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1. Gráfico del mal
Para poder empezar a graficar lo primero que deben hacer es
identificar el “ladder”.
Si se fijan, el ladder (lado izquierdo en la foto) tiene varias
“segmentaciones”, estás barritas se van organizando en el gel de
acuerdo a su peso molecular, por tanto hay que recordar que las
más pesadas quedarán en la parte superior y las de menos peso
molecular “migrarán” más, por tanto quedarán en la parte
inferior del gel. Dicho esto se le asignan valores que en este caso
van de las 10 Kb a las 1 kb. A estos valores hay que sacarle el
logaritmo para así poder graficar. Hecho esto, se procede a medir
la distancia de migración de cada una de estas barritas en el
ladder, para esto con una regla mido desde donde comienza el gel
hasta más menos la mitad de la “barrita” que queremos medir.
Por ejemplo, para las 10 Kb, la distancia sería de 5,4 cm, para las 8
Kb, la distancia sería 5,8 cm, y así sucesivamente.
Esto quedaría más o menos así:
Peso Molecular (Kb) Log Peso Molecular (Log Kb) Distancia (cm)
10 1 5,4
8 0,9031 5,8
6 0,7782 6,4
5 0,699 6,8
4 0,6021 7,4
3 0,4771 8,2
2 0,301 9,6
1,5 0,1761 10,7
1 0 12,5
Teniendo esto, nos dirigimos a la muestra problema (lado derecho de la foto), y procedemos a
medir cuanto migro en el gel. En este caso como son 3 muestras les asignaremos letras para
identificarlas. Los valores son:
Muestra Distancia (cm)
A 5,1
B 5,7
C 9,1
2. Ahora con los procedimientos de rigor listo, comenzamos a graficar. En el eje de las ordenadas (Y)
ira el Logaritmo del peso molecular (Log Kb) y en las abscisas (X) ira la distancia de migración en
cm. LO PRIMERO QUE DEBEN GRAFICAR ES LADDER!!!
Una vez graficado el ladder tiran una línea recta por los puntos que les apareció en el gráfico.
Ahora la recta no tiene necesariamente que pasar por todos los puntos si no que por la mayoría de
ellos, es decir tiene que ser la MEJOR RECTA de acuerdo a los datos de su gráfico. Hecho esto, no
queda nadas más que hacer que graficar nuestras muestras problema. Para eso utilizamos nuestro
único dato que sería la distancia ubicando la muestra problema en el eje de las X de acuerdo a su
valor en cm, pero como todavía no tenemos valor Y lo dejamos expresado solamente en el eje de
las X es decir seria un valor para la muestra A de (5,1 – 0) gráficamente hablando. Ahora como ya
ubicamos nuestra muestra A en el eje X, lo que hacemos es tirar una Recta Perpendicular a la eje
de las X haciéndola chocar con nuestra mejor recta (obtenida al graficar el ladder), para luego tirar
otra recta en forma paralela al eje de las X haciéndola chocar con el eje Y obteniendo así nuestro
valor de la muestra problema. El gráfico quedaría así:
3. Con el gráfico listo solo nos queda saber cuánto pesan nuestras muestras problema, ya que el
gráfico solo nos dio el logaritmo del peso molecular de ellas. Para eso usando calculadora aplican
el antilog y obtienen el valor de su muestra problema. Esto quedaría así:
Muestra Logaritmo Peso Molecular Peso Molecular
A 0,66 4,57
B 0,56 3,63
C 0,01 1,02
Espero que esta mini guía les sea útil. Éxito!