Segunda etapa del proceso de plastinación.

1. Deshidratación
Plas%nación
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2. Principios
de
Deshidratación
En
plas%nación
como
en
histología
la
deshidratación
es
el
proceso
de
reemplazar
el
agua
del
espécimen
por
un
solvente
orgánico
miscible
en
agua.
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3. Punto
clave
• Es
importante
diferenciar
claramente
los
agentes
deshidratantes
de
los
solventes
intermediarios
o
Vola%le
Intermedium.
• En
teoría
primero
se
deshidrata
y
luego
se
hace
un
paso
por
solvente
intermediario
(generalmente
Cloruro
de
Me%leno)
pero
si
el
agente
deshidratante
%ene
las
caracterís%cas
de
un
solvente
intermediario
este
paso
se
puede
obviar.
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4. Agentes
deshidratantes
Su
estructura
química
puede
variar:
– Mono-­‐hídricos
• Metanol,
etanol
e
isopropanol
– Di-­‐hídricos
• Monoe%len
glicol
• Die%len
glicol
– Tri-­‐hídricos
• Glicerina
– Cetonas
• Acetona
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5. Vola%le
Intermedium
• Cualquier
solvente
orgánico
con
presión
de
vapor
alta
y
y
bajo
punto
de
ebullición
(+35ºC
-­‐
60
ºC).
• Puede
ser
miscible
en
agua
(Ej.
Acetona)
• Puede
ser
no
miscible
en
agua
(Ej.
Cloruro
de
me%leno)
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6. Difusión
• El
proceso
de
deshidratación
se
dá
por
el
mecanismo
de
Difusión
simple
• Del
la%n
diffundere
=
expandir
o
dispersar.
• Es
la
mezcla
gradual
de
diferentes
sustancias
sin
usar
fuerzas
externas.
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7. Deshidratación
en
el
concepto
de
Plas<nación
Para
producir
un
plas%nado
agua
y
lípidos
son
reemplazados
por
un
polímero
curable.
1. Deshidratación:
Agua
y
parte
de
los
lípidos
son
reemplazados
por
un
solvente
orgánico
miscible
en
agua.
2. El
liquido
deshidratante
es
intercambiado
por
un
Vola%le
intermedium.
Si
un
Vola%le
intermedium
como
acetona
es
usado
para
deshidratación
el
paso
2
se
obvia.
3. Impregnación
Forzada:
El
Vola%le
Intermedium
en
el
espécimen
es
reemplazado
por
el
polímero
curable.
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8. Procedimiento
básico
Deshidratación
ascendente
(procedimiento
mas
conocido).
• Consiste
en
poner
el
componente
anatómico
en
baños
de
deshidrataciones
seriales
con
concentraciones
ascendentes,
el
primer
baño
con
deshidratante
al
50%-­‐70%
y
el
úl%mo
con
deshidratante
al
100%.
Frezze
Subs%tu%on
• Hielo
del
espécimen
es
reemplazado
por
el
agente
deshidratante
a
-­‐24ºC.
• El
agente
usado
es
acetona
y
desde
el
primer
baño
se
usa
al
100%
En
ambos
procedimientos
terminan
cuando
el
contenido
de
agua
en
el
componentes
es
inferior
al
1%
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9. Procedimiento
básico
• El
reemplazo
del
agua
y
lípidos
del
tejido
se
da
por
difusión.
• Entre
más
contenido
acuoso
tenga
el
tejido
mas
demorará
la
deshidratación.
• El
contenido
de
agua
de
la
solución
de
deshidratación
se
determina
por
su
densidad.
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10. Notas
Importantes
• La
relación
entre
el
peso
del
componente
y
el
volumen
de
deshidratante
debe
ser
10:1
• Un
componente
fresco
o
fijado
no
puede
simplemente
ser
sumergido
en
el
líquido
deshidratante
,
ya
que
este
se
encogerá
(shrinkage).
• No
poner
el
componente
anatómico
en
acetona
o
etanol
al
100%
a
temperatura
ambiente
para
no
causar
retracción
extrema.
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11. Desengrasado
Durante
la
deshidratación
los
componentes
también
se
da
el
proceso
de
desengrasado.
Este
proceso
depende
de:
1. Tipo
de
deshidratante:
Cloruro
de
Me%leno
más
fuerte
que
acetona.
2. Temperatura:
Acetona
a
+25ºC
mucho
mas
fuerte
que
a
-­‐25ºC
3. Relación
entre
el
volumen
del
tejido
adiposo
y
el
volumen
del
baño
de
deshidratación.
4. Duración
de
la
deshidratación.
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12. Cronograma
de
trabajo
(Freeze
subs<tu<on)
1. Lavar
especímenes
y
enfriar
a
+1ºC
-­‐
+5ºC.
2. Pre-­‐enfriar
Acetona
a
-­‐25ºC
3. Sumergir
componente
anatómico
en
acetona
4. Cambiar
acetona.
Por
razones
de
seguridad
se
deben
hacer
los
cambios
de
acetona
a
-­‐25ºC
– Estar
debajo
del
punto
de
inflamación
(-­‐19ºC)
– Presión
de
vapor
a
esta
Tº
es
muy
baja.
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13. Cronograma
de
trabajo
(Freeze
subs<tu<on)
Casos
especiales:
• C e r e b r o :
M a n t e n e r
d e s h i d r a t a c i ó n
p o r
encima
del
98%
para
disminuir
retracción
• I n t e s < n o s :
P a r a
mantener
flexibilidad
se
recomienda
que
estos
permanezcan
lo
menos
posible
en
acetona
.
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14. Duración
de
la
Deshidratación
• Usualmente
acetona
es
cambiada
3
veces
si
la
razón
es
10:1.
• Cerebro
Humano:
Toma
2
semanas
en
el
primer
baño
,
1
semana
en
el
segundo
y
4
días
en
el
tercero.
• Riñones
y
ar<culaciones:
3
–
4
semanas
• Cabezas
e
hígados:
5-­‐6
semanas
• Intes<nos:
5
a
10
días.
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15. Protocolo
Universidad
de
Murcia,
España
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16. Protocolo
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