GRUPO 15-HEMATOCRITO.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BIOMEDICAS Y
BIOTECNOLOGIA
Hematocrito. Velocidad de sedimentación globular,
Plaquetas, Tiempo de coagulación. Tiempo de sangría
Docente: Blgo. Pedro Marcelino Adrianzen Julca.
Estudiantes:
Valles Tuesta Milton
Vasquez Bardales Brihtny Angie Jenifer
Vasquez Bardales Melly Jhoana
Vasquez Chavez Luis Fernando
Vasquez Rodriguez Claudia Paulina
ANÁLISIS CLÍNICO

HEMATOCRITO
Representa la proporción de glóbulos rojos frente a la fracción plasmática en la sangre
Método de microescala
- Una centrífuga para "microhematocrito"
- Una escala para medir los resultados
- Cera blanda o arcilla.
- Lanceta para extracción de sangre capilar
- Tubos capilares con heparina (heparina
seca como anticoagulante) de 75 mm de
longitud y 1,5 mm de diámetro interior.
Si la sangre venosa está
mezclada con bipotásica de
EDTA no será necesario que los
tubos contengan heparina.
Procedimiento
1. Obtener sangre capilar. Recoger la
primera gota de sangre con un filtro de
papel.
2. Aplicar el extremo delgado del tubo capilar con
heparina sobre la gota de sangre. Llenar los 3/4 del
tubo.
Hematocrito. Velocidad de sedimentación globular, Plaquetas, Tiempo de coagulación. Tiempo de sangría

3. Taponar el extremo contrario del
tubo, que no ha estado en contacto
con la sangre
4. Disponer de una gradilla
numerada en que haya colocado
arcilla.
5. Colocar los tubos en
las ranuras del cabezal
de la centrífuga, el
extremo del tubo que se
ha taponado con cera
deberá apuntar hacia
fuera, lejos del centro.
Centrifugar a alta
velocidad.
6. tres capas:
- superior: columna de
plasma (P).
- mitad: capa delgada
de glóbulos blancos
(GB).
- inferior:
columna de
glóbulos rojos
(GR).

Uso de escala
Sostener el tubo frente a la escala,
desplazándolo hasta que la línea marcada
con el número 1,0 tope con el plasma; Leer la
línea que pase al nivel del tope de la columna
de glóbulos rojos
Sin uso de escala
hto
altura de la columna de globulos rojos
𝑎𝑙𝑡𝑢𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑜𝑙𝑢𝑚𝑛𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑎𝑛𝑔𝑟𝑒 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙
(𝑔𝑙𝑜𝑏𝑢𝑙𝑜𝑠 𝑟𝑜𝑗𝑜𝑠 𝑚𝑎𝑠 𝑝𝑙𝑎𝑠𝑚𝑎
Medir en mm la longitud de toda la columna, desde el
tope del plasma hasta la base de la columna
Medir en mm la longitud de la columna de eritrocitos
Valores normales por grupos de edad

VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG) O
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION DE LOS ERITROCITOS
Se basa en el principio que en la sangre, a la que se ha añadido un anticoagulante, los eritrocitos sedimentan hasta
formar una columna compacta en la parte inferior del tubo o recipiente.
La VSG se modifica siempre que existe un
desequilibrio humoral que afecta a las
proteínas plasmáticas, acelerándose
cuando aumenta la proporción de
fibrinógeno -que recubre los hematíes y los
adhiere entre sí formando rouleaux- o la
proporción de globulinas.
Fundamento bioquímico
La concentración del fibrinógeno en el
plasma.
La concentración de globulina alfa y
beta en el plasma.
La diferencia entre la densidad del
plasma y la masa de glóbulos.
Factores

MÉTODO DE WINTROBE
1. Mezcle la muestra de sangre a fondo
pero suavemente mediante al menos
ocho inversiones completas del
recipiente.
2. Muestra de sangre previamente citratada:
Con ayudade una pipeta de transferencia,
añada 1,25 ml de la muestra bien mezclada
al depósito de llenado. (Figura 1).
5. La Dispette debe introducirse completamente
hasta el fondo del depósito; si el nivel de
sangre en la Dispette sobrepasa la marca de
cero en la escala graduada, presione
ligeramente con el pulgar el lateral del tubo (ver
Figura 4) y el nivel de sangre descenderá y se
detendrá exactamente en la marca de cero.
3. Muestra de sangre con EDTA: En un tubo de
ensayo de 12 x 75 mm, añada cuatro partes de
muestra de sangre a una parte de solución
salina normal (NaCl al 0,85 %, 0,145 mol/l).
Transfiera 1,25 ml de esta mezcla al depósito
de llenado azul (Figura 1).
4. De inmediato, introduzca con cuidado la
Dispette en el depósito y compruebe que la
muestra de sangre vaya subiendo por el
interior hasta alcanzar o sobrepasar el nivel
cero (ver Figuras 2 y 3).
6. Coloque el conjunto de Dispette y depósito
en un soporte de VSG correctamente
nivelado y cerciórese de que la Dispette
forme un ángulo de 90°, ±1° y no más, con la
horizontal (es decir, perpendicular, ver
Figuras 5a y 5b). Inicie inmediatamente el
cronómetro.
7. Al final de la hora programada, el resultado
se lee alineando el ojo al nivel hasta el que la
columna de hematíes ha descendido dejando
por encima plasma transparente (ver Figura d
en la página 3).
8. Anote el resultado como VSG = x mm
o velocidad de eritrosedimentación = x
mm

MÉTODO DE WINTROBE
Materiales
• Un tubo de hematocrito
Wintrobe.
• Anticoagulante para 5 mL
de sangre venosa.
• Una jeringa.
• Un cronómetro o reloj.
Procedimiento
6. Esperar durante una hora exacta (usar
su cronómetro o reloj). A continuación,
medir la altura de la columna del plasma
según la graduación en milímetros (rnm)
del tubo a partir del extremo superior
5. Colocar el tubo en la gradilla
de Wintrobe, en posición
completamente vertical.
4. Aspirar la sangre del tubo o
frasco y depositarla en el tubo de
Wintrobe. Evitar la formación de
burbujas en el interior del tubo.
3. Mezclar bien por inversión suave.
2. Colocar 1 mL de sangre
venosa en un tubo o frasco
conteniendo solo 2 mg del
anticoagulante.
1. Preparar el anticoagulante;
mezclando 6 mg de oxalato de
amonio más 4 mg de oxalato de
potasio.
Resultados
♦ Se expresan en VSE…mm de altura.
♦ Los valores normales de Wintrobe son:

MÉTODO DE WESTERGREN
Materiales
• Un tubo de Westergren de 300
mm de longitud y 2,5 mm de
diámetro interior. Graduado de 0 a
200 mm.
• Anticoagulante: citrato trisódico en
proporción de 38g/L (3,8%).
• Una jeringa de 5 mL.
• Un cronómetro o reloj.
1. Depositar en un tubo o frasco 0,4
mL de solución de citrato trisódico.
2. Extraer 2 mL de sangre
venosa.
3. Depositar 1,6 mL de la
sangre venosa en el frasco
que contiene la solución de
citrato trisódico
Procedimiento
4. Agitar con
suavidad. Aspirar
la sangre del
frasco, y
depositarla en el
tubo de
Westergren hasta
la línea 0. Evitar
la formación de
burbujas en el
interior del tubo.
5. Colocar el tubo en la
gradilla de Westergren, en
posición completamente
vertical.
6. Esperar durante 1 hora exacta
(usar su cronómetro o reloj) y
continuación, medir la altura de la
columna del plasma según la
graduación en mm (milímetros)
del tubo a partir de la línea 0, del
extremo superior.

PLAQUETAS
Las plaquetas son células sanguíneas llamadas
trombocitos y ayudan a que la sangre se coagule, por
lo que se detiene el sangrado.
• Aspecto: Fragmentos de células de formas variadas
(triangulares, estrelladas, ovales), con gránulos.
• Tamaño: 2 - 5 µm.
• Concentración: Aproximadamente 300 x 109 por litro de
sangre (300 000 por en número: mm3 de sangre).
• Función: Son importantes para la coagulación de la sangre.
RECUENTO DE PLAQUETAS (Método directo en cámara)
PROPÓSITO: Evaluar la cantidad de plaquetas existentes en la sangre
para lo cual se diluye una muestra de sangre con una sustancia con un
líquido diluyente que hace a las plaquetas más visibles.
MUESTRA REQUERIDA:
Sangre venosa con EDTA o sangre capilar.
MATERIAL Y REACTIVOS:
o Tubos de vidrios 12x75mm
o Cámara Neubauer.
o Laminilla para cámara de Neubauer.
o Tubo capilar.
o Papel filtro
o Caja de Petri.
o Pipeta automática de 10 μL.
o Puntas plásticas.
o Guantes descartables.
o Gradilla para tubos.
o Solución de Gower.
EQUIPO:
o microscopio
o Contómetro manual
o Reloj marcador.

Procedimiento
1. Colocar 2 ml de reactivo de Goweren un
tubo de 12 x75 mm.
2. Mezclar bien la muestra de sangre
varias veces.
3. Colocar exactamente 10 µL de sangre
en el tubo que contiene el diluyente.
4. Mezclar por un mínimo de 3 minutos.
5. Dispensar con pipeta automática o con
capilar la dilución en el borde de la laminilla
de la cámara Neubauer.
6. Colocar la cámara en una caja de petri
sobre un disco del papel filtro húmedo,
para evitar la evaporación, se tapa y se
espera de 10 a 20 min
7. Proceder al conteo de las plaquetas en
el microscopio con el objetivo 40x y poca
luz.
8. Contar toda el área central.
9. Observar las plaquetas como pequeñas
partículas de gran refringencia.
9. Correlacionar el recuento de plaquetas
obtenido en la cámara con las plaquetas
que se observan en el frotis

FORMA DE REPORTE
Las plaquetas contadas en la cámara se multiplican por el factor
correspondiente y se reportan por mm³ de sangre.
Cálculo:
Valores de referencia
150,000-450,000/mm³

ESTIMADO DEL NÚMERO DE PLAQUETAS (Método
indirecto)
PROPÓSITO: Evaluar el número de plaquetas presentes
en la sangre, a través de la observación de un frotis
coloreado, con el fin de comparar con el conteo directo.
MUESTRA REQUERIDA:
Frotis de sangre coloreado con Wright.
EQUIPO:
o Contómetro.
o Microscopio
MATERIAL Y REACTIVOS:
o Papel limpia lentes.
o Aceite de inmersión
Procedimiento
1. Colocar la lámina coloreada en la
platina del microscopio.
2. Observar con el objetivo 40x.
3. Colocar una gota de aceite de
inmersión en la lámina coloreada.
4. Observar con el objetivo 100x.
5. Contar las plaquetas en 10 campos situados entre el cuerpo y la cola del frotis (los
campos deben contener aproximadamente 100 glóbulos rojos).
Forma de reporte

TIEMPO DE COAGULACIÓN
El tiempo de coagulación permite valorar la
integridad de la vía intrínseca de la
coagulación
MÉTODO DE LEE Y WHITE
♦ Se observa la formación del coágulo en tubos de vidrio
en condiciones estandarizadas; esta prueba mide el
mecanismo intrínseco de la coagulación.
Materiales
• Dos tubos de ensayo de 75 x 10
mm marcados para el nivel de 1
ml.
• Un cronómetro.
• Un baño maría a 37 °C.
• Material para la obtención de
sangre venosa.
• Algodón no absorbente.
Principios generale

MÉTODO DE LEE Y WHITE
Procedimiento
1. Obtener sangre venosa por punción.
2. Poner a funcionar el cronómetro tan pronto
como la sangre empiece a entrar en la
jeringa. Extraer 2,5 ml.
3. Llenar con esta sangre cada uno de los dos
tubos de ensayo hasta la marca de 1 mL. Taponar
ambos tubos con algodón no absorbente.
4. Colocar los tubos en baño maría a 37°C.
5. Después de 3 minutos sacar el primer tubo
del baño maría. Inclinar el tubo hasta un plano
de 45° para observar si la sangre se ha
coagulado. Repetir el paso 5 para el segundo
tubo.
6. Si la sangre no ha coagulado, colocar los tubos
otra vez en el baño maría y examinarlos cada 30
segundos hasta que se observe la formación del
coágulo.
Resultados
♦ El resultado definitivo del tiempo de coagulación es
el promedio de los dos resultados.
♦ Ejemplo
• El primer tubo necesitó 5 minutos, el segundo
tubo necesitó 7 minutos.
• El resultado final es el promedio de ambos
resultados:
(5 + 7) / 2 = 6 minutos
♦ Las cifras normales para el método de Lee y White
son de 5 - 12 minutos.

TIEMPO DE SANGRÍA
Es una prueba médica simple que mide el tiempo que tarda en cesar
la hemorragia después de realizar una incisión estandarizada en la
piel, generalmente en el antebrazo o el lóbulo de la oreja, se utiliza
para evaluar la función plaquetaria y la integridad de los vasos
sanguíneos en la hemostasia primaria
MÉTODO LVY
Principios generales
Mediante esta prueba se estudia la adhesión de
las plaquetas al endotelio vascular y su
capacidad para formar el trombo plaquetario
que detiene la hemorragia a nivel de un vaso de
pequeño calibre. Consiste, por tanto, en realizar
una pequeña herida y medir el tiempo que tarde
en dejar de sangrar.
Materiales
♦ Esfingomanómetro o tensiómetro de mercurio.
♦ Lanceta (dispositivo descartable estandarizado para tiempo de
sangría).
♦ Cronómetro.
♦ Papel Wathman Nº 1, cortado en círculos.
♦ Vendita compresiva.
♦ Algodón y alcohol.

MÉTODO LVY
Procedimiento
1. Se realiza una incisión superficial en la piel
del antebrazo y se mide el tiempo que tarda
en detenerse la hemorragia
2. La incisión mide 10 mm de largo y 1 mm de
profundidad. El tiempo desde el cual se realiza la
incisión hasta que la herida para desangrar es
conocido como tiempo de sangría.
3. Cada 30 segundos se utiliza papel filtro para
secar la sangre, sin presionar para evitar la
alteración del examen.
4. Se considera normal un tiempo de sangría de
alrededor de 3 a 11 minutos estimado ya sea por
diferente caso del paciente.

MÉTODO DUKE
Principios generales
Mediante esta prueba se estudia la adhesión de
las plaquetas al endotelio vascular y su
capacidad para formar el trombo plaquetario
que detiene la hemorragia a nivel de un vaso de
pequeño calibre. Consiste, por tanto, en realizar
una pequeña herida y medir el tiempo que tarde
en dejar de sangrar
Materiales
• Una lanceta estéril.
• Alcohol al 70%.
• Filtro de papel o papel secante.
• Un reloj con segundero o un
cronómetro.
Para diagnosticar enfermedades hemorrágicas.
Antes de realizar operaciones quirúrgicas.
Antes de realizar una punción en el hígado o el bazo.
se usa para

Procedimiento
MÉTODO DUKE
1. Limpiar con suavidad el lóbulo de la oreja
utilizando una pieza de algodón con alcohol al
70%. No frotar. Dejar secar.
2. Hacer un pequeño corte de 3 mm de
profundidad con la lanceta, en el borde inferior del
lóbulo de la oreja. Ala vez, poner a funcionar su
reloj con segundero o cronómetro.
3. Dejar que la sangre salga libremente. No exprimir el
lóbulo de la oreja.
4. Recoger la primera gota en una esquina del papel del
filtro o papel secante. No tocar la piel con el papel
5. Esperar 30 segundos y recoger la segunda
gota de sangre en el papel secante, pero un
poco más adelante de la primera gota.
5. Recoger las siguientes gotas de sangre una
cada 30 segundos. Las gotas serán cada vez más
pequeñas. Cuando las gotas dejen de salir y el
papel secante ya no absorba sangre, detener el
funcionamiento del reloj o del cronómetro.
6. Anotar el tiempo transcurrido, según el reloj o
el cronómetro.

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