1. SEP DGETI SEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: AUREA AIDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO: YOLANDA VERGARA CORDERO
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN CLÍNICA
REPORTE DE LA PRÁCTICA: BIOMETRIA HEMATICA
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_
CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: _____________________________________

2. INTRODUCCION
La Biometría Hemática también denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina de
mayor importancia, ya que la información que de aquí se deriva nos proporciona una idea
muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques:
Formula Roja: Determina los parámetros relacionados con el eritrocito.
Formula Blanca: Determina los parámetros relacionados con los leucocitos.
Formula Roja: La determinación de la fórmula roja se compone de los siguientes parámetros:
A. Microhematocrito (Ht): Volumen del paquete globular, después de centrifugación respecto
del volumen sanguíneo total expresado en litros/litros.
El volumen total que ocupan los eritrocitos en un volumen dado de sangre, dividido entre el
volumen de sangre, se denomina fracción de volumen de eritrocitos.
El resto de sangre se compone de casi completamente de plasma, junto con una reducida
cantidad de glóbulos blancos.
B. Hemoglobina (Hb): Es determinada la cantidad de esta proteína expresada en g. /dl.
C. Conteo eritrocítico (Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por microlitros de
sangre.
Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritrocítico son:
1. Cambios que inciden directamente en la circulación de eritrocitos:
 Valor disminuido: Se denomina anemia, los tres parámetros disminuyen aunque este
decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamaño eritrocítico
y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos, por lo que el cálculo e interpretación de
los índices de la formula roja son de ayuda en estos casos.
 Valor aumentado: Denominado policitemia, donde aumente el número de eritrocitos
circulantes denominado policitemia absoluta, también puede darse un aumento transitorio en
los eritrocitos circulantes denominado policitemia relativa (descritos posteriormente).
2. Cambios en el volumen plasmático:
 Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratación.
 Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratación con fluidos administrados
parenteralmente dando una lectura que simula anemia.

3. D. Índices eritrocíticos: Determinados mediante cálculos matemáticos.
1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht x 10 / Eri), Es el tamaño eritrocítico expresado en
fentolitros y se comporta de la siguiente forma:
 Valor aumentado: Se presenta en anemia macrocítica en la que la interferencia en la
síntesis del ADN causa inhibición de la división celular y la resultante es la aparición de
eritrocitos de gran tamaño (como ocurre en los casos de deficiencia de vitamina B12 y ácido
fólico). También aumenta transitoriamente en los casos de reticulocitosis
(anemia regenerativa).
 Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro
2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de hemoglobina
depositada en él eritrocitos expresada en picogramos.
 Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro; la hemoglobina
extracelular también está implícita, aunque el índice asume que toda la hemoglobina es
intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis permanece
normal o ligeramente elevado.
 Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro.
3. Concentración de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la cantidad de
hemoglobina que está relacionada directamente con el eritrocito. Es el índice más preciso, ya
que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes.
 Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro, así mismo puede
incrementarse en los casos de esferocitosis marcada.
 Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro.
E. Morfología eritrocítica: Es determinada en el frotis sanguíneo.
1. Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es debido
a una tendencia de sedimentación en forma paralela, trastorno que se relaciona con el
incremento en la concentración de fibrinógeno y/o el cambio en las concentraciones de
globulinas. En caninos y felinos puede presentarse en condiciones normales en un grado
moderado y es muy marcada en casos de enfermedad inflamatoria y neoplasias. En equinos
sanos es común desapareciendo en casos de anemia.
2. Aglutinación eritrocítica: Cuando se forma un acumulo de eritrocitos, ocurre generalmente
en los casos de anemias inmunomediadas, puede ser observada en las paredes del tubo
colector como pequeños grumos.
3. Anisocitosis: Es la variación en el tamaño de los eritrocitos donde aparecen macrocitos y/o
microcitos a lado de células de tamaño normal, se presenta como respuesta en anemias de
tipo regenerativo.

4.  Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamaño que provocan incremento en el VGM,
(reticulocitos) aparecen generalmente en anemias regenerativas.
 Microcitos: Son pequeños eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en casos
de anemias dadas por deficiencia de hierro y Piridoxina generalmente.
4. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular reducida,
lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, son casi exclusivos de caninos y se
presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y en anemias hemolíticas isoinmunes
así como después de una transfusión. Son removidas rápidamente de la circulación por los
macrófagos esplénicos, debido a su falta de elasticidad y a que no están habilitadas para
traspasar los poros capilares esplénicos.
5. Policromasia: Es una variación en la afinidad eritrocítica hacia el colorante, donde existe un
tono azuloso en las células que contienen residuos de ARN, eritrocitos que generalmente son
grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de Policromasia está asociada con el
incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a una anemia, catalogada como
regenerativa cuando está presente.
6. Hipocromía: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la región central del eritrocito
dado por la disminución en la concentración de hemoglobina dentro de la célula, la causa
más común en la que se presenta es la deficiencia de hierro.
7. Poiquilocitosis: Son células anormales en su forma comúnmente encontradas
en anemias debidas a la pérdida crónica de sangre o a enfermedades caracterizadas por
fragmentación eritrocítica, células que son retiradas prematuramente de la circulación
agudizando el estado anémico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis.
8. Leptocitos: Son células delgadas que cuentan con una membrana celular grande
observadas en enfermedades crónicas debilitantes que producen anemia.
9. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en la
Estomatocitos hereditaria del Alaska malamut y en enfermedades hepáticas.
10. Células en diana: Son células con forma de tiro al blanco que se presentan en anemias de
tipo regenerativo junto con Policromasia, aunque cuando se presentan y no existe Policromasia
se pueden relacionar con enfermedad renal, hepática o esplénica.
11. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente como
consecuencia de un estado anémico en procesos regenerativos, no obstante si son numerosos
pueden indicar hipoesplenismo..
12. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritrocítica producto de la
desnaturalización de la hemoglobina causada por la acción oxidante de ciertas drogas o
químicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritrocítica y se asocian con hemolisis
intravascular.
13. Cuerpos eritrocíticos refráctiles: Se localizan en estados normales en aproximadamente el
10% de los eritrocitos del gato, se incrementan en la presencia de diversas enfermedades, en
muchas ocasiones juegan un papel importante en el desarrollo de la anemia.

5. 14. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberación de células
eritroides inmaduras hacia la circulación sanguínea en los casos de anemia, aunque pueden
ser observadas en casos de enfermedad de la médula ósea donde existe daño en el
parénquima que afecta la barrera capilar, así como en casos de leucemia.
Formula blanca:
Frotis sanguíneo.
La extensión se prepara repartiendo uniformemente una gota pequeña de sangre sobre un
portaobjetos de manera que solo se deposite una capa de células.
Después de teñirlas, las extensiones se sangre se utilizan para.
Determinar las fracciones de número de los tipos de leucocitos.
Para detectar glóbulos rojos anormales
Identificar ciertos parásitos.
Cámara de Neubauer
Es para ambos conteos, glóbulos blancos y glóbulos rojos, también con oxalato de amonio podemos
contar plaquetas y glóbulos blancos al mismo tiempo.
Serie Plaquetaria:
Puede ser por medio del frotis sanguíneo o en Cámara de Neubauer, estas se cuentan para
observar que no haya trombosis o trombocitopenia.
OBJETIVO
El alumno realizara la biometría hemática completa, en 30 minutos correctamente.
MATERIAL, REACTIVOS, APARATOS
Por persona:
1. 1.- tubo de ensaye con anticoagulante
2. Torundas en alcohol
3. Ligadura hueca de 45 cm aprox.
4. Portaobjetos limpios y secos
5. Tubo capilar
6. Tubo de wintrobe
7. Pipeta de Sahli
8. Pipetas toma p/ blancos y rojos

6. 9. Tubos de ensaye de 13x100mm
10. Boquilla con manguera o alargadera
11. Cámara de Neubauer
12. Jeringas o vacutainer para 5ml
Reactivos:
1. Anticoagulante EDTA u Oxalato doble
2. Amonio y Potasio. Alcohol de caña
3. Líquido de Drabkin (cianometahemoglobina)
4. Liquido de Turk y de Hayen
5. Colorante de Wright
6. Buffer para colorante de Wright
Aparatos:
1. Soporte para tubos de wintrobe
2. Centrifuga p/Microhematocrito
3. Aparato p/ lectura de Microhematocrito
4. Espectrofotómetro
METODOLOGÍA
TOMAR MUESTRA, 5MLS DE SANGRE CON ANTICOAGULANTE DE EDTA
LLENADO DE TUBO DE WINTROBE
o Sujetar en un embolo limpio y seco, la cánula de wintrobe. Mover bombeando
unas 3 o 5 veces el embolo y mezclarlo al topo.
o Mezclando la sangre por inversión, quitar el tapón dejarlo sobre la mesa invertido
(no ensuciar la mesa de sangre), introducir la cánula hasta el fondo de tubo con
sangre y
o Aspirar hasta 1ml, sacar la cánula, tapar el tubo de sangre y limpiar el exterior de la
cánula sin tocar la punta, ahora…
o Tomar el tubo de wintrobe etiquetado. Introducir la cánula hasta el fondo del tubo
de wintrobe, a la altura de la vista ir inyectando la sangre y sacando al mismo
tiempo la cánula, de tal manera que cuando haya llegado exactamente a la
marca 0-10, también la cánula este afuera. Si hubiera sobrado sangre en el
embolo, quitar la cánula y vaciar por las paredes el sobrante la sangre. Y el tubo
de wintrobe
o Llevarlo a la gradilla de wintrobe, dejarlo ahí y leer a los 60 minutos exactamente.

7. TUBO CAPILAR MICROHEMATOCRITO
o Tubo capilar lleno a ¾, presione el extremo para evitar que salga la sangre, limpiar
el extremo con papel sanitario, sellar el extremo opuesto a la sangre, con la llama
del mechero girando cuidadosamente para que se funda uniformemente. Llevarlo
a centrifugar por 5 minutos, en la microcentrifuga para luego leer el
Microhematocrito.
o Lectura:
 Hacer coincidir exactamente la fase hematíes-plasma, con la raya y no
mover más el capilar.
 Colocar en la ranura de plástico, orientando el paquete de hematíes hacia
el punto rojo.
 Moviendo el disco de aluminio hacer coincidir la línea graduada, con el
fondo de paquete de glóbulos rojos por un lado y por el otro con la fase
plasma aire, procurando que la línea intercepten esos puntos por el centro.
 Escribir la lectura de Microhematocrito en la escala.
RECUENTO DE ERITROCITOS Y LEUCOCITOS:
o Siempre agitar la sangre que tiene anticoagulante, tantas veces como la utilice
o La sangre en la pipeta de Thoma debe estar exactamente en la marca 0.5, limpiar
el exterior con papel sanitario, sin tocar la punta para evitar que baje la marca. El
diluyente (Hayen para rojos, Turk para blancos) debe quedar exactamente en la
marca /101 rojos, 11 blancos) indicada en la pipeta (no debe faltar ni sobrar),
cubrir los extremos de la pipeta con el pulgar y cordial, agitar por inversión varias
veces por 15 segundos. Llevar al agitador mecánico 3 minutos, desechas las 3
primeras gotas (que es liquido diluyente).
o La cámara (colocarla sobre un fondo
blanco) y el cubre de Neubauer sobre la
cámara (debe estar libre de polvo y sin
grasa), ya lista depositar inmediatamente la
dilución en la cámara de Neubauer (sin que
se derrame o tenga burbujas). Puede ser de
un lado, rojos y al otro blancos.

8. o Colocar la cámara en el
microscopio con cuidado y leer.
Rojos cuadricula central (5
cuadrantes de 4x4 objetivo de
40x; y blancos en las cuadriculas
de los extremos (4 cuadrantes de
4x4 objetivo de 10x).
o Se escribe el número total de cada cuadrante, desde el primero hasta el numero 5
(así observamos la diferencia entre cada cuadricula, ya que no debe haber una
diferencia de más de 10 para que se considere correcta la lectura. Y de la misma
manera se realiza para los blancos, solo que serán los 4 cuadrantes).
o Se suman los 5 resultados, se multiplica el total por 10,000 asi obtendrá el numero
de hematíes por ml de sangre.
o Para blancos se suman los 4 resultados, se multiplica por 50, obteniendo el numero
de leucocitos por ml de sangre.
LECTURA DE CIANOMETAHEMOGLOBINA
o Agitar la sangre con anticoagulante, tales veces que se utilice.
o La sangre en la pipeta de Sahli debe estar exactamente en la marca 0.02mls y
limpiar el exterior con el papel sanitario sin tocar la punta (evitando la variación en
la marca).
o En el tubo de ensaye etiquetado con 5 mls de cianometahemoglobina, depositar
la sangre soplando y con la misma pipeta mezclar, aspirar la misma dilución y
soplar y mezclar (varias veces), haciendo una dilución homogénea, que no quede
sangre en el interior de la pipeta. Dejar en reposo por 0 minutos.
o Leer en el espectrofotómetro a 540nm.

9. FROTIS
o Portaobjetos limpios y secos (bordes uniformes, no roñoso o rotos), se toman por los
lados laterales para evitar las huellas o grasa de las manos, si es necesario lavarlos
con jabón y secarlos con un paño limpio y sin pelusa.
o Portaobjetos sobre un fondo blanco, que tendrá sobre la mesa de trabajo.
o Agitar lenta, uniforme y por inversión el tubo que contiene la sangre, para evitar
sedimentaciones y errores, al quitar el tapón rápidamente colocar…
o Una gota de sangre en el extremo central de cada portaobjetos con rapidez
tomar con una mano (pulgar y cordial) los extremos del portaobjetos y con el
índice presionar el centro.
o Con la otra mano, tomar el otro portaobjetos, sujetándolos con el dedo índice la
punta de un extremo y con el pulgar un poco más arriba del extremo, y con los
demás dedos sujetar el borde lateral, el portaobjeto quedara por debajo de la
mano (según se le ha mostrado). El dedo índice nos marcara en el frotis según lo
necesitemos.
o Colocar en ángulo de 50°
con los portaobjetos (uno
horizontal y con el otro
haciendo ángulo de 50°),
haciendo contacto con la
gota de sangre que, por
capilaridad formara una
línea con el portaobjetos.
Deslizando rápido y con
firmeza para obtener un
frotis en condiciones
favorables: delgado, más
de la mitad, liso (sin
ondulaciones).
o Dejar que se seque
aireándolo (al aire libre), si
tenemos dudas observarlo
al microscopio con objetivo
de 10x o 40x, las células
sanguíneas deben estar
separadas unas de otras.

10. TINCIÓN CON WRIGHT
o Teñirlo con el colorante de Wright, en el soporte
colocar el frotis y cubrirlo totalmente con el
colorante de Wright por 3 min. (ó según se
indique), ahora añadirle el buffer de Wright
unas 6 u 10 gotas inmediatamente, con una
pipeta soplarle (en forma de 8) por 20 o 30
segundos, haciendo una mezcla homogénea
(toma la superficie un brillo metálico
homogéneo) reposar por 6 minutos; transcurrido el tiempo lavar al chorro de la
llave verticalmente (solamente eliminando el exceso de colorante), se deja escurrir
dejando paradito a que se escurra y se limpia la parte opuesta al frotis para que
no tenga interferencia en la observación microscópica.
HEMOGRAMA
o En la punta del frotis teñido colocar una gota
de aceite de inmersión levantarlo para que
resbale recorriendo lo teñido. Ahora colocarlo
en la platina del microscopio y enfocar con
objetivo de 10x, ya enfocado mover el revolver
directamente al objetivo 100x y mover
ligeramente el micrométrico e ir leyendo las
células correspondientes.
o Eritrocitos anormales que localice reportarlo.
o Leucocitos agranulocitos ó
monomorfonucleares como monocitos y
linfocitos.
o Leucocitos granulocitos ó polimorfonucleares:
Neutrófilo basófilo, Neutrófilo Eosinófilo.