1. EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS.
ENZIMAS OXIDATIVAS.
IVY ALEXANDRA CASTILLO BORRERO.
ERIKA NATALIA MONTENEGRO.
KATHERIN SANCHEZ.
UNIVERSIDAD COOPERATIVA SEDE VILLAVICENCIO.
FACULTAD DE MEDICINA.
BIOESTRUCTURAS.
2014.

2. MATERIALES Y REACTIVOS.
• MATERIALES Y REACTIVOS.
• MUSLO DE POLLO FRESCO.
• ARENA.
• HIELO.
• CLORURO DE SODIO.
• NORITA (CARBON ACTIVADO).
• AZUL DE METILENO 0.02 %
• CIANURO DE POTACIO.
• AGUA DESTILADA.
• LACTATO 1%
• ACEITE MINERAL.

4. INTRODUCCIÓN.
• En esta practica los extractos enzimáticos y algunas sustancias
de importancia biológica se preparan de los tejidos del animal.
Debido a que las enzimas se deterioran rápidamente después
de la muerte del animal, los órganos requeridos deben ser
extraídos lo mas pronto posible y los extractos de cada uno,
preparados en rápida sucesión.
• Los siguientes tejidos son para ser usados como se indica:
Músculo: Coenzimas y enzimas (deshidrogenasa).

5. PREPARACION DE LA
COENZIMA.

6. 1. SETOMO1GRAMODEMUSLO.

7. 2.secolocoelgramodemusloen8mLdeaguacaliente(paraactivarlasenzimasdel
musloquepuedendestruirlacoenzimadespuésdelamuerte).Calientealbañomaría
por4a5min.

8. 3. luegodecalentarelgramodemuslo,secolocotodoelcontenidoenunmorterojunto
con1gramodearenaysetriturohastaformarunapastafina.

9. 4.sepusolamezclaenuntuboparacentrifugaryluegosepusoelsobrenadanteconla
coenzimaenunbañodehielohastaquefueusado.

10. PREPARACION PARA LA
ENZIMA.

11. 1. SETOMO1GRAMODEMUSLO.

12. 2.secolocoenunmorterojuntocon20mldeNaCl0.9%y1a2gramosdearena,luego
setriturohastaformarunapastafina.

14. 3. secolocolamezclaenuntuboysepusoacentrifugaryluegosetomoel
sobrenadantequecontienelaenzimaláctica.

15. 4. luego desepararelsobrenadante,seañadió½denorita(carbónactivado)para
removercualquierrestodelacoenzimadelapreparaciónenzimática,luegosevolvióa
centrifugar,seguardolasolucióndeenzimapuraenhielo.

17. RELACION ENZIMA
SUSTRATO.

18. • Paraevidenciar larelación enzima,coenzimaysustratose hicieronlassiguientes
soluciones.

19. • seagregaronencadatubodeensayolosanteriorescomponentes,yluegoaceite
mineral(sinhacerburbujas),esteparaestablecercondicionesrelativamente
anaerobias.

20. • Altenerlostubosyaconcadamezcla,proseguimosallevarlosalbañoserológico.

21. • Alsalirdelbañoserológico,sedejaronpor3horaslostubosdeensayoenuna
gradillaparavercualpresentabadecoloración.

22. CONCLUSIONES.
• Obtuvimos un cambio notorio en la mezcla del tubo #2, el azul
de metileno se disipó por la presencia de la enzima, había
suficiente flavoproteina para disipar el azul de metileno, tenia
coenzima que es necesaria para el trabajo en conjunto con la
enzima para las reacciones.
• El que menos disipo el azul de metileno fue el tubo #4 por
falta de la enzima.