1. IVY ALEXANDRA CASTILLO BORRERO
LINA SOFIA POVEDA SANCHEZ
LEIDY MORENO TORRES
HEIDY CABALLERO
U N I V E R S I D A D C O O P E R A T I V A . V I L L A V I C E N C I O
F A C U L T A D D E M E D I C I N A
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EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS Y
PROCEDIMIENTOS.
LABORATORIO ENZIMAS MITOCONDRIALES

2. MATERIALES.
PRACTICA DE ENZIMAS
MITOCONDRIALES.

5. PROCEDIMIENTOS.
PRACTICA DE ENZIMAS
MITOCONDRIALES.

6. 1. ESTRACCION Y PREPARACION DE LAS ENZIMAS Y COENZIMAS.
Tomamos 5 gr de hígado (libre de tejido y sangre)

7.  Se tomo de 2 a 3 gr de arena y se llevo a un mortero junto con los 5 gr
de hígado, se agrego de a 3 porciones de NaCl hasta completar 15 ml.

8. SE MACERO MUY BIEN HASTA
OBTENER UNA MASA SUAVE.

9.  Luego se transfirió la mezcla a un Erlenmeyer que posteriormente fue
llevado a un baño de hielo durante 15 min.

10.  Luego de los 15 min pasamos la mezcla a 2 tubos de centrifuga y se
puso a centrifugar a 1500 rpm por 10 min.

11.  Se tomaron 5 tubos de ensayo, se marcaron así: (B´, B´1, B´2, B´3, B´4)
y se adicionaron los siguientes componentes en cada tubo.
REACTIVO BLANCO 1 2 3 4
NaCl 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0
Succinato de
sodio. 1%
0.0 1.0 1.0 1.0 1.0
Azul de
metileno.
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Malonato de
sodio. 1%
0.0 0.0 0.0 0.0 1.0
37°C X 10 min
Extracto
enzimático.
1.0 0.5 1.0 1.5 1.0
Aceite
mineral.
1.0 1.0 1.0 1.0 1.0

12.  Antes de agregar el extracto enzimático y el aceite mineral llevamos
cada mezcla al baño serológico

13.  Luego de 10 min en el baño serológico se agrego el extracto enzimático,
se agito y se agrego el aceite mineral sin sacar los tubos del baño
serológico.

15.  Se tomaron otros 4 tubos de ensayo y se les adiciono los siguientes
reactivos para hacer el seguimiento de la reacción catalizada por la
citocromo oxidasa.
REACTIVO BLANCO 1 2 3
NaCl 1.0 1.0 1.0 1.0
Succinato de
sodio. 1%
0.0 0.0 0.0 1.0
Cianuro de
potasio 0.05 M
0.0 0.0 1.0 0.0
Agua destilada. 2.0 1.0 0.0 0.0
Extracto
enzimático.
1.0 1.0 1.0 1.0
p-
fenilendiamina
1%
0.0 1.0 1.0 1.0

16.  Luego de adicionar los reactivos en cada tubo se llevaron al baño
serológico siendo revisado cada 5 min.