Tecnicas comunmente empleadas en el diagnostico serologico de infeccion viral

1. Universidad Nacional Experimental “Francisco de Miranda”
Ministerio del Poder Popular Para la Educación Superior
Aprendizaje Dialógico Interactivo
Microbiología I
Virus de Inmunodeficiencia
Humana
Integrantes:
Colina Alexander CI:21.667.763
Colina Renny CI: 23.680.404
Colmenarez Silvia CI:25.881.086
Sección 12
Lcdo. Jesús Núñez

2. Niveles de Diagnostico de Laboratorio de
Infección por el VIH
• 1era Generación: Enzimoinmunoanálisis - Los EIA de primera
generación utilizaban para la detección de anticuerpos antígenos procedentes de un
lisado vírico de VIH-1.
• 2era Generación: Los EIA de segunda generación empleaban
proteínas recombinantes o péptidos sintéticos que reproducían epítopos del VIH-1/2,
con una mejora sobre todo de la especificidad.

3. Técnicas Recomendadas para cada uno de los
niveles
• 3era Generación: Los EIA de tercera generación utilizan también
proteínas recombinantes o péptidos sintéticos, pero en un formato
denominado sándwich. Este diseño permitió detectar todas las clases de
inmunoglobulinas, no como los anteriores que solo reconocían IgG, lo que
aumentó la sensibilidad al ser la IgM el primer marcador de seroconversión.
• 4ta Generación: Los EIA de cuarta generación, algunos de ellos con la
sustitución de sustratos enzimáticos por fluorescentes (pruebas ELFA,
enzymelinked fluorescent assay). Se caracterizan por la inclusión de
anticuerpos frente al antígeno p24, lo que permite la detección simultánea de
antígeno y anticuerpo.

4. Criterios Epidemiológicos Clínicos y Éticos Legales
para solicitar una prueba Diagnostica de infección por
VIH.
• Criterios epidemiológicos : Las siguientes situaciones
epidemiológicas en los niños indican riesgo de infección por el VIH y ameritan una
prueba de laboratorio para descartarla: u Hijo de madre infectada por el VIH. u Hijo
de padre o madre con riesgo para esta infección. u Víctima de abuso sexual. u
Hermano con infección por VIH comprobada.
• Criterios Clínicos: La presencia de algunas de las siguientes
entidades clínicas indican la necesidad de una prueba de VIH:
 Evidencia de la infección congénita por varios microorganismos.
 Miopatías, hepatitis, cardiomiopatía, nefropatía o citopenias de origen
desconocido.
 Sarcoma de Kaposi.
 Síndrome de desgaste.

5. Criterios Epidemiológicos Clínicos y Éticos Legales
para solicitar una prueba Diagnostica de infección por
VIH.
Criterios Éticos:
 Beneficencia, la búsqueda del bien o beneficio del paciente.
 No maleficencia, la obligación de no hacer daño al paciente.
 Autonomía, respeto a la dignidad y a la autodeterminación de las
personas.
 Justicia, la distribución equitativa de bienes escasos en una
comunidad evitándose todo proceder discriminatorio.

6. Fundamentos de las Técnicas de Laboratorio Utilizadas para el
diagnostico de infección por VIH e interpretación de los
resultados Obtenidos.
Técnicas de Cribado:
 EIA/Elisa
OraSure
Técnica de Confirmación:
LIA / IFI
RIPA
Western Blot
Métodos Directos:
Cultivo vírico o aislamiento viral
Deteccion de antígeno p2
ID
Investigación de ácidos nucleicos
virales -
 RIPA/EIA
Metodos Rapidos:
Dot-Blot
SUDS
Prueba de Orina
OraQuick-Advanced

7. Interpretación de Resultados

8. Interpretación de resultados
La “interpretación” de los resultados es uno de los mayores puntos
conflictivos en la serología VIH, se considera negativo la ausencia total de
reactividad; para valorar la positividad existen numerosos criterios:

9. Indicar la utilidad practica de cada una de las pruebas
que se emplean para el diagnostico serológico por
infección del VIH
Pruebas serológicas:
 Western Blot (WB): Para confirmar y verificar este primer test (EIA/ELISA), se lleva
a cabo esta prueba, que determinará la presencia de anticuerpos mediante el estudio
de una muestra de sangre o saliva. Si el resultado es positivo, se puede confirmar la
presencia del VIH.
 IFI/IFA: Esta prueba es una alternativa a la anterior, por tanto, también sirve para
confirmar que los resultados de la prueba ELISA son fiables. Se detecta la presencia
de anticuerpos en la muestra de células obtenida del paciente y, a diferencia de la
prueba Western Blot, esta puede ser mucho más rápida, sencilla y asequible.
 RIPA: esta técnica está limitada a laboratorios por su alta dificultad de aplicación, no
obstante los resultados obtenidos gozan de una especificidad y sensibilidad mayores
a los anteriores

10. Criterios para la elección de las pruebas diagnosticas y de
seguimiento de la evolución de la infección.
El diagnóstico de la infección por VIH, está basado en una estrategia
de dos pasos. En primer lugar se realiza un análisis de cribado, seguido
de un análisis de confirmación.
Técnicas de Cribado:
 EIA/Elisa
OraSure
Técnica de Confirmación:
LIA / IFI
RIPA
Western Blot

11. Criterios para la elección de las pruebas para seguimiento de la
evolución de la infección.

13. Bibliografía