1. UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS - FILIAL CUSCO
FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE TECNOLOGIA MEDICA
COLORACIONES
ESPECIALES II
LIC. T.M. RICARDO A. SANTOS SALCEDO

2. HISTOQUÍMICA
ESTUDIO de las SUSTANCIAS o
COMPOSICION QUIMICAS de los TEJIDOS
O CORTES (Glucógeno, cationes, lípido, etc.)
utilizando Métodos de análisis Variado ( Técnicas
Histológicas); ósea permite la identificación y
localización en las células y tejidos de compuestos
radicales químicas, formando productos insolubles
que son coloreados y visualizados por el
microscopio.

3. PRINCIPIOS BASICOS DE LA
HISTOQUIMICA:
3. Los COMPUESTOS que deben ser analizados NO
SON DIFUSIBLES. Proceso de insolubilización del
compuesto que va a ser estudiado.
2. El PRODUCTO DE LA REACCION debe ser
INSOLUBLE. Evita su difusión en la solución de
los reactivos o migración.
3. El METODO utilizado es ESPECIFICO PARA LA
SUSTANCIA o grupo químico que se va
analizando. Favoreciendo la interpretación de los
resultados obtenidos.
* En algunas Reacciones Histoquímicas la
INTENSIDAD del COLOR producido es
PROPORCIONAL a la CC. de la sustancia analizada.

4. PRINCIPALES SUSTANCIAS DEMOSTRABLES
HISTOQUIMICAMENTE:
• CARBOHIDRATOS: Demostración de
GLUCOGENO (Polisacáridos) por el Método de
COLORACION de PAS (Reacción Acido
Peryodico de Schiff), entre otros.
• LIPIDOS: Demostración de GRASAS NEUTRAS
por el Método de COLORACION con SUDAN III
o IV entre otros.
• FOSFOLIPIDOS: Demostración de la presencia
de FOSFOLIPIDOS por el Método de SUDAN
BLACK (Sudan Negro).

5. 4. AMILOIDES: Demostración de AMILOIDES por
el Método de ROJO CONGO BENNHOLD.
5. HIERRO: Demostración de HIERRO
TRIVALENTE por el Método de PERLS (Azul de
Prusia).
6. CALCIO: Demostración de depósitos insolubles
DE CALCIO por el Método de VON KOSSA.
7. PIGMENTOS MELÁNICOS: Demostración de
PIGMENTOS MELANINICOS por el Método de
MASSON FONTANA.

6. AMILOIDE
Depósito hialino y trasparente que no es
normal.
Formado en enfermedades diversas
Llamado por Romanosky (1842)
enfermedad Landacea.
Virchow en 1854 tiñe de azul con una
mezcla de iodo y ac. sulfúrico

7. Es deposito proteico patológico en espacios
extracelulares de tejidos y órganos del
cuerpo.
Naturaleza Física del amiloide
-Fibrillas no ramificadas.
- Componente P.

8. Constitución Química
- Proteínas.- fibrilares (91%)
AL
AA
-Glicoproteinas
- Glucosaminoglicanos ácidos

9. COLORACION METODO DE ROJO CONGO
BENNHOLD
I.- OBJETIVO: DEMOSTRACION de AMILOIDE en
CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.
II.- RESULTADOS:
AMILOIDE PRIMARIO………….......AMARILLO
AMILOIDE SECUNDARIO……ROJO O NARANJA
AL MICOROSCOPIO DE
POLARIZACION……………..VERDE ESMERALDA

10. COLORACION ROJO CONGO DE
BENNHOL
Amiloide primario = Amarillo

11. COLORACION METODO DEL CARMIN
DE BEST
I.- OBJETIVO:
DEMOSTRAR la presencia de GLUCOGENO en
CORTES DE TEJIDOS HISTOLOGICOS.
II.- RESULTADOS:
GLUCOGENO………………………. ROJO;
La lamina sometida a digestión con amilasa salival no
debe presentar coloración positiva,
NUCLEO …………………………..… AZUL

12. COLORACION SUDAN III O IV
I.- OBJETIVOS: DEMOSTRACION de GRASA
NEUTRA en CORTES DE TEJIDOS
HISTOLOGICOS.
II.- FIJACION: Tejidos frescos o fijadas por el
Liquido de Backer.
III.- MICROTOMIA: 4 – 8 u (congelación)

13. IV.- REACTIVOS
- Solución colorante de sudan
- Alcohol al 70%
- Alcohol al 50 %
- Solución colorante de hematoxilina de Harris
- Gelatina Glicerinada.
V.- RESULTADOS:
GRASAS NEUTRAS ………...… NARANJA (Sudan
III) .GRASASN NEUTRAS………....ROJO (Sudan
IV )
NUCLEOS …………………………..AZUL

14. COLORACION SUDAN III - IV
Grasa neutra = Naranja (sudan III)
Grasa neutra = Rojo (sudan IV)
Núcleos : Azules

15. COLORACION SUDAN III

16. COLORACION DE VON KOSSA
Depósitos de calcio = Negro o marrón oscuro
Núcleos = Morado
Citoplasma : Rosado

17. COLORACION DE MASSON FONTANA
Pigmentos melaninicos y sustancias argentafines = Negro
Núcleos = Morado
Citoplasma = Rosado

18. COLORACIONES HISTOQUIMICA
METODO DE OBJETIVO O RESULTADOS
COLORACIÓN PROPÓSITO
PAS (ACIDO GLUCOGENO Glucógeno = Rojo a púrpura
PERYODICO DE (POLISACARIDOS, Mucina y membrana basal =
SCHIFF) CELULAS MUCOSAS Y Rojo a púrpura.
MEMBRANA BASAL) Núcleos = Azul
Hongos = Rojo a púrpura
ALCIAN BLUE Glucosaminoglicanos Glucosaminoglicanos Ácidos
(AZUL ALCIANO) Ácidos Sulfatados y no Sulfatados y no sulfatados =
sulfatados Azul verdoso
Núcleo = Morado
HIERRO COLOIDAL Glucosaminoglicanos Glucosaminoglicanos Ácidos
DE HALE Ácidos Sulfatados y no Sulfatados y no sulfatados =
sulfatados Azul turquesa intenso
Núcleos = Azul
Citoplasma = Rosado

19. CARMIN DE BEST Glucogeno Glucogeno = Rojo
Núcleos = Azul
SUDAN III ó IV Grasas neutras Grasas neutras = Naranja
(sudan III)
Grasas neutras = Rojo
sudan IV
Núcleos = Azul
SUDAN BLACK B Fosfolípidos Fosfolípidos = Negro
(SUDAN NEGRO) Núcleos = Rojo
ROJO CONGO DE Amiloide Amiloide primario =
BENNHOL Amarillo
Amiloide segundario =
negativo al color amarillo
PERLS Depósito de hierro Depósito de hierro
trivalente trivalente = azul turquesa
Núcleos = morado
Citoplasma = rosado

20. VON KOSSA Depósito insoluble de Depósito de calcio = negro ó
calcio marrón oscuro.
Núcleos = morado
Citoplasma = rosado
MASSON FONTANA Pigmentos Pigmentos melaninicos y
melaninicos sustancias argentafines =
negro
Núcleos = morado
Citoplasma = rosado
FEULGEN Ácido Ácido dexosiribonucleico del
dexosiribonucleico núcleo = rojo púrpura
Citoplasma = rosado