Un banco de líneas celulares troncales tiene como funciones la elaboración, el almacenamiento, la conservación y la gestión de líneas celulares de diverso tipo, de acuerdo con las normas y estándares que determina la legislación nacional e internacional. Dentro de los tipos de líneas celulares se encuentran las de origen embrionario, obtenidas a partir de la masa celular interna de blastocistos procedentes de preembriones sobrantes de ciclos de FIV, donde la figura de un embriólogo que manipule los preembriones es necesaria. Para poder definir aspectos en cuanto al perfil de este tipo de profesional, debemos buscar las similitudes con los centros de reproducción asistida. Mediante este trabajo se pretenden describir las funciones de un embriólogo dedicado a la derivación de líneas celulares embrionarias humanas dentro del Banco de Líneas Celulares de Andalucía
Nuevas perspectivas del embriólogo en bancos de células madre
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Diciembre 2006 Vol. 11 • Nº2
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NUEVAS PERSPECTIVAS PARA EL EMBRIÓLOGO: PAPEL EN EL
BANCO DE LÍNEAS CELULARES DE ANDALUCÍA (NODO CENTRAL
BANCO NACIONAL DE LÍNEAS CELULARES)
New perspectives for the embryologist: role in the Andalusian Stem Cell Bank (Spanish Central Node)
José Luis Cortés*, Fernando Cobo, Carmen Cabrera, Angela Helen Barnie, Purificación Catalina, Ana Nieto, Rosa Montes, Alicia
Barroso, Ángel Concha
Banco de Líneas Celulares de Andalucía (Nodo Central Banco Nacional de Líneas Celulares).
* Banco de Líneas Celulares de Andalucía. Hospital Universitario Virgen de las Nieves. Avda Fuerzas Armadas 2, 18014 Granada. E-mail: josel.cortes.sspa@jun
tadeandalucia.es
RESUMEN: Un banco de líneas celulares troncales tiene como funciones la elaboración, el almacenamiento, la
conservación y la gestión de líneas celulares de diverso tipo, de acuerdo con las normas y estándares que determina
la legislación nacional e internacional. Dentro de los tipos de líneas celulares se encuentran las de origen
embrionario, obtenidas a partir de la masa celular interna de blastocistos procedentes de preembriones sobrantes de
ciclos de FIV, donde la figura de un embriólogo que manipule los preembriones es necesaria. Para poder definir
aspectos en cuanto al perfil de este tipo de profesional, debemos buscar las similitudes con los centros de
reproducción asistida. Mediante este trabajo se pretenden describir las funciones de un embriólogo dedicado a la
derivación de líneas celulares embrionarias humanas dentro del Banco de Líneas Celulares de Andalucía.
PALABRAS CLAVE: Banco de líneas celulares troncales, blastocisto, célula troncal embrionaria, embriólogo,
FIV, masa celular interna.
SUMMARY: The functions of a stem cell bank are the elaboration, storage, conservation and management of all the
cell line types, according to national and international regulations currently in force. One of these cell lines is the
embryonic stem cell line, which is obtained from the inner cell mass of blastocysts of IVF spare embryos, where the
figure of an embryologist who manipulates the embryos is necessary. To be able to define some aspects about the
profile of this type of professional, we must look for the similarities with the Assisted Reproduction Centres. A
description of the functions of the embryologist who derives human embryonic stem cell lines in the Andalusian Stem
Cell Bank has been carried out.
KEY WORDS: Stem cell bank, blastocyst, embryonic stem cell, embryologist, IVF, inner cell mass.
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José Luis Cortés. Nuevas Perspectivas...
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INTRODUCCIÓN
La creación de bancos de líneas celu- poder regenerativo de las células tron- ya formado.
lares troncales públicos es un hecho cales embrionarias, numerosos cen-
reciente en Europa (aproximadamen- tros de investigación han iniciado pro- La ASMR 2004, en la guía para labo-
te 5 años), siendo España pionera en yectos de derivación de hESCs, don- ratorios de embriología y andrología,
este sentido, con la inauguración del de la figura del embriólogo adquiere enumera los servicios que ofrecen en
Banco de Líneas Celulares de otra perspectiva. concreto los laboratorios de embriolo-
Andalucía (BLCA), en Granada, el 23 gía clínica:
de Enero de 2004. Tanto la derogada Aún así, para poder definir aspectos
reforma de la Ley 35/1988 (Ley referentes a la figura del embriólogo - Preparación de los medios de cul
45/2003, de 21 de Noviembre), como en un centro de investigación debe- tivo y control de calidad
la actual Ley 14/2006, de 26 de Mayo, mos buscar las “homologías” con el - Identificación de ovocitos mediante
sobre Técnicas de Reproducción papel desempeñado en los centros de examen del líquido folicular
Asistida, así como la Directiva Europea reproducción asistida. - Evaluación de la madurez y calidad
(European Union, 2004), permiten a los ovocitaria
bancos de líneas celulares españoles ASEBIR ha publicado en el año - Preparación del esperma: recolec-
derivar líneas celulares embrionarias 2006, dentro del programa de ción y análisis del semen, lavado y ca-
humanas (siglas inglesas hESCs hu- Cuadernos de Embriología Clínica, unas pacitación espermática
man embryonic stem cells) a partir de Recomendaciones sobre Recursos - Inseminación de los ovocitos
preembriones sobrantes de ciclos de Humanos y Físicos para el Laboratorio - Determinación de la fertilización
FIV, siempre bajo el consentimiento in- de Reproducción Asistida Humana. En y evaluación de la calidad del zigoto
formado de los progenitores. estas recomendaciones, el embriólogo - Cultivo embrionario y evolución
sería el encargado de tomar las decisio- de la calidad embrionaria
Algo novedoso en la Ley es la elimi- - Transferencia embrionaria
nes clínicas dentro del laboratorio de
nación de las diferencias en la consi- - Crioconservación, almacenaje y
acuerdo con los protocolos estableci-
deración de los preembriones crio- descongelación de esperma, ovocitos
dos, y realizaría la mayor parte de la
conservados con anterioridad a la en- y embriones
labor asistencial del laboratorio de an-
trada en vigor de la Ley 45/2003, y los - Micromanipulación de ovocitos
drología y embriología.
que pudieran generarse posterior- humanos y/o embriones
mente, en cuanto a sus posibles des- Respecto a la formación del embrió-
tinos, siempre supeditados a la volun- Es obvio que en los centros de inves-
logo, éste deberá haber obtenido el
tigación en los que se deriven hESCs, la
tad de los progenitores. Es decir, cual- grado de Licenciado en Ciencias
función del embriólogo será diferente a
quier preembrión crioconservado, sea Biomédicas, como hemos expuesto las descritas anteriormente, pero pen-
cual fuere su tiempo de crioconserva- anteriormente, poseer conocimientos samos que la persona encargada de de-
ción, podría ser utilizado para fines de de fisiología humana, endocrinología rivar estas líneas sí debe de haber ad-
investigación siempre y cuando los reproductiva, genética, técnicas de la- quirido anteriormente una amplia expe-
progenitores firmen el consentimiento boratorio de andrología y embriología, riencia en este campo, lo que le otorga-
y estén asociados a un proyecto con- y conocimientos de cultivo celular. rá propiedad a la hora de manipular los
creto que deberán autorizar posterior- Además deberá poseer una experien- preembriones destinados a generar una
mente los Comités Éticos correspon- cia de al menos 2 años y acreditar la línea celular.
dientes. realización de 100 ciclos de FIV con
ICSI y 200 preparaciones de semen De esta manera, las funciones del pro-
PERFIL Y FUNCIONES DEL para inseminación artificial, supervi- fesional responsable del Área de
EMBRIÓLOGO sados por el coordinador del laborato- Embriología dentro del BLCA son
rio en cuestión, o por otro embriólogo (Figura 1):
Aunque no es aún un título oficial,
el embriólogo es aquel Licenciado en
Ciencias Biomédicas (Medicina,
Veterinaria, Farmacia, Biología o
Química) con experiencia en Biología
de la Reproducción. Según el R.D.
413/1996, de 1 de Marzo, para que un
centro esté autorizado en la aplicación
de las técnicas de reproducción asisti-
da deberá estar dotado de una perso-
na que cumpla los requisitos anterio-
res. Hasta ahora, la figura del embrió-
logo ha estado siempre relacionada
con las clínicas de reproducción asis-
tida, pero con el descubrimiento del
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- Descongelación de preembriones rios métodos que consisten en el Medical Research (ICMR-DBT,
crioconservados. Como los preem- aislamiento de la MCI y la elimina- 2006) expone que el profesional
briones provienen de distintos cen- ción de las células del trofoectoder- que realice el tratamiento de fertili-
tros, es competencia de esta área mo de los blastocistos. En nuestro dad y el investigador que derive la
el conocimiento de todos los proto- centro hemos experimentado dos línea celular o que trabaje con ellas
colos de congelación/descongela- métodos para realizar el aislamiento no sean la misma persona. Además
ción utilizados para optimizar los de la MCI dependiendo de la cali- explica que la decisión sobre el des-
resultados en cuanto a la obtención dad blastocitaria. Por un lado, un tino de los preembriones debe estar
de hESCs. método mecánico, bien por micro- libre de la influencia de los investi-
manipulación o por empleo del di- gadores que podrían alentar a los
-Clasificación de preembriones sector láser, cuando los blastocistos progenitores hacia su uso con fines
crioconservados descongelados, si- son de buena calidad con una MCI de investigación.
guiendo criterios morfológicos bastante distinguible y con tamaño
(Calderón et al., 2002): adecuado. En cambio, nosotros pensamos
que el embriólogo del banco de cé-
o Ritmo de división de las blastómeras El empleo del láser es un nuevo lulas troncales sí debe ser parte ac-
o Apariencia del citoplasma de las método de aislamiento de la MCI tiva en el proceso de entrevista, ex-
blastómeras probado en modelo murino por va- plicación y firma del consentimien-
o Contacto entre las blastómeras rios grupos, dando buenas tasas de to informado por parte de la pareja,
o Aspecto de la zona pelúcida derivación de líneas celulares em- o la mujer en su caso, estando dis-
o Fragmentación de las blastómeras brionarias murinas (mESCs) ponible para realizar las entrevistas
o Multinucleación de las blastómeras (Tanaka et al., 2006; Cortés et al., cuando sea necesario, ya que es
o Evaluación de la calidad blasto 2006). Consiste en ir aplicando el experto en cuanto a cualquiera de
citaria láser a las células del trofoectoder- los destinos propuestos por la Ley
mo destruyéndolas, siendo sola- española (Ley 14/2006).
Aunque algunos autores no rela- mente las células de la MCI las que
cionan la calidad embrionaria y blas- se adhieren a la superficie de culti- El BLCA es un centro multidiscipli-
tocitaria con la tasa de obtención de vo elegida (Fibroblastos murinos y nario donde varias áreas interaccio-
líneas celulares (Mitalipova et al., humanos, MatrigelTM). nan para una adecuada coordina-
2004), desde nuestro centro pensa- ción, con el objetivo de elaborar, al-
mos que esta clasificación sí es im- Para los blastocistos con una pe- macenar, conservar y gestionar to-
portante a la hora de elegir el méto- queña o nada visible MCI, utiliza- dos los tipos de líneas celulares, de
do de aislamiento de la masa celu- mos el método de cultivo directo del acuerdo a las actuales normativas
lar interna (MCI) y posterior deriva- blastocisto sobre la superficie de nacionales e internacionales. Estas
ción de la línea celular (Ver abajo). cultivo elegida (Kim et al., 2005). áreas o secciones son las siguientes
Así, tanto las células del trofoecto- (Figura 1): Área de calidad; área de
- Cultivo y evolución de los preem- dermo, como las de la MCI se ad- trazabilidad; área de embriología;
briones hasta estadio de blastocis- hieren a dicha superficie. Pasados área de cultivo celular; área de cito-
to, donde se encuentra la MCI, unos días, los dos tipos celulares genética y biología molecular; área
compuesta por las células tronca- sufren un crecimiento, y mecánica- de microbiología y área de investi-
les, que darán lugar a las hESCs. mente se separa la MCI. Aparte gación.
Para evaluar la calidad blastocitaria existe otro método de aislamiento
atendemos al modelo propuesto de la MCI mediante inmunocirugía CONCLUSIÓN
por el Instituto Cornell (Veeck and (Solter and Knowles, 1975), pero
Zaninovic, 2004), donde se valora que está en desuso debido a que los En el BLCA pensamos que existe
el grado de expansión del blastocis- medios utilizados contienen produc- una nueva figura de embriólogo in-
to, así como el aspecto del trofoecto- tos de origen animal, con el riesgo de vestigador especializado en la ma-
dermo y la MCI, quedando estable- contaminación cruzada. nipulación de preembriones huma-
cidas tres categorías: nos destinados a generar nuevas
- Coordinador entre los centros de re- hESCs. Este embriólogo debe haber
o Blastocistos de buena calidad producción y el banco para la perfec- acreditado experiencia previa en
con una MCI bastante distingui ta interlocución en la donación de embriología clínica, y debe de estar
ble y con tamaño adecuado. preembriones para fines científicos. en contacto con las clínicas de re-
o Blastocistos con una pequeña - Coordinador de la labor de obten- producción para la perfecta coordi-
pero distinguible MCI. ción de los consentimientos infor- nación en la donación de preem-
o Blastocistos de mala calidad con mados. La Guía para la Investigación briones con fines de investigación.
una MCI poco definida. y Terapia con Células Troncales pro- Además, el área de embriología al
- Derivación de hESCs. Existen va- puesta por la Indian Council of que estará integrado el embriólogo
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formará parte del Banco de Células en blastocistos de ratón para obten- Stem Cells 2003;21:521-526.Real
Troncales, con un stock propio de ción de células troncales embriona- Decreto 413/1996, de 1 de marzo, por
líneas celulares embrionarias, para rias: cultivo directo vs. láser. IX el que se establecen los requisitos téc-
su distribución a centros de investi- Congreso de la Asociación Española nicos y funcionales precisos para la
gación que las puedan utilizar para de Bancos de Tejidos; 2006 May 17- autorización y homologación de los
investigación básica y futuras apli- 19; Oviedo, España. P. 73-4. centros y servicios sanitarios relacio-
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