1. Van Leuwenhoek y los microbios Colonización Crecimiento microbiano Metabolismo Agentes infecciosos 2. Enfermedades infecciosas 3. Toxinas 4. Mutación 5. Resistencia 6. Plásmidos Agentes infecciosos 2. Generación espontánea 3. Enfermedades infecciosas

1. Microbiología
apuntes de clases
PRUEBA TEORICA I
Nicolas mora
Universidad de Antofagasta
2016

2. DISCLAMER
• Para la siguiente presentacion sobre
fundamentos de microbiologia para la primera
prueba teorica, tiene que tenerse en cuanta que
ha sido creada 1 hora antes de la prueba a modo
de resumen.
• Por favor no considerar las faltas ortograficas y de
imágenes ya que en realidad el creador no tuvo
tiempo para poder realizar un mejor trabajo, ya
que la intencion fue solamente plasmar la
materia de una forma mas facil.
Solo lea y conteste bien en la prueba. exito

3. Objetivos esperados
• Reconocer morfologia basica de bacterias
• Fundamentos de tinciones utilizadas en
microbiologia
• Conocer los inicios de la microbiologia
• Diferenciar las principales familias y generos
de bacterias con sus respectivas
enfermedades y manifestaciones clinicas
• Metabolismo, reproduccion, mecanismos de
defensa y estructura bacteriana.

4. Un poco de historia• Robert Hooke
• comprobó las observaciones de anton leeuwenhoek
• dibujos de leeuwenhoek, de las distintas formas de
bacterias
• B forma de bacilo de filamento
• E es un coco
• letra c y d son cocos en cadena (collar de perlas), esa
estructura es característica de un genero
•
• también habían formas curvadas o espiroquetas, además
de cocos o bacilos
•
• también habían forma de racimo Familia Staphylococcus
• hablaremos de las bacterias que se agrupan en cadenas y
las que estan en grupos o racimos, es una característica de
identificación en bacterias de importancia clínica
• los cocos gram + se agrupan en cadenas y en racimos
• también la forma del coco es una característica importante
( redondo u ovalada o con forma de llama de vela) indica la
especie que produce la infección

5. Morfologia bacteriana basica

6. estructura bacteriana
las bacterias propiamente tales y a las archaes, corresponden
a reino monera y son procariota
• arcaría son bacterias eucariotas
• en el árbol de la vida existen 3 dominios, reino bacteria,
reino archae y reino arcaría
• Bacterias y archaes:
• Son células procariotas
• Poseen genomas diferentes
• Las archaes pueden sobrevivir en ambientes que serían
muy extremos para cualquier bacteria gracias a unas
diferencias a nivel de estructura

7. Organelos que están en el citoplasma
de la bacteria:
• RIBOSOMAS. Son los más numerosos y esenciales para el metabolismo de
cualquier célula, las bacterias pueden tener 100.000 copias de ribosomas,
en el caso de las bacterias están libres en el citoplasma, no están
asociados a membrana.
• Plásmidos: Es ADN circular extra cromosomal, en las bacterias hay
muchísimos que pueden ser iguales o diferentes. Están codificando para
ciertas características que le confieren una mayor resistencia a la bacteria
o una ventaja sobre el resto.
• Mesosomas: Especie de pequeñas invaginaciones de la membrana
plasmática, contiene gránulos, normalmente estos gránulos son de en
aquellas bacterias que pueden, cierto, son eh algunos fotosintéticos y en
otras también se ubican en las enzimas de la cadena respiratoria
• Gránulos de inclusión: las bacterias también, en esta especie de vacuolas,
acumulan elementos dependiendo del ambiente en donde están.
Acumulan azufre, carbono acomplejado con otros elementos para
periodos de escases de nutrientes en los que pueden ser utilizados como
energía.

8. ¿Qué rodea a la bacteria?
• La bacteria es tan pequeña pero tiene muchas estructuras externas que la rodean y
la hacen poder resistir un ambiente que una célula eucariota cualquiera no resiste,
por lo tanto, indispensable y como toda célula tiene primero rodeando el citoplasma
MEMBRANA CITOPLASMATICA, después las bacterias tienen algo llamado PARED
CELULAR que puede ser bastante gruesas en algunos casos y además algunas otras
bacterias aparte de tener esta pared también tienen una CAPSULA, la cual le da aún
más protección, y se trata de un patógeno que tenga una capsula, es un factor de
virulencias, esto lo hace más resistente a las defensas del huésped.
• Sobresaliendo hay varios accesorios que puede tener la bacteria, puede tener uno o
varios FLAGELOS, y si tiene flagelos esto le da la condición de ser MOVIL. Puede
tener PILIS que son pelos especializados, cuya función es de RECONOCIMIENTO,
algunos de ellos siguen un proceso que se llama CONJUGACION, entonces se habla
de un PILI SEXUAL. También tiene otras estructuras más cortitas que se llaman
FIMBRIAS, cuya función es de ADHESIÓN A SUPERFICIES, también reconocen a un
receptor y se adhieren a él con una unión de tipo quinta
• (Todo lo que sobresale de la bacteria está compuesto por proteínas globulares de
diferentes tipos)
• Eso es lo que puede tener en general una bacteria, ahora se verán los detalles:

9. Bacillus megaterium
• Bacilo: forma bacilar, filamentosa (filamentos cortos).
• Bacillus: son gram + en general
• En una fotografía de un microscopio electrónico, se puede ver que lo que existe en
esta doble línea es la MEMBRANA PLASMATICA y esta otra gruesa, oscura,
corresponde a la PARED CELULAR, que en el caso de las gram + es gruesa y
posteriormente aquí vemos otra estructura más laxa, menos teñida que puede
corresponder a una capa mucosa, como el GLICOCALIX, que a veces también se llama
CAPSULA, más laxa, o EXOPOLISACARIDO.
• estructura de la membrana plasmática: (Bicapa fosfolipidica, zona hidrofóbica, zona
hidrofilica, es fluida por la cola de los ácidos grasos, tiene proteínas que atraviesan
toda la capa, por lo que tienen un dominio hidrofilico y un dominio hidrofóbico, otras
funcionan como poros por donde ingresan moléculas, otras están orientadas más
hacia la capa externa de la membrana relacionándose con el medio otras más a la
parte interna relacionada con el citoplasma). Entonces la primera capa que cubre a
una bacteria (que es una célula procariota), al igual que a una célula eucariota, es una
MEMBRANA PLASMATICA.
• Hay algunas diferencias a nivel de unión entre glicerol y los ácidos grasos o el glicerol
y la cadena hidrocarbonada. Solamente a nivel químico vemos una diferencia, pero es
en el grupo de las archeas. Vemos que este tipo de unión entre glicerol y las cadenas
de ácidos grasos, tanto en bacterias como en células eucariotas es igual, se llama
UNION TIPO ESTER, en cambio en archeas tenemos una UNION TIPO ETER (esta es
una diferencia estructural). Esta es una de las pruebas que apoyan la idea de que en
realidad las bacterias y las células eucariotas están más cerca de lo que se cree
evolutivamente.

10. Funciones de la membrana plasmática:
• Permeabilidad
• Anclaje de proteínas
• Transporte
• Presenta un patrón químico que permite conservar la energía
• Entonces más detalle para entender la membrana de gram +
veamos acá, esta es una pared de una gram +, también un corte, si
vemos de adentro hacia afuera vamos a ver que esta el citoplasma
granuloso, con los ribosomas y con todo el material que podemos
encontrar en el citoplasma, esta doble capa corresponde a la
membrana plasmática y aquí vemos esto grueso que es el
PEPTIDOGLICANO, como su nombre lo dice debería estar
compuesto de azucares y derivados de aminoácido.

11. Staphylococcus aureus
• Son cocos gram positivos en racimos
• Las bacterias del género “staphylococcus” son
de tamaño muy regular, la particularidad es
que se agrupan en racimos
• Staphylococcus significa cocos en racimos.
• Aureus, que es el nombre de la especie, es por
el color que toma cuando nosotros lo
cultivamos en una placa (amarillento).

12. Ahora veremos una más compleja que
corresponde a una gram negativa. ¿Qué
diferencias se observan con respecto a la
anterior?
• El peptidoglicano es más delgado
• Posee una membrana externa (su estructura
es similar a la de la membrana plasmática)

13. • Ya vimos la membrana plasmática, esto es de una gram
+, ahora esto es lo que reconocemos, el peptidoglicano
y aquí están representados 2 de los azucares que
forman esta estructura, que es el N-acetilmurámico y la
N-acetilglucosamina y además tiene una serie de
aminoácidos (peptapeptidos) que están representados
por estos círculos de aquí, entonces ustedes se fijan
que aquí para formar el peptidoglicano se juntan 2
residuos de azucares, aquí hay un enlace de tipo
glucosidico y aquí vemos un pequeño péptido asociado
a uno de los azucares, y ese pequeño péptido tiene
todos estos pequeños aminoácidos (pelotitas) además
hay otros ácidos que nacen y se unen a la membrana
que se llaman ácido lipoteicoico cuando se unen
directamente los fosfolípidos y otro que se llaman
ácidos teicoicos cuando se unen a los azucares más
externos de la capa peptidoglicano

14. • Entonces en una superficie de una bacteria gram + no hay Bacillus,
lo que sobresalen serian estos grupos, después del peptidoglicano
tendríamos sobresaliendo colas de ácido lipoteicoico y colas de
ácido teicoico.
• la capa de peptidoglicanos esta formada por n acetil glicano mas n
acetil glucosamina mas un pentapeptido
• Aquí está el orden en que este aminoácido está en la molécula:
• una L-alanina
• una D-glutamina
• una L-lisina
• dos D-alanina
• Esto es importante porque los aminoácidos entre estos
peptapeptidos se van a unir entre ellos y este puente entre los
aminoácidos es una glicina, entonces la unión entre ellos es fuerte.
Son 5 aminoácidos (puente de penta glicinas) que unen a una
molécula con la otra.

15. • La glisina se une al tercer aminoácido del
pentapeptido que es la lisina de una molecula y de la
otra se une a la D-alanina de otra molécula y la otra D-
alanina (porque habían 2) se pierde para obtener
energía debido a la ruptura del enlace para obtener un
enlace peptídico. Esto es el peptidoglicano de todos los
gram +, lo mismo ocurre en las gram – solo que más
delgado y para compensar este peptidoglicano delgado
las gram – tendrán una capa extra llamada LPS (lípido
poli sacárido). Además de tener la estructura igual
que la otra con fosfolípidos va a tener azucares y
otros lípidos, por eso se llama lípo poli sacárido.

16. • Es importante estudiar esta membrana externa
porque parte de algunas estructuras de ella, en el
caso de los patógenos, se considera que son
estructuras toxicas para el huésped y esa
principalmente está dada por el lípido A.
Entonces en el caso de salmonela, escherichia
coli, que son gram -, algunos de los síntomas que
presentan se deben a la presencia de este lípido A
que actuaría como una endotoxina, que es parte
de su estructura, pero al reconocer y asociarse
con algún receptor especifico del epitelio del
huésped provoca la reacción inflamatoria.

17. • Asociado a este lípido A existe un polisacárido especial
denominado polisacárido O, entonces toda esta
estructura es nueva y no se encuentra en una membrana
plasmática normal, la vamos a encontrar solo en la capa
de LPS (lípido A y polisacárido O) que forman parte de una
misma molécula y además hay otras proteínas igual que
en la membrana citoplasmática que están incluidas,
algunas más hacia el exterior y otras pueden atravesar
completamente esta capa, y esas son muy especiales y se
llaman porinas y tampoco las vamos a encontrar en las
gram +.
• Lípido A, polisacárido O y porinas solo están presentas
en una gram - .
• Las porinas , estan formados por 3 subunidades, permiten
el paso de sustancias y elementos a través de la
membrana de esta célula gram -

18. • El peptidoglicano de una gram – es más delgado y
también más laxo, no es tan compacto como en
la gram + por el tipo de unión que vemos en él. La
unión es menos fuerte porque ocurre
directamente entre los aminoácidos, no mediante
glicina.
• Una diferencia importante es que hay un
aminoácido, que es el tercero, que se llama ácido
diaminopimélico o meso-diaminopimélico que no
está presente en las gram +, el signo de las gram
– es ese aminoácido en el peptidoglicano que no
está presente en las gram +.
• Estas son diferencias pequeñas pero importantes
para la característica de la tinción que va a tener
la membrana.

19. El fundamento de la tinción de gram
• Cuando se trabaja con la serie de colorantes que son 2 se
forma un complejo, lo primero que hacemos es teñir con
cristal violeta y después le agregamos lugol (o povidona en
algunos libros) , estos forman un compuesto que ingresa al
citoplasma de la célula, nosotros vamos a ver a la célula de
color azul intenso o violeta si la teñimos con cristal violeta y
lugol, pero siguiendo con la tinción, el paso siguiente es
decolorar con alcohol por muy poco tiempo (máximo 20
segundos) pero al decolorar con alcohol a un gram + (que
tiene capa gruesa) se deshidrata la pared y se cierran los
poros, se cierra todo, entonces queda atrapado este
colorante azul intenso y por más que lavemos el
portaobjetos eso no va a salir, el agua no va a sacar lo que
está ya teñido en el citoplasma.

20. • Si hacemos lo mismo ahora (teñir con cristal violeta y lugol) con una
gram – (peptidoglicano más delgado pero con una capa externa para
compensar) se tiñe el citoplasma y se forma un compuesto oscuro, al
decolorar con alcohol también se va a producir eh como esto es más
laxo el alcohol puede penetrar más fácilmente por la membrana
externa porque es rica en lípidos, entonces penetra y el
peptidoglicano no alcanza a interrumpir su paso y finalmente elimina
este complejo, entonces el etanol si destiñe a la célula que está teñida
de azul, por lo tanto para poder diferenciar agregamos el otro
colorante que es la safranina y ahí se va a teñir de rojo en cambio la
anterior (gram +) aunque agreguemos la safranina no se va a teñir
porque ya está teñida, por lo tanto, el fundamente de la tinción de
gram no tiene que ver con las diferencias estructurales del
peptidoglicano, tiene que ver con el grosor del peptidoglicano y con
las capas más delgadas que tiene la gram – y con la capacidad de
poder atravesar esta membrana externa que permite el paso del
alcohol. El fundamento tiene que ver con algo físico de la estructura,
no tiene que ver con las diferencias que vimos de su constitución, por
eso podemos diferenciar cuando una célula es gram + o - .
• esto es pregunta de prueba.

21. • Algo que debemos saber de las bacterias es la
forma en la que tienen organizado su material
genético, sabemos que en las eucariotas hay
un cromosoma organizado, en las bacterias
por similitud con las eucariotas se habla de un
cromosoma bacteriano, se pensaba que este
(el cromosoma bacteriano) era circular, de
doble hebra y cerrado pero ahora sabemos
que las bacterias presentan más cromosomas
y no todos son circulares.

22. El flagelo de una proteína que se llama
flagelina, como se organiza y se ancla
para mover a la bacteria?• hay diferentes discos de proteínas, en forma de discos y proteínas tubulares y
globulares
• las proteínas globulares actúan como motores que permiten rotación de flagelo
que permite a la bacteria moverse, las proteínas funcionan con atp
• el flagelo bacteriano se puede ver con microscopio óptico con una tinción que
permita engrosar flagelos
• flagelación peritrica, rodea a toda la celula que corresponde un bacillo, se da en
E.coli
• vibrio cholera, tiene flagelo polar, es un bacilo curvado, tiene forma de poroto
• el flagelo polar, esta inserto en los capas de una gram – al tener un solo flagelo,
esta bacteria no es móvil
• flagelación peritrica: cuando los flagelos rodean toda la bacteria (es la flagelación
mas común)
• flagelación monotrica: un solo flagelo
• flagelación iophotrica: a los 2 extremos tiene varios flagelos (bacterias
ambientales)
• flagelación anfitrica: cuando hay 1 flagelo a cada lado
• también puede haber ausencia de flagelos

23. Neisseria gonorrhoae
• es un gran –
• es inmóvil
• posee fimbrias (aporta adhesión)
• colonizan huésped a través de las fimbrias
• existen neisseria fisiológicas, se agrupan de a
2, tienen forma arriñonada
• *causa vaginitis en la mujer*

24. Streptococcus pyogenes
• estructura que al dividirse forma pequeñas cadenas de
3 o 4, pero también tienen forma de a 2, son cocos
ovaladas
• posee capsulas, se ve con forma organizada o
compacta
• es gram +
• la capsula no se tiñe con coloración habitual (gram),
esta capsula libera un polímero llamado
exopolisacaradio (eps)
• bacterias de acido láctico liberan eps
• la capsula se puede teñir con tinción negativa

25. estructuras que tienen las bacterias y
no las celulas eucariotas
• Endosporas
• son de tipo de resistencia, se da en bacillus anthracis
• las endoesporas se tiñen con una tinción que se
compone por verde de malaquita y safranina o fucsina
• un colorante tiñe la espora y otro la celula vegetativa (
esta contiene a la espora)
• la espora contiene todos los componentes de la celula
• las esporas solo se han descrito en bacterias gram +
• 2 generos importantes que siempre tienen esporas son
• bacillus sp (son aerobicos)
• clostrium sp (son anaeróbicos)

26. • las endoesporas se forman dentro de la celula vegetativa, un
bacillus que forma espora, en las primeras etapas vemos con su
material genético, sus mesosomas, la pared, la membrana
plasmática
• 2) dna se condensa
• 3)se desarrolla un septo dentro de la bacteria, y en ese septo se
forma la espora, todo el material genético y el citoplasma y las
esporas se van como hacia un lugar y se forma el septo
• 4) se empiezan a rodear de membranas externas
• hay un centro donde esta la celula propiamente tal y se rodea de
membranas externas y hace que la espora sea muy resistente a
condiciones ambientales y puede permanecer hasta que no es
eliminada
• cuando la espora se libera de sus membranas queda libre y puede
volver a germinar y reproducirse
• los cromosomas bacterianos pueden ser multiples y tener diversas
formas además de la forma circular

27. • en la naturaleza, agua estancada, lagunas salinas, fuentes
hidrotermales pueden hallarse con bacterias con estructuras extras
• especies de pedúnculos o cubiertas externas llamas proxetas
• vibrio: es curvo
• espirilo: forma de filamento mas grueso
• espiroquetas: son prolongaciones mas finas y delgadas
• los cocos según su plano de división pueden formar agrupaciones,
son claves para identificarlos
• dicoco: prolongación de a 2
• streptococo dyogenes: cocos redondos pero no tan ovalados
• streptococo: forma collar
• staphilococo: forman racimos
• grupos de a 8: sarcina genero bacteriano ambiental
• en las gram + es clave identificar la forma y la agrupación
• existen también tétradas que se dan en generos ambientales se
llaman: micrococus sp
• las bacterias bacilos se dividen por fision binaria
• también existen los cocobacilo
• una bacteria en promedio mide 0,5 a 1 micron

28. • streptomyces sp, el grupo en general se llama actinomicetes, hay
varios de esos generos esta en la microbiota bucal
• en celula epiteliales de la boca, se hallaran bacilos o cocos gram +,
esos predominan pero también ahí gram –
• otra bacteria, borrelia burgdorferi es una espiroqueta de
transmisión animal
• otra bacteria de tipo archeas que no tienen de coco o bacilo sino
que tienen forma pleomorfica ( son entre cuadrados o redondas)
existe una bacteria cuadrada de la clasificación archeae, la
haloquadratum
• se llama halorobrum sp
• el diámetro de una bacteria común es de 0,2-0,5 micrones de
diámetro y de largo miden 0,5 a 1,5 en los bacilos
• existen excepciones
• thermus aquaticos tiene un largo mayor a 10 micrometros
• epulopiscum fishelsoni, es una bacteria parasita que mide 200 a
600 micras de largo
•

29. requerimientos nutricionales
necesarios para la vida para bacterias y
el ser humano
• Alimento (abarca proteínas, azucares, vitaminas ), además de agua,
oxigeno (para bacterias aerobicas), la temperatura, un ph adecuado
• necesitamos crear un medio in vitro para las bacterias que simulen
su ambiente natural
• existen bacterias que se han adaptado a condiciones de vida
extrema, las bacterias extremofilas
• es posible cuantificar crecimiento de un cultivo
• bacterias micrococcus (son bacterias ambientales) es un tipo de
bacteria gram +, filamentosa, con forma de coco
• bacterias pueden cultivarse en medios liquidos o solidos para
determinar el caldo adecuado hay que determinar las condiciones
de su ambiente natural e intentar optimizar esas condiciones en el
laboratorio para que crezcan in vitro

30. bacterias pueden:
• crecer en forma homogénea y dejar el tubo de ensayo turbio
• pueden crecer y bajar y acumularse en el fondo del tubo de ensayo en
forma de sedimiento
• puede crecer en la superficie del tubo de ensayo formando una
especie de película
• la forma que crezca dependerá de las necesidades de oxigeno, una
bacteria aerobia anaerobia facultiva crecerá en forma homogénea
dejando el tubo turbio
• una bacteria aerobia crecerá formando una película en la parte
superior
• una microaerofila (o sea que tiene una tiene una atmosfera con
oxigeno reducida) formara un sedimento en la parte inferior
• estos casos se dan en caldos, o sea en medios liquidos
• bacterias pueden crecer en medios solidos en placas
• existen tubos con crecimiento similar a placas formando una película
en la superficie del tubo, el tubo tiene forma de agar inclinado, es un
tubo con un medio que se dejo solidificar de tal manera con un fondo
alto y con zona inclinada, se llama pico de flauta, la bacteria siempre
crecerá formando esa película

31. características de cada una de las
bacterias
primero hay que conocer elementos esenciales de cada bacteria y para
que lo usaran (carbono, oxigeno, hidrogeno, nitrógeno, fosforo, azufre,
potasio, magnesio, hierro, calcio, se hallan en todas las procariotas y
eucariotas)
tipos de nutrición bacteriana
• organismos fotoautotrofos
• organismos fotoheretrofos
• organismos quimioautotrofos
• organismos quimioheretrofos
bacterias fotoautrofos tienen la facultad de realizar fotosíntesis,
ejemplos en grupo
• cianobacterias principalmente estan en agua dulce, pero también
estan en agua salada, generan en el agua de los lagos y ríos malos
olores y toxinas
• bacterias purpura y verde (tanto el primero como este son bacterias
ambientales)

32. bacterias fotoheretrofas
• usan energía de la luz y además el carbono lo pueden obtener de
compuestos organicos, viven en aguas contaminadas o en aguas
mas anaerobias ricas en compuestos organicos
organismos quimioheretrofos o heterotrofos
• son el grupo mayoritario, abarca a los hongos filamentos y las
archaeas, su fuente de energía y carbono sera los compuestos
organicos, es muy similar al medio nutritivo de los seres
eucarioticos
organismos quimioautotrofos
• son un grupo muy pequeño dentro de las bacterias y las archaeas,
viven en un ambiente con alto contenido de compuestos
inorgánicos, de allí sacan fuente de energía, pueden asimilar co2
• en el laboratorio cultivaremos bacterias heterótrofas, hay que darle
como fuente de energía compuestos organicos, algunas son mas
exigentes ( se llaman bacterias fastidiosas) no se conforman con un
medio con solo azúcar y proteínas, requieren mas compuestos
como vitaminas, aminoácidos, acidos nucleicos y vitaminas que
constituirán micronutrientes en el medio de cultivo
• bacterias nesseria requiere de elementos esenciales, streptococo
tampoco crecen en cualquier medio

33. • agar sangre contiene gran parte de estos componentes,
además la base para el medio agar sangre también tiene
elementos nutritivos
• los medios se pueden clasificar en medios solidos, liquidos
y semisólidos, el agar les da solidez
• según la composición (en los medios comerciales, son esos
tarros del lab) se puede saber que tipo de medio es, según
eso los medios se clasifican en medios sinteticos-definidos,
complejos no definidos y medio minimo
• el medio minimo será para el crecimiento de las bacterias
menos exigentes, puede tener una proteína o una azúcar
• el medio complejo no definido es un medio con algún
elemento organico como un extracto de carne, levadura o
peptona, se sabra la masa del extracto (ejemplo 10 gramos
de levadura por litro), pero no se sabra la cantidad de
carbono, nitrógeno o fosforo que podrá aportar, por eso se
llama no definido
• el medio definido sintetico, se sabran todos los nutrientes,
se conocera aporte exacto de elementos

34. • también se pueden clasificar según la utilización que tengan,
pueden ser medios de enriquecimiento donde se harán crecer
todas las bacterias que existan en el medio (un ejemplo es el agar
sangre) o el caldo cerebro-corazon, también el agar soya tripticasa
• también hay medios selectivos en que solo crece un grupo de
bacterias especifico dentro de todos los grupos de bacterias del
medio, tendrá elementos inhibitorios para las bacterias que no
queremos que crezca
• medio diferencial: se usa para pruebas bioquímicas, se siembra una
bacteria en un medio diferencial y se obtiene mas de una respuesta
según el tipo de metabolismo de la bacteria
• algunos medios pueden ser diferencial y selectivos al mismo tiempo

35. ejemplos de bacterias que usan algún
medio especifico:
• -bacteria Bacillus megaterium para crecer usa un medio
minimo, es un medio químico y definido, contiene:
• a) sucrosa: es una fuente de carbono y energía
• b)sales de fosfato: actúan como buffer de ph y proporcionan
micronutrientes nitrógeno y fosforo
• c) sulfato, azufre y magnesio: son micronutrientes, que
estabilizan enzimas o la membrana
• -bacteria thiobacillus thiooxidans, se usa para lixiviación de
minerales, crece en medio químico definido, es una bacteria
litoautotrofica
• las bacterias fastidiosas requieren medio complejo e
indefinido, la profe da un ejemplo de una receta que contiene
extracto de carne, de levadura y peptona, es una medio
enriquecido porque tiene 3 fuentes de carbono y 1 de azúcar,
si se le añadiera sangre el medio quedaría mas enriquecido y
podrían cultivarse bacteria messerian o streptococcus

36. según capacidad para vivir con un ambiente
que tenga oxigeno existen varias
alternativas
• aerobias obligadas
• microaerofilas
• anaerobias obligadas
• anaerobias o aerobias facultativas
• aerotolerantes anaerobeas
presencia de enzimas en la membrana de las
bacterias que catalizan radicales libres si es que hay
oxigeno en el ambiente determinara a cual de las 5
subclasificaciones pertenecerá la bacteria

37. • hay 3 enzimas que permiten que bacterias puedan vivir
en ambiente con oxigeno y que el oxigeno no se
acumule en forma de radicales libres y son la enzima
peroxidasa, catalasa y las peróxido dimutasa, estas
enzimas transforman radicales libres en oxigeno y agua
• anaerobia obligada no tiene ninguna de las 3 enzimas
• aerotolerante tiene 2 enzimas la peróxido dimutasa y la
catalasa, bacterias streptococcus son ejemplos de
bacterias aerotolerante
• staphyloccus es una bacteria anaerobio facultativo,
tiene la enzima catalasa

38. En relacion al pH
• 1-acidofilos : es de pH 0,0 hasta 5,5
• 2-neutrofilos: va desde el 5,6 al 8,5
• 3-basofilos: 7,5 a sobre 11
el rango de afinidad al pH se medira en graficos con
forma de curva, donde se encontrara un minimo, un
máximo y un optimo, representara los rangos de
crecimiento, en rango minimo crecerá pero mas lento, o
crecerá en un ramo máximo que tampoco será el ideal
ejemplos de bacterias, con minimo pH, máximo y optimo
• bacteria E.coli: es neutrofila
• Thiobacillus thiooxidans: es acidofila
• Microbacter sp: es alcalofila
• Lactobacillus acidophilus: es acidofila

39. según temperatura:
• todas las bacterias patógenas serán mesofilas pero
pueden vivir a temperaturas mas bajas, ejemplo:
• bacteria salmonella y listeria son bacterias mesofilas
que contaminan alimentos, pueden vivir a 4 grados
centígrados
• listeria monocytogenes: crece a 1 grado centrigado
pero su optimo es 30-37 y su máximo es 45 grados
• E.coli: crece minimo a 10 grados, 37 optimo y 45
maximo
• Streptoccocus pyogenes: el rango de temperatura es de
25 a 45 grados y el optimo son 37 grados
• *dato obvio: las que son patogenas funcionan a
temperatura corporal.*

40. • thermus aquaticus y bacillus caldolyticus su optima esta alrededor de los
70 grados celcius y la bacteria pyrococcus furiosus su rango optimo esta a
100 grados
• de la thermus aquaticus se aislo taq polimerasa
• las archaeas también tienen representantes termófilos e hipertermofilos,
el máximo de temperatura de estas archaeas es de 113 grados celcius, de
la bacteria Pyrodictium abyssi
• la bacteria sulfolobus acidocaldarius es tanto acidofila como termófila
• las bacterias también se pueden clasificar según la disponibilidad de agua
• cuando mas soluto tiene el medio significa que tiene menos agua
disponible, la mayoría de las bacterias requieren mucha agua, pero hay
otras que toleran menos cantidad de agua (se llaman osmotolerantes)
halotolerantes (se refiere a altas cantidades sales) en general cuando se
habla de osmotolerante el soluto se refiere a azúcar
• las bacterias pueden ser halófilas o osmofilas (una bacteria que pueda
sobrevivir en ambiente muy saturado de solutos que vienen siendo
azúcar)
• mycobacterium tuberculosis es una bacteria con altas exigencias
nutricionales y crecen mas lento, existen algunas bacterias que no se
pueden cultivar en un laboratorio porque son bacterias que crecen dentro
de celulas eucariotas como las mycroplasmas y las bikepsias?? (asi se
pronuncia)

41. ¿Cómo crecen las bacterias?
• las bacterias se dividen por fision binaria y de acuerdo a eso se
puede estimar cuanto tarda en hacer ese proceso, eso se llama tasa
de crecimiento de una determinada bacteria
• también se puede calcular la biomasa o la masa celular, podemos
también calcular numero de celulas que forman parte de esa
biomasa, los cultivos liquidos y solidos contienen una biomasa, pero
la masa de un matraz o tubo, el cultivo homogéneo de un matraz
por ejemplo la masa de obtiene mediante una centrifugación
• para saber cuantas celulas hay es necesario hacer un recuento del
cultivo homogéneo y contar el numero de celulas mediante
metodologías
para poder medir la biomasa de una celula hay:
• medios físicos: la centrifugación
• medios químicos: calcula cantidad de carbono, nitrógeno y
proteínas se puede saber cuantas celulas hay, otra medida química
es calcular concentración de CO2, o mediante el análisis del
consumo de O2, o a través de la medición de la turbidez con un
espectrofotómetro y saber cuan denso esta el cultivo, mientras mas
turbio este el medio mas bacterias habran

42. • para hacer un recuento exacto se requieren técnicas
directas e indirectas
• una técnica directa es mirar a través de un microscopio
pero solo se hace con celulas mas grandes: microalgas,
esporas de hongos y levaduras
• las bacterias normalmente se cuentan a través del recuento
de colonias, es un recuento indirecto y de viables , es un
recuento indirecto porque no se miran las celulas sino que
se miran la forma macroscópica del crecimiento de las
bacterias que corresponde a la colonia
• el recuento químico mediante la turbidez usando un
espectrofotómetro es una técnica indirecta
• para estudiar una bacteria en el laboratorio se deben hacer
curvas de crecimiento para saber a que ritmo crece, para
hacer las curvas de crecimiento de usan las técnicas de
recuento, hay 4 fases en una curva de crecimiento, las
bacterias crecen muy rápido, una población completa se
divide en 15 minutos, se habla de un crecimiento
geométrico progresivo y exponencial

43. Elementos de la curva de crecimiento
• fase log: el numero de bacterias se mantiene constante, es periodo de
adaptación
• fase exponencial: ocurre el crecimiento exponencial de las bacterias
• fase estacionaria: el numero de bacterias se mantiene constantes
• de muerte: empieza a decaer numero de bacterias
ejemplos de tiempos en minutos que se demorar en replicarse las
bacterias mas conocidas
• E. coli: en medio que tenga glucosa y sales, crece en 37 minutos
• Bacillus megaterium: crece en 25 minutos
• Streptococcus lactis: en un medio que tenga lactosa crece en 48
minutos
• Micobacterium tuberculosis: en un medio sintetico 700-900 minutos
• Treponema pallidum: se demora mas tiempo que la anterior, no lo dice
estos son los tiempos de generación de cada bacteria
si trabajamos en cultivo continuo, estos tiempos cambian porque siempre
se agregan medios nutritivos, para que el cultivo siempre este en fase
estacional o en fase estacionaria

44. • mediante un recuento de viables en el caso de las
bacterias se hace con las colonias, hay un método que
se llama por dilución y plaqueo, si se toma gota de un
caldo y se siembra en una placa
• crecerá todo, una película que no se podrá contar
nada, habrá que hacer diluciones seriadas para poder
separar físicamente a las bacterias que darán origen a
las colonias, cada vez que se diluye se pueden contar
las colonias que crecen, esas colonias se forman a
partir de una bacteria viable que quedo allí y se
empezó a dividir, la colonia es una forma indirecta de
contar cuantas celulas habían originalmente en la
muestra

45. Ya queda poco..
• bacterias con capacidad hemolítica, la tienen
porque tienen enzima hemolisina, pero para
que la bacteria pueda producir esa enzima
debe tener la informacion genética para
hacerlo, vimos como bacterias reciben info
genética, las bacterias se pueden recombinar
mediante varias tecnicas

46. métodos de replicación bacteriana
• conjugación: participan los pili sexuales, debe haber una bacteria
donadora (plasmido f+) y una bacteria receptora (plasmido f-),
existen muchos plasmidos diferentes, en una bacteria pueden
entrar multiples plasmidos diferentes
• Transducción: éste tipo de reproducción sexual de las bacterias es
cuando se produce un intercambio de ADN entre una bacteria y
otra a través de un virus (que funciona como vector). los virus que
realizan esto se llaman bacteriofagos
• Transformación bacteriana: se da normalmente en la naturaleza,
pequeñas moléculas del adn que circulan en el entorno de una
bacteria pueden entrar libremente a una bacteria, puede ocurrir en
nuestra microbiota, in vitro en el laboratorio , los fragmentos de
dna en el ambiente se llaman plasmidos
• se puede tomar una bacteria y romperla y extraer su DNA y
analizarlo, asi podemos reconocer su secuencia genética
• mediante PCR podemos amplificar genes, clonarlos

47. tipos de bacteriófagos
• fagolamda: se usa mucho en biología molecular
• los plasmidos de E. coli, estan compuestos por DNA cerrado de doble
hebra circular
• los plasmidos tienen la propiedad de actuar como vectores para hacer que
bacterias expresen genes exógenos
• plasmido Puc18: tiene una zona que tiene genes que aportar resistencia a
la ampicilina, además contiene una zona que es su operon, el operon es
una zona que tiene genes que codifican para las enzimas que participan
para la degradación de la lactosa (operon lac)
• existe también en otros plasmidos el operon triptófano que es para la
sintesis de triptófano
• en eucariotas hay genes que participan en estos procesos que estan en los
cromosomas, en cambio en bacterias las zonas reguladoras se ubican en
los operones
• también existen las enzimas de restricción: que son enzimas que cortan
secuencias de adn, esta region se llama poli A

48. plasmido recombinante:
• algunos E. coli tienen la capacidad de recibir
plasmidos, mientras que otros E. coli tienen la
capacidad de donar plasmidos
• los plasmidos además tienen la ventaja que se
replican independientemente de la celula
• una alternativa que puede ocurrir es que el
plasmido f+ (que tiene la capacidad de formar el
pili) se quede como plasmido y otra posibilidad es
que se introduzca en el cromosoma de la bacteria
y en ese caso recibe el nombre de celula HFR (del
inglés high frecuency recombination)

49. transducción bacteriana
• en este tipo de replicación bacteriana puede ocurrir un ciclo lítico
que termina con la destrucción de la bacteria o puede ocurrir un
ciclo alisogenico en que la información de este virus se mantiene
por varias generaciones, la bacteria no muere inmediatamente
• el fago tiene tiene mucha proteínas estructurales ya que deben
anclarse para poder traspasar su material genético, cuando esto
pasa la bacteria se divide y la información del bacteriófago pasa a
formar parte de su propio cromosoma en algún momento por
inducción de algún factor externo el fago se puede separar y se
pasa a llamar profago y ese profago actua como un virus y entra en
el ciclo lítico haciendo que la bacteria sinteticé sus proteínas y
duplique su material genético y finalmente se liberan esos
componentes y se genera la lisis o ciclo lítico que puede empezar
directamente en etapas o puede inducirse a partir de un ciclo
lisogenico

50. Tips para las preguntas del laboratorio
• Para el Práctico nos puede preguntar sobre medios de cultivo, la función
de estos, Como prepararlos, como esterilizarlos, etc. Ejemplo: Medio base
para hacer Agar sangre que puede ser TCA, agar cerebro corazón THA,
Maconkey, Caldos nutritivos, Sape de hongos.
• En una puede haber una batería con una bacteria a diferentes T° y nos
puede preguntar cuál es el rango de esa bacteria: Cual es el mínimo
(Turbidez tenue), óptimo (muy concentrado) y máximo (Muy
concentrado).
• También nos puede colocar una receta de un medio de cultivo y debemos
indicar que aportan sus componentes al desarrollo de la bacteria.
• Identificar tipos de Hemolisis, etc.
• Hay que identificar bacterias: Gram, forma, agrupación y ejemplos de
patógenos o ambientales.
• También habrá preguntas con respuesta corta y estaciones.

51. Control de los microorganismos,
Antibióticos.
• Desde que se comprobó que los microorganismos estaban
involucrados en enfermedades infecciosas, fue necesario controlar el
crecimiento de los microorganismos en diferentes procesos de cirugía.
Se crearon Técnicas Antisépticas para evitar el crecimiento.
• Joseph Lister  Fundador de las primeras técnicas antisépticas
modernas para efectuar una cirugía con mejores técnicas y más
limpias.
• Lo primero que se usó fue Acido carbólico pulverizado (para esterilizar
ambientes).
• Actualmente es más el control debido al los diversos procesos que los
microorganismos tienen en diferentes áreas de trabajo como:
Medicina, Agricultura, Biotecnología, etc.
• Descontrolar: inhibir y prevenir el crecimiento. Si estamos frente a una
infección se debe MATAR, pero si estamos con un proceso
biotecnológico cuando no se requiere eliminar todo, se debe INHIBIR
crecimiento de algunos. Para matar se deben aplicar compuestos
químicos.
• Bactericidas: Matan bacterias (compuestos naturales o artificiales).
• Bacteriostáticos: Inhiben crecimiento de las bacterias.

52. • Concepto de esterilización: Es la destrucción
completa o eliminación de todos los
microorganismos. No es un grado, está o no
está estéril. Depende del origen del material.
Hay muchos métodos de esterilización.

53. Factores para control bacteriologico
Físicos:
Calor
• Ebullición (No es esterilización) En el mejor de los casos Solo elimina a las
bacterias pero no a las esporas.
• Autoclave (Calor húmedo) 121°C calor muy penetrante y permite incluso
eliminar las esporas.
• Calor seco: Esterilizar elementos sin materia orgánica y además nos
asegura la esterilización con tiempo y T° mayor. Aquí se esterilizan
metales, vidrios, etc.
• Incineración: a T° muy superiores, alcanzando los 500°C.
• Radiaciones (UV) : Con longitudes de onda que nos aseguran eliminar todo
lo que contaminaría a la superficie. Sin embargo la radiación UV no puede
esterilizar todo, por eso que se complementa con otros tipos de
esterilizaciones. Ej: Cámara de flujo laminar.
• Radiaciones (gama): También nos aseguran esterilización, actúan en
macromoléculas como aminoácidos y forman radicales libres evitando que
la bacteria siga creciendo tras el daño causado hacia el ADN.
Filtración: Retener a las posibles bacterias en una solución.

54. • Químicos: Compuestos naturales o artificiales.
• Gases aplicados en el ambiente: Etileno, formaldehido,
glutaraldehído. Estos actúan a nivel de enlace en las
macromoléculas, por lo tanto impide que se desarrolle la bacteria.
• Óxido de Etileno es uno de los más usados, se aplica en cámara de
gases para esterilizar material o superficies mayores.
• OZONO, también está siendo usada como desinfectante para el
agua y los alimentos, el oxígeno se somete a un campo eléctrico y
generará un O2 atómico que se combina con otras moléculas de O2
formando ozono. También se utiliza para desinfectar superficies.
También se utiliza en embalaje de huevos, alimentos embazados,
etc.
• PEROXIDO DE HIDROGENO LÍQUIDO (A baja T°).

55. • Pasteurización en Alimentos: significa que no va a matar
todas las bacterias de la materia prima, Ej: LECHE  no
matará la Lactobacillus, pero sí especies de streptococcus,
micrococcus, mycobacterium tuberculosis (viene del
ganado). Se calienta con 63° - 71° matando selectivamente
algunos tipos de microorganismos.
• Para inhibir el crecimiento se puede congelar los productos,
pues la mayoría de las bacterias no crecen a esa T°.
• Para conservar bacterias y alimentos existe una técnica que
es LIOFILIZACIÓN (Extracción de todo el agua) evita el
desarrollo de bacterias. Ej: Leche en polvo.

56. Desinfectantes y antisépticos
Antisépticos: diseñados para usar en materia
orgánica como aplicarlo directamente a la piel.
Se usa en Clínica.
Desinfectantes: Son aplicados en materia inerte.
Estos actúan sobre las proteínas, las precipitan,
las desnaturalizan, rompen enlaces, reaccionan
con algunos aminoácidos, hacen que no sean
funcionales por lo tanto el organismo muere.

57. • Cuando un microorganismo está creciendo
óptimamente en un matraz, se puede hacer una
CURVA DE CRECIMIENTO: Fase Lag, Fase
exponencial, Fase estacionaria, Fase muerte.
Se determina con
• METODOS DE RECUENTOS  VIABLES O TOTALES.
Un parámetro es la TURBIDEZ (recuento Total)
con un espectrofotómetro. (Ejemplo de recuento
viable: Colonias).

58. • Antimicrobianos: Se utilizan para controlar el crecimiento de
patógenos. Hay antibióticos de origen natural, aritificial o mezcla de
ambos.
• Agente quimioterapéutico: agente químico sintético que actúan
frente a las bacterias patógenas.
• Antibióticos: Agentes químicos de origen natural. Originados por
Bacterias y hongos de diversos grupos. Afecta a otras bacterias que
nos interesa eliminar. Lo malo es que los agentes peligrosos se
hacen resistentes a estos antibióticos con el tiempo, ejemplo: Los
patógenos importantes son en casi su totalidad resistentes a los
antibióticos Beta-Lactámicos.
• Ejemplos de Agentes quimioterapéuticos sintéticos que afectan a
bacterias:
• Sulfonamidas, Isoniacida, Etabutol.

59. Antibióticos
• DE AMPLIO ESPECTRO (Efecto sobre Gram+ y Gram-, no distinguen).
• ESPECTRO REDUCIDO. -> Antimicótico: Inhibe a los hongos.
• Efecto de algunos agentes quimioterapéuticos o antibióticos pueden
explicarlo cualquiera de las gráficas, puede ser:
• Bacteriostáticos: inhibe.
• Bactericidas: Se puede contar turbidez en totales pero estarán muertas.
• Bacteriolíticos (matan a los microorganismos por lisis, por lo tanto no
habrán líneas curva ni discontinua.) Esta capacidad bacteriolítica la
tendrán los antibióticos que actúan en pared celular, para alterar la pared
la bacteria se lisa. Ejemplo: Penicilina es un buen bacteriolítico.
• (LA DIFERENCIA ESTÁ EN EL MODO EN EL QUE CONTROLAN EL
CRECIMIENTO)
• Línea continua  Viables.
• Línea Discontinua  totales.

60. Puntos en los que actúan los
antibióticos
• ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN A LA PARED CELULAR:
Beta lactámicos (penicilina), Cefalosporinas, etc. Actuan como bacteriolíticos, Junto a
los que afectan su membrana desestabilizan la protección de la célula, la lisarán.
• ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN EL METABOLISMO:
Ácido PABA se forma producto del metabolismo del ácido fólico: Sulfonamidas,
inetropil* Son de origen sintéticos.
• ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN A LA MEMBRANA PLASMÁTICA:
Polimixina
• ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN EL DNA:
Actuan en las enzimas que participan en el Enrollamiento del ADN o en el proceso de
la Replicación del ADN. Ej: la ADN girasa inhibida por 3 antibióticos: Novobiocina,
Norfloxacina, Ac. Nadilixico (quinolonas) Estas afectan el super enrollamiento del DNA.
• También está las que afectan el ARN Polimerasa, impidiendo que se forme el ARN
mensajero,  La Rimfapcina.
• ANTIBIOTICOS QUE AFECTAN LA SINTESIS PROTEICA (a nivel de ribosomas): Las
bacterias tienen 2 subunidades una de 50 s y la otra de 30 s en los ribosomas. Hay
antibióticos que están actuando a este nivel (nivel de subunidad pequeña y mayor)
 Intromicina*, Tetraciclina, Estreptomicina, canabicina*.

61. ANTIBIOGRAMA
• es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la
susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de una bacteria a un grupo de
antibióticos.
• 1.- Placa -> Medio de enriquecimiento en medio MILLER HINTON
(Recomendada para los antibióticos).
• 2.- Se hizo una siembra con una técnica llamada AGAR FUNDIDO (Mezcla
del agar con el inóculo y eso con la placa, luego Formamos una película.
• 3.- Sobre la siembra colocaremos Discos de antibióticos.
• 4.- La placa sembrada con los discos se llevará a incubar para llegar a saber
el efecto que tiene la bacteria, 37°C X 24Hrs.
• 5.- Resultados: Discos Negros  Son Halos de división. Las exoenzimas se
difunden desde la biomasa hasta el exterior, El disco tiene el antibiótico
concentrado, al contacto con el agar y el cultivo que es húmedo difunde y
dependiendo de la bacteria si es o no resistente va a crecer más cerca o
lejos del disco, Así se determina que antibiótico es el adecuado y
determinar que bacteria está provocando la infección. Se mide el
diámetro del Halo, Expresado en milímetro.

62. • Entre más grande el halo el antibiótico será más recomendable.
• La resistencia de las bacterias se debe al DNA. En patógenos se ve
mucho la resistencia adquirida y esto implica que durante la vida
del organismo ha adquirido de otras bacterias una información
genética que va a implicar un cambio en su formación que
signifique su resistencia a los antibióticos.
• Transmisión horizontal de genes: intercambio de genes entre cepas
y especies a través de la conjugación, transducción y
transformación.
• Transmisión Vertical: Transmisión de padre a hijo, cuando una
bacteria se divide es porque comienza de la división de una
bacteria, por lo tanto toda la colonia tendrá la misma información
genética CLON. También por Mutación y selección.
• Estreptomyces: Son dados origen a los antibióticos que conocemos,
estos pueden ir a blancos sensibles de otras bacterias.
• Clase química de los antibióticos: Buscar desde el libro online.
• B-Lactámicos: Pinicilina y la cefalosporina  Inhiben la síntesis del
péptidoglicano de las gram+
•

63. RESUMEN MICRO ORGANISMOS