Practicas de toxicologia

PRACTICAS DE
LABORATORIO DE
TOXICOLOGIA

DOCENTE
BIOQ.CARLOS GARCIA MSC

AÑO LECTIVO
2013-2014

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos GarcíaMsC.
Alumnas:Cynthia Ortega Quezada, Fanny Cabrera Correa
Curso

Paralelo

Grupo #

Practica N° 1
Título de la Práctica:INTOXICACIÓN POR CIANURO
Animal de Experimentación:Cobayo
Vía de Administración:Vía Parenteral

10

 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante una Intoxicación.
2. Determinar el tiempo en que actúa el Cn en el organismo del cobayo para
causarle la muerte.
3. Conocer mediante varias pruebas de identificación la presencia del Cn en el
cobayo.
 MATERIALES


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







Bisturí #11
Equipo de disección
Cinta
Vaso de precipitación
Erlenmeyer
Equipo de destilación
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo
Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro

 Guantes de látex
 Mascarilla
 Mandil

 SUSTANCIAS






Ácido tartárico
NaOH
CnK
Cobayo

 PROCEDIMIENTO

 AQUÍ SE ESCRIBE DESDE EL MOMENTO MISMO EN QUE SE PREPARA AL
COBAYO, REACTIVOS ENTRE OTROS HASTA LLEGAR A LAS REACCIONES
DE RECONOCIMIENTO
 GRÁFICOS(ESCRIBA ABAJO DE CADA GRAFICO LO QUE SIGNIFICA EL
MISMO O QUE ES LO QUE ESTA OCURRIENDO)

EJEMPLO: RASURANDO EL COBAYO ANTES DEL CORTE

 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Reconocimiento en Medios Biológicos
Azul de Prusia

Reacción de Fenolftaleína

Con Ácido Pícrico Positivo

Positivo (azul brillante)

Positivo (no característico – coloración rojo intenso)

(característico – coloración anaranjado)

Con Solución de yodo

Positivo (característico de coloración de Yodo)

 OBSERVACIONES
Instantáneamente de haber sido administrado el Cn por vía Peritoneal, el cobayo presentó
varios signos y síntomas entre ellos: cefalea, náuseas, convulsiones y colapso cardíaco
produciéndole la muerte, esto sucedió en un lapso de 2’20”, debido al grado de toxicidad del
cianuro.
 CONCLUSIONES
El cianuro es un tóxico letalmente mortal el cual lo hemos podido verificar en la práctica
realizada en un animal de experimentación. El mismo que murió rápidamente
Este cianuro se lo puede identificar por medio de reacciones químicas los mismos que nos
darán la coloración específica dándonos a conocer la presencia del tóxico (Cn).
 RECOMENDACIONES
 Asegurarse que el equipo esté bien sellado, de esta forma impedimos que en el
proceso de la destilación los vapores se escapen.
 Al aplicar calor en la destilación no se debe permitir que la muestra llegue a elevarse y
por ende a contaminar el equipo, de esta forma también se echaría a perder la
práctica.
 Constar de mascarilla para no percibir los olores del cianuro.
 CUESTIONARIO

¿Dónde se encuentra el cianuro?
El cianuro está presente en forma natural en algunos alimentos y en ciertas plantas como el
cazabe, Chaya. El cianuro se encuentra en el humo del cigarrillo y en los productos de
combustión de los materiales sintéticos como los plásticos. Los productos de combustión son
las sustancias que se desprenden al quemar un material.
¿Cómo pueden las personas estar expuestas al cianuro?
o Las personas pueden exponerse al cianuro al respirar el aire, beber del agua, comer
los alimentos o tocar la tierra que contiene cianuro.
o El cianuro entra al agua, la tierra o el aire como resultado tanto de procesos naturales
como industriales.
o En el aire, el cianuro está presente principalmente como cianuro de hidrógeno
gaseoso.
o Fumar cigarrillo es probablemente una de las mayores fuentes de exposición al
cianuro entre personas que no trabajan en industrias que utilizan materiales
relacionados con el mismo.

 BIBLIOGRAFÍA O WEBGRAFÍA
http://www.bomba18.cl/manuales1/cianuro.pdf
http://emergency.cdc.gov/agent/cyanide/basics/espanol/facts.asp

 AUTORIA

Ninguna
Machala 31 de Mayo del 2013
FIRMAS

Cynthia Ortega

Fanny Cabrera

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García
Fecha: Machala, 31 de mayo del 2013
Curso: 5to

Grupo #1

Paralelo: “B”

Práctica Nº 4
Título de la Práctica:Intoxicación por Etanol

10


Aprender a determinar la presencia de etanol en un cobayo
Observar los signos que presenta el cobayo después de haber sido
administrado por vía peritoneal el etanol.
Determinar el tiempo máximo en que muere el animal de experimentación.
 MATERIALES


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



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

Bisturí #11
Cinta
Erlenmeyer
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo




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



Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Cobayo (animal de
experimentación)

 SUSTANCIAS

 Ácido tartárico
 NaOH
 Metanol
 PROCEDIMIENTO
Colocar el cobayo en la campana
Administrar por vía peritoneal 20 ml de etanol
Colocar en la campana y observar cómo reacciona el cobayo y cuál es el
tiempo de latencia.
Una vez muerto el cobayo colocarlo en la tabla de disección
Rasurarlo en la zona que se le va a realizar la disección con la ayuda de un
bisturí
Abrir cuidadosamente la piel del animal y absorber la sangre con la ayuda de
una jeringa
Retirar las vísceras y colocarlo en un vaso de precipitación y procedemos a
cortar en pequeños trozos y colocarlo cuidadosamente en un balón aforado.
Añadir acido tartárico y las perlas de vidrio
Preparar 20 ml de hidróxido de sodio al 20% y colocarlo en un Erlenmeyer.
armar el equipo de destilación y colocar el balón y el Erlenmeyer en su
respectivo lugar.
Abrir la llave y comenzar la destilación y con la ayuda de dos mecheros
calentar con ligeros movimientos circulares
Una vez obtenido el destilado realizar las respectivas pruebas de
reconocimiento.

 GRÁFICOS

Tomar20 ml de etanol administrar por vía peritoneal
colocar en la campana yobservar las
reacciones que presenta el cobayo

Colocar las vísceras en un vaso

Con el equipo ya armado
comenzar la destilación

Cortar cuidadosamente

Colocar el cobayo en la tabla de disección

obtención del destilado

Realizamos las respectivas pruebas de reconocimiento

Reacción de SCHIFF

reacción de RIMINI reacción con la fenilhidracina

Reacción con el Ac.Cromotropico

reacción de HEHNER

 OBSERVACIONES
En esta práctica se pudo observar que el animal de experimentación presento
convulsiones, picazón, cefaleas.

Reacción de Schiff

(positivo – color violeta)

Reacción de Rímini

Con la fenilhidracina

(Característico – coloración azul intenso)

( negativo –no presento color rojo grosella)

Con el ácidocromo trópico

(positivo no característico–no dio color rojo)

Reacción de Hehner(negativo – no se dio un color azul-violeta)

 CONCLUSIONES
El Etanol es un toxico puede ser muy toxico en dosis altas el mismo que se puede
comprobar en el animal de experimentación .es por ello que se debe evitar el este tipo
de sustancia.
 RECOMENDACIONES
Que se trabaje con mucha precaución, con los materiales adecuados debido a que se
está trabajando con un toxico
Tener un lugar apropiado donde se pueda eliminar el derecho biológico toxico para
que no exista contaminación.

 CUESTIONARIO

1) Obtención del etanol
El etanol puede producirse de dos formas. La mayor parte de la producción mundial se
obtiene del procesamiento de materia biológica, en particular ciertas plantas con azúcares. El
etanol así producido se conoce como bioetanol, pero por otra parte, también puede
obtenerse etanol mediante la modificación química del etileno. Hoy en día se utilizan varios
tipos de materias primas para la producción
a gran escala de etanol de origen biológico
(bioetanol), tales como las sustancias con
alto contenido de sacarosa (dulces-caña de
azúcar), almidón (maíz) y celulosa (maderacitricos).

2) Aplicaciones del etanol

:

El etanol es un compuesto químico que puede utilizarse como combustible, bien solo, o bien
mezclado en cantidades variadas con gasolina, y su uso se ha extendido principalmente para
reemplazar
el
consumo
de
derivados
del
petróleo.
El combustible resultante de la mezcla de etanol y gasolina se conoce como gasohol o
alconafta. Dos mezclas comunes son E10 y E85, con contenidos de etanol del 10% y 85%,
respectivamente.

http://etanol-ae.blogspot.com/2012/05/usos-y-obtencion.html
http://www.buenastareas.com/ensayos/Usos-Del-Etanol/1704648.html

 AUTORIA
Ninguna
Machala de Junio del 2013

FIRMAS

Cynthia Ortega

Fanny Cabrera

Curso: 5to

Paralelo: “B”

Grupo #1

Práctica Nº 6
Título de la Práctica:INTOXICACIÓN POR ALUMINO

10
Aprender a determinar la presencia de aluminio en un cobayo
administrado por vía peritoneal el aluminio.

 MATERIALES








Bisturí #11
Cinta
cocineta
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo









Papel filtro
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Perlas de vidrio

 SUSTANCIAS
 25 ml HCL
 4g de clorato de potasio
 aluminio
 PROCEDIMIENTO
Administrar 20cc de aluminio al cobayo.
Controlar el tiempo en que el toxico hace efecto hasta su muerte.
Luego colocar al cobayo en la tabla de disección y empezar a rasurar en la parte
donde se va a realizar la disección.
Después abrirlo con el bisturí y proceder a extraer los órganos depositándolos en un
vaso de precipitación.
Procedemos a triturar los órganos y colocar las perlas de vidrio .Procedemos a
aplicar la técnica de cloro naciente; la cual consiste en aplicar a los órganos en el
vaso de precipitación 25 ml de HCL mas 2g dejar en baño maría por media hora
luego retirar agregando más 2g de clorato de potasio .
Procedemos a filtrar en embudo y con papel filtro de poro fino dentro de la campana
de gases.
Con el destilado se procede a realizar las reacciones de reconocimiento.
 GRÁFICOS

Tomar 20ml de sol.de aluminio administrar por vía peritoneal colocar en la campana y observar la
Reacciones que presenta el cobayo

Colocar las vísceras en un vaso Cortar cuidadosamente
de disección

Colocar el cobayo en la tabla

Baño maría de los órganos

destilado obtenido


Carbonato de sodio(positivo)

Reacción con el sulfuro de
Amonio

( Negativo)

Reacción con fosfatos
Alcalinos

(positivo)

Reacción con el hidróxido
de amonio

(positivo)

 OBSERVACIONES
El animal de experimentación no ejerció ningún movimiento y al cabo de 45 min
murió el cobayo.
 CONCLUSIONES
EL aluminio es un sólido que puede ser muy toxico en dosis altas el mismo que se
puede comprobar en el animal de experimentación realizándolo en forma líquida de
solución para que sea administrada al animal de experimentación es por ello que se
debe evitar el este tipo de sustancia.
 RECOMENDACIONES
Manipular correctamente tanto el material físico como biológico para no tener
ningún inconveniente.
Tener precaución al momento de inhalar los vapores cuando se está realizando el
baño maría.

 CUESTIONARIO
2) Que es el aluminio
El aluminio es el elemento metálico más abundante en la Tierra y en la Luna, pero
nunca se encuentra en forma libre en la naturaleza. Se halla ampliamente
distribuido en las plantas y en casi todas las rocas, sobre todo en las ígneas, que
contienen aluminio en forma de minerales de alúmino silicato. Cuando estos
minerales se disuelven, según las condiciones químicas, es posible precipitar el
aluminio en forma de arcillas minerales, hidróxidos de aluminio o ambos. En esas
condiciones se forman las bauxitas que sirven de materia prima fundamental en la
producción de aluminio.
2) EFECTOS DEL ALUMINIO SOBRE LA SALUD

:

La toma de Alumino puede tener lugar a través de la comida, respirarlo y por contacto en la
piel. La toma de concentraciones significantes de Aluminio puede causar un efecto serio en
la salud como:
Daño al sistema nervioso central
Demencia
Pérdida de la memoria
Apatía
Temblores severos
El Aluminio es un riesgo para ciertos ambientes de trabajo, como son las minas, donde se
puede encontrar en el agua. La gente que trabaja en fabricas donde el Aluminio es aplicado
durante el proceso de producción puede aumentar los problemas de pulmón cuando ellos
respiran el polvo de Aluminio. El Aluminio puede causar problemas en los riñones de los
pacientes, cuando entra en el cuerpo durante el proceso de diálisis
 http://www.lenntech.es/periodica/elementos/al.htm
 tplaboratorioquimico.blogspot.com/.../materiales-de-un-laboratoriogene
 AUTORIA
Ninguna
Machala 16 de Agosto del 2013

Fecha: Machala, 14/06/ 2013
Curso: 5to

Grupo #1

Paralelo: “B”

Práctica Nº 3
Título de la Práctica:Intoxicación por metanol

10


Aprender a determinar la presencia de metanol en un cobayo con las
respectivas pruebas de identificación.
administrado por vía peritoneal el etanol.
 MATERIALES










Bisturí #11
Cinta
Erlenmeyer
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo


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

Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Cobayo (animal de
experimentación)

 SUSTANCIAS

 NaOH
 Metanol
 PROCEDIMIENTO

Colocarse la vestimenta adecuada antes de la práctica
Administrar por vía peritoneal 10 ml de metanol
tiempo de latencia.
bisturí
una jeringa
respectivo lugar.
reconocimiento.

 GRÁFICOS

Tomar 10 ml de metanol administrar por vía peritoneal







Reacción de SCHIFF



reacción de HEHNER

 OBSERVACIONES
En esta práctica se pudo observar que el animal de experimentación presento
agitación, respiración lenta, etc., y que finalmente murió al tiempo de1 hora.


Reacción de Schiff

(positivo – color violeta)



(positivo no Característico – coloración azul intenso)

( negativo –no presento color rojo grosella)


(negativo–no dio color rojo)


 CONCLUSIONES
El metanol es un toxico fuerte pero en este caso no se obtuvo los resultados deseados
debido a que esta sustancia tubo un largo tiempo de latencia ya que el metanol no
ejerció rápidamente su toxicidad.
 RECOMENDACIONES
Trabajar con mucha precaución y con los materiales adecuados.
Trabajar con sustancias que no estén contaminadas o caducadas debido que se
prolonga el tiempo de latencia del cobayo.
 CUESTIONARIO

3) Intoxicación aguda del metanol

Intoxicación aguda
La vía más frecuente de absorción en una intoxicación aguda es la digestiva. La dosis letal
varía entre 20 y 100 ml aunque algunos autores informan dosis letales de 240 ml. La muerte
por metanol va siempre precedida de ceguera. Se sabe que incluso 15 ml de metanol han
causado ceguera y el responsable de ello es el formaldehído. De acuerdo a la dosis absorbida,
las formas de presentación son las siguientes:
Forman leve: sensación nauseosa, molestias epigástricas y cefaleas. Si el tiempo de absorción
es de algunas horas se presenta visión borrosa
Forma moderada: se producen vómitos. Hay taquicardia y depresión del sistema nervioso
central. Si se produce el cuadro de embriaguez, es poco intenso y corto en su duración. La
piel está fría y sudorosa, la visión es borrosa y hay taquipnea.

Forma grave: el paciente está en coma y presenta acidosis metabólica. La respiración es
superficial y rápida. El color de la piel y las mucosas es francarnente cianótico. Las dificultades
para respirar pueden llegar al edema agudo de pulmón. La orina y el aliento huelen a
formaldehído. Se presenta edema cerebral; coma y a veces convulsiones. Las intoxicaciones
graves presentan insuficiencia renal aguda.

2) Aplicaciones del metanol

:

El metanol es el principal componente del destilado en seco de la madera. Es uno de los
disolventes más universales y encuentra aplicación, tanto en el campo industrial como en
diversos productos de uso doméstico. Dentro de los productos que lo pueden contener se
encuentra el denominado “alcohol de quemar” constituido por alcoholes metílico y etílico,
solvente en barnices, tintura de zapatos, limpiavidrios, líquido anticongelante, solvente para
lacas etc. Además, los combustibles sólidos envasados también contienen metanol.

http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/metanol.html

 AUTORIA
Ninguna
Machala 21 de Junio del 2013

FIRMAS
Cynthia Ortega

Fanny Cabrera

Curso: 5to

Grupo #1

Paralelo: “B”

Práctica Nº 2
Título de la Práctica:INTOXICACIÓN POR FORMOL (FORMALDEHÍDO)

10


Aprender a determinar la presencia del formaldehido en un cobayo
administrado por vía peritoneal el formaldehido.
 MATERIALES




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
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

Bisturí #11
Cinta
Erlenmeyer
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo




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



Perlas de vidrio
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Cobayo (animal de
experimentación)

 SUSTANCIAS

 NaOH
 Formol
 PROCEDIMIENTO
Administrar por vía peritoneal 10 ml de formol (formaldehido)
tiempo de latencia.
bisturí
una jeringa
respectivo lugar.
reconocimiento.
 GRÁFICOS

Tomar 10ml de formaldehidoadministrar por vía peritoneal









Reacción de SCHIFF



reacción de HEHNER

 OBSERVACIONES
El animal de experimentación presento irritación a los ajos y no ejerció ningún
movimiento y al cabo de 4’ 32” murió el cobayo.


Reacción de Schiff




(característico – color violeta)

(Característico – coloración azul intenso)

(positivo no característico –no presento color rojo grosella)

(negativo – no dio color rojo)


 CONCLUSIONES
El formaldehido es un líquido incoloro que puede ser muy toxico en dosis altas el
mismo que se puede comprobar en el animal de experimentación .es por ello que se
debe evitar el este tipo de sustancia.
 RECOMENDACIONES
Que el Docente proporcione información antes de la práctica y de la sustancia a
analizar con anterioridad.
 CUESTIONARIO

4) Obtención del formaldehido:
El formaldehído ha sido fabricado y continúa siendo fabricado a partir del metanol.La
mayoría del formaldehído comercializado es producido a partir del metanol y el aire.
Como la mezcla aire metanol es inflamable en una concentración de metanol que varía del 6% a
25% o del 9% al 37% en volumen de acuerdo a la presión y temperatura en la que se encuentre
la mezcla.
En la producción de formaldehído a partir del metanol, la materia prima es el gas de síntesis que
se obtiene del metano

CH4 + H2O

CO + 3 H2

3 CH4 + CO2 + 2 H2
2 H2 + CO
CH2OH + ½ O2
CH3OH

2) Aplicaciones del formaldehido

4 CO + 8 H2
CH3OH
HCHO + H2O

HCHO + H

:

Los usos del formaldehído son muy amplios y dependen de los aditivos (p.ej.: úrea,
melanina, fenol, amoníaco). Así se utiliza en diversas concentraciones en adhesivos (p.ej.,
para la fabricación de placas de madera aglomerada), plásticos celulares, curtientes,
explosivos y colorantes, así como en conservantes, solventes, medicamentos, resinas y
fungicidas.

http://www.textoscientificos.com/quimica/formaldehido/obtencion
http://www.ces.iisc.ernet.in/energy/HC270799/HDL/ENV/envsp/Vol328.ht
m
 AUTORIA
Ninguna
Machala 07 de Junio del 2013

FIRMAS
Cynthia Ortega

Fanny Cabrera

Fecha: Machala,30 de agosto del 2013
Curso: 5to

Grupo #1

Paralelo: “B”

Práctica Nº 13
Título de la Práctica:INTOXICACIÓN POR PLATA
Animal de Experimentación:Rata
Vía de Administración:Vía Peritoneal

10
Aprender a determinar la presencia de plata en un animal de experimento.
Observar los signos que presenta la rata después de haber sido administrado
por vía peritoneal la plata .

 MATERIALES
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
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Bisturí #11
Cinta
cocineta
Jeringuilla de 10cc
Tubos de ensayo


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




Papel filtro
Pipetas
Cronómetro
Guantes de látex
Mascarilla
Mandil
Perlas de vidrio

 Recipiente para baño maría
 SUSTANCIAS
 25 ml HCL
 4g de clorato de potasio
 Plata
 PROCEDIMIENTO
Administrar 20cc de plata a l animal de experimentación.
Controlar el tiempo en que el toxico hace efecto hasta su muerte.
Luego colocar al cobayo en la tabla de disección y empezar a rasurar en la parte
donde se va a realizar la disección.
Después abrirlo con el bisturí y proceder a extraer los órganos depositándolos en un
vaso de precipitación.
Procedemos a triturar los órganos y colocar las perlas de vidrio .Procedemos a
aplicar la técnica de cloro naciente; la cual consiste en aplicar a los órganos en el
vaso de precipitación 25 ml de HCL mas 2g dejar en baño maría por media hora
luego retirar agregando más 2g de clorato de potasio .
Procedemos a filtrar en embudo y con papel filtro de poro fino dentro de la campana
de gases.
Con el destilado se procede a realizar las reacciones de reconocimiento.
 GRÁFICOS

Tomar 20ml de sol.de plata

administrar por vía peritoneal colocar en la campana y observar la
Reacciones que presenta la rata

Colocar las vísceras en un vaso Cortar cuidadosamente

Colocar la rata en la
Tabla de disección

Baño maría de los órganos

destilado obtenido


Ácido Clorhídrico (positivo)

Bromuro de potasio

(Negativo)

yoduro de potasio

Reacción con los oxalatos

Reacción con los tío sulfato de sodio

(positivo)

(positivo)

(positivo)

Reacción con el cromato de potasio

Reacción con la fenil tio carbazona

(positivo)

(positivo)

 OBSERVACIONES
Se lo duerme al animal de experimentación con cloroformo primero para ejercer su,
muerte más rápidamente para inyectar el toxico que es la plata.

 CONCLUSIONES
La plata puede ser muy toxico en dosis altas el mismo que se puede comprobar en el
animal de experimentación realizándolo en forma líquida de solución para que sea
administrada al animal de experimentación es por ello que se debe evitar el este tipo
de sustancia, el cual ejerció su tiempo de latencia de 15 min.

 RECOMENDACIONES
Manipular correctamente tanto el material físico como biológico para no tener
ningún inconveniente.
Tener precaución al momento de inhalar los vapores cuando se está realizando el
baño maría.
 CUESTIONARIO
PROPIEDADES GENERALES
La plata es un metal muy dúctil y maleable, algo más duro que el oro, la plata
presenta un brillo blanco metálico susceptible al pulimento. Se mantiene en agua y
aire, si bien su superficie se empaña en presencia de ozono, sulfuro de hidrógeno o
aire con azufre.
Tiene la más alta conductividad eléctrica y conductividad térmica de todos los
metales, pero su mayor precio ha impedido que se utilice de forma masiva en
aplicaciones eléctricas. La plata pura también presenta el color más blanco y el
mayor índice de reflexión.
EFECTOS DE LA PLATA SOBRE LA SALUD:
Las sales solubles de plata, especialmente el nitrato de plata (AgNO3), son letales en
concentraciones de hasta 2 g. Los compuestos de plata pueden ser absorbidos
lentamente por los tejidos corporales, con la consecuente pigmentación azulada o
negruzca de la piel (argiria).
Contacto con los ojos: Puede causar graves daños en la córnea si el líquido se pone
en contacto con los ojos. Contacto con la piel: Puede causar irritación de la piel.
Contacto repetido y prolongado con le piel puede causar dermatitis alérgica.
Peligros de la inhalación: Exposición a altas concentraciones del vapor puede causar
mareos, dificultades para respirar, dolores de cabeza o irritación respiratoria.
Concentraciones extremadamente altas pueden causar somnolencia, espasmos,
confusión, inconsciencia, coma o muerte

 http://www.lenntech.es/periodica/elementos/ag.htm#Efectos%20ambientales%20de%20la
%20Plata

 AUTORIA
Ninguna
Machala 06deseptiembre del 2013
FIRMAS
Cynthia Ortega

Fanny Cabrera

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