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1. PRACTICA N° 7
PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD ANTIBIÓTICA
ANTIBIOGRAMA

2. ¿QUE ES UN ANTIBIOGRAMA?
• Procedimiento que determina la sensibilidad de los microorganismos
a los antibióticos.
• Se utiliza para determinar que agente antimicrobiano será capaz de
inhibir el crecimiento de las bacterias u hongos causantes de la
infección. Los resultados de esta prueba ayudaran al medico a
establecer el tratamiento mas efectivo frente a la infección

3. CUANDO SE INDICA LA REALIZACIÓN DE UN ANTIBIOGRAMA
• Está indicado cuando se aísla una bacteria responsable de un
proceso infeccioso y no puede predecirse su sensibilidad,
especialmente si se sabe que este tipo de bacteria puede presentar
resistencia a los antimicrobianos.

4. UTILIDADES DEL ANTIBIOGRAMA
1. La instauración de un tratamiento antibiótico correcto al paciente. Es necesario conocer si el
microorganismo responsable de la infección posee mecanismos que le confieran resistencia
frente alg´’un antibiótico para no incluirlo como terapia
2. Es útil en el seguimiento e incluso en la confirmación de tratamientos empíricos.
3. En ocasiones la enfermedad infecciosa resulta grave y se comienza el tratamiento antes de
conocer los datos de sensibilidad de la cepa. El antibiograma tener que confirmar, o en su
caso corregir el tratamiento.
4. Epidemiologia. Es necesario detectar el aumento de los niveles de resistencia en los
aislamientos clínicos para tomar las medidas correctivas.
5. Puede tener utilidad diagnostica porque el perfil de resistencia puede en algún caso orientar
en la identificación bacteriana.

5. CRITERIOS QUE SE SIGUEN PARA SELECCIONAR LOS
ANTIMICROBIANOS
1. Factores microbiológicos: tipo de agente infeccioso y mecanismos de
resistencia descritos previamente en su especie.
2. Factores farmacológicos: tipo de antimicrobiano y parámetros de absorción,
distribución y eliminación.
3. Factores del paciente: tipo de infección
4. Factores de riesgo y estado general de salud. Situación inmunológica e
hipersensibilidad.
5. Experiencia anterior referente a los patrones de resistencia antibiótica mas
habituales para cada especie.

6. MÉTODO DE DIFUSIÓN EN DISCO (KIRBY – BAUER)

7. • MATERIAL
 Cultivos bacterianos.
 Placas con agar Mueller Hinton (profundidad de 3 a 5
mm)
 Discos de sensibilidad antibiótica
 Pinzas.
 Hisopos estériles

8. • PROCEDIMIENTO
• a) Preparación del inoculo:
 Cultivar al microorganismo en tubos
con caldo nutriente e incubar 6-8
horas a 35ºC., hasta obtener una
turbidez equivalente al tubo 0.5 del
nefelómetro de Mac Farland (1.5 x
108 gérmenes).

9. • B) SIEMBRA:
 Se humedece el hisopo estéril en el
tubo con cultivo bacteriano, luego
eliminar el excedente frotando el
hisopo por las paredes del tubo.
 Realizar la siembra por diseminación
en tres direcciones, en placas con agar
Mueller Hinton.
 Dejar secar la placa durante 5 minutos
y colocar luego los discos de
sensibilidad.

10. • c) Colocación de los discos de
antibióticos:
 Con ayuda de una pinza estéril coger
cada uno de los discos de antibióticos y
colocarlos sobre la superficie de la placa
de agar M-H en forma circular
manteniendo una separación de 24 mm
de distancia.
 Presionar cada uno de los discos
ligeramente con ayuda de la pinza.
 Incubar las placas a 35ºC durante 18-24
horas.

11. • d) Lectura e interpretación:
 Observar que alrededor de cada
disco se formará un halo
transparente en caso de que el
antibiótico inhiba el crecimiento
bacteriano.
 Medir el diámetro de cada halo de
inhibición y expresarlo en mm.

12. LECTURA E INTERPRETACIÓN
 La interpretación se realiza de
acuerdo al tamaño del halo de
inhibición y se interpreta como
Sensible cuando el antibiótico
inhibe a la bacteria (halo > de
17 mm);
 Resistente, cuando el
antibiótico no inhibe el
crecimiento de la bacteria (halo
< de 13 mm de diámetro); como
Intermedio podría interpretarse
como “quizás” (halo >13 y < 16
mm).

13. CUESTIONARIO
1.Que es el nefelómetro de Mac Farland y cual es su
composición química?
2.Que factores pueden alterar el resultado de un
antibiograma?
3.Que son las Betalactamasas y Carbapenemasas. Cual es su
importancia clínica ?
4.Cómo se realiza el antibiograma para hongos
levaduriformes?