1. Resumen:
Introducción. Croton draco, planta autóctona de la cuenca del Papaloapan; ha sido utilizada por
las comunidades locales para tratar diversas afecciones, entre ellas las infecciones bacterianas; esto
se debe a los compuestos bioactivos que presenta. En la actualidad, cada vez se incrementan más
la resistencia bacteriana a antibióticos; por lo tanto, es importante continuar la investigación de
estos y otros productos naturales. Objetivo. Determinar la actividad bactericida de fracciones del
extracto crudo de la savia de Croton draco a diferentes concentraciones, frente a diferentes
bacterias de importancia clínica. Materiales y métodos. Cepas empleadas: Salmonella spp,
Escherichia coli, Morganella morganii sensible y resistente, Staphylococcus aureus sensible y
resistente, y Proteus mirabilis; Estas se activaron en medios de cultivo específicos (agar sangre,
EMB, sal y manitol, Mc Conkey). Siguiendo el método de Kirby-Bauer, utilizando discos de papel
filtro con 6 mm de diámetro, con 1000, 700, 500, 250 y 100 μg de cada fracción por duplicado e
incubando a 36 °C durante 24 horas; las pruebas de actividad antimicrobiana se realizaron posterior
a la incubación, midiendo los halos de inhibición alrededor de los discos de papel. Resultados.
Se encontró que la fracción de acetato de etilo (AcOEt) de Croton draco exhibió halos de
inhibición contra Morganella morganii sensible, de 9mm a 18mm y resistente a aminopenicilinas
y cefalosporinas, de 8mm a 15mm; contra Staphylococcus aureus sensible, de 10mm a 20mm y
resistente a la meticilina (MRSA), de 5mm a 18mm. Conclusión. Estos hallazgos resaltan el
potencial de Croton draco como fuente de compuestos antibacterianos, siendo así un prometedor
aliado en la búsqueda de metabolitos que hagan frente a la resistencia bacteriana.
Palabras Clave: Croton draco, resistencia a antibióticos, actividad bactericida.
Introducción
Los productos naturales, son compuestos orgánicos producidos por seres vivos, muchos de los
fármacos más empleamos en la actualidad tienen sus raíces en la naturaleza, ya sea de manera
directa o indirecta. Han sido utilizados durante siglos en la medicina tradicional y la etnobotánica,
que explora la interacción entre el ser humano y las plantas, ha desempeñado un papel crucial en
la identificación y comprensión de estos usos tradicionales (Rivas, 2022). El conocimiento
ancestral se combina con la investigación científica moderna para desentrañar el potencial
terapéutico de estas plantas y sus compuestos bioactivos. Al hablar de productos naturales, se abre
la puerta a un mundo de compuestos diversos (Newmann y Craggm 2020).
Estos son algunos ejemplos:
Alcaloides: Presentes principalmente en plantas, poseen una amplia gama de propiedades
biológicas. Algunos pueden bloquear neuroreceptores y canales iónicos, haciéndolos valiosas
herramientas en la lucha contra infecciones.
2. Lignanos: Contribuyen al crecimiento de las plantas y actúan como antioxidantes en el
metabolismo humano. Con propiedades citotóxicas y antitumorales, los lignanos sugieren su
potencial en el tratamiento de enfermedades oncológicas.
Terpenos: Compuestos formados por unidades de cinco átomos de carbono, conocidos como
isoprenos. Responsables de los aromas y sabores característicos de las plantas, los terpenos
participan en el metabolismo tanto primario como secundario. Su diversidad química los convierte
en candidatos ideales para investigaciones farmacológicas.
Croton draco, perteneciente a la familia Euphorbiaceae, es originario de México y Centroamérica;
este árbol es conocido como "sangre de graco" debido a su característica savia rojiza. En diversas
comunidades de Centro y Sudamérica, esta planta se ha utilizado tradicionalmente como
cicatrizante, antiinflamatorio, antimicrobiano, antiviral (Barrera, Gómez y Castiblanco, 2016.;
Steinman, 2021). Es por esto, que es considerado una posible opción terapéutica en el futuro. Las
primeras referencias escritas sobre estas propiedades datan del siglo XVII, cuando el naturalista
español Cobo observó el uso curativo de este látex por parte de las tribus indígenas en México,
Perú y Ecuador. (Risco, Iglesias y Cañigueral, 2001).
Estudios realizados por Tamariz y col., en el 2003 demuestran que, Croton draco tiene actividad
antibacteriana frente a Helicobacter pylori, la actividad curativa se relaciona con el efecto
cicatrizante del Clorhidrato de Taspina,
Metodología:
Recolección de Savia de Croton draco: la colecta se realizó en el municipio de San Juan Bautista
Tuxtepec, Oaxaca, específicamente en la localidad Camarón Salsipuedes. Se eligieron árboles con
troncos gruesos, ya que pueden producir mayor cantidad de savia. La corteza de los árboles fue
lavada con agua y jabón para eliminar polvo, y se aplicó metanol para desinfectar. Luego, se
realizaron incisiones en la corteza y se colocaron canaletas metálicas para recoger la savia. La
savia recolectada fue transportada al laboratorio de Química y Biotecnología de la Facultad de
Bioanálisis de la Universidad Veracruzana.
Imagen 1. Recolección de la sabia de Croton draco
3. Fraccionamiento del Extracto: El fraccionamiento se basó en el método de Kupchan, donde se
emplean distintos disolventes por gradientes de polaridad: n-hexano, diclorometano, acetato de
etilo y una mezcla metanol-agua1:1. El extracto crudo se disolvió en una mezcla de metanol-agua,
posterior a esto se añadieron los disolventes de menor a mayor polaridad. Luego, se separaron las
fases acuosas de las orgánicas para ser concentradas por evaporación rotatoria. Contando así, con
cuatro fracciones de diferente polaridad.
Obtención de Cepas Bacterianas: Las cepas bacterianas fueron donadas por el Hospital Regional
de Alta Especialidad de Veracruz. Se identificaron utilizando el equipo Vitek 2 Compact y pruebas
bioquímicas específicas en el Cepario de la Facultad de Bioanálisis. Las cepas se conservaron en
agar BHI inclinado.
Imagen 2. Fraccionamiento del extracto
Imagen 3. Identificación de las cepas en equipo VITEK 2 y mediante pruebas bioquímicas.
4. Evaluación de laActividad Bactericida: Se prepararon diferentes medios de cultivo (agar sangre,
EMB, sal y manitol, Mac Conkey y Mueller-Hinton) las cepas obtenidas, fueron activadas en el
medio específico de cada una de ellas. Posteriormente, se siguió el método Kirby-Bauer utilizando
discos de papel filtro con 6 mm de diámetro, en estos fueron depositadas con diferentes
concentraciones de fracciones del extracto crudo en los discos y se incubaron a 36 °C por 24 horas.
Finalmente, se midieron los halos de inhibición.
Resultados
El estudio evaluó la actividad bactericida de fracciones obtenidas de la savia de Croton draco
frente a diversas cepas bacterianas de importancia clínica. Los resultados muestran que la fracción
de acetato de etilo (AcOEt) presentó actividad contra varias de las cepas bacterianas ensayadas,
mientras que no mostró inhibición contra Salmonella spp y Escherichia coli. Estos resultados
tienen implicaciones importantes en la búsqueda de nuevos agentes antimicrobianos naturales.
En general, se observa que la fracción de AcOEt tiene un efecto inhibitorio con halos de inhibición
que varían según la concentración utilizada. Morganella morganii, sensible y resistente, fueron
inhibidas por la fracción de AcOEt a diferentes concentraciones, mostrando una mayor inhibición
en la cepa sensible en comparación con la resistente, esto es debido a los mecanismos involucrados
en la resistencia a antibióticos.
La actividad de la fracción de AcOEt también se observó en cepas de Staphylococcus aureus, una
bacteria que incluye cepas resistentes a la meticilina (MRSA) y cepas sensibles. Se observa que la
fracción de AcOEt tiene un mayor efecto inhibitorio en cepas sensibles de Staphylococcus aureus
en comparación con las resistentes. Esto sugiere que la fracción podría tener un potencial
antimicrobiano que afecta de manera diferente a cepas sensibles y resistentes.
Imagen 4. Ensayo bactericida de las fracciones
5. Tabla 1. Halos de inhibición en mm del extracto de obtenido de la savia de Croton draco frente a bacterias de importancia
clínica.
Bacterias
Concentraciones de la fracción AcOEt
1000 μg 750 μg 500 μg 250 μg 100 μg
Morganella morganii sensible 18 mm 15 mm 13 mm 10 mm 9 mm
Morganella morganii resistente 15 mm 14 mm 13 mm 10 mm 8 mm
Staphylococcus aureus sensible 20 mm 17 mm 15 mm 12 mm 10 mm
Staphylococcus aureus resistente 18 mm 16 mm 14 mm 10 mm 5 mm
Proteus -- -- 15 mm -- --
Imagen 5. Halos de inhibición de las 5 concentraciones de Croton draco sobre (1) Morganella morganii
sensible, (2) Morganella morganii resistente, (3) Staphylococcus aureus resistente a la meticilina, (4)
Staphylococcus aureus sensible a la meticilina, (5) Proteus.
6. Conclusión
Los resultados obtenidos en este estudio son prometedores y sugieren que la fracción de AcOEt de
la savia de Croton draco podría contener compuestos con potencial antimicrobiano frente a las
siguientes bacterias: Morganella morganii sensible y resistente a aminopenicilinas y
cefalosporinas, Staphylococcus aureus sensible y resistente a la meticilina (MRSA) y Proteus
mirabilis. Es importante resaltar que la actividad antimicrobiana de la fracción de AcOEt es
selectiva, ya que no mostró inhibición contra Salmonella spp y Escherichia coli, Esto podría estar
relacionado con diferencias en la composición de la membrana celular o en los mecanismos de
resistencia de estas bacterias; de igual manera, podemos concluir que el espectro bactericida del
extracto es amplio, al mostrar buenos resultados inhibitorios en más de 4 cepas.
Referencias
Barrera, C.A. C., Gómez, D. C., & Castiblanco, F.A. (2016). Importancia medicinal del género
Croton (Euphorbiaceae). Revista Cubana de Plantas Medicinales, 21(2), 234-247.
Newmann, D.J., & Cragg, G.M. (2020). Natural Products as Sources of New Drugs from 1981
to 2019. Journal of Natural Products, 83(3), 770-803. doi: 10.1021/acs.jnatprod.9b01285
Ramón F., Simpson W., Valdés R., Guillermo Á.. bark anatomy in croton draco var. draco
(euphorbiaceae). American Journal of Botany 96(12): 1–13. 2009
Risco, E., Iglesias, J., & Cañigueral, S. (2001). Interés Terapéutico del látex de Croton lechleri.
In Forum De Natura Rerum. París (pp. 20-21).
Rivas Caceres, R. R. (2022). Medicina Tradicional Mexicana. Instituto de Ciencias
Biomédicas.
Steinmann, V. W. (2021). A Synopsis of Croton (Euphorbiaceae) in Michoacán,
Mexico. Taxonomy, 1(4), 395-424.