Determinación cuantitativa de alanina aminotransferasa gpt (alt)

1. SEP DGETI SEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO: I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACION METABOLICAS
PRACTICA:
DETERMINACION CUANTITATIVA
DE ALANINA AMINOTRANSFERASA GPT (ALT)
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_
CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: ____________________________________

2. INTRODUCCION
La Alanina aminotransferasa (ALAT), anteriormente conocida como Transaminasa glutámico-
pirúvica (GPT), también llamada alanina transaminasa (ALT), es
una enzima aminotransferasa con gran concentración en el hígado y en menor medida en los
riñones, corazón y músculos.
Cuando hay una lesión de estos órganos la ALT es liberada a la sangre y aparece elevada en los
análisis.
Como es una aminotransferasa más específicamente hepática que la Aspartato
aminotransferasa (AST), aparece más elevada en las enfermedades hepáticas que en otras, por
eso el cociente ALT/AST (o GPT/GOT) será mayor de 1 en ciertas enfermedades hepáticas como
la hepatitis vírica. Al contrario aparece menor de 1 en enfermedades crónicas como
la cirrosis hepática, enfermedad hepática alcohólica, congestión hepática o tumores hepáticos.
PRINCIPIO DEL METODO
La alanina aminotrasferasa (ALT) inicialmente llamada transaminasa glutámico pirúvica (GPT)
cataliza la transferencia reversible de un grupo amino de la alanina al α-cetoglutarato con
formación de glutamato y piruvato. El piruvato producido es reducido a lactato en presencia de
lactato deshidrogenasa (LDH) y NADH:
ALT
L-Alanina + α-Cetoglutarato ---⎯⎯⎯→Glutamato + Piruvato
LDH +
Piruvato + NADH + H + ⎯⎯⎯→ Lactato + NAD
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el medio, determinado
fotométricamente, es proporcional a la concentración catalítica de ALT en la muestra ensayada.

3. SIGNIFICADO CLINICO
La ALT es una enzima intracelular, se encuentra principalmente en las células del hígado y el
riñón.
Su mejor aplicación es en el diagnóstico de las enfermedades del hígado.
Se observan niveles elevados en enfermedades hepáticas como la hepatitis, enfermedades de los
músculos y traumatismos.
Cuando se emplean en conjunción con la AST ayuda en el diagnóstico de infartos de miocardio, ya
que el valor de la ALT se mantiene dentro de los límites normales y aumenta en los niveles de
AST.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
INTERFERENCIAS
Los anticoagulantes de uso corriente como la heparina, EDTA oxalato o fluoruro no afectan los
resultados. La hemólisis interfiere con la determinación.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de la ALT.
Ciertos medicamentos pueden elevar sus valores; como el paracetamol, el alopurinol, la ampicilina,
la azatioprina, la carbamacepina, cefalosporinas, la clorpropamida, el clofibrato, la cloxacilina, la
codeína, la indometacina, la isoniacida, el metroxate, el ácido nalidixico, la notrofurantoina, los
anticonceptivos orales, la fenotiacina, la fenitoina, la procainamida, el propanolol, y la tetraciclina.
METODOLOGIA
1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante
2. Centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.
3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar a 2500 r.p.m.
por 3 minutos.
4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya rotulado, sin
desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.
5. Pipetear en una cubeta

4. RT (ml) 1.0 Como nuestro espectrofotómetro no
lee menos de 100, duplicaremos
cantidades.
2.0
Muestra (µl) 100 200
6. Mezclar, incubar 1 minuto
7. Leer la absorbancia (Ab) inicial de la muestra, poner en marcha el cronometro y leer la
absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
8. Realizar cálculos
REACTIVOS
INTERPRETACION
Color del reactivo:
Color del reactivo con el suero:
CALCULOS
Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto (∆Ab/min).
∆Ab/min x 1750= U/L de ALT

5. Lecturas Minuto
1 1’
2 2’
3 3’
4 4’
CONCLUSION
En esta práctica aprendimos a realizar la prueba de la enzima aminotransferasa, asiendo ajustes
en los valores de RT y muestra, pues como esta descrito anteriormente se duplicaron valores por la
razón de que nuestro espectrofotómetro solo tiene la capacidad de leer la absorbancia a más de
100nm.
También aprendimos como interviene esta enzima en el metabolismo, obteniéndose por un par de
reacciones derivando del ciclo de Krebs.

6. SEP DGETI SEMS
Tuxtepec, OAX.
APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS
PRÁCTICA
DETERMINACION CUANTITATIVA DE ALANINA AMINO TRANFERASA GPT (ALT)
NOMBRE DEL PACIENTE: MENDOZA BLAS ROBERTO ANTONIO
SEXO: M EDAD: 18 AÑOS FECHA: 17/05/11 HORA: 9:40AM
REPORTE
RESULTADOS:
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OBSERVACIONES:
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ANALISTA:
AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”
FIRMA
25ºC 30ºC 37ºC
Hombres Hasta 22
U/L
29 U/L 40 U/L
Mujeres Hasta 18
U/L
22 U/L 32 U/L
VALORES DE REFERENCIA