Determinacion cuantitativa colorimetrica enzimatica de trigliceridos en suero.

1. SEPDGETISEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO:I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACIONMETABOLICAS
PRACTICA:
DETERMINACION CUANTITATIVA-COLORIMETRICAENZIMATICA
DE TRIGLICERIDOS EN SUERO
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_
CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: _____________________________________

2. INTRODUCCION
La determinación de los niveles de triglicéridos, cuando se lleva a cabo en conjunto con
otros ensayos de lípidos, proporciona una ayuda en el diagnóstico de hiperlipoproteinemia
primaria y secundaria. También es útil para dar seguimiento a la diabetes mellitus, nefrosis,
obstrucción biliar y varias anormalidades metabólicas que resultan de disturbios endocrinos.
1. El glicerol y los ácidos grasos se forman en una primera etapa por la acción de
la lipasa sobre los triglicéridos.
2. El glicerol se fosforila por l adenosin-5’-trifosfato (ATP) para producir glicerol-3
fosfato (G-3-P) y adenosión-5’-difosfato (ADP) n una reacción catalizada por el
glicerol-cinasa (GK).
3. La G-3-P es oxidada por la glicerolfosfato oxidasa, (GPO) produciendo
dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno.
4. Los peróxidos reaccionan con 4-aminoantipirina y 4-clorofenol bajo la influencia
catalítica de las peroxidasas (POD) para formar una quinoneimina de color rojo.
OBJETIVO
Determinar la concentración de los triglicéridos en el suero
PROCEDIMIENTO
1. extraer 5ml de sangre sin anticoagulante
2. centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.
3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar a 2500
r.p.m. por 3 minutos.
4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya rotulado,
sin desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.
5. Continuamos agregando 2.0ml a un tubo rotulado con la letra “M” de muestra.
6. Al tubo “M” le agregamos 200µl de suero problema, mezclar y llevar a incubar a 37°C
por 5 min.
7. Procedemos a leer en el espectrofotómetro a 500nm
8. Realizar cálculos.
Glicerol + ATP GK G-3-P + ADP
G-3-P + O2 GPO DAP + H2O2
2H2O2 + 4-aminoantipirina + PODquinoneimina + HCl + 4H2O
4-clorofenol

3. Blanco “B” Estándar “St” Muestra “M”
Reactivo 2,0ml 2.0ml 2.0ml
estándar - 200µl -
muestra - - 200 µl
INTERPRETACION
Reactivo 1: es incoloro
Al adicionar el suero al reactivo 1 se torna un
color crema
CALCULOS
Resultados.
Los valores se derivan de la siguiente ecuación:
1. Triglicéridos en suero (mg/dL) = A M x 200
AE
Donde AM y AE son los valores de absorbancia de la muestra y del estándar
respectivamente, 200 es la concentración del estándar (mg/dL).

4. SEP DGETISEMS
Tuxtepec, OAX.
APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS
PRÁCTICA
DETERMINACIONCUANTITATIVA-COLORIMETRICAENZIMATICA
DE TRIGLICERIDOS EN SUERO
NOMBRE DEL PACIENTE:JUNCO GARCÍA PERLA RUBÍ
SEXO:F EDAD:18 AÑOS FECHA:22/03/11 HORA:9:40AM
REPORTE
RESULTADOS:
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OBSERVACIONES:
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ANALISTA:
AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”
FIRMA
VALORES DE REFERENCIA
En suero/plasma:
30 – 150 mg/dL