Determinación cuantitativa colorimetrica de glicohemoglobina en sangre.

1. SEPDGETISEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO:I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACIONMETABOLICAS
PRACTICA:
DETERMINACION CUANTITATIVA-COLORIMETRICA
DE LA GLICOHEMOGLOBINA EN SANGRE TOTAL
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_

2. CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: _____________________________________
INTRODUCCION
La Glicohemoglobina es formada progresivamente e irreversiblemente en los eritrocitos
durante sus 120 días de vida. La concentración de Glicohemoglobina en los glóbulos rojos
depende del promedio de concentración de glucosa durante un cierto periodo de
semanas y es estable durante la vida de la célula. Por lo tanto la medición de la
Glicohemoglobina, como por ciento de la hemoglobina total, brinda un método de ayuda
para el control del paciente diabético, ya que los niveles de glycohemoglobina se acercan
a los valores normales dependiendo de cómo el diabético responda al tratamiento.
Abraham et. alreportó una excelente correlación entre la concentración de
Glicohemoglobina y el control diabético.
En el método presentado, se mezcla un hemolizado de sangre total con una resina de
intercambio catiónico. La hemoglobina no glicosilada (HbA0) se une a la resina, dejando la
(HbA1) libre para que se pueda remover mediante un separador de resina en el
sobrenadante. El porcentaje de HbA1, se determina midiendo los valores de absorbancia a
415 nm de la fracción HbA1 y de la fracción de Hb total, calculando la proporción de
absorbancias (R) y comparando esta proporción con un estándar de glicohemoglobina al
que se le practicó el mismo procedimiento.
Los resultados son expresados como HbA1 también se puede convertir o reportar como
HbA1c
OBJETIVO
Cuando se determina la Glicohemoglobina en el control del diabético, se está evaluando
el comportamiento de su glicemia durante un período previo mínimo de cuatro semanas, lo
cual da una imagen global del manejo del paciente que no se ve afectada por
fluctuaciones de la glicemia de corto término.
PROCEDIMIENTO
1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante
2. centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.
3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar a 2500
r.p.m. por 3 minutos.
4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya
rotulado, sin desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.
5. Pipetear en tubos.
(Preparación del Hemolizado)
Estándar (S) Muestra(U)
Reactivo de lisis 500µl 500µl
Estándar de
Glicohemoglobina
100µl

3. Muestra (sangre Total) 500µl
6. Medir 500µl del reactivo de lisis, pasarlo a la sangre 100µl - hemolizado
7. Medir 100µl de lisado y vaciar resina, mezclar metiéndoles al tubo el manguillo y
8. Se mezcla por 5 minutos. Se deja reposar por 60 minutos aproximadamente.
9. Pasados los 5 minutos, se introduce un poco más el manguillo
10. Esperar 60 minutos.
CALCULOS
Para cada Estándar y Muestra calcule el Rango (R) de absorbancia de la
Glicohemoglobina y de la absorbancia de la hemoglobina total como sigue:
R = A gly___
A tot
Glicohemoglobina (%) =R (Muestra) x
R (Estándar)
Resina +
100µl de
sangre
Mezclar:
destapar y
mezclar
Manguillo
Mezclar 5
minutos.
Concentración del x
Estándar de
laGlicohemoglobina (%)

4. SEP DGETISEMS
Tuxtepec, OAX.
APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS
PRÁCTICA
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA-COLORIMETRICA
DE GLICOHEMOGLOBINA EN SANGRE TOTAL
NOMBRE DEL PACIENTE:GARDOZO VARGAS EMMANUEL
SEXO:M EDAD:18 AÑOS FECHA:01/04/11 HORA:9:40AM
REPORTE
RESULTADOS
______________________
OBSERVACIONES:
__________________________________________________________________________________________________
________________________
ANALISTA:
AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”
Glicohemoglobina
A1
Valores Glicohemoglobi
naA1C
valores
Rango normal 6.0 – 8.0 % Rango normal 4.2 – 6.2 %
Diabético Diabético
Buen control 7.5 – 8.9 % Buen control 5.5 – 6.8 %
Control medio 9.0 – 10.0 % Control medio 6.8 – 7.6 %
Control pobre Arriba de
10.0 %
Control pobre Arriba de
7.6 %
VALORES DE REFERENCIA