Este documento describe una práctica de laboratorio sobre la intoxicación con metanol en ratas. La práctica incluyó la administración de metanol a una rata por vía intraperitoneal, la observación de síntomas y el tiempo hasta la muerte. Luego se realizaron disecciones y pruebas de identificación como destilación y reacciones de color para detectar metanol en los órganos. El objetivo era observar los efectos del metanol y adquirir habilidades para identificarlo.
1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA.
LABORATORIO DE TOXICOLOGIA
NOMBRE: JONATHAN PESANTEZ
CURSO: QUINTO AÑO “B”
DOCENTE: BIOQ FARMA. DR CARLOS GARCIA
GRUPO: 3
CALIFICACION:
FECHA DE ELABRACIÓN: 16 de junio del 2015.
FECHA DE PRESENTACIÓN: 23 de junio del 2015
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PRÁCTICA # 3
TITULO: INTOXICACIÓN CON METANOL
Animal de experimentacion:Rata Wistar
Tóxico:Metanol
Via de Administración: 10 ml intraperitoneal.
Tiempos
Inicio de la práctica: 07:45
Hora de administración:07:48
Deceso del animal:07:56(6 minutos)
Hora de disección:08:30
Final de la practica:09:30
Sintomas
Ceguera
Nistogmas
Convulsiones
Vomitos
OBJETIVOS:
• Observar todos los sintomas que presenta el animal debido a la intoxicación.
• Explicar el tiempo que el toxico deja de actuar en el animal.
• Adquirir destrezas y realizar puebas de reacciones de identificación para la
presencia de metanol en la rata wister ,tomando como referencia la sol. Madre.
MATERIALES
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
2. • Jeringa de 10 cc
• Agitador
• Espatula
• Probeta
• Pinzas
• Fosforo
• Cronometro
• Perlas de vidrio
• Equipo de disección
• Equipo de destilación
• Tubos de ensayo.
• Tabla de disección
• Pipeta
• Pera
• Mechero de Alcohol
• Guantes de látex
• Mascarilla
• Mandil
• Vaso de precipitación 200 y 500 ml
• Bisturí
REACTIVOS
• Cloruro de Fenil Hidracina
• Ferrocianuro de Potasio KFe (CN)3
• Ácido Sulfúrico H2SO4
• Nitro prusiato de Sodio
• Cloruro de Morfina
• Hidróxido de Potasio (KOH)
• Cloruro Ferrico (Cl 3Fe)
SUSTANCIA
• Agua Destilada
EQUIPO:
• Balanza.
• Cocineta
PROCEDIMIENTO.
• Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de
implementos de bioseguridad.
• Administrar 5 ml de Cianuro de Sodio por vía intraperitoneal
• Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo.
• Atamos al animal en experimentación a una tabla de disección.
• Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte
• Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los
cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.
• Colocamos las muestras (vísceras) en un vaso de precipitación
• Agregar las 50 perlas de vidrio y Acido Tartárico 2g en 50 mL de agua.
• Preparar el equipo de destilación y así mismo hacemos giros rotatorios con el
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
3. • mechero de alcohol para fijar la concentración de nuestra sustancia a obtener
durante 30 minutos
• Obtenida la solución madre realizamos las respectivas reacción de reconomiento
• Una vez terminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existe
por lo ques es necesario en el respectivo aldehído, con tal propósito. Este se consigue
mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta
de grasa y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta
cuando la lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado,
lo cual nos indica que hemos conseguido el propósito de transformar el metanol en
metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento de formaldehído, así:
• Reacción de Schiff.- Se produce color violeta
• Reacción de Rimini.- Origina color azul intenso.
• Con la fenil hidracina.- Da color rojo grosella.
• Reacción de Marquis.- Se obtiene un color violeta.
• Con el ácido cromotrópico.- Da color rojo.
• Reacción de Hehner.- Se produce color violeta o color rojo violeta.
GRAFICOS
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
2.Inyectar el toxico por
via intraperitoneal.
1.Animal de
experimentación:
Cobayo.
4.Colocar el animal
en la tabla de
disección.
5.Extraer las visceras y
colocar en un vaso de
precipitación.
7. Preparamos el
equipo de destilación
Soxlet
8.Esperar 15
minutos para
obtener la solución
madre.
4. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
SOLUCIÓN MADRE
Reacción de Rímini
Reacción positivo no característico se produjo la
coloración azul intenso
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
3. Observamos los
síntomas luego de
administrar el toxico
6.Triturar la visceras 9. Realizar las
reacciones de
identificación.
Reaccion de Rimini
ANTES
Adicionamos los
reactivos descritos
.
Reaccion de Rimini
DESPUES
Positiva No característico
(color azul intensa)
5. Reacción de Fenilhidracina
Reacción positivo no característico se produjo la
coloración anaranjado
Con CNNa
Reacción positivo no característico se produjo la
coloración roja
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
Reacción de
fenilhidracina
ANTES
Reactivo de color
amarillo
.
. REACCION CNNa
ANTES
Adicionamos CNNa y
calentamos
REACCION CNNa
DESPUES
Positivo no característico
(coloración roja)
Reacción de Hehner
ANTES
Adicionamos al destilado
mililitros de leche y los
otros reactivos
.
Reacción de Hehner
DESPUES
Positiva No característico
(color rojo sangre)
Reacción de
fenilhidracina
DESPUES
Positivo No
característico (color
anaranjado)
6. Reaccion de Hehner
Reacción positivo no característico se produjo la
coloración roja
Reacción de Marquis
Reacción positivo no característico se produjo la
coloración violeta
REACCIONES DE COLORACIÓN A LA LLAMA
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
REACCION DE
MARQUIS
ANTES
Adicionamos Acido
Sulfurico
REACCION DE MARQUIS
DESPUES
Positivo no característico
coloración violeta
COLORACIÓN A LA
LLAMA
ANTES
Adicionamos Acido
Sulfurico
COLORACIÓN A LA
LLAMA
DESPUES
Positivo no característico
coloración violeta
7. OBSERVACIONES.
Cuando se administro la dosis letal del toxico metanol por via intraperitoneal,la rata
wistar presento varios signos y sintomas como: Convulsiones,
Ceguera,Vomitos,provocando la muerte del animal.
CONCLUSIONES.
El Metanol es muy toxico y de acción rápida, en la cual se realizo la experimentación en
un rata wistar dministrando una dosis letal minima, que por un periodo de tiempo que el
metanol actuado en el organismo, provocando la muerte. Mediante una solucion madre
que se obtuvo por medio de un proceso de destilacion,se le realizaron pruebas de
identificación para dar a conocer la presencia de metanol en el animal
deexperimentación.
RECOMENDACIONES
• Sellar correctamente con cinta el refrigerante del equipo de destilación para evitar
perdida de gases.
• Cumplir con todas las medidas de proteccion.cuando se trabaja con componentes
toxicos.
• Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar
accidentes
CUESTIONARIO DE PREGUNTAS
¿Que es el Metanol ?
El metanol es un líquido incoloro, ligero, inflamable a temperatura ambiente que
contiene menos carbono y más hidrógeno que cualquier otro combustible líquido. Es
una sustancia química estable biodegradable que se produce y envía a diario a todo el
mundo, y que tiene numerosas aplicaciones industriales y comerciales. El metanol se
produce naturalmente en la naturaleza, y se descompone rápidamente, tanto en
condiciones aeróbicas como anaeróbicas
¿Propiedades química del Metanol?
Este producto reacciona violentamente con bromo, hipoclorito de sodio, dietil-cinc,
disoluciones de compuestos de alquil-aluminio, trióxido de fósforo, cloruro cianúrico,
ácido nítrico, peróxido de hidrógeno, sodio, ter-butóxido de potasio y perclorato de
plomo. En general, es incompatible con ácidos, cloruros de ácido, anhidridos, agentes
oxidantes, agentes reductores y metales alcalinos.
¿Toxicidad del Metanol ?
El metanol producto tóxico; la exposición extensa a él podría provocar daños
irreversibles para la salud, incluyendo ceguera. La exposición máxima permitida en los
EE. UU. en el aire (40 h/semana) es de 1.900 mg/m³ para el etanol, de 900 mg/m³ para
la gasolina, y de 260 mg/m³ para el metanol. Es también tremendamente volátil y por lo
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
8. tanto aumentaría el riesgo de incendios o de explosiones. Además de los importantes
riesgos de incendio y de explosión, una volatilidad más alta significa más emisiones por
evaporación.
¿Dosis toxica del Metanol ?
La dosis letal del metanol está estimada en 30-240 mL (20-150 gramos). La dosis tóxica
mínima es aproximadamente de 100 mg/kg. Se pueden encontrar niveles elevados de
metanol en sangre luego de exposición dérmica extensa o por inhalación. Una
concentración sérica de 40 mg% es mortal.
¿Farmacocinetica del Metanol ?
El metanol es absorbido y rápidamente distribuido por el agua del cuerpo. No se une a
proteínas. Es metabolizado lentamente por la alcohol-deshidrogenasa. La vida media
oscila entre 2 y 24 horas. Apenas cerca del 3% es excretado sin cambios por el riñón.
BIBLIOGRAFÍA
Toxicologia Ambiental Dr Ramirez Cuello,H Funher.Editorial Cientifico-medico.Los
Angeles.California.
WEBGRAFIA
Medline. (10 de Mayo de 2013 ). Intoxicacion con formaldehido.Medlineplus.com.
http://www.bio-nica.info/Biblioteca/Gutierrez-Intoxicacion-Metanol.pdf
GLOSARIO
Neuropatía periférica.- La neuropatía periférica significa que estos nervios no
funcionan apropiadamente. Esta neuropatía puede ser un daño a un solo nervio o a un
grupo de nervios.
Irritación.- Estado inflamatoria o una reacción dolorosa del organismo causado
principalmente por algún tipo de alergia a agentes químicos o a otros estímulos.
Dosis letal.- Necesaria para provocar la muerte de un determinado porcentaje de
individuos.
Aerobios.-Se denominan aerobios o aeróbicos a los organismos que pueden vivir o
desarrollarse en presencia de oxígeno.
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
9. Anaerobios.-Son los que no utilizan oxígeno (O2) en su metabolismo, más exactamente
que el aceptor final de electrones es otra sustancia diferente del oxígeno
Xenobiótico: Es todo compuesto químico que no forme parte de la composición de los
organismos vivos.
Tóxico: Se utiliza como adjetivo para designar y calificar a todos aquellos elementos o
sustancias que resulten nocivos y dañinos para algún tipo de organismo.
Toxicidad: Al grado de efectividad que poseen las sustancias que, por su composición,
se consideran tóxicas. Se trata de una medida que se emplea para identificar al nivel
tóxico de diversos fluidos o elementos.
ANEXOS
DATOS OBTENIDOS DE LOS SINTOMAS DEL COBAYO Y LAS REACCIONES DE
RECONOCIMIENTO PARA LA DETERMINACION DE PRESENCIA DE CIANURO
TOMANDOCOMO REFERENCIA SOLUCIÓN MADRE
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
10. INVESTIGACIÓN BIBLIOGRAFICA
METANOL
El metanol es un agente químico de uso industrial que se encuentra en numerosos
productos de limpieza, anticongelantes, pinturas y barnices. La intoxicación puede tener
lugar de forma accidental al manipular estos productos o, como ocurre en España de
modo más frecuente, de forma voluntaria como gesto autolítico1
. Han existido
numerosas epidemias por consumo de bebidas alcohólicas adulteradas procedentes de
destilerías clandestinas que utilizaban metanol como alternativa más barata al etanol2
.
Los cuadros de intoxicación por metanol son infrecuentes, pero con una gran
morbimortalidad. A pesar de los diferentes tratamientos empleados, la mortalidad
permanece entre el 26 y el 50% y en los casos no mortales existe una gran cantidad de
secuelas neurológicas y visuales incluyendo la ceguera.
FUENTES DE EXPOSICIÓN.
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación
de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido
limpia cristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada.
También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
TOXICOCINÉTICA.
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal, y los
niveles en la sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo
de la presencia o ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un
periodo de lactancia (40 minutos a 72 horas), durante el cual se observan síntomas. Esta
fase se sigue de acidosis con anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una
oxidación catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces
más toxico que el metanol, pero es rápidamente convertido a ácido fórmico, que es 6
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
11. veces más toxico que el metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el
grado de acidosis y la magnitud del anión gap. También la mortalidad y los síntomas
visuales se correlacionan con el grado de acidosis.
CUADRO CLÍNICO.
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también
puede ocurrir por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser
precoz, o retrasarse hasta 24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los
principales signos y síntomas son:
• Perdida de agudeza visual con edema de papila. Además, puede aparecer nistagmus
(movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es
de arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotario, incontrolable) y
alteración de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión
y ceguera irreversible por atrofia del nervio óptico.
• Taquipnea mediada por acidosis y parada respiratoria súbita.
• Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos,
acompañados, a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos.
• Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo,
convulsiones, cefalea, vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
• Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión, y depresión
miocárdica.
DIAGNÓSTICO.
El diagnóstico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los
acompañantes. Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico
diferencial es amplio, e incluye cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis,
meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina.
Además, es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis
metabólica. El diagnóstico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
TRATAMIENTO.
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario
asegurar la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La
recuperación del paciente parece estar directamente relacionada con el intervalo de
tiempo transcurrido entre la ingestión del tóxico y el inicio del tratamiento. También
depende del grado de acidosis, que a su vez, es también en parte, función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará lavado gástrico, a ser posible en las dos primeras
horas o en las 4 primeras horas si la ingesta se acompañó de alimentos. El carbón
activado y los catárticos son ineficaces.
ALMACENAMIENTO
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
12. El metanol debe almacenarse en recipientes de acero al carbón, rodeado de un dique y
con sistema de extinguidores de fuego a base de polvo químico seco o dióxido de
carbono, cuando se trata de cantidades grandes. En el caso de cantidades pequeñas,
puede manejarse en recipientes de vidrio.
En todos los casos debe mantenerse alejado de fuentes de ignición y protegido de la luz
directa del sol.
TOXICIDAD DEL METANOL
El metanol producto tóxico; la exposición extensa a él podría provocar daños
irreversibles para la salud, incluyendo ceguera. La exposición máxima permitida en los
EE. UU. en el aire (40 h/semana) es de 1.900 mg/m³ para el etanol, de 900 mg/m³ para
la gasolina, y de 260 mg/m³ para el metanol. Es también tremendamente volátil y por lo
tanto aumentaría el riesgo de incendios o de explosiones. Además de los importantes
riesgos de incendio y de explosión, una volatilidad más alta significa más emisiones por
evaporación.
DOSIS TOXICA DEL METANOL
La dosis letal del metanol está estimada en 30-240 mL (20-150 gramos). La dosis tóxica
mínima es aproximadamente de 100 mg/kg. Se pueden encontrar niveles elevados de
metanol en sangre luego de exposición dérmica extensa o por inhalación. Una
concentración sérica de 40 mg% es mortal.
BIBLIOGRAFÍA
Quimica.Net. (13 de Febrero de 2014). Recuperado el 21 de Junio de 2015, de
http://www.quimica.es/enciclopedia/Metanol%C3%ADdo.html
FIRMA
“Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”