El documento describe un experimento de laboratorio sobre la intoxicación por cianuro en cobayos. Se administró cianuro por vía intraperitoneal a un cobayo y se observaron los signos y el tiempo hasta la muerte. Luego, se realizaron procedimientos como la disección del animal, destilación de las vísceras y reacciones químicas para identificar la presencia de cianuro. Las reacciones confirmaron cianuro en bajas concentraciones, posiblemente debido a fugas en el equipo.
1. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº 2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 2 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 9 de Junio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº1
1. Tema: INTOXICACIÓN POR CIANURO.
2. Animal experimentado: Cobayo.
3. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
4. Objetivos:
1) Determinar la presencia del tóxico (cianuro) en el organismo del animal
mediante reacciones de identificación cualitativa.
2) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (cianuro).
5. Materiales: Sustancias:
Balanza
Jeringa
Cronometro
Probeta
Equipo de disección
Tabla de diseccion
Bisturí
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Tubos de ensayo
Mechero
Cocineta
Pipetas
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
10
Calificación
Agua destilada
Cianuro
Hidróxido de Sodio 0.1 N
Acido Tartárico al 20%
Cristales de sulfato ferroso
Acido sulfúrico
Cloruro férrico
Acido clorhídrico
Sulfato de cobre
Fenolftaleína
Acido pícrico
Yoduro de plata
Yodo
2. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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6. Procedimiento:
1. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
2. Pesar el cobayo
3. Preparar 1.06 de CNNa + 20ml de agua destilada .
4. Administrar el toxico preparado, 13ml CNNa al 5% por vía peritoneal.
5. Colocar al cobayo en la campana.
6. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.
7. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir el cobayo.
8. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado
(Vaso de precipitación).
9. Preparar 2gr de acido tartárico en 50ml de agua destilada.
10. Añadir la solución de acido tartárico a las vísceras, con la finalidad de acidular.
11. Luego de este tiempo se filtra, y se destila.
12. El residuo de la destilación, después que se ha eliminado por completo el cianuro, se
recoge con hidróxido de sodio, en el cual se practican las diferentes reacciones de
reconocimiento.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
1. Azul de prusia - Una pequeña porción del destilado (después de comprobar su
alcalinidad) se le agregan unos pocos cristales de sulfato ferroso, un exceso de ácido
sulfúrico diluido y unascuantas gotas de solución diluida de cloruro férrico, se
calienta y se agita levemente y se acidifica con ácido clorhídrico diluido,
obteniéndose un color azul intenso llamado azul de Prusia.
𝐻𝐶𝑁 + 𝑁𝑎𝑂𝐻 → 𝐶𝑁𝑁𝑎 + 𝐻2 𝑂
2𝐶𝑁𝑁𝑎 + 𝑆𝑂4 𝐹𝑒 → 𝑁𝑎4 𝑆𝑂4 + 𝐹𝑒(𝐶𝑁)2
𝑁𝑎2 𝐶𝑁 + 𝐹𝑒(𝐶𝑁)4 → 𝑁𝑎4 𝐹𝑒(𝐶𝑁)6
𝑁𝑎4 𝐹𝑒(𝐶𝑁)6 + 4𝐹𝑒𝐶𝑙3 → 12𝑁𝑎𝐶𝑙 + 𝐹𝑒4[𝐹𝑒(𝐶𝑁)6]3
2. Reacción de la fenolftaleína.- Se agregan a una pequeñaporción de destilado unas
gotas de solución de sulfato de cobre (1:2000) y previamente unas gotas de fenolftaleína
con lo que le producirá un intenso color rojo debido a la oxidación de la fenolftaleína a
fenolftaleína.
3. Transformación de Cianuros a Sulfocianuros.- Se alcaliniza la muestra con hidróxido
de sodio o potasio y se adiciona hiposulfuro de amonio recientemente preparado. Se
evapora a baño maría y se recoge el residuo con ácidoclorhídrico. Se filtra para eliminar
el azufre que eventualmente pudiera estar presente y se agrega solucióndiluida de
cloruro férrico. En caso positivo aparece un color rojo sangre por formación de
sulfocianato férrico.
𝑁𝑎𝐶𝑁 + (𝑁𝐻4)2 𝑆2 → 𝑁𝑎𝑆𝐶𝑁 + (𝑁𝐻4)2 𝑆
3𝑁𝑎𝐶𝑁 + 𝐶𝑙2 𝐹𝑒 → 𝐹𝑒(𝑆𝐶𝑁)3 + 3𝑁𝑎𝐶𝑙
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4. Reacción de la Bencidina.-Una pequeña cantidad de muestra se agrega a una solución
de bencidina en ácido acético mezclada con solución de sulfato de cobre, produce color
azul si en la. muestra se encuentra el ácido cianhídrico.
5. Con el ÁcidoPícrico.- Una pequeña porción de la muestra, se le agregan. unas gotas de
ácido Pícrico al 2 %; en case positivo el color amarillo del reactivo se toma anaranjado.
6. Con Yoduro de Plata Si agregamos unas gotas de la solución de la muestra sobre un
precipitado de yoduro de plata se producirá la solución del precipitado en caso positivo.
7. Con Solución de Yodo.- Al adicionar unas cuantas gotas de la muestra sobre una
solución de yodo, se producirá la decoloración del yodo en caso positivo.
7. Reacciones y conducta post-administración:
8:54am = administración.
9:00am = convulsiones.
9:04am = perdida de movimiento.
9:11am= segunda dosis (3ml).
9:29am=tercera dosis (5ml).
9:32am= hipoxia.
9:36am = deceso.
8. Gráficos
Pesamos 1.06 Administrar al cuy Observamos reacciones Deceso
de CNNa
Colocamos al cuy en la Hacemos una incisión Extraemos vísceras Picamos finamente
tabla de disección
Colocamos en una balón Añadimos acido tartárico destilamos Recibimos destilado en
NaOH y hacemos las
Respectivas reacciones.
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9. Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
1) Reacción de azul de Prusia: (-) negativo. (No hubo coloración azul).
2) Reacción de fenolftaleína: (+) positivo, característico (color violeta).
3) Reacción con ácido pícrico: negativo (+)positivo, característico color (anaranjado)
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4) Reacción con solución de yodo: (+) positivo no característico color (decoloración).
10. Observaciones.
1) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda
usar mascarilla con filtros de celulosa.
2) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
3) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
4) El cianuro en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de la
autopsia.
5) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
optimas condiciones.
11. Conclusiones.
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el alto nivel de
toxicidad del cianuro sobre organismos vivos y además constamos la presencia
aunque en poca concentración del toxico en el organismos del animal que pudo
deberse a una fuga de los vapores en el equipo de destilación.
CUESTONARIO
Cuáles son las manifestaciones clínicas de la intoxicación por cianuro?
El cianuro se une a la citocromooxidasa de forma reversible, inhibe la fosforilación oxidativa
y daña aquellos tejidos que más dependen de ella, como el miocardio y el sistema nervioso
central. Dada su afinidad por el hierro (Fe +3) oxidado, presente en la cadena respiratoria
de la célula (citocromooxidasa), se une a este elemento bloqueando dicha cadena y, por ende,
la respiración. El centro respiratorio puede estar inicialmente estimulado por la acidosis
metabólica, pero finalmente se inhibe en las intoxicaciones graves; dicha estimulación se
debe además a un efecto de estimulación directa de quimiorreceptores en los centros
respiratorio y cardíaco.
Cuáles son las dosis letales del cianuro?
6. Laboratorio de Toxicología
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Las dosis letales para las sales de cianuro son 200-300 mgr mientras que para el ácido
cianídrico es de 50 mgr.
Tratamiento para la intoxicación por cianuro
Administrar oxígeno al 100%.Si el paciente está en paro respiratorio intubarlo. Canalización
venosa inmediata. Realizar lavado gástrico exhaustivo con solución salina y descartar el
contenido rápidamente por el riesgo de intoxicación inhalatoria del personal de salud.
Suministrar carbón activado 1 gr/Kg de peso corporal en solución al 25% por sonda
nasogástrica. Antídotos: El cianuro tiene mayor afinidad por los nitritos, luego por el
tiosulfato desodio y por la hidroxicobalamina.
GLOSARIO.
Cianuro
El cianuro se encuentra en el reino vegetal formando parte de numerosos glucósidos capaces
de liberar ácido cianhídrico (HCN) al reaccionar con las enzimas hidrolíticas apropiadas. El
ácido cianhídrico es un tóxico potente y de rápido efecto, ya que bloquea la respiración
celular al combinarse el ion cianuro (CN-) con una enzima indispensable para tal proceso.
Hipoxia
Es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una región del cuerpo
(hipoxia de piel loca), se ve privado del suministro adecuado de oxígeno.
Destilación
La destilación es la operación de separar, mediante vaporización y condensación en los
diferentes componentes líquidos, sólidos disueltos en líquidos o gases licuados de una mezcla,
aprovechando los diferentes puntos de ebullición de cada una de las sustancias ya que el
punto de ebullición es una propiedad intensiva de cada sustancia, es decir, no varía en
función de la masa o el volumen, aunque sí en función de la presión.
Volátil
La volatilidad desde el punto de vista químico, físico y de la termodinámica es una medida de
la tendencia de una sustancia a pasar a la fase vapor. Se ha definido también como una
medida de la facilidad con que una sustancia se evapora. A una temperatura dada, las
sustancias con mayor presión de vapor se evaporan más fácilmente que las sustancias con
una menor presión de vapor.
Dosis letal
Es la cantidad de tóxico que puede producir la muerte.
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BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 53-69.
WEBGRAFIA:
http://www.slideshare.net/lorenasenzanocastro/intoxicaciones-por-cianuro-dra-
lorena
http://www.estrucplan.com.ar/Producciones/entrega.asp?IdEntrega=47
Revisado
Día Mes Año
Machala, 9 de Junio del 2014
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Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 9 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 16 de Junio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº2
12. Tema: INTOXICACIÓN POR FORMALDEHIDO.
13. Animal experimentado: Cobayo.
14. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
15. Objetivos:
3) Aprender a manipular y administrar tóxicos (Formaldehido) en animales
de experimentación.
4) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (Formaldehido).
5) Determinar la presencia del Formaldehido en el organismo del animal
mediante reacciones de identificación cualitativa.
16. Materiales: Sustancias:
Vaso de precipitación
Tubos de ensayo
Mechero
Cocineta
Pipetas
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
10
Calificación
Aceite mineral + formol
Aceite mineral + diluyente
Agua destilada
Permanganato de potasio
Ácido sulfúrico puro
Fushinabisulfatada
Cloruro de fenilhidracina al 4 %
Nitroprusiato de sodio al 2.5%
Hidróxido de sodio
Cloruro de fenil hidracina
Ferricianuro de potasio al 5 – 10%
Solución sulfúrica de morfina
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
9. Laboratorio de Toxicología
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17. Procedimiento
1. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
2. Preparamos la muestra de Formaldehido.
3. Se realizan las reacciones de reconociendo en medios biológicos.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
1. Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de
permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de
ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de
solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla
adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle
nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de
fushinabisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color
violeta en caso de positivo.
2. Reacción de Rimini: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de
fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién
preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración
azul intensa.
3. Con la Fenilhidracina: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico
a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil
hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas
gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
4. Reacción de Marquis: Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido
sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2
gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene
enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
5. Con el Ácido Cromotrópico: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado
con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de
calentarla ligeramente.
6. Reacción de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros
deleche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado
trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico);
en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
10. Laboratorio de Toxicología
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4. Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
1) Reacción de Rimini: (+) Positivo, No característico (no tuvo cambio de color).
2) Fenilhidracina: (-) Negativo. (No hubo coloración roja)
3) Ácido Cromotrópico: (+) Positivo característico. (Cambio de Color a Rojo)
11. Laboratorio de Toxicología
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4) Reacción de Hehner: (+) Positivo, No característico (no tuvo cambio de
coloración anaranjada).
5. Observaciones.
6) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se
recomienda usar mascarilla con filtros de celulosa.
1) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse
en optimas condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de
una forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.
6. Conclusiones.
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel
considerado de toxicidad del formaldehido en relación a la capacidad de otros tóxicos
ya usados, y que pudimos comprobar mediante reacciones de reconocimiento, por lo
que damos por realizada con el total éxito la práctica.
CUESTONARIO
¿Qué es el Formaldehido?
El Formaldehído es un gas incoloro de olor penetrante que se utiliza mucho en la
fabricación de materiales para la construcción y en la elaboración de productos para
el hogar, principalmente resinas adhesivas para tableros de madera aglomerada.
Existen dos tipos de resina de formaldehído: las de urea formaldehído y las de fenol-
formaldehído. Los productos elaborados con las primeras liberan formaldehído,
mientras que los niveles de emisión de éste por parte de las resinas de fenol-
formaldehído son, por lo general, menores.
12. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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Productos con formaldehido?
El formaldehído ha sido utilizado por décadas para embalsamar cadáveres de tal
manera que puedan ser presentados durante un velorio. Es un líquido para preservar
que sustituye la sangre, es un agente reconocido por el Instituto Nacional de Cáncer
por causar dicha enfermedad (carcinógeno), y, por si esto fuera poco, está incluido en
la mayoría de los productos que usted compra y usa en su casa.
El formaldehído también puede hallarse en estos materiales de construcción:
Contrachapado
Pegamento
Aislantes
Madera comprimida
Tableros de fibra
Revestimiento de madera
Estos son algunos de los productos de cuidado personal que pueden contener esta
toxina:
Lociones
Champú
Bloqueador Solar
Cosméticos
Pasta Dental
Pastillas de Jabón
Jabón Líquido para Baño
Toallas para Bebés
Jabón de Burbujas para la Tina
13. Laboratorio de Toxicología
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Efectos sobre la salud?
El formaldehído normalmente se encuentra en bajas concentraciones, en general
menos de 0,06 ppm, tanto al aire libre como en lugares cerrados. En concentraciones
de 0,1 ppm o más, puede producir trastornos agudos, tales como ojos llorosos,
náuseas, accesos de tos, opresión en el pecho, jadeos, sarpullido, sensación de
quemazón en los ojos, nariz y garganta y otros efectos irritantes.
La sensibilidad al formaldehído es muy variable. Mientras ciertas personas muestran
una alta sensibilidad a él, otras, a un mismo grado de exposición, no presentan
ningún tipo de reacción. Las personas sensibles al formaldehído pueden experimentar
síntomas a niveles inferiores a 0,1 ppm. La Organización Mundial de la Salud
recomienda que los niveles de concentración no sean mayores de 0,05 ppm.
Los resfríos, la gripes y las alergias pueden producir síntomas similares a algunos de
os causados por exposición al formaldehido.
El formaldehído ha demostrado ser cancerígeno en animales de laboratorio y
también puede serlo en el hombre. No se conoce el umbral por debajo del cual no
existe riesgo de contraer cáncer. Dicho riesgo depende de la concentración y del
tiempo de exposición.
GLOSARIO.
Aceite mineral
Un aceite mineral es un subproducto líquido de la destilación del petróleo desde el
petróleo crudo.
Formol
El formol, formaldehído o metanal es un compuesto químico altamente volátil y muy
inflamable. Su fórmula es H2 C=O (un átomo de carbón unido a dos átomos de
hidrógeno y unida a un átomo de oxígeno).
Diluyente
(También conocido como thinner) es un agente de dilución.
Intoxicación
Una intoxicación se produce por exposición, ingestión, inyección o inhalación de una
sustancia tóxica siempre y cuando sea de composición química ya que si el compuesto es
natural se le llamara ingesta excesiva y esto por cualquier sustancia sea natural, química,
procesada o creada
14. Laboratorio de Toxicología
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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Reacción de schiff
La prueba de Schiff es una reacción química orgánica nombre temprana desarrollado por
Hugo Schiff, y es prueba química relativamente general para la detección de muchos
aldehídos orgánicos que también ha encontrado su uso en la tinción de los tejidos biológicos.
El reactivo de Schiff es el producto de reacción de una formulación de colorante tal como
fucsina y bisulfito de sodio; pararosanilina y nueva fucsina son alternativas de tinte con la
química de detección comparables.
BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 73-78.
WEBGRAFIA:
http://www.globalhealingcenter.net/salud-natural/formaldehido-
productos.html
http://www.beautymarket.es/peluqueria/el-uso-del-formol-peligroso-o-no-
peluqueria-3548.php
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Revisado
Día Mes Año
Machala, 16 de Junio del 2014
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Estudiante Catedrático
15. Laboratorio de Toxicología
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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 23 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 30 de Junio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 3
18. Tema: INTOXICACIÓN POR METANOL
19. Animal experimentado: Cobayo.
20. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
21. Objetivos:
6) Adiestrase en la manipulación y administración de tóxicos (metanol)
animales de experimentación.
7) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (metanol).
8) Determinar la presencia del metanol en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
22. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Lámina de Cobre
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Calificación
NaOH (20%)
Ácido tartárico
Metanol
Agua destilada
Permanganato de potasio
Ácido sulfúrico puro
Fushinabisulfatada
Cloruro de fenilhidracina al 4 %
Nitroprusiato de sodio al 2.5%
Hidróxido de sodio
Ferricianuro de potasio al 5 – 10%
Solución sulfúrica de morfina
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
10
16. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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Mandil
23. Procedimiento.
1. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
2. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de metanol se toma de manera segura
al animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
3. Se administra la cantidad de 30 ml de metanol y se deja el animal en la meseta
4. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
5. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guilletse rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación
6. Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón
7. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al
proceso de destilación por el lapso de 2 horas.
8. Luego de terminada destilación y obtenido el destilado con un pedazo de cobre
calentado al rojo vivo se introduce en el matraz con el destilado repitiendo esto hasta
que la barrilla de cobre desprenda residuos de color negro que indican que todo el
metanol del destilado se ha transformado en su respectivo aldehído metanal ya que
no existe reacciones específicas para el reconocimiento del metanol.
9. Se procede a tomar una pequeña cantidad de destilado para proceder a realizar las
reacciones de reconocimiento en medios biológicos.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
1. A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al
1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja
reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido
oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se
decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido
sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushinabisulfatada (Reactivo de
Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
2. A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas
de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de
hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
3. En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad
de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de
solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de
potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
4. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita
luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de
ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un
color violeta.
5. Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el
formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
6. Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros deleche, se estratifica con
ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5
gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de
contacto se produce un color violeta o azul violeta.
17. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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24. Reacciones y conducta post-administración:
08:23am = administración.
08:27am = perdida de equilibrio y respiración agitada.
08:28am = ceguera
08:31am = hipoxia.
08:47am = segunda dosis (5ml de metanol).
08:49am= convulsiones.
09:10am= tercera dosis (5ml de metanol).
09:24am= cuarta dosis (5ml de metanol).
09:45am = deceso
25. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de etanol Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Rasuramos a nivel de Hacemos un corte con el
En la tabla de diseccion abdomen bisturi
Desprendemos las viceras Sacamos las viceras Se recoge las entrañas en
Un vaso de precipitacion.
Trituramos las viceras Destilamos quemamos la lámina de Cu
18. Laboratorio de Toxicología
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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El destilado se transforma
De metanol a metanal
26. Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
5) Reacción de azul de Schiff: (+) No característico. (Anillo naranja)
6) Reacción de Rimini: (+) No característico (Cambio de color a amarillo)
7) Reacción con la fenilhidracina: (+) Positivo característico (Coloración rojo grosella)
19. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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8) Con el Ácido Cromotrópico: (-) negativo. (No hubo coloración roja)
6) Reacción de Hehner:(-) negativo (No hubo coloración violeta).
27. Observaciones.
7) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
8) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
9) Observamos una de las característica de la intoxicación por metanol la
ceguera después de un corto tiempo de la administración
10) El metanol en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de la
autopsia.
11) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
óptimas condiciones.
28. Conclusiones
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel
considerado de toxicidad del metanol en relación a la capacidad de otros tóxicos ya
usados sobre organismos vivos y además pudimos constatar la presencia del toxico
en el organismos del animal por lo cual nos dio positivas alguna de las reacciones de
identificación.
20. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
Página20
29. Recomendaciones.
Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda usar
mascarilla con filtros de celulosa.
El equipo de destilación debe estar perfectamente armado y utilizar cinta aislante
en las parte que puedan haber fuga del toxico, ya que la determinación de metanol
es de mucha importancia porque se han presentado en nuestro medio nacional
intoxicaciones por dicha sustancia, que se presenta en la actualidad como un tipo
de intoxicación frecuente en nuestro País.
CUESTONARIO
1. ¿Qué es metanol?
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro ay volátil a temperatura ambiente. Por si mismo
es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
2. ¿Cómo es la toxicocinética del metano?
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal y los niveles en
sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de a presencia o
ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo de latencia
(40 minutos a 72 horas), durante el cual nos e observan síntomas. Esta fase sigue de acidosis
con anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación
catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que el
metanol, pero es más rápidamente convertido a acido fórmico, que es 6 veces más toxico que
el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la
magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan con
el grado de acidosis.
3. ¿Cuál son los mecanismos de acción del metanol?
El metanol se absorbe por vía oral, a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de
distribución es 0.6 l/kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la
grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte, a través del alcohol-deshidrogenasa, el
formaldehido, que es rápidamente convertido a acido fórmico por el aldehído-
deshidrogenasa, el cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por el
pulmón y el 12% por vía renal.
La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a 2.5 mediante hemodiálisis. La
eliminación sigue una cinética de primer orden a bajas dosis y durante la hemodiálisis,
mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis.
Se piensas que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la
intoxicación por metanol, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis
metabólica y del descenso del bicarbonato.
21. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de consciencia
convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10-30ml, considerándose potencialmente letal una
dosis de 60-240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y potencialmente
mortales los que superan 1l/g.
GLOSARIO
Toxicocinética
Se define a la toxicocinética como el conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico desde
su entrada a un organismo hasta su eliminación.
Metanal
El formaldehído o metanal es un compuesto químico, más específicamente un aldehído
altamente volátil y muy inflamable, de fórmula H₂C=O. Se obtiene por oxidación catalítica del
alcohol metílico.
Lámina de cobre
La lámina de cobre es una pieza muy delgada de cobre que se utiliza en los proyectos de
cristal esmerilado. La misma tiene un lado adhesivo. La lámina de cobre se coloca entre el
vidrio y es utilizada en reemplazo del plomo.
Intoxicación
Una intoxicación se produce por exposición, ingestión, inyección o inhalación de una
sustancia tóxica siempre y cuando sea de composición química ya que si el compuesto es
natural se le llamara ingesta excesiva y esto por cualquier sustancia sea natural, química,
procesada o creada.
Acido tartárico
El ácido tartárico o "ácido tártrico" es un compuesto orgánico polifuncional, cuyo grupo
funcional principal es el carboxilo (ácido carboxílico). Su fórmula es: HOOC-CHOH-CHOH-
COOH, con fórmula molecular C4H6O6. Su peso molecular es 150 g/mol.
22. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 86-88.
WEBGRAFÍA
http://www.ipsunipamplona.com/es/images/notas/PDF/INTOXICACIONES%20POR
%20METANOL.pdf
http://es.wikipedia.org/wiki/Toxicocin%C3%A9tica
http://www.ehowenespanol.com/lamina-cobre-sobre_346497/
http://www.cosmos.com.mx/wiki/d443/metanal-aldehido-formico-formol-
formaldehido-formalina
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Bioq. Fausto Dutan
Revisado
Día Mes Año
Machala, 30 de Junio de 2014
__________________________________ ________________________________
Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
Estudiante Catedrático
23. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº 2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 23 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 30 de Junio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 4
30. Tema: INTOXICACIÓN POR ETANOL
31. Animal experimentado: Cobayo.
32. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
33. Objetivos:
9) Aprender a manipular y administrar tóxicos (etanol) animales de
experimentación.
10) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (etanol).
11) Determinar la presencia del etanol en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
34. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Lámina de Cobre
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Calificación
NaOH (20%)
Ácido tartárico
Etanol
Agua destilada
Permanganato de potasio
Ácido sulfúrico puro
Fushinabisulfatada
Cloruro de fenilhidracina al 4 %
Nitroprusiato de sodio al 2.5%
Hidróxido de sodio
Ferricianuro de potasio al 5 – 10%
Solución sulfúrica de morfina
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
10
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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35. Procedimiento.
10. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
11. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de etanol se toma de manera segura al
animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
12. Se administra la cantidad de 30 ml de metanol y se deja el animal en la meseta
13. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
14. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación
15. Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón
16. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al
proceso de destilación por el lapso de 2 horas.
17. Luego de terminada destilación y obtenido el destilado con un pedazo de cobre
calentado al rojo vivo se introduce en el matraz con el destilado repitiendo esto hasta
que la barrilla de cobre desprenda residuos de color negro que indican que todo el
etanol del destilado se ha transformado en su respectivo aldehído etanal ya que no
existe reacciones específicas para el reconocimiento del etanol.
18. Se procede a tomar una pequeña cantidad de destilado para proceder a realizar las
reacciones de reconocimiento en medios biológicos.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
7. A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al
1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja
reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido
oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se
decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido
sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushinabisulfatada (Reactivo de
Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
8. A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas
de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de
hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
9. En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad
de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de
solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de
potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.
10. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita
luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de
ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un
color violeta.
11. Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el
formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
12. Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros deleche, se estratifica con
ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5
gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de
contacto se produce un color violeta o azul violeta.
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5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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36. Reacciones y conducta post-administración:
08:23am = administración.
08:27am = perdida de equilibrio y respiración agitada.
08:28am = ceguera
08:31am = hipoxia.
08:47am = segunda dosis (5ml de metanol).
08:49am= convulsiones.
09:10am= tercera dosis (5ml de metanol).
09:24am= cuarta dosis (5ml de metanol).
10:15am = deceso
37. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de etanol Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Rasuramos a nivel de Hacemos un corte con el
En la tabla de diseccion abdomen bisturi
Desprendemos las viceras Sacamos las viceras Se recoge las entrañas en
Un vaso de precipitacion.
Trituramos las viceras Destilamos quemamos la lámina de Cu
28. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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El destilado se transforma
De etanol a etanal
38. Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
9) Reacción de azul de Schiff: (+) Positivo Característico. (Coloración Violeta intenso)
10) Reacción de Rimini: (+) Positivo caracteristico (Coloración Azul intenso)
29. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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11) Reacción con la fenilhidracina: (+) Positivo característico (Coloración rojo grosella)
5) Con el Ácido Cromotrópico: (+) Positivo característico (Coloración roja)
7) Reacción de Hehner: (+) Positivo característico (Coloración violeta).
39. Observaciones.
12) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
30. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
Página30
13) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
14) Observamos una de las característica de la intoxicación por etanol la ceguera
después de un corto tiempo de la administración
15) El etanol en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de la
autopsia.
16) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
óptimas condiciones.
40. Conclusiones
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel
considerado de toxicidad del etanol en relación a la capacidad de otros tóxicos ya
usados sobre organismos vivos, aunque comparado con el metanol tardo media hora
más en su toxicidad para el animal y además pudimos constatar la presencia del
toxico en el organismos del mismo por lo cual nos dio positivas las reacciones de
identificación.
41. Recomendaciones.
Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda usar
mascarilla con filtros de celulosa.
El equipo de destilación debe estar perfectamente armado y utilizar cinta aislante
en las parte que puedan haber fuga del toxico, ya que la determinación de metanol
es de mucha importancia porque se han presentado en nuestro medio nacional
intoxicaciones por dicha sustancia, que se presenta en la actualidad como un tipo
de intoxicación frecuente en nuestro País.
CUESTONARIO
4. ¿Qué es etanol?
El etanol, uno de los derivados de la caña de azúcar más conocidos, se encuentra hoy en
pleno auge en Cuba, pues además de su uso para elaborar bebidas, se investigan sus
cualidades como combustible alternativo.
5. ¿Cuál es la Formula estructural de la molécula de etanol?
El compuesto químico es un líquido incoloro e inflamable con un punto de ebullición de 78°C.
Se mezcla con agua en cualquier proporción y da una mezcla azeotrópica con un contenido
de aprox. el 96% de etanol.
Su fórmula química es C2H5OH. El etanol es el alcohol que se encuentra en las bebidas
alcohólicas.
6. ¿Cuál es la toxicidad del etanol?
31. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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El etanol puede afectar al sistema nervioso central provocando estados de euforia. Al mismo
tiempo baja los reflejos. Con concentraciones más altas ralentiza los movimientos, impide la
coordinación correcta de los miembros etc. Finalmente conduce al coma y puede provocar la
muerte.
Una elevada parte de los accidentes de tráfico está relacionada con la ingesta de etanol.
La resistencia al alcohol parece aumentar en las personas adultas mientras que los niños
especialmente vulnerables.Se han reportado casos de bebés que murieron por intoxicación
debido a la inhalación de vapores de etanol tras haberles aplicado trapos impregnados de
alcohol.
También es un desinfectante su mayor potencial bactericida tiene una concentración de
aproximadamente 70 %.
GLOSARIO
Etanal
El etanal o acetaldehído es un compuesto orgánico de fórmula CH3CHO. Es un líquido volátil,
incoloro y con un olor característico ligeramente afrutado. Es un metabolito hepático del
etanol y principal factor para la aparición de la resaca alcohólica y el rubor facial.
Reacción de schiff
La prueba de Schiff es una reacción química orgánica nombre temprana desarrollado por
Hugo Schiff, y es prueba química relativamente general para la detección de muchos
aldehídos orgánicos que también ha encontrado su uso en la tinción de los tejidos biológicos.
El reactivo de Schiff es el producto de reacción de una formulación de colorante tal como
fucsina y bisulfito de sodio; pararosanilina y nueva fucsina son alternativas de tinte con la
química de detección comparables.
Toxicocinética
Se define a la toxicocinética como el conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico desde
su entrada a un organismo hasta su eliminación.
Intoxicación
Una intoxicación se produce por exposición, ingestión, inyección o inhalación de una
sustancia tóxica siempre y cuando sea de composición química ya que si el compuesto es
natural se le llamara ingesta excesiva y esto por cualquier sustancia sea natural, química,
procesada o creada.
Acido tartárico
El ácido tartárico o "ácido tártrico" es un compuesto orgánico polifuncional, cuyo grupo
funcional principal es el carboxilo (ácido carboxílico). Su fórmula es: HOOC-CHOH-CHOH-
COOH, con fórmula molecular C4H6O6. Su peso molecular es 150 g/mol.
32. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 86-88.
WEBGRAFÍA
http://es.wikipedia.org/wiki/Etanol
http://www.ecured.cu/index.php/Etanol
En química, el reactivo de Schiff (inventado1 y nombrado por Hugo Schiff) es un
reactivo para la detección de aldehídos.
http://centrodeartigos.com/articulos-de-todos-los-temas/article_36203.html
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Bioq. Fausto Dutan
Revisado
Día Mes Año
Machala, 23 de Junio de 2014
__________________________________ ________________________________
Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
Estudiante Catedrático
33. Laboratorio de Toxicología
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº 2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 23 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 30 de Junio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 5
42. Tema: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO
43. Animal experimentado: Cobayo.
44. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
45. Objetivos:
12) Aprender a manipular y administrar tóxicos (cloroformo) animales de
experimentación.
13) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (cloroformo).
14) Determinar la presencia del cloroformo en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
46. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Lámina de Cobre
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Calificación
NaOH (20%)
Ácido tartárico
Etanol
Agua destilada
alcohol de 95%
nitrato de plata
potasa alcohólica
cloruro de potasio
beta naftol
amoniaco diluido
percloruro de hierro
resorsinol
piridina
lejía de sosa 1:2
piperacina
10
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5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
Página35
47. Procedimiento.
19. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
20. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de etanol se toma de manera segura al
animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
21. Se administra la cantidad de 30 ml de metanol y se deja el animal en la meseta
22. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
23. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación
24. Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón
25. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al
proceso de destilación por el lapso de 2 horas.
26. Luego de terminada destilación, se procede a tomar una pequeña cantidad de
destilado para proceder a realizar las reacciones de reconocimiento en medios
biológicos.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
13. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con
otras tantas de alcohol de 95% que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama
la mezcla y se observa que arde con una llama bordeada de verde y que el acido
clorhídrico formando reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un
precipitado de cloruro de plata.
14. Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de
potasa alcohólica (proporción 1:10), se origina formiatos y cloruro de potasio.
CHCL3 + 4KOH 3CLK + HCO2K + 2H2O
Se neutraliza la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.
15. Al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcoholica
de potasa (preferente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un
franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es amarillo mas o menos oscuro; con
resorsinol la coloración es roja-violáceo y con la piridina rojo.
16. En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de
piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos
instantes en baño de maría y se deja en reposos; se convierte en una materia
coloreada que varia del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible
para unos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que
haya sido absorbido de 15 – 20 de agua clorofórmica.
17. Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos
pocos miligramos de clorhidrato de piperacina; si el cloroformo esta presente en la
36. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el
alcaloide.
18. Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de
acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que
can desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.
48. Reacciones y conducta post-administración:
08:34am = administración.
08:35am = hipoxia (falta de respiración).
08:39am = perdida de equilibrio.
08:41am = convulsiones.
08:50am = Anestesiado.
08:51am= segunda dosis (5ml de cloroformo).
09:02am= deceso.
49. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de cloroformo Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Rasuramos a nivel de Hacemos un corte con el
En la tabla de diseccion abdomen bisturi
Desprendemos las viceras Se recoge las entrañas en Trituramos las viceras
Un vaso de precipitacion.
Destilamos Obtenemos el destilado en una solucion de NaOH.
37. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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50. Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
12)Reacción 1: (+) Positivo Característico. (Precipitado de cloruro de plata).
13) Reacción de Dumas:
o Reacción con percloruro de Hierro(FeCl3): (+) Positivo característico en frio y
caliente (Coloración Roja).
o Reacción con Nitrato de Plata(NO3Ag): (+) Positivo característico
(Precipitado de cloruro de Plata).
38. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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14) Reacción de Lustgasrten:
o Reacción con B-naftol: (+) Positivo característico (Coloración azul).
o Reacción timol: (+) Positivo característico (Coloración amarilla).
o Reaccion con el resorsinol: (+) Positivo característico (Coloración rojo –
violáceo).
39. Laboratorio de Toxicología
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
Página39
o Reaccion con la Piridina: (+) Positivo característico (Coloración roja).
5) Reaccion de Roseboom: (+) Positivo característico (Coloración roja)
51. Observaciones.
17) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda
usar mascarilla con filtros de celulosa.
18) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
19) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
20) Observamos una de las característica de la intoxicación por metanol la
ceguera después de un corto tiempo de la administración
21) El cloroformo en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de
la autopsia.
22) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
optimas condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de una
forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.
52. Conclusiones
40. Laboratorio de Toxicología
5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
Página40
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel considerado de
toxicidad del cloroformo en relación a la capacidad de otros tóxicos ya usados sobre
organismos vivos y además pudimos constamos la presencia del toxico en el organismos del
animal, por lo que damos por realizada con el total éxito la práctica.
53. Recomendaciones.
Entre las recomendaciones de la práctica determinamos que es necesario la utilización de
una mascarilla de filtro de celulosa sobre todo en el momento de lavada de los materiales
debido al desprendimiento de gases y malos olores que muchas veces imposibilitan el lavado;
además estaría por demás expresar el consumo de un desintoxicante natural como la leche o
productos lácteos como medidas profilácticas en el laboratorio de toxicología.
CUESTONARIO
7. ¿Qué es cloroformo?
El cloroformo es un líquido incoloro, dulcemente perfumado, que es más conocido por su uso
histórico como anestésico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido a
preocupaciones sobre su seguridad..
8. ¿Cómo es la toxicocinética del cloroformo?
La toxicidad de los destilados del petróleo afecta a muchos órganos, pero la mayoría de los
problemas serios se relacionan con los sistemas respiratorio, cardiovascular y nervioso
central, y en menor medida, con el gastrointestinal.
Estudios realizados en animales han demostrado que la lesión pulmonar después de la
ingestión se debe a aspiración, y no a absorción gastrointestinal. La aspiración puede ocurrir
inicialmente, cuando la sustancia es ingerida, o posteriormente, durante el vómito. La
potencial aspiración de un hidrocarbono depende de sus características físicas, y el riesgo de
que se produzca se incrementa con la baja viscosidad, alta volatilidad y baja tensión
superficial. Los destilados del petróleo aspirados producen inhibición del surfactante
pulmonar, que da lugar a colapso alveolar, alteraciones de la relación ventilación/perfusión
y subsecuente hipoxemia. Además, el broncoespasmo y la lesión capilar directa producen
neumonitis química con hiperhemia, edema y hemorragia alveolar. En pocas horas tras la
aspiración puede producirse alveolitis hemorrágica difusa con infiltrados granulomatosos
que alcanza su pico máximo alrededor del tercer día y habitualmente se resuelve en unos 10
días, aunque pueden ocurrir complicaciones posteriores como neumonía bacteriana,
pequeñas alteraciones residuales de la ventilación y neumatoceles. La alteración del
surfactante, produce un cuadro que recuerda a la enfermedad de la membrana hialina.
Las alteraciones neurológicas son secundarias a la hipoxemia y acidosis causadas por la
toxicidad pulmonar.
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Aunque los destilados del petróleo se absorben mal a través del tracto gastrointestinal,
pueden producir, sin embargo, inflamación y ulceración de las mucosas e infiltración grasa
del hígado. Estas sustancias pueden causar también miocarditis y arritmias severas e incluso
muerte súbita por sensibilización miocárdica a las catecolaminas endógenas, así como
hemólisis intravascular y lesión renal consistente en cambios degenerativos tubulares, que
raramente llegan a la necrosis tubular.
9. ¿Cuáles son los usos del cloroformo?
Hoy en día, el cloroformo se usa en una variedad de procesos industriales, incluyendo la
fabricación de productos químicos, refrigerantes y disolventes. Se produce mediante la
reacción de cloro con etanol y si bien es relativamente estable, también es tóxico y debe ser
manejado con cuidado. La exposición excesiva a cloroformo puede causar daños a largo
plazo para la salud de varios órganos importantes.
GLOSARIO
Anestésico
Constituye un grupo farmacológico usado para deprimir el sistema nervioso central de
manera que permita la realización de procederes nocivos o desagradables, o prevenir/aliviar
el Dolor mediante el bloqueo de la conducción nerviosa cuando se inyecta localmente en el
tejido nervioso.
Hipoxemia
Cuando las alteraciones de la ventilación y de la perfusión alveolar sobrepasan las
posibilidades de compensación, los gases en la sangre arterial se apartan del rango normal,
con el consiguiente riesgo para la respiración celular.
Potasa alcohólica
Se prepara disolviendo 20 g. de hidróxido de potasio (KOH) por 100 ml. de alcohol etílico de
96° C esta solución puede sustituirse por una solución alcohólica NaOH que se prepara con
12 g. de NaOH diluidos en 100 ml. de alcohol de 96°.
Alcohol
El alcohol es, desde un punto de vista químico, aquel compuesto orgánico que contiene el
grupo hidroxilo unido a un radical alifático o a alguno de sus derivados. En este sentido, dado
que se trata de un compuesto, existen diversos tipos de alcoholes.
Volátil
La volatilidad desde el punto de vista químico, físico y de la termodinámica es una medida de
la tendencia de una sustancia a pasar a la fase vapor. Se ha definido también como una
medida de la facilidad con que una sustancia se evapora. A una temperatura dada, las
sustancias con mayor presión de vapor se evaporan más fácilmente que las sustancias con
una menor presión de vapor.
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 110-115.
WEBGRAFÍA
http://www.taringa.net/posts/salud-bienestar/17709423/Que-es-el-cloroformo-y-
para-que-se-usa.html
http://tratado.uninet.edu/c100803.html
http://escuela.med.puc.cl/publ/Aparatorespiratorio/11Hipoxia.html
http://www.ecured.cu/index.php/Anest%C3%A9sico
http://definicion.de/alcohol/
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Revisado
Día Mes Año
Machala, 30 de Junio de 2014
__________________________________ ________________________________
Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos García. Mg. Sc.
Estudiante Catedrático
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº 2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 30 de Junio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 7 de Julio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 6
54. Tema: INTOXICACIÓN POR CETONA
55. Animal experimentado: Cobayo.
56. Vía de administración:Parenteral (intraperitoneal)
57. Objetivos:
15) Aprender a manipular y administrar tóxicos (cetona) animales de
experimentación.
16) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (cetona).
17) Determinar la presencia de cetona en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
58. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Lámina de Cobre
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Calificación
Yodo mercúrico(alcalino)
Yodo yodurada (alcalino)
Hidróxido de potasio
Carbonato de sodio o hidróxido de sodio
Ácido clorhídrico concentrado5%
Ramnosa (lactosa)
10
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59. Procedimiento.
27. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
28. Tener todos los materiales a utilizarse limpios y secos.
29. Preparamos la solución problema
30. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de cetona se toma de manera segura al
animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
31. Se administra la cantidad de 5 ml de acetona y se deja el animal en la meseta
32. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
33. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guilletse rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación
34. Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón
35. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al
proceso de destilación por el lapso de 30minutos.
36. Luego de terminada destilación, se procede a tomar una pequeña cantidad de
destilado para proceder a realizar las reacciones de reconocimiento en medios
biológicos.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
19. Reacción de Nessler.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercúrico en medio
alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adición.
20. Reacción de Yodoformo.- Al calentar una pequeña cantidad de la muestra con una
solución yodo-yodurada en medio alcalino con hidróxido de potasio se produce
yodoformo reconocible por su olor particular y su color amarillo.
21. Con Nitroprusiato de Sodio.- Con este reactivo, al que se le añade solución de
carbonato de sodio o hidróxido de sodio, origina una coloración amarilla-rojiza que al
agregarle ácido acético, pasa al rojo-violeta.
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22. Reacción de Fritsch.- Se mezcla la solución problema con un volumen igual de ácido
clorhídrico concentrado que contiene 5% de ramnosa (lactosa), se calienta en baño de
vapor. Aparece un color rojo, apreciable aún en concentración de 0.01 g de acetona
por ml de solución.
60. Reacciones y conducta post-administración:
08:07am = administración.
08:11am = respiración agitada y cierra los ojos
08:56am= lagrimeo, hipoxia (falta de respiración).
09:18am= deceso.
61. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de cetona Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Rasuramos a nivel de Hacemos un corte con el
En la tabla de diseccion abdomen bisturi
Desprendemos las viceras Se recoge las entrañas en Trituramos las viceras
Un vaso de precipitacion.
Armamos el equipo Destilamos Obtenemos una sol. Ac.
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62. Reacciones de reconocimiento en medios biológicos
ANTES
DESPUES
15)Reacciónde Nessler: (+) Positivo Característico. (cambio de coloración, precipitado
blanco).
16)Reacción de Yodo Formo: (+) Positivo característico (cambio de coloración
amarillo).
17)Reacción de Nitroprusiato de Sodio: (+) Positivo característico (cambio de
coloración, rojo-violeta).
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18) Reacción de fritsch:
a). con lactosa: (-) Negativo (no hay cambio de color).
b). Con solución de sacarosa: (+) no característico (cambio de coloración
ligeramente amarillo)
Observaciones.
23) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda
usar mascarilla con filtros de celulosa.
24) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
25) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
26) Observamos una de las característica de la intoxicación por cetona la
ceguera después de un corto tiempo de la administración
27) La cetona en el organismo del animal se pudo percibir en el momento de la
autopsia.
28) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
óptimas condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de una
forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.
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63. Conclusiones
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel considerado de
toxicidad de la cetona en relación a la capacidad de otros tóxicos ya usados sobre
organismos vivos y además constamos la presencia del toxico en el organismos del animal,
por lo que damos por realizada con el total éxito la práctica.
64. Recomendaciones.
Entre las recomendaciones de la práctica determinamos que es necesario la utilización de
una mascarilla de filtro de celulosa sobre todo en el momento de lavada de los materiales
debido al desprendimiento de gases y malos olores que muchas veces imposibilitan el lavado;
además estaría por demás expresar el consumo de un desintoxicante natural como la leche o
productos lácteos como medidas profilácticas en el laboratorio de toxicología.
CUESTONARIO
10. ¿Qué es la cetona?
Una cetona es un compuesto orgánico caracterizado por poseer un grupo funcional
carbonilo unido a dos átomos de carbono. Las cetonas suelen ser menos reactivas que los
aldehídos dado que los grupos alquílicos actúan como dadores de electrones por efecto
inductivo. Las cetonas se forman cuando dos enlaces libres que le quedan al carbono del
grupo carbonilo se unen a cadenas hidrocarbonadas. El mas sencillo es la propanona, de
nombre común acetona.
11. ¿Propiedades físicas de la cetona?
o Estado físico: son líquidas las que tienen hasta 10 carbonos, las más grandes son
sólidas.
o Olor: Las pequeñas tienen un olor agradable, las medianas un olor fuerte y
desagradable, y las más grandes son inodoras.
o Solubilidad: son insolubles en agua (a excepción de la propanona) y solubles en
éter, cloroformo, y alcohol. Las cetonas de hasta cuatro carbonos pueden formar
puentes de hidrógeno, haciéndose polares.
o Punto de ebullición: es mayor que el de los alcanos de igual peso molecular,
pero menor que el de los alcoholes y ácidos carboxílicos en iguales condiciones.
12. ¿Obtención de la cetona?
Las cetonas se pueden obtener a partir de reacciones químicas y las que se encuentran en la
naturaleza. Respecto a las reacciones, los métodos más importantes son mediante la
oxidación de alcoholes secundarios, ozonólisis de alquenos, hidratación de alquinos, y a
partir de reactivos de Grignard.
13. ¿Uso industrial de la cetona?
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La cetona que mayor aplicación industrial tiene es la acetona (propanona) la cual se utiliza
como disolvente para lacas y resinas, aunque su mayor consumo es en la producción del
plexiglás, empleándose también en la elaboración de resinas epoxi y poliuretanos
14. ¿Qué efectos causa la cetona en la salud?
Las cetonas son un tipo de ácido. Se acumulan cuando el cuerpo descompone la grasa para
convertirla en combustible. El cuerpo quema la grasa si no puede obtener suficiente azúcar
(glucosa) para usar como fuente de energía. Cuando el cuerpo quema demasiada grasa muy
rápido, se producen cetonas. Las cetonas pasan de su flujo sanguíneo a la orina.
GLOSARIO
Yodoformo
El yodoformo es el compuesto orgánico con la formulaCHI3. Es una sustancia volátil que
forma cristales color amarillo pálido; tiene un olor penetrante (en viejos textos de química, el
olor es referido a veces como el olor de los hospitales) y, de manera análoga al cloroformo, de
un sabor dulce. Es ocasionalmente utilizado como un desinfectante. A veces se refiere al
compuesto también como triyoduro de carbono (que no es estrictamente correcto, ya que el
compuesto también contiene hidrógeno) o triyoduro de metilo (que es incluso más ambiguo
ya que el nombre puede referirse también al ion triyodurometilado, CH3I3.
Nitroprusiato de sodio
El nitroprusiato, al igual que la nitroglicerina, causa relajación del músculo liso y es un
vasodilatadorarteriovenoso más rápido y potente. Al igual que los nitratos actúa como un
donador de óxido nítrico, por lo que su acción vasodilatadora está mediada por la activación
de la guanililciclasa y la formación de GMP cíclico.
Anestésico
Constituye un grupo farmacológico usado para deprimir el sistema nervioso central de
manera que permita la realización de procederes nocivos o desagradables, o prevenir/aliviar
el Dolor mediante el bloqueo de la conducción nerviosa cuando se inyecta localmente en el
tejido nervioso.
Hipoxemia
Cuando las alteraciones de la ventilación y de la perfusión alveolar sobrepasan las
posibilidades de compensación, los gases en la sangre arterial se apartan del rango normal,
con el consiguiente riesgo para la respiración celular.
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Volátil
La volatilidad desde el punto de vista químico, físico y de la termodinámica es una medida de
la tendencia de una sustancia a pasar a la fase vapor. Se ha definido también como una
medida de la facilidad con que una sustancia se evapora. A una temperatura dada, las
sustancias con mayor presión de vapor se evaporan más fácilmente que las sustancias con
una menor presión de vapor.
BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 95-100.
WEBGRAFÍA
http://organicamentefuncional.blogspot.com/2013/05/cetonas-definicion-
estructura.html
http://es.wikipedia.org/wiki/Nitroprusiato
http://javiera97perez.blogspot.com/2012/04/uso-industrial-de-la-cetona.html
http://www.ecured.cu/index.php/Cetonas
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Revisado
Día Mes Año
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Estudiante Catedrático
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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MsC.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº 2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 7 de Julio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 14 de Julio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 7
65. Tema: INTOXICACIÓN POR PLOMO
66. Animal experimentado: Cobayo.
67. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
68. Objetivos:
18) Aprender a manipular y administrar tóxicos (plomo) animales de
experimentación.
19) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (plomo).
20) Determinar la presencia del cloroformo en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
69. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
50 Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Cocineta
10
Calificación
10 ml Nitrato de Plomo Pb(NO3)2
2g KClO3
25 ml HCl conc.
Agua destilada
Amoniaco (NH3)
Hidróxido de sodio
Ácido acético
Yoduro de potasio
Ácido sulfúrico
Cloruro estannoso
Yoduro de potasio
Nitrato de cadmio
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70. Procedimiento.
37. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
38. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de una solución saturada de Nitrato de
Plomo Pb(NO3)2 se toma de manera segura al animal por la parte posterior de su
cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
39. Se administra la cantidad de 10ml de Nitrato de plomo Pb(NO3)2 y se deja el animal
en la meseta.
40. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
41. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación.
42. Agregar 50 perlas de vidrio, 2gr de KClO3 y 25 ml de HCl concentrado.
43. Llevar a baño María con agitación constante, por 30 minutos.
44. 5 minutos antes que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g mas de KClO3.
45. Luego de a ver finalizado el baño maría, dejar enfriar y filtrar.
46. Con el filtrado procedemos a realizar las respectivas reacciones de reconocimiento.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
1) Con el cromato de potasio: Se pone una porción del líquido en un tubo de ensayo, o
en una capsula de porcelana, se neutraliza con hidróxido de sodio, luego se acidifica
con ácido acético y se trata con solución de cromato de potasio, obteniéndose un
precipitado amarillo0 de cromato de potasio.
Pb (NO3)2 +K2CrO CrO4Pb+2KNO3
2) Con el yoduro de potasio: con este reactivo en solución, al hacerlo reaccionar con la
muestra que contenga plomo, se debe producir un precipitado amarillo cristalino de
I2Pb soluble en caliente con agua y precipitable en frio como agujillas amarillas.
Pb (NO3)2+ 2IK PbI2 +2KNO3
3) Con la Difenil tío carbazona: esta sustancia disuelta en tetracloruro de carbono, al
reaccionar con el plomo produce un color rojo.
4) Con el ácido sulfúrico: en una solución diluida, produce un precipitado blanco de
sulfato de plomo, este precipitado después de ser lavado se le adicionan gotas de una
mezcla de cloruro estannoso, yoduro de potasio y nitrato de cadmio, hasta que se
disuelva el precipitado produce un color anaranjado.
5) Con el tetrametildiaminodifenilmetano: es una solución acética. Para realizar esta
reacción, se humedece el papel filtro en algunas gotas de solución amoniacal de
peróxido de hidrogeno al 3%, se agregan al papel unas pequeñas gotas de la solución
muestra; el papel filtro humedecido se lo coloca sobre un vidrio de reloj y se calienta
en baño, maría para eliminar el exceso de peróxido y precipitar el plomo como oxido
de plomo. Así, se hace caer sobre el papel una gota de reactivo cerca de la zona donde
se dejó caer las gotitas de la muestra. En caso positivo, en el punto de contacto
aparece un color azul por la formación de hidrosol respectivo.
6) Con la bencidina: a 1 ml de la solución muestra se añade hidróxido de sodio hasta la
que mezcla de reacción francamente alcalina (si aparece algún precipitado se
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centrifuga para separarlo). A la solución clara se añade ½ ml de peróxido de
hidrogeno al 3% se hierve cuando momento, se separa y lava el precipitado (por
centrifugación o filtración) con agua y finalmente se añaden gotas de bencidina
sobre el precipitado. Un color azul nos indica la presencia de plomo.
71. Reacciones y conducta post-administración:
07:59am = administración.
08:00am = perdida de motricidad, no responde a estímulos oculares.
08:03am = perdida de equilibrio, leve convulsiones.
08:05am = hipoxia.
08:06am = vómito
08:07am=deceso.
72. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de Plomo Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Hacemos un corte con el Desprendemos las viceras
en la tabla de diseccion. bisturi.
Se recoge las entrañas en Trituramos las viceras Agregamos 50 perlas de
Un vaso de precipitacion. Vidrio.
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Pesamos 2gr de KClO3 Agregamos el KClO3 y Llevamos a Baño Maria
25 ml de HCl conc. por 30 minutos.
Agregar 2 gr de KClO3 Dejar enfriar Filtrar y realizar las
Respectivas reacciones.
Reacciones de reconocimiento.
ANTES
DESPUES
19) Reacción con el cromato de potasio: (+) Positivo, No característico. (Cambio de
coloración a naranja intensa).
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20) Reacción con el yoduro de potasio: (+) Positivo, No característico (Coloración
amarilla intensa).
21) Reacción con el ácido sulfúrico: (-) Negativo (No hubo precipitado, ni cambio de color
a naranja intenso).
73. Observaciones.
29) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda
usar mascarilla con filtros de celulosa.
30) Instalar adecuadamente los materiales de vidrio sobre las nueces y los
soportes.
31) Usar cinta aislante sobre las uniones de cada abertura y unión del material
de vidrio para evitar fugas y accidentes.
32) Observamos una de la característica de la intoxicación por plomo los órganos
deshechos, y con coloración negro del animal.
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33) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
optimas condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de una
forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.
74. Conclusiones
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel considerado de
toxicidad de la solución saturada de plomo en relación a la capacidad de otros tóxicos ya
usados sobre organismos vivos y además pudimos constamos la presencia del toxico en el
organismos del animal, por lo que damos por realizada con el total éxito la práctica.
75. Recomendaciones.
Entre las recomendaciones de la práctica determinamos que es necesario la utilización de
una mascarilla de filtro de celulosa sobre todo en el momento de lavada de los materiales
debido al desprendimiento de gases y malos olores que muchas veces imposibilitan el lavado;
además estaría por demás expresar el consumo de un desintoxicante natural como la leche o
productos lácteos como medidas profilácticas en el laboratorio de toxicología.
CUESTONARIO
15. ¿Qué es el plomo?
El plomo es un metal blando que ha sido conocido a través de los años por muchas
aplicaciones. Este ha sido usado ampliamente desde el 5000 antes de cristo para aplicaciones
en productos metálicos, cables, tuberías, pero también en pinturas y pesticidas. El plomo es
uno de los 4 metales que tienen un mayor efecto dañino sobre la salud humana. Este puede
entrar en el cuerpo humano a través de la comida (65%), agua (20%), y aire (15%).Los
compuestos del plomo son tóxicos y han producido envenenamiento de trabajadores por su
uso inadecuado y por una exposición excesiva a los mismos. Sin embargo, en la actualidad el
envenenamiento por ploma es raro en virtud de la aplicación industrial de controles
modernos, tanto de higiene como relacionados con la ingeniería.
El mayor peligro proviene de la inhalación de vapor o de polvo. En este caso de los
compuestos órgano plúmbicos, la absorción a través de la piel puede llegar a ser
significativa. Alguno de los sinto9mas de envenenamiento por plomo son dolores de cabeza,
vértigo e insomnio. En los casos agudos por lo común se presenta estupor, el cual progresa
hasta el coma y termina en la muerte.
16. ¿Cuáles son los efectos del plomo sobre la salud?
El plomo puede causar varios efectos no deseados, como son:
• Perturbación de la biosíntesis de hemoglobina y anemia
• Increment5o de la presión sanguínea
• Daño de los riñones
• Abortos y abortos sutiles
• Perturbación del sistema nervioso
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• Daño al cerebro
• Disminución de la fertilidad del hombre a través del daño del esperma
• Disminución de la habilidad de aprendizaje de los niños
• Perturbación en el comportamiento de los niños, como es agresión, comportamiento
impulsivo e hipersensibilidad.
El plomo puede entrar en el feto a través de la placenta de la madre. Debido a esto puede
causar serios daños al sistema nervioso y al cerebro de los niños por nacer.
17. ¿Cuáles son los efectos ambientales que causa el plomo?
El plomo ocurre de forma natural en el ambiente, pero las mayores concentraciones que son
encontradas en el ambiente son el resultado de las actividades humanas.
Debido a la aplicación del plomo en gasolinas un ciclo no natural del plomo tiene lugar.
En los motores de los coches el plomo es quemado, eso genera sales de plomo (cloruros,
bromuros, óxidos) se originaran.
Estas sales de plomo entran en el ambiente a través de los tubos de escape de los coches. Las
partículas grandes precipitaran en el suelo o en la superficie de las aguas, las pequeñas
partículas Viajaran grandes distancias a través del aire y permanecerán en la atmosfera.
Parte de este plomo caerá de nuevo sobre la tierra cuando llueva. Este ciclo del plomo
causado por la actividad humana está mucho más extendido que el ciclo natural del plomo.
Este ha causado contaminación por plomo haciéndolo en un tema mundial no solo la
gasolina con plomo causa concentración de plomo en el ambiente.
Otras actividades humanas, como la combustión del petróleo, procesos industriales,
combustión de residuos sólidos, también co0ntribuyen.
El plomo puede terminar en el agua y suelos a través de la corrosión de tuberías de tuberías
en los sistemas de transporte y a través de la corrosión de la pintura s que contienen plomo.
No puede ser roto, pero puede convertirse en otros compuestos.
El plomo se acumula en los cuerpos de los organismos acuáticos y organismos del suelo. Estos
experimentaran efectos en su salud por envenenamiento por plomo. Los efectos sobre la
salud de los crustáceos pueden tener lugar incluso cuando solo hay pequeñas
concentraciones de plomo presente.
GLOSARIO
Ácido sulfúrico
Es empleado como deshidratante de la materia orgánica y también para destruirla y oxidar
el carbón orgánico, y en esas condiciones, puede el ácido nítrico oxidar el toxico mineral
transformándolo en nitrato soluble.
Hipoxemia
Cuando las alteraciones de la ventilación y de la perfusión alveolar sobrepasan las
posibilidades de compensación, los gases en la sangre arterial se apartan del rango normal,
con el consiguiente riesgo para la respiración celular.
Amoniaco
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5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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El amoníaco, amoniaco, azano, espíritu de Hartshorn o gas de amonio es un compuesto
químico cuya molécula consiste en un átomo de nitrógeno (N) y tres átomos de hidrógeno
(H) de acuerdo con la fórmula NH3.
Plomo
El plomo es un elemento químico de la tabla periódica, cuyo símbolo es Pb (del latín
plumbum) y su número atómico es 82 según la tabla actual, ya que no formaba parte en la
tabla de Dmitri Mendeléyev. Este químico no lo reconocía como un elemento metálico común
por su gran elasticidad molecular. Cabe destacar que la elasticidad de este elemento depende
de la temperatura ambiente, la cual distiende sus átomos, o los extiende.
Nitrato de plomo
El compuesto químico nitrato de plomo (II) es una sal inorgánica de plomo y de ácido nítrico.
Es un cristal incoloro o un polvo blanco, y un oxidante muy estable y fuerte. Al contrario que
otras sales de plomo (II), es soluble en agua. Su uso principal, desde la Edad Media (con el
nombre de plumb dulcis) ha sido como materia prima en la producción de numerosos
pigmentos. Desde el siglo XX, se usa como estabilizador térmico para el nylon y los
poliésteres, y como recubrimiento de las películas fototermográficas. Su producción
comercial no empezó en Europa hasta el siglo XIX —en Estados Unidos hasta 1943—
mediante un proceso de producción típico, que utiliza plomo metálico u óxido de plomo (II).
BIBLIOGRAFIA
KLAASSEN CD y WATKINS JB.”Fundamentos de Toxicología” Casarett y Doull. (2005)
(Madrid, McGraw Hill Interamericana) pág. 110-115.
WEBGRAFÍA
http://fagalab.com/Hojas%20de%20Seguridad/NITRATO%20DE%20PLOMO.pdf
http://www.atsdr.cdc.gov/es/csem/plomo/es_pb-fisiologia.html
http://tratado.uninet.edu/c100803.html
http://escuela.med.puc.cl/publ/Aparatorespiratorio/11Hipoxia.html
http://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADaco
http://es.wikipedia.org/wiki/Nitrato_de_plomo_(II)
AUTORIA
Bioq. Carlos García. MsC.
Revisado
Día Mes Año
Machala,14 de Julio de 2014
__________________________________ ________________________________
Brenda E. Espinoza B. Bioq. Carlos García. MSc.
Estudiante Catedrático
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD
ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
NOMBRE: Brenda Estefanía Espinoza Blacio
CATEDRÁTICO: Bioq. Carlos García. MSc.
CURSO: 5to Año de Bioquímica y Farmacia “A”
GRUPO: Nº2
FECHA DE ELABORACION: Lunes, 14 de Julio del 2014
FECHA DE ENTREGA: Lunes, 21 de Julio del 2014
TRIMESTRE: Primero
PRÁCTICA Nº 8
76. Tema: INTOXICACIÓN POR MERCURIO
77. Animal experimentado: Cobayo.
78. Vía de administración: Parenteral (intraperitoneal)
79. Objetivos:
21) Aprender a manipular y administrar tóxicos (mercurio) en animales de
experimentación.
22) Observar los signos y reacciones que presentan los animales en
experimentación luego de la administración de tóxicos (mercurio).
23) Determinar la presencia del mercurio en el organismo del animal mediante
reacciones de identificación cualitativa.
80. Materiales Sustancias:
Bisturí #11
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
50 Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Cocineta
10
Calificación
17ml Nitrato Mercúrico Hg(NO3)2
4g KClO3
25 ml HCl conc.
Agua destilada
Cloruro Estañoso
Yoduro de Potasio
DifenilTioCarbazona
Sulfuro de Hidrogeno
DifenilCarbazida
Amoniaco
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5to de Bioquímica y Farmacia “A”
“Todo es veneno, nada es veneno. Todo depende de la dosis.”
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81. Procedimiento.
47. Tomamos las respectivas medidas de Bioseguridad en el laboratorio.
48. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de una solución saturada de Nitrato
Mercúrico Hg(NO3)2 se toma de manera segura al animal por la parte posterior de
su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.
49. Se administra la cantidad de 17ml de Nitrato de Mercúrico Hg(NO3)2 y se deja el
animal en la meseta.
50. Se documentan las reacciones y conducta post-administración.
51. Transcurrido el tiempo del deceso del animal se procede a colocarlo en mesa de
disección, con ayuda de una navaja o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen
del animal para facilitar el corte, con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando
perforar las entrañas luego se recogen las entrañas en un vaso de precipitación.
52. Agregar 50 perlas de vidrio, 2gr de KClO3 y 25 ml de HCl concentrado.
53. Se añade 20ml de Agua destilada para disolver el acido clorhídrico concentrado.
54. Llevar a baño María con agitación constante, por 30 minutos.
55. 5 minutos antes que se cumpla el tiempo establecido añadir 2g más de KClO3.
56. Luego de a ver finalizado el baño maría, dejar enfriar y filtrar.
57. Con el filtrado procedemos a realizar las respectivas reacciones de reconocimiento.
Reacciones de reconocimiento en medios biológicos:
1) Con el Cloruro Estañoso: al agregar una pequeña cantidad del reactivo a una porción
de la muestra, en caso positivo se debe producir un precipitado blanco de cloruro
mercurioso o calomel o un precipitado negro de Hg metálico.
2HgCl2 + SnCl2 Hg2Cl2 + SnCl4
Hg2Cl2 + SnCl2 2Hg + SnCl4
2) Con el Yoduro de Potasio: al reaccionar una muestra que contenga Hg, frente al KI, se
produce un precipitado rojo, anaranjado o amarillo (de acuerdo a la concentración
del toxico) de yoduro mercúrico.
HgCl2 + 2IKHgI2 + 2KCl
3) Con la DifenilTioCarbazona: es una reacción muy sencilla para reconocer el Hg; (el
reactivo se prepara con 0.012 gr de ditizona disuelta en 1000 ml de Cl4C) se mide un
poco demuestra y se añaden algunas gotas de reactivo con el cual debe producir un
color anaranjado en caso (+), si es necesario se puede calentar ligeramente la
mezcla.
4) Con la DifenilCarbazida: en medio alcohólico, la difenilcarbazida produce con el Hg
un color violeta o rojo violeta.
5) Con el Sulfuro de Hidrogeno: produce un precipitado negro mercúrico.
HgCl2 + H2SSHg + 2HCl
6) Con Amoniaco: si al añadir la solución de NH3 sobre el precipitado este se ennegrece,
es señal suficiente para la existencia del mercurio.
Hg2Cl2 + 2NH3HgO+ Hg(NH2)Cl + NH4+ + Cl-
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82. Reacciones y conducta post-administración:
08:00am = administración.
08:03am = perdida de equilibrio, leve convulsiones.
08:43am= convulsiones
08:44am = hipoxia.
08:46am = motilidad baja
08:47am=deceso.
83. Gráficos.
Cobayo en el panema Administracion de Plomo Observamos reacciones
Colocamos al cobayo Hacemos un corte con el Desprendemos las viceras
en la tabla de diseccion. bisturi.
Se recoge las entrañas en Trituramos las viceras Agregamos 50 perlas de
Un vaso de precipitacion. Vidrio.
Pesamos 2gr de KClO3 Agregamos el KClO3 y Agregamos 20ml de H2O
25 ml de HCl conc.
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Reacciones de Reconocimiento en medios biológicos:
ANTES
DESPUES
22) Con el Cloruro Estañoso: (+) Positivo característico. (Precipitado Blanco).
23) Con el Yoduro de Potasio: (+) Positivo característico (Precipitado amarillo).
Llevamos a Baño Maria Agregar 2 gr de KClO3 Dejar enfriar
por 30 minutos.
Filtrar y realizar las respectivas reacciones.
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24) Con la DifenilTioCarbazona: (-) Negativo (No hubo cambio de color a naranja).
25) Con la DifenilCarbazida: (-) Negativo (No hubo cambio de color a violeta o rojo
violeta).
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26) Con Amoniaco: (-) Negativo (No se ennegrece).
84. Observaciones.
34) Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda
usar mascarilla con filtros de celulosa.
35) Observamos una de la característica de la intoxicación por una solución
saturada de mercurio, en los órganos deshechos, y con coloración negro del
animal.
36) Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en
optimas condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de una
forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.
85. Conclusiones
En conclusión determinamos mediante la práctica de laboratorio el nivel considerado de
toxicidad de la solución saturada de mercurio en relación a la capacidad de otros tóxicos ya
usados sobre organismos vivos y además pudimos constamos la presencia del toxico en el
organismos del animal, por lo que damos por realizada con el total éxito la práctica.
86. Recomendaciones.
Entre las recomendaciones de la práctica determinamos que es necesario la utilización de
una mascarilla de filtro de celulosa sobre todo en el momento de lavada de los materiales
debido al desprendimiento de gases y malos olores que muchas veces imposibilitan el lavado;
además estaría por demás expresar el consumo de un desintoxicante natural como la leche o
productos lácteos como medidas profilácticas en el laboratorio de toxicología.