La electroforesis es una técnica analítica que permite separar especies químicas como ácidos nucleicos o proteínas aplicando un campo eléctrico. Se usa para separar, identificar y purificar estas biomoléculas en medios como el agar o la poliacrilamida. La electroforesis mide el tamaño y carga de las moléculas para separarlas, y se pueden usar tinción como el bromuro de etidio o Sybr-Green para detectar el ADN.

1. Electroforesis de Ácidos
Nucleicos
Mg. Luis Lizárraga Vargas

2. • La electroforesis es la
técnica mediante la cual se
separan las biomoléculas en
disolución cuando se ven
sometidas a un campo
eléctrico.
• Se trata de una técnica
fundamentalmente analítica.

3. Permite separar especies químicas (ácidos
nucleicos o proteínas) a lo largo de un campo
eléctrico en función de su tamaño y de su carga
eléctrica.

6. Electroforesis Horizontal:
Para ADN y RNA
Electroforesis Horizontal:
Para proteínas y ADN

7. Medios de soporte para realizar la
electroforesis
• AGAR
• POLIACRIDAMIDA

8. Finalidad de la electroforesis
• Separar
• Identificar
• Purificar

9. Preparación de gel de agarosa

10. catalizar la polimerización

11. Tinción del ADN
BROMURO DE ETIDIO
-Es un compuesto intercalante,
es decir, que tiene afinidad para unirse
al DNA
– Absorbancia a 302 y 366 y emisión a
590 nm.
– Detecta hasta 10 ng de ADN.

13.  Sybr-Green
-Detecta hasta 100-300 pg
emisión en λ = 522 nm

14. Se asocia a la molécula de ADN
interactuando con la hendidura
menor del ADN

15. Migración
• Tamaño del ADN
• Concentración de agarosa
• Conformación del ADN
• Voltaje
• Tampón de electroforesis

16. Interpretación de Resultados

27. Inlet
(cathode)
Outlet
(anode)
Capillary Electrophoresis
(CE)
Argon Ion Laser
Fill with Polymer
Solution
50-100 m x 27 cm
5-20 kV
- +
Burn capillary
window
Data Acquisition and Analysis
DNA Separation occurs in minutes...

29. ABI PRISM® 3500 Genetic Analyzer
Capillary electrophoresis with multi-color
detection capabilities

30. capillary
Syringe with polymer
solution
Autosampler tray
ABI Prism 3500 Genetic Analyzer
Outlet
buffer
Injection
electrode

31. ABI 3500 Result