La cromatografía de adsorción se basa en el proceso de adsorción-desorción de sustancias contenidas en la fase móvil sobre un sólido estacionario, mientras que la cromatografía de reparto consiste en la separación de componentes de una mezcla sobre una fase estacionaria constituida por un soporte sólido cubierto por una película líquida retenida de forma fuerte. El documento también describe experimentos de cromatografía usando proteínas y otras sustancias en columnas de Sephadex para separarlas seg

1. 1. Explique la diferencia entre cromatografía de adsorción y reparto.
Cromatografía de adsorción
Llamada cromatografía gas-solido. Es un fenómeno superficie que se manifiesta por el
aumento de la concentración del soluto en la interfase que rodea al medio estacionario.
Se basa en el proceso adsorción-desorción de sustancia contenidas en la fase móvil sobre
un sólido estacionario.
Cromatografía de reparto
Consiste en la separación de los componentes de una mezcla sobre una fase estacionaria
constituida por un soporte solido inerte cubierto por una película liquida que es
fuertemente retenida por dicha fase. La separación se efectúa por medio de una fase fluida
móvil que es el solvente de desarrollo que es inmiscible con el liquido del soporte
estacionario y que transporta los componentes de la fase estacionaria.

2. 8.Desarrollar el Excel sobre cromatografía.
8.1. Identifica el tipo de ligando que se asocia a la proteína
Proteína: proteína A
ligandos: Ig G, Albumina.
La grafica muestra 2 picos: el primero corresponde a la albumina, la cual se una a la
proteína A por lo tanto sale primero, el pico 2 pertenece a la Ig G, ya que esta es un
ligando especifico para la proteína A, siendo la última en salir con respecto al grupo de
ligandos.

3. 8.2. Analizar una mezcla de los siguientes componentes disueltos en agua y eludidos
en una columna conteniendo Sephadex G-50.
a) predecir los resultados de tu experimento
El orden de salida según su peso molecular es el siguiente: Primero el azul de dextrano,
luego el Citocromo C y al final el FAD (coenzima).
8.3. Se tiene una mezcla de proteínas que deben ser separadas en una columna de
Sephadex G-100.La columna es eluida con 0.1M de buffer Tris, pH 7.0. Las
proteínas son las siguientes:
a) Prediga el orden de salida de las proteínas de la columna de Sephadex.
El orden de salida es el siguiente: primero la miosina, luego le sigue la catalasa, después
la seroalbúmina, seguido de la quimio tripsinógeno y al final la mioglobina.
b) Dibujar la curva de elución hipotética (A280 nm vs número de fracción) de
las proteínas eluídas.

5. Referencias bibliograficas
 SánchezMa. Dolores.Venezuela.2004. Estudiosobre losácidosgrasos libresenqueso
blanco,Universidadde LosAndes.46:2.
 PérezC.Ruth. Estudiode validaciónde laMetodologíaparala determinaciónde VitaminaA
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 Serie AcadémicosCBS.Cromatografíade gasesyde líquidosde altaresoluciónMéxico2000.
pag. 215-231 255-305.