Artículo de bioseguridad - P.A - Final .pdf

Artículo de Investigación
Bioseguridad
Toma y transporte de muestra para la detección de virus chikungunya a
laboratorio de referencia.
Sample collection and transportation for the detection of chikungunya virus to a
reference laboratory.
Agid Pérez, Marco A.1
; De La Cruz Durand, Joel I.1
; Félix Quiroz, Cristian M.1
;
Ortiz Medrano, Brayan A.1
; Purihuamán Rojas, Lizandro.1
; Terrones Cruzado,
Deisy A.1
1. Departamento de Microbiología y Parasitología - Facultad de Ciencias Biológicas,
Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.
Resumen.
La Chikungunya se produce por un virus y es transmitida al hospedador por
mosquitos infectados del género Aedes. Este virus tiene forma esférica de ARN de cadena
sencilla positiva, que mide 70 nm de diámetro. La trasmisión se produce cuando, los
insectos hematófagos de tipo hembra pican e inyectan el virus al huésped. Para el manejo
de este patógenos es importante el uso de los siguientes EPP: Trajes especiales completos
para proteger la ropa que se lleva puesta, uso de Mascarillas, cofia para cubrir el cabello,
gafas de bioseguridad, entre otros. En el diagnóstico de Chikungunya se utilizan tres tipos
de pruebas: la serología, el aislamiento viral, y la reacción en cadena de la polimerasa con
transcriptasa reversa. Generalmente es conveniente utilizar frascos de hemocultivos,
frascos de lisis-centrifugación, tubos y frascos con cierre de rosca, Además es importante
tener en cuenta la temperatura de congelación de -20°C para RT-PCR, en refrigeración
(2-8°C) y que el tiempo de almacenamiento no debe de pasar las 24 horas.

Summary
Chikungunya is caused by a virus and is transmitted to the host by mosquitoes
derived from the Aedes genus. This virus has a spherical shape of positive single-stranded
RNA, measuring 70 nm in diameter. Transmission occurs when female hematophagous
insects bite and inject the virus into the host. For the management of this pathogen, the
use of the following PPE is important: Complete special suits to protect the clothes worn,
use of masks, cap to cover the hair, biosafety glasses, among others. Three types of tests
are used in the diagnosis of Chikungunya: serology, viral isolation, and reverse
transcriptase-polymerase chain reaction. It is generally convenient to use blood culture
bottles, lysis-centrifugation bottles, tubes and bottles with screw caps. It is also important
to take into account the freezing temperature of -20°C for RT-PCR, in refrigeration (2-
8°C) and that the storage time should not exceed 24 hours.

Universidad Nacional “Pedro Ruiz Gallo” Facultad de Ciencias Biológicas
INTRODUCCIÓN
La fiebre Chikungunya es una
enfermedad producida por un virus y
transmitida al hospedador por mosquitos
infectados del género Aedes, siendo
principalmente las especies Aedes aegypti y
Aedes albopictus, los principales vectores
(Organización Mundial de la Salud [OMS],
2017). Este patógeno está en la clasificación
del grupo de riesgo 3, razón por la cual su
manejo debe de ser en un laboratorio de
Bioseguridad de nivel 3 (Government of
Canadá, 2020). Por esta razón es importante
tener un vasto conocimiento sobre el
proceso adecuado cuando se maneja este
tipo de agente patógeno. Además, este
presente trabajo servirá de fuente
bibliográfica indispensable tanto para
alumnos en formación y profesionales
donde su ambiente laboral sea un
laboratorio de diagnóstico e investigación.
Teniendo en cuenta lo anterior este
presente trabajo tiene como objetivo
fundamental describir el proceso adecuado
para la toma y transporte de muestra para la
detección de virus Chikungunya a
laboratorio de referencia. Para ello se
abordará temas como morfología y fisiología
del virus de Chikungunya, enfermedad, tipo
de muestra, volumen requerido de la
muestra, equipo de protección individual
para la toma de muestras, instrucciones para
la preparación del paciente, condiciones de
la muestra, envase para obtención de la
muestra primaria, conservación y tiempo de
almacenamiento y transporte de la muestra.
CARACTERÍSTICAS
MORFOLÓGICAS
El virus de la chikungunya es un virus
de forma esférica de ARN de cadena sencilla
positiva, que puede llegar a medir 70 nm de
diámetro (Da Cunha y Trinta,2017; Vu et al.,
2017). Está compuesto por una envoltura de
origen lipídico provenientes de la M. celular
de la célula infectada que presentan las
glucoproteínas E1 y E2, las cuales se
disponen aproximadamente como 80
espículas formadas por 240 heterodímeros de
estas proteínas. Estas glucoproteínas se
caracterizan debido a que fusionan las
membranas del virus y del huésped y
intervienen en la infección del virus (Cunha
et al., 2020).
Con respecto a la cápside, esta
conformada aproximadamente por 240

copias de la proteína C, organizados como
un icosaédrico (Cunha et al., 2020). Esta
estructura presenta una molécula ARN
monocatenario positiva con una longitud de
11, 5 kb, la cual conforma el genoma viral y
codifica a las proteínas (nsp 1 – nsp 4)
comprometidas en la replicación viral, en
tanto que las proteínas (C,E1,2 y 3 y 6K) que
componen al virión (Caiza., 2021).
Figura 1 y 2
Morfología del virus con sus partes
(Martínez et al., 2017)
Por otro lado, su estructura genómica
está conformada por 2 marcos de lectura
(ORF) divididos por una zona pequeña no
codificante (Calvo et al., 2021). El primero se
localizado en la región 5’ y codifica a una
poliproteína de más 2,424 aminoácidos,
desencadenado a las poliproteínas no
estructurales (nsP1 – nsP4) la cuales
constituyen el complejo de replicación del
virus (Calvo et al., 2021; Martínez et al.,
2017). Mientras que el segundo se localiza en
la región 3’ codificando a una poliproteína de
más 1,244 aminoácidos desencadenado a las
poliproteínas estructurales (C, E3, E2, 6K y
E1), poliproteínas que componen la cápside
y envoltura (Martínez et al., 2017).
ENFERMEDAD
Vectores
La enfermedad del virus de la
chikungunya es una enfermedad que
comienza con la picadura de insectos
hematófagos hembra del género Aedes, que
se encuentran mayormente en regiones
rusticas y urbanas del mundo que tengan una
temperatura elevada, encontrándolos sitios
como baldes de agua, floreros, neumáticos
entre otros donde ponen sus huevos. Este

díptero se caracteriza por presentar una
cabeza y un cuerpo con apariencia delgada,
de color oscuro con 6 patas con rayas
blancas y suele picar a primeras horas del
día y de la noche en zonas como miembros
superiores e inferiores (Caiza, 2021; Gómez
y Mendez,2017; Vergara, 2017).
Figura 3 y 4
Dípteros del género Aedes de las especies
aegypti y albopictus (Vergara, 2017)
Trasmisión
La trasmisión del virus se produce
cuando, los insectos hematófagos de tipo
hembra de las especies más conocidas como
aegypti y albopictus, pican e inyectan saliva
con sustancias que inhiben la coagulación
sanguínea, adquiriendo la sangre del huésped
e infectando al huésped produciéndole
comezón en el área perjudicada por el insecto
(Caiza, 2021; Vergara, 2017). Una vez que el
virus entra a la dermis y la sangre, comienza
a replicarse en las principales células de la
dermis expandiéndose por la sangre gracias a
los vasos linfáticos, propagándose a órganos
y tejidos importantes como el cerebro, bazo,
musculo e hígado ocasionando alrededor de
109 copias del virus por mililitro de sangre a
lo largo de los 7 primeros días de la infección,
para posteriormente con el tiempo provocar
cuadros clínicos que pueden ser leves o
graves (Da Cunha y Trinta, 2017; Silva y
Dermody,2017).
Figura 5
Proceso de trasmisión mediante la forma
silvestre o selvática (Vu et al., 2017).

Por otro lado, la forma urbana se trasmite
mayormente por la especie de insectos A.
egypti y A. albopictus, encontrados
mayormente en regiones que presentan un
clima con una temperatura templada,
tropical y subtropical afectando
mayormente al H. sapiens (Caiza, 2021).
Figura 6
Proceso de trasmisión mediante la forma
urbana (Vu et al., 2017).
Epidemiologia
El virus de la chikungunya es un virus
cosmopolita, debido a que se encuentra
distribuido en diversas partes de los cinco
continentes del mundo como por ejemplo el
Caribe, Latinoamérica, Europa, regiones del
sureste de Asia y en regiones tropicales de
África (Caiza, 2021; Vergara, 2017)
El primer reporte del virus de la
chikungunya fue durante a partir de los años
50, encontrándose brotes de 60 – 80%, en
Tanzania donde los pobladores presentaron
cuadros de fiebre conjuntamente con
erupción cutánea y artralgia grave, debido a
esto los habitantes de este país la
denominaron a esta enfermedad con el
nombre de “makonde’’ que significa persona
doblada, haciendo relación a los cuadros de
articulación grave que padecían las personas
(Caiza, 2021; Vu et al., 2017).
Durante los años 60 y 90 la
propagación del virus de la chikungunya,
provoco grandes brotes en diversos países de
África como Uganda, Guinea, entre otros,
debido a altas temperaturas climáticas que
ocasionaron lluvias fuertes asociando la
prevalecía de mosquito del género Aedes en

estas zonas, por otra en las regiones del
sureste de Asia la prevalencia de estos
insectos hematófagos fue debido a que en
esta parte del mundo los mosquitos hembra
ponen sus huevos envases abiertos o cisterna
donde acumulan agua (Vu et al.,2017).
Durante el año 2004, comenzó una
gran epidemia que se propago en un 75%,
afectando a los habitantes de la zona costera
de Kenia e islas Mayotte, Madagascar, las
Malvinas, entre otras islas aledañas al
océano indico para posteriormente con el
tiempo propagarse en países del sur y este de
Asia, en zonas del sur del continente
europeo, en Norteamérica específicamente
en estados unidos y diversos países;
Posteriormente en el año 2007 en Italia, en
una región del norte se produjo la primera
aparición del virus de la chikungunya por
medio de la especie A. albopictus, para
después en el año 2009 y 2010 expandirse
en una isla del océano índigo llamada
“reunión’’ hasta España, esta propagación
rápida del virus fue debido a que la especie
A. albopictus, presenta en su cubierta, la
proteína E1 modificada que mejora la
trasmisión del virus a las personas (Caiza,
2021; Vu et al.,2017). Según la OPS, a
finales del año 2013 y a principios del año del
2014, se informó la presencia de 1.094.661
casos sospechosos y 24.071 casos
confirmados del virus de la chikungunya
(Camacho, 2018; Martínez et al., 2017),
siendo específicamente la isla caribeña “San
Martin’’, donde se informó el primer brote
del virus expandiéndose en diversas islas del
cercanas como san bartolome, dominica y
águila hasta la región de Guyana francesa
convirtiéndose en la primera zona del sur de
América en reportar la enfermedad (Cunha et
al., 2020 ; Camacho, 2018), distribuyéndose
posteriormente en el año 2015 y 2016, según
la OPS en diversos países americanos
cercanos como el Perú, Colombia,
Argentina, Brasil, entre otros extendiéndose
hasta en el oriente de África y el sur de Asia
(OMS, 2020; Da Cunha y Trinta, 2017).
Figura 7
Epidemiologia del Virus de la Chikungunya
durante el año 2016 (Martínez et al., 2017)

Posteriormente durante los años
2017 a 2020, se encontraron reportes en
países de Europa, África y Asia (OMS,2020;
Camacho,2018).
Figura 8
Epidemiologia del Virus de la Chikungunya
durante el año 2018 (Acosta et al., 2019)
Patogenia
Cuando la hembra hematófaga se
alimenta, no sólo inyecta el virus, sino
también proteínas contenidas en las
glándulas salivales de los mosquitos, que
actúan juntas para reducir la producción de
IL-8 de los queratinocitos infectados,
debilitando la respuesta inmune del
hospedero, lo que resulta un mayor aumento
de la replicación viral en macrófagos, células
endoteliales y fibroblastos, donde los
fibroblastos son los más susceptibles a la
replicación de este virus. Una vez que el virus
se replica en estas células, van a pasar a los
ganglios linfáticos y luego al sistema
circulatorio para su eventual diseminación,
llegando así a los órganos diana como son:
hígado, músculo, articulaciones, riñones y
cerebro. La inmunidad innata induce
interferones tipo 1, que son esenciales
para prevenir la replicación viral y la
liberación de interleucinas 1B, 4, 6 y 10,
siendo las IL-1 e IL-6 pirógenos
endógenas que son las responsables de
la fiebre en la fase aguda de la
enfermedad. Además, las altas
concentraciones de IL-6 en plasma en la

fase aguda, así como las altas
concentraciones de factor estimulante
de colonias de granulocitos, se asocian
con un mayor riesgo de desarrollar
artralgia persistente (Mancera et al.,
2017).
La enfermedad del virus de la
chikungunya se describen 3 formas
evolutivas:
Enfermedad Aguda:
La enfermedad en la etapa aguda
comienza posteriormente a la etapa de la
incubación, iniciando con una fiebre alta que
sobrepasa a los 38.5° o 39° C, debido a la
elevada cantidad de copias del virus en la
sangre, seguido de unas afecciones
articulares intensas que a veces incapacitan
al paciente y se presentan mayormente en
zonas como manos, muñecas, tobillos y pies
en conjunto mialgias agudas en
extremidades superiores e inferiores y
erupciones cutáneas en zonas como
extremidades, el abdomen y el rostro
durante el 2do -5to día (Da Cuhna y Trinta,
2017; Martínez et al., 2017; Mathew et al.,
2017).
Entre otros síntomas podemos
encontrar dolor de cabeza y espalda,
conjuntivitis, diarreas, náuseas, vómitos y
lesiones en zonas de la piel y mucosas (Da
Cuhna y Trinta, 2017; Martínez et al, 2017)
Figura 9 y 10
Afecciones articulares en miembros
inferiores mayormente observados en
adultos (Da Cunha y Trinta,2017).

Figura 11 y 12
Manifestaciones cutáneas en la zona del
abdomen (Da Cunha y Trinta,2017).
Enfermedad Post – aguda:
En esta etapa de la enfermedad, se
observa al paciente más estable en su
condición clínica, no obstante,
posteriormente a este momento de curación
el paciente puede presentar dolores
reumáticos como poliartralgia persistente,
restricción de movimientos en los miembros
superiores por el intenso proceso
inflamatorio en hombros y codos,
tenosinovitis, entre otros (Cholojan y
Palencia, 2019; Da Cuhna y Trinta, 2017).
Figura 13
Retriccion de movimiento debido a la
inflamación de los miembros superiores (Da
Cunha y Trinta,2017).
Tambien en esa etapa de la
enfermedad se ha podido observar
manifestaciones clínicas como edema
reaccional y síndromes de compresión
nerviosa, particularmente de los nervios
cubital, medial y tibial, que producen
síndromes del túnel cubital, carpiano y
tarsiano, respectivamente (Da Cuhna y
Trinta, 2017).

Enfermedad Crónica:
En esta etapa enfermedad, suele
durar aproximadamente 90 días o más, y se
observan cuadros clínicos en las
articulaciones como: artralgias intensas en
zonas como manos, tobillos y piernas
afectando al tejido cartilaginoso;
tenosinovitis, la cual afecta en zonas
similares a la artralgia, fatiga y en ocasiones
el paciente también puede desarrollar artritis
(Gil et al., 2020; Cholojan y Palencia, 2019;
Cordova et al., 2018).
Figura 14
Frecuencias de artralgias (Caiza., 2021).
En esta etapa la enfermedad se puede
complicar debido a factores como la edad
siendo las personas de la tercera edad los más
afectados, trastornos reumáticos,
comorbilidades antes de contraer el virus y
ser del género femenino entre otros (Gil et
al., 2020; Martínez et al.,2017)
Tratamiento:
El virus de la fiebre chikungunya, es
un virus que actualmente no presenta
medicamento o vacuna especifica. Sin
embargo, según el CDC, para esta
enfermedad el paciente no debe tener
actividad física, debe ingerir sustancias
liquidas (para evitar la pérdida de agua por
causa de los vómitos) y medicamentos que
disminuyan la fiebre, alergias y el dolor (Gil
et al., 2020; Córdova et al., 2018; Gómez y
Méndez, 2017). En el caso de que el paciente
presente temperatura elevada o fatiga en la
fase aguda se debe emplear medicamentos de
carácter analgésico y antipirético como el
paracetamol (Gómez y Méndez, 2017). No
obstante, no es recomendable el uso de
medicamentos Aines (excepto coxib) o Ac.
Acetilsalicílico debido a que puede ocasionar
cuadros clínicos como sangrado pudiendo
llegar a desarrollar el síndrome de reye,
mayormente esto en pacientes de edad

infantil (Gil et al., 2020; Córdova et al.,
2018).
Con respecto a las manifestaciones
clínicas reumáticas, estas se pueden tratar
con medicamentos, farmacoterapia y
fisioterapia en caso de cuadros como dolor
articular y rigidez muscular, aunque estas
terapias deben ser leves debido que si no lo
son puede provocar la sintomatología (Gil et
al., 2020).
Según estudios el plasma con
anticuerpos de personas afectadas, pueden
servir como un tratamiento opcional para
disminuir la viremia en paciente
mayormente en pacientes de inmunidad baja
y bebes evitando cuadros delicados (Gil et
al., 2020).
Prevención y control
Toda persona que presenta esta
enfermedad debe ser consciente en tener
más cuidado para no ser picado otra vez por
estos mosquitos y más si está en la primera
semana de enfermedad, ya que el virus se
encuentra circulando por el torrente
sanguíneo y el mosquito los puede ingerir y
luego picar a otro huésped y seguir
propagando de esa manera esta enfermedad.
Otra manera de poder prevenir y
controlar esta enfermedad es mediante la
reducción de los depósitos de agua natural y
artificial, los cuales sirven de criaderos para estos
vectores de la fiebre chikungunya. De esta
manera las comunidades que son afectadas deben
ser responsables en el vaciado y lavado de todos
los recipientes que almacenen agua. Además, se
recomienda tener una vivienda con una distancia
prudente de los lugares que se consideran
potencialmente criaderos para estos mosquitos.
El uso de insecticidas es una de las
medidas a tomar en cuenta, ya que con esto
se logra disminuir la población de mosquitos,
que bien se encuentren volando o sobre algún
depósito de agua donde suelen posarse. El
agua almacenada también suele ser tratada
con insecticidas con el fin de erradicar las
larvas inmaduras presentes, evitando de esa
manera siga con su ciclo evolutivo.
Otra manera de prevenir la
enfermedad es mediante el uso de ropa
adecuada, de manera que la piel no presenta
ninguna exposición a la picadura de algún
mosquito que pueda presentar este virus. A
estas prendas se le puede aplicar repelentes,

así mismo a la piel que generalmente
siempre está expuesta. Una característica
importante es que dichos repelentes en su
composición deben contener icaridina, u
otro compuesto.
Los mosquiteros, son una barrera de
protección contra estos vectores y más si son
tratados con algún insecticida, debido a que
generalmente se usan para la protección de
los niños pequeños, personas que presenten
alguna otra enfermedad que pueda verse
comprometida y las personas mayores de
edad. Recalcando que estos vectores suelen
picar preferentemente durante las horas del
día.
Otras recomendaciones que se
pueden tomar en cuenta para la prevención
de la enfermedad son las siguientes
(MedlinePlus, 2019):
❖ Lavar con abundante cloro o jabón todos
los recipientes como cubetas, tinacos,
incluyendo los floreros que algunas
familias suelen tener.
❖ Tapar de manera adecuada los depósitos
donde el almacenamiento de agua sea
fundamental.
❖ Botar todos los recipientes que se
consideren como no utilizables, evitando
de esta manera la formación de criaderos
innecesarios.
❖ Se recomienda dormir en habitaciones
cerradas, con presencia de pabellones o
de mosquiteros.
TIPO DE MUESTRA
El diagnóstico del virus de
chikunguña se realiza mediante diferentes
procedimientos de diagnóstico, algunos de
ellos ya vienen siendo utlizados desde
muchos años antes como la serología, sin
embargo otros procedimientos de
diagnóstico como la reacción en cadena
polimerasa que es una innovación para
realiza el diagnóstico viral (Organización
Panamericana de la Salud, 2011).
La enfermedad en la primera semana
se presenta con una sintomatología aguda
donde obligatoriamente tomar la muestra
para luego ser enviada a algún laboratorio de
referencia. Las muestras generalmente son

sanguíneas para detectar los diferentes
anticuerpos, en cambio cuando el cuadro
clínico se agrava y afecta el sistema
nerviosos se debe tomar muestra de líquido
cefaloraquídeo. Cuando el caso sea de
gravedad es de obligatoriedad tomar la
muestra sanguínea lo más antes posible
(Organización Panamericana de la Salud,
2011).
La muestra puede tener distintos
orígenes, ya que en caso de investigación se
toma la muestra a mosquitos infectados con
una toma de muestra muy particular, pero la
toma de muestra en humanos es
mayormente cuando se trata de una
infección donde se requiere el diagnóstico
serológico para así se pueda dar el
tratamiento de manera eficiente
(Organización Panamericana de la Salud,
2011).
RECOLECCIÓN,
ALMACENAMIENTO DE
MUESTRAS:
Uno de los aspectos principales en
los diagnósticos realizados en los
laboratorios se refiere a la recolección y al
adecuado almacenamiento de las muestras
obtenidas.
❖ Toma de muestras para serología,
aislamiento viral y diagnóstico
molecular (Organización Panamericana
de la Salud, 2011).
Tipo de Muestra: Muestras de suero
Momento adecuado para la recolección:
▪ Si se da en el momento de la fase
aguda deberá realizarse entre los 8
primeros días de la enfermedad.
▪ Caso contrario, si es durante fase
convaleciente: Tendrá que ser entre
10 a 14 días luego de la toma de
muestra de la fase aguda.
Otros tipos de muestras que pueden
usarse:
Muestras:
• Si el caso es una meningoencefalitis se
utilizará el LCR.
• Tejidos y sueros disponibles como
materiales de autopsia.
• Para cuando se presente un caso de
artritis acompañada de derrame
tendremos que usar líquido sinovial.
[Nota: En caso las muestras

recolectadas fuesen de mosquitos de campo
atrapados, no habrá cambio porque de la
misma manera se manipularán utilizando
las técnicas que describimos con
anterioridad]
VOLUMEN REQUERIDO
PARA LA MUESTRA
Acerca de la recolección del suero
(Quintero, 2019).
• Nosotros empezaremos recogiendo
asépticamente 4−5 ml de sangre
venosa haciendo uso del método de
venopunción, llevándose a cabo en
tubos de polipropileno que no
contengan anticoagulante con gel
separador.
• Después de la recolección, permitir
que se produzca la coagulación de la
sangre a temperatura ambiente, luego
se centrifugará a 2.000 revoluciones
por minuto para que de esta forma el
suero se separe. Recolectar el suero en
un vial que esté limpio y seco.
• Recordar que absolutamente todas las
muestras clínicas deben ir siempre de
la mano con sus datos
epidemiológicos y clínicos
respectivos.
Figura 15
Recolección de muestras de sangre para
examen de Chikungunya (Gaviria et al,
2015).
TIPO Y CARACTERÍSTICAS DEL
LABORATORIO PARA EL MANEJO
DE ESTE PATÓGENO
El virus del Chikunguña es un virus
que se presenta que no se transmite por
medio de aerosoles, sin embargo, es de gran
importancia conocer en qué tipo de
laboratorio se tiene que manipular este virus,
ya que nos permitirá tener las condiciones de
asepsia y protocolos bajo control, con el fin
de evitar un contagio por un corte de algún
instrumento. Por ser un virus de la familia de
los arbovirus se trabaja en el laboratorio de
nivel 3. En el laboratorio de nivel 3 las
condiciones de bioseguridad son más
estrictas, ya que se puede trabajar con virus

que se propagan por aerosoles, asimismo su
infraestructura está diseñada de manera más
estructurada con desinfección previa a la
entrada al laboratorio, con el fín de no
permitir el ingreso de algún patógeno que
impida realizar el diagnóstico de manera
eficiente. La presión negativa del aire es una
característica peculiar de este laboratorio,
que ayudará a evitar la diseminación de
algún agente patógeno que se dispersa por
aerosoles en caso de que ocurra algún
accidente (Chiong et al., 2018).
La infraestructura en este laboratorio
presenta características que un laboratorio
nivel 2 no tiene y que son muy sustanciales
para evitar accidentes, las principales
características de infraestructura son:
La señalización de riesgo biológico,
el cual pone en alerta que se corre el riesgo
de alguna infección por un agente peligroso.
Otra característica peculiar es que los techos
deben tener impermeabilidad para que
cuando suben los vapores no se escape al
exterior. A diferencia del laboratorio de
nivel dos en el laboratorio de nivel 3 cuenta
con duchas antes de ingresar al laboratorio y
presenta doble hoja las puertas para hacer un
ambiente más hermético. El sistema de
ventilación presenta el flujo de circulación en
una sola dirección donde no debe de existir
recirculación, además se debe de tener
vigilancia permanente para evitar que no
ocurra fallas en los filtros hepa (Chiong et al.,
2018).
EQUIPO DE PROTECCIÓN
PERSONAL (EPP):
El virus Chikungunya es un patógeno
que se clasifica en el grupo de riesgo 3. El
personal que ingrese a este tipo de
laboratorio está obligado a utilizar de manera
correcta los equipos de protección personal.
Según Chiong et al. (2018) se deben usar los
siguientes EPP:
• Trajes especiales completos para
proteger la ropa que lleva puesto el
personal que labore en el laboratorio.
• Uso de Mascarillas.
• Cofia para cubrir el cabello.
• Gafas de bioseguridad se usará para
protegerse de la exposición a
salpicaduras.
• Uso de protección respiratoria de
presión positiva.
• Uso de Mandil sin aberturas o
envolventes y con mangas ajustadas

que cubran por completo los
antebrazos
• Uso de zapatos especiales.
• Uso de doble Guantes durante toda la
permanencia en BSL3. Un par de
guantes de antesala.
Otras precauciones a tomar en cuenta
para el manejo de la muestra del virus
Chikungunya:
La manipulación de materiales
potencialmente infeccioso se debe realizar
dentro de una cabina de bioseguridad
biológica tipo II y III u otro dispositivo de
contención que sea adecuado junto con los
EPP. La centrifugación de
materiales contaminados debe realizarse en
recipientes herméticos, en recipientes de
seguridad cerrados o en
rotores colocados en una cabina
de bioseguridad. Debe
limitarse estrictamente el uso de agujas,
jeringas y otros objetos punzantes. Las
heridas abiertas, cortes y raspaduras deben
cubrirse con un vendaje impermeable
(Governmet of Canada, 2022).
CONDICIONES DE LA MUESTRA
DEL VIRUS DE CHIKUNGUNYA
En la toma de muestra es conveniente
tomar precauciones para ejecutar el
procedimiento como el uso de equipo de
protección que evite que el personal se pueda
infectar y es conveniente tener todos los
envases necesarios en condiciones de
asepsia, por ello se debe de lavar las manos
y desinfectar las superficies. En la ejecución
del diagnóstico, en primer lugar, se debe ver
de dónde se tiene que extraer la muestra, ya
que en infecciones virales con arbovirus las
muestras deben provenir de suero, líquido
cefaloraquídeo con características
meningoencefálicas o en patologías como
artritis es muy útil tomar la muestra del
líquido sinovial (Jessenea y Toleto, 2021);
una vez tomada la muestra el tubo de ensayo
necesariamente tiene que estar rotulado
(MINSA, 2017).
Figura 16
Lavado de manos previo a la toma de
muestra (Jessenea y Toleto, 2021).

Durante la primera semana las
pruebas de diagnóstico son de tipo
serológico y virológico, donde tenemos que
tener los equipos de protección personal
adecuados, a pesar de que no se trate de un
virus que se propague por aerosoles se corre
el riesgo de contaminarse mediante un corte
en la manipulación de algún instrumento
punzocortante o por el traslado de este
material biológico en material de vidrio
frágil. Por ejemplo, durante la prueba
serológica ELISA se corre el riesgo de
quebrar por accidente las placas Petri o de
contaminarse con el Líquido
Cefaloraquídeo cuando se realizan las
diluciones. La muestra de Líquido
Cefaloraquídeo, de sangre completa o de
líquido amniótico se deben guardar en
placas selladas a una temperatura de
incubación de 2-8°C una noche antes de
realizar la prueba serológica con el fin de
conservar la muestra y no se debe congelar
y descongelar la muestra por reiteradas
veces, ya que es posible que se desnaturalice,
sin embargo, para realizar la inactivación por
calor húmedo en baño María se necesita una
temperatura de 56°C durante 2 horas. (OMS,
2020; CDC, 2017)
ENVASES PARA LA OBTENCIÓN DE
LA MUESTRA PRIMARIA
Generalmente es conveniente utilizar
frascos de hemocultivos, frascos de lisis-
centrifugación, tubos y frascos con cierre de
rosca. En el caso de que se tomen muestras
de suero es recomendable utilizar tubos de
vacío que contengan un gel separador o que
presenten sustancias en el tubo de vacío
como el EDTA o citrato, los tubos deben
tener preferentemente un cierre hermético,
para asegurar un buen transporte de la
muestra, además se aconseja en no abrir la
tapa del tubo de vacío ya que pierde su
característica de esterilidad, además es
recomendable al momento de tomar la
muestra en mirar la fecha de vencimiento de
los envases que contienen algún
anticuagulante, ya que es posible que haya
expirado y no haga efecto sobre el líquido
sanguíneo; los frascos de tipo eppendorf son
recomendables para contener como mínimo
2ml de muestra libre de hemólisis. (Calderón,

2018), para la sangre se usa tubo amarillo
que contiene un gel separador de suero. En
algunos casos después de recoger la muestra
se utiliza conservante, pero en el caso de
arbovirus se almacena las muestras de
sangre en frascos sin conservantes (Gomez
et al., 2019).
Figura 17 ,18 y 19
Frascos de tapa lila conteniendo sangre,
tubo con tapa rosca conteniento líquido
cefaloraquídeo y tubos tipo eppendorf
(Calderón, 2018).
También se debe rotular en los tubos
la siguiente información: Nombre del
paciente, fecha de nacimiento, registro
médico o número de gráfico, fecha y hora de
recogida y fuente de la muestra con un
marcador indeleble antes de realizar la toma
de muestra, ya que si se realiza después por
accidente puede llegar a salpicar sangre al
exterior del tubo y no sería posible rotular el
tubo (Gomez et al., 2019; Bel, 2018).
CONSERVACIÓN Y TIEMPO
DE ALMACENAMIENTO
Cuando la muestra de suero ya asido
obtenida, dicha muestra tiene que
almacenarse para su debida serología a:
• Temperatura de congelación de -20°C
para RT-PCR
• En refrigeración (2-8°C)
• El tiempo de almacenamiento no debe
de pasar las 24 horas debe ser enviado

lo más rápido para que la muestra no
se malogre.
TRANSPORTE DE LA
MUESTRA
Cuando se realiza transporte de la
muestra a la entidad de Virología del
Instituto Nacional de Salud o otro
laboratorio departamental de Salud que
están debidamente capacitados para su
respectivo procesamiento. Todas las
muestras deben de transportarse a las
temperaturas que son recomendables y
seguras y en el menor tiempo posible para
que no se malogren (MINSA, 2020).
Los laboratorios de salud pública de
las entidades territoriales harán la recepción
de las muestras para su posterior envió al
laboratorio de virología del Instituto
Nacional de Salud que están capacitados
para procesar las muestras de suero.
Cabe precisar que las muestras de
fluidos corporales, tejidos y cultivos debe
ser considerada como infecciosa para el
personal de laboratorio y debe ser
manipulada utilizando los equipos de
protección adecuadas. Asimismo, se debe
justificar e informar si la muestra no cumple
con los requisitos de validación del
laboratorio, también como las razones por
las cuales la muestra fue rechazada y, en los
casos siguientes, por qué la muestra fue
analizada a pesar de no cumplir dichos
criterios de aceptación.

REFERENCIAS
Acosta, N., Tobar, D., Olivares, R.,
Dabanch, J., y Noramnbuena, M.
(2019). Chikungunya: educación
y prevención como pilares
fundamentales para enfermedad
sin cura. Revista Hospital Clínico
Universidad de Chile, 30, 109 –
119.
https://redclinica.cl/Portals/0/Use
rs/014/14/14/1668.pdf
Asociación de médicos de sanidad
exterior. (2018). Fiebre
chikungunya. Epidemiología y
Situación Mundial
https://www.amse.es/informacio
n-epidemiologica/658-fiebre-
chikungunya
Bel, E. J. (2018). Updates to the
Instructions for Collecting and
Shipping Arboviral Samples.
Infectious Disease Epidemiology
Section, 1-3.
https://ldh.la.gov/assets/oph/Cent
er-PHCH/Center-CH/infectious-
epi/Arboviral/ArboviralShipping
Instructions.pdf
Calderón, L. (2018). Distribución de los
vectores del dengue, chikungunya
y zika (Aedes aegypti y Aedes
albopictus) en el estado de
Puebla [tesis de grado,
Benemérita Universidad
Autónoma de Puebla].
https://repositorioinstitucional.bua
p.mx/handle/20.500.12371/7821
Centros para el Control y Prevención de
Enfermedades [CDC]. (2016).
MAC-ELISA para el zika [Archivo
PDF].
https://www.cdc.gov/zika/pdfs/sp
anish/non-eua-zika-mac-elisa-
protocol-sp.pdf
Caiza, K. (2021). Chikungunya,
caracterización clínica y
diagnóstico de laboratorio.
[Trabajo de grado, Universidad
Nacional de Chimborazo].
http://dspace.unach.edu.ec/bitstre
am/51000/8649/1/7.-
TESIS%20Katherine%20Briggith
%20Caiza%20Cuello-LAB-
CLIN.pdf
Calvo, E., Archila, E., López, L., y
Castellanos, J. (2021).
Reconociendo el virus del
Chikungunya. Biomédica, 41(2),
353-73.
https://revistabiomedica.org/index
.php/biomedica/article/view/5797/
4758
Camacho, E. (2018). Caracterización
filogenética de los virus dengue,
Chikungunya y Zika circulantes en
el departamento de sucre durante
el periodo 2013 – 2015 [Tesis de
Magíster, Universidad de Sucre]

https://repositorio.unisucre.edu.c
o/bitstream/handle/001/975/T616
.922%20C172.pdf;jsessionid=14
CD7BFCBA7D5830AA2AFF34
420C5A1C?sequence=1
Córdova. V., Vega, C., y Alarcón, A.
(2018). Enfermedad de
chikunguña. Medicina Interna de
México, 34(3), 497 - 505.
https://www.medigraphic.com/pd
fs/medintmex/mim-
2018/mim183r.pdf
Cunha, M., Costa, P., Correa, I., De
Sourza, M., Calil, P., De Silva,
G., Costa, S., y Fonseca, V.
(2020). Chikungunya Virus: An
Emergent Arbovirus to the South
American Continent and a
Continuous Threat to the World.
Frontiers in Microbiology, (11),
1-20.
DOI=10.3389/fmicb.2020.01297
Chiong, M., Leisewitz, A., Márquez, F.,
Vironneau, L., Tischler, N.,
Piñones, O., Moreno, R. (2018).
Manual de Normas de
Bioseguridad y Riesgos
Asociados. [Asociados –
Fondecyt – CONICYT] [Archivo
PDF].
https://www.conicyt.cl/fondecyt/
files/2018/06/Manual-
_Bioseguridad-_junio_2018.pdf
Choloján, A y Palencia, L. (2019).
Detección de ARN del virus
Dengue, Chikungunya y Zika por
diagnóstico molecular y
serológico en pacientes
sintomáticos en el laboratorio
clínico Los Almendros, Morales
Izabal [tesis de grado, Universidad
Galileo].
http://biblioteca.galileo.edu/tesari
o/bitstream/123456789/1026/1/20
19-T-lbc-
010_chojolan_y_palencia.pdf
Da Cunha. R y Trinta, K. (2017).
Chikungunya virus: clinical
aspects and treatment - A Review.
Memórias do Instituto Oswaldo
Cruz, 112(8), 523 – 531.
https://www.scielo.br/j/mioc/a/Jq
RqyjsdtdVJrYSPwcrs9Tz/?format
=pdf&lang=en
Gaviria, A., Ruiz, F., Osorio, E.,
Valderrama, J., Ortiz, L., Borda,
R., y Padilla, J. (2015). Casos
clínicos y memorias del curso de
enfermedades transmitidas por
vectores dengue y Chikunguña.
Perfil Bacteriólogos.
https://www.minsalud.gov.co/site
s/rid/Lists/BibliotecaDigital/RIDE
/VS/TH/Casos-clinicos-
memorias-etv-perfil-
bacteriologia.pdf

Gil, D., Ortega, J., y Gonzales, G. (2020).
Diagnóstico de dengue, zika y
chikungunya, en pacientes del
departamento de Santa Rosa
[tesis de grado, Universidad de
san Carlos de Guatemala].
https://biblioteca-
farmacia.usac.edu.gt/Tesis/QB12
40.pdf
Gómez, J y Mendez, J. (2017). Virus del
Zika, Chikungunya y Dengue:
Tres enfermedades, un mismo
vector. Revista Navarra Médica,
3 (1), 18 - 26.
https://journals.uninavarra.edu.co
/index.php/navarramedica/article
/view/a3-v3-n1-2017/4
Governmet of Canada (2022). Pathogen
Safety Data Sheets.
https://www.canada.ca/en/public
-health/services/laboratory-
biosafety-biosecurity/pathogen-
safety-data-sheets-risk-
assessment.html
Jessenea, L., y Toledo, T. (2021).
Informe final de investigación
previo a la obtención del título de
Licenciada en Ciencias de la
Salud en Terapia Física y
Deportiva [Tesis de pregrado,
Universidad Nacional de
Chimborazo].
http://dspace.unach.edu.ec/bitstre
am/51000/8649/1/7.-
TESIS%20Katherine%20Briggith
%20Caiza%20Cuello-LAB-
CLIN.pdf ..
Mancera, N., Páez, M., y Becerra, S.
(2017). Virus chikungunya:
etiología, patogenia y diagnóstico
[Archivo PDF]
https://repository.unab.edu.co/bits
tream/handle/20.500.12749/17084
/Generaci%c3%b3n_creativa_201
7-85-
88.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Martínez, M., Bermúdez, V., Garicano,
C., Núñez, V., Palmar, J., Bautista,
J., Ramirez, P., y Rojas, J. (2017).
Infección por virus
Chinkungunya: de la clínica a la
inmunopatogenia. Archivos
Venezolanos de Farmacología y
Terapéutica, 36(5), 172 – 183.
https://www.revistaavft.com/imag
es/revistas/2017/avft_5_2017/5inf
eccion.pdf
Mathew, AJ, Ganapati, A., Kabeerdoss, J.
(2017). Infección por
chikungunya: una amenaza para la
salud pública mundial. Current
Allergy and Asthma Reports, 17
(13).
https://doi.org/10.1007/s11882-
017-0680-7
Matusali, G., Colavita, F., Bordi, L., Lalle,
E., Ippolito, G., Capobianchi, M.,

y Castilletti, C. (2019). Tropism
of the Chikungunya Virus.
Viruses, 11, 175.
https://www.mdpi.com/1999-
4915/11/2/175/htm
Ministerio de Salud [MINSA], (2017).
Norma técnica de salud para la
vigilancia epidemiológica y
diagnóstico de laboratorio de
dengue, chikungunya, zika y otras
arbovirosis en el Perú [Archivo
PDF].
https://www.dge.gob.pe/portal/d
ocs/tools/arbovirosis18.pdf
Orientación técnica para el
diagnóstico y manejo clínico de
arbovirosis: Dengue,
Chikungunya, Zika y Fiebre
amarilla [Archivo PDF].
http://www.bvs.hn/Honduras/De
ngue/Boletin.Dengue/Orientaci%
C3%B3n-t%C3%A9cnica-para-
el-diagn%C3%B3stico-y-
manejo-cl%C3%ADnico-de-
arbovirosis-dengue-
chikungunya-zika-y-fiebre-
amarilla.pdf
Curso virtual en enfermedades
transmitidos por vectores. Revista
iladiva.
https://www.minsalud.gov.co/sit
es/rid/Lists/BibliotecaDigital/RI
DE/VS/PP/Memorias-
chikunguna-bac.pdf
Organización Panamericana de la Salud.
(2011). Preparación y respuesta
ante la eventual introducción del
virus Chikungunya en las
Américas.
https://www.paho.org/es/documen
tos/preparacion-respuesta-ante-
eventual-introduccion-virus-
chikungunya-americas-2011
Organización Panamericana de la Salud.
(2018). Chikungunya.
https://www.paho.org/es/temas/ch
ikungunya.
Organización Mundial de la Salud.
(2020). Chikungunya.
https://www.who.int/es/news-
room/fact-
sheets/detail/chikunguny
Quintero, E. (2019). Revisión de
actualización en los lineamientos
para Dengue y otras Arbovirosis.
Servicios de Salud Jalisco.
https://siev.ssj.gob.mx/eventos/de
ngue2020/archivos/5._Algoritmo
_de_diagnostico_laboratorial_del
_paciente_con_dengue_Lic._Erne
stina.pdf
Silva, L y Dermody, T. (2017).
Chikungunya virus: epidemiology,
replication, disease mechanisms,
and prospective intervention
strategies. The Journal of Clinical

Investigation, 127(3), 737 - 749.
https://www.jci.org/articles/view/
84417
Vergara. J. (2017). La fiebre
chikungunya, una enfermedad
emergente en los países
desarrollados [tesis de pregrado,
Universidad de Sevilla].
https://idus.us.es/bitstream/handl
e/11441/64916/La%20fiebre%20
chikungunya..pdf?sequence=1&i
sAllowed=y
Vu. D., Jungkind, D., Desiree, A. (2017).
Chikungunya Virus. Clinics
in Laboratory Medicine, (37),
371 – 382.
https://www.labmed.theclinics.co
m/action/showPdf?pii=S0272-
2712%2817%2930010-0

Artículo de bioseguridad - P.A - Final .pdf

Recomendados

Recomendados

Más contenido relacionado

Similar a Artículo de bioseguridad - P.A - Final .pdf

Similar a Artículo de bioseguridad - P.A - Final .pdf (20)

Más de LonderVasquezOlivera1

Más de LonderVasquezOlivera1 (7)

Último

Último (20)

Artículo de bioseguridad - P.A - Final .pdf