electroforesis

1. INTEGRANTES:
•Andry Fajardo
•Andrea Lemus
•Nayra Velásquez
•Melissa Ruiz
ELECTROFORESIS

2. La electroforesis es un método de laboratorio en el que
se utiliza una corriente eléctrica controlada con la
finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y
carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por en el año
1937, pero su importancia vino a incrementarse cuando
en los años cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius ,
impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se
asigno a la separación de materiales en un campo
eléctrico en presencia de algún tipo de soporte; aunque
este termino se limito originalmente al análisis de
coloides y partículas submicroscopicas , se ha
convertido en estos últimos años en una metodología
aplicada a sustancias de bajo peso molecular.

3.  La electroforesis es una técnica para la
separación de moléculas según la movilidad de
estas en un campo eléctrico. La separación
puede realizarse sobre la superficie hidratada de
un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel
o en acetato de celulosa), o bien a través de una
matriz porosa (electroforesis en gel), o bien en
disolución (electroforesis libre). Dependiendo de
la técnica que se use, la separación obedece en
distinta medida a la carga eléctrica de las
moléculas y a su masa.

4. TIPOS DE ELECTROFORESIS:
• Electroforesis Capilar
• Electroforesis en geles de agarosa
• Electroforesis en gel de poliacrilamida
• Electroforesis en geles de gradientes

5. ELECTROFORESIS CAPILAR
Es una técnica de separación utilizada en distintas áreas (química,
bioquímica, etc.) para separar las diferentes moléculas presentes en
una disolución de acuerdo con la relación masa/carga de las mismas.
La separación se lleva a cabo en un tubo hueco de diámetro muy
pequeño (menos de 50 µm de diámetro), de ahí que reciba el nombre
de capilar.
ELECTROFORESIS EN GELES DE AGAROSA
La agarosa electroforesis en gel es la forma más eficaz de separar
fragmentos de ADN de diferentes tamaños que van desde 100 pb a 25
kb 1. La agarosa es aislado a partir de las algas
géneros Gelidium y Gracilaria, y consta de agarobiose repetida (L y D-
galactosa) subunidades 2. Durante la gelificación, los polímeros de
agarosa asociación no covalente y formar una red de paquetes cuyo
tamaño de poro determinar un gel de propiedades moleculares de
tamizado. El uso de electroforesis en gel de agarosa revolucionado la
separación del ADN. Antes de la adopción de geles de agarosa, el ADN se
separó utilizando principalmente de densidad de sacarosa centrifugación
en gradiente, que sólo proporcionan una aproximación de tamaño.

7. ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
Los geles de poliacrilamida constituyen un excelente medio de soporte para separaciones
electroforéticas, dado que reúnen una serie de propiedades idóneas: transparencia,
elasticidad, porosidad controlable y compatibilidad con una gran variedad de compuestos
químicos. La poliacrilamida se forma por copolimerización de dos compuestos, la
acrilamida y la bis-acrilamida (N,N'-metilén-bis-acrilamida), en una reacción iniciada por
la tetrametiletiléndiamina (TEMED) y el persulfato de amonio. El radical persulfato activa
al TEMED, el cual a su vez activa al monómero de acrilamida para que polimerice. Las
cadenas de poliacrilamida son entrecruzadas al azar por la bisacrilamida, formándose así
una red de porosidad bastante uniforme, que puede ser regulada variando las
condiciones de la reacción y las concentraciones de los monómeros.
ELECTROFORESIS EN GELES DE GRADIENTES
La electroforesis en gel con gradiente de desnaturalización, también referida
como electroforesis en gel desnaturalizante en gradiente, (en el ámbito
científico comúnmente referida por su abreviación en inglés: DGGE) es una
técnica de huella, rastreo o trazado molecular (vulgarmente conocida en Inglés
como molecular fingerprinting) usada en diversas disciplinas de la biología y la
química, que consiste en la separación de cadenas de ADN de doble cadena
dependiendo de su punto de desnaturalización, siendo dicha desnaturalización
definida en éste caso como la separación de cadenas complementarias de ADN.

9. Fuentes de error en la electroforesis.
La electroforesis es una técnica muy sensible y
puede ser afectada por muchos errores
experimentales, como la temperatura durante
la polimerización y la corrida del gel, velocidad
de la polimerización, niveles de catalizador,
pureza del reactivo, tiempo de corrida y
preparación de las muestras.