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V
CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL
PROFESOR: CORDERO AZABACHE, Jorge Eduardo
INTEGRANTES: CODIGO:
 HUAYLLANI HILARIO, Kael U2011116833
 ILARES QUISPE, Henry U2010208193
 LARA NINAHUANCA, Jorge U2010114090
 RIVERA VILLANES, Diana U2010207091
 TICSE HUAMAN, Jesid U2010208687
SECCION: BI1001
GRUPO: I - 1
HUANCAYO – PERU
2013 - I
AISLAMIENTO
DE HONGOS
2 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
ÍNDICE
OBJETIVOS……………………………………………………………………………....3
GENERAL……………………………………………………………....….3
ESPECIFICO………………………………………………………………3
INTRODUCCIÓN………………………………………………………………….……..4
MARCO TEÓRICO................................................................................................5
MATERIALES Y METODOS….……………………………………………………..…9
PROCEDIMIENTOS…..........................................................................................10
RESULTADOS……………………………………………………….……………….…15
DISCUCIÓN DE RESULTADOS…………………………………..………………….18
CONCLUSIONES……………………………………………………..………………...25
BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………..……………..26
ANEXOS…………………………………………………………………..……………..26
3 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
OBJETIVOS
Objetivo general
 Identificar los distintos tipos de hongos que se pueden encontrar en muestras
biológicas y ambientales.
 Aislar y sembrar a estos hongos en placas Petri utilizando correctamente sus
respectivos agares y caldos de cultivo, en distintos métodos de aislamiento.
Objetivo específico
 Conocer las características macro morfológicas de colonias fúngicas de distintos
tipos de hongos ya sea en: color, superficie, borde, consistencia, aspecto y
desarrollo.
 Atender las explicaciones y sugerencias de nuestro docente antes de realizar las
prácticas de laboratorio de microbiología en el aislamiento de hongos.
4 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
INTRODUCCION
Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus
características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser organismos
sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras están vivos, no cesan de
crecer. A los animales, pues, aunque las células de los hongos poseen pared como las
de las plantas, las paredes celulares fúngicas son ricas en quitina, la misma sustancia
que hace duro el esqueleto externo de los insectos.
En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes orígenes en
el árbol de la vida, razón por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayoría,
los más familiares y reconocibles, conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungí o
Eumycota). Otros se ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoo,
como es el caso de los hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan
ciertos mohos acuáticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado
Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscópicas de curiosa
simetría.
En el presente informe se presentara como se da el crecimiento de hongos en los
alimentos, aguas, etc, para lo cual se está detallando cada procedimiento y se está
dando a conocer cada resultado para tener una idea más clara de cómo actúan.
El éxito de la práctica está en la observación de cada detalle en la morfología de los
tipos de hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada experimento, en la
habilidad en el manejo adecuado de cada material y reactivo .Es por eso que para una
correcta realización de trabajo de práctica es necesario familiarizarse con los nombres,
funciones, manejo adecuado del material de laboratorio de microbiología para la
preparación de aislamientos de hongos.
5 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
MARCO TEÓRICO
LOS HONGOS
Los hongos son un grupo extraordinariamente diverso de eucariontes que difieren
mucho por sus características estructurales y sus modos de reproducción. Tienen muy
poco en común, excepto la nutrición heterotrófica obligada, por la ausencia de clorofila.
Sus células están incluidas en paredes celulares por lo menos en alguna de su ciclo
vital, y producen algún tipo de espora, generalmente en gran número.
Existen dos grupos de hongos:
1. Myxomycota o mohos del légamo
incluyen los mohos plasmodiales del légamo
que difieren netamente en su estructura y por
sus medios de reproducción.
Los mohos de légamo celulares son parecidos
a los protozoarios y remedan amibas durante la
mayor parte de sus etapas vitales. No tienen
células flageladas y las esporas no se producen
por divisiones citoplasmáticas, como en otros
hongos, sino por formación de paredes
alrededor de células amiboides individuales.
2. Eumycota u hongos verdaderos hay unas 80000 especies de hongos
verdaderos, coinciden en muchas propiedades con las algas, por lo que se piensa
que proceden de una o varias divisiones de algas. Los hongos verdaderos
comprenden desde levaduras, ciertos mohos, mildéu, royas, tizones y setas.
Algunos hongos verdaderos son unicelulares, pero la mayoría son pluricelulares
formados de filamentos ramificados llamados hifas. La pared celular externa del hongo
puede estar expuesta de quitina, lignina o celulosa.
Toda la masa de hifa ramificada que forma un solo hongo se llama micelio. La presencia
de micelio es una de las características de Eumycophyta. En el moho común del pan
este micelio se presenta de forma presenta en forma de una masa de hebras
entrelazadas sobre la superficie, las que penetran en el interior del pan. En otros
hongos, por ejemplo las setas, gran parte del micelio se encuentra bajo tierra. El
sombrero del hongo que comemos es el cuerpo esporífero, una estructura reductora
especializada que se desarrolla del micelio subterráneo.
Los hongos son saprofitos o parásitos; se encuentran dondequiera que exista substancia
orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y húmedos. Algunos
hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy desfavorables, resisten
6 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en soluciones concentradas de
sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el micelio y establecer
contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que desdoblan las proteínas,
carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios.
En esta forma muchos hongos intervienen en forma importante en ciclos como del
carbono, nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas
muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden
ser utilizados para el ciclo.
CLASES DE EUMYCOTA
 ZYGOMICETES
Es una división de hongos, que incluye alrededor
de mil cincuenta especies. Los hongos
pertenecientes al filo Zygomycota se caracterizan
por formar zigosporas con gruesas paredes, de
origen sexual y esporangiosporas no nadadoras,
de origen asexual. El moho negro del pan
(Rhizopus nigricans), un representante bien
conocido de este grupo del orden Mucorales,
produce masas de hifas sobre pan, fruta y otros
alimentos deteriorados. El cuerpo de este hongo,
compuesto de hifas no septadas, muestra que a
pesar de una pequeña diferenciación celular entre los hongos, las hifas pueden
especializarse por varios propósitos. Los hongos del orden Entomoftorales son parásitos
de las moscas, miniaturas y de otros insectos. Son organismos sapotróficos, se
mantienen de restos de plantas y animales del suelo. Tienen esporangiosporas sencillas
dentro de unos receptáculos; en el interior de cada uno de ellos se desarrollan unas
estructuras que llegan a independizarse y funcionar como conidios. El orden Zoopagales
comprende hongos parásitos de amebas, nematodos y artrópodos.
Los hongos zigospora producen esporas dentro de los esporangios y durante la
reproducción sexual, se forma una zigospora antes de la meiosis y la producción de
esporas. La mayoría de los hongos conocidos como mohos, como los del pan o la fruta,
pertenecen a esta división.
 ASCOMYCETES
Son hongos con micelio tabicado que producen
ascosporas endógenas. Hay unas 64.000 especies. Es
la División (Filo) más grande del Reino Fungí. Pueden
ser unicelulares y talófitos. La reproducción puede ser
de dos tipos: asexual, por esporas exógenas (conidios o
conidioesporas), y sexual, esporas endógenas
(ascospora).Han sido aislados de lugares extremos,
7 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
desde dentro de rocas en la planicie helada de Antártica hasta las profundidades del
mar. En los grupos más evolucionados se forman ascocarpos o cuerpos de fructificación
(esporocarpo).
Existen en ambientes terrestres y acuáticos, en sustratos como la madera, materiales de
queratina (uñas, plumas, cuernos y pelos), estiércol, suelo y alimento, entre otros.
Pueden ser parásitos de animales y el hombre, además de atacar a las plantas. Entre
los más sencillos destacan las levaduras responsables de la fermentación.
 DEUTEROMYCETES
Los hongos imperfectos (fungí imperfecto),
antiguamente llamados deuteromicetes
(Deuteromycetes) o deuteromicotas
(Deuteromicotas), comprenden más de 15000
especies diferentes1 que se clasifican juntas
porque no se conoce en ellas la fase sexual de
reproducción. De ordinario, se trata de hongos de
los filos Ascomycota y Basidiomycota que se
reproducen asexualmente. Son de gran importancia
para el hombre por ser el filo de mayor
patogenicidad humana dentro del Reino Fungí y
tienen una gran peso en el campo de la Biotecnología. Entre sus miembros asimismo se
encuentran los géneros Penicillium2 y Aspergillus, entre otras de gran fama.
El término deuteromicotas antes considerado un filo formal ha caído hoy en desuso dado
que los hongos imperfectos no encajan en la clasificación taxonómica común de los
hongos basada en el concepto de especie biológica o en las características morfológicas
de las estructuras sexuales (porque, como ya se dijo, no se conoce su fase de
reproducción sexual); de ahí deviene la denominación de "imperfectos".
Los deuteromicetes son organismos saprófitos oportunistas que se reproducen
asexualmente por medio de conidios. Cada conidio forma una hifa y el conjunto de hifas
luego forman los micelios constituidos por hifas tabicadas.
 BASIDIOMYCETES
Son una división del reino Fungí que incluye los
hongos que producen basidios con basiodiosporas.
Contiene a las clásicas setas y hongos con
sombrero. Este filo es el más evolucionado y el más
conocido pues comprende numerosos y variados
tipos de hongos. Cuando son de carácter
heterotálico, el micelio primario sufre dicariotización
(somatogamia o espermatización) produciendo
hifas dicarióticas que corresponden al micelio
8 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
secundario. En los hongos de carácter homotálico una basiodiospora produce el micelio
dicariótico. Hay presencia de quitina en las paredes celulares, y aparecen unas
estructuras llamadas fíbulas, muy parecidas a los uncínulos de los ascomicetos.
 CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS
COLOR
· ANVERSO
· REVERSO producción de
pigmento difusible
SUPERFICIE
· LISA
· ACUMINADA
· CRATERIFORME
· RADIADA
· UMBILICADA
· CEREBRIFORME
BORDE
· LISO
· RADIADO
· FESTONEADO
· LOBULADO
CONSISTENCIA
· BLANDA
· FILANTE
· ADHERENTE
· LEÑOSA
ASPECTO
· CREMOSO
· YESOSO
· CEREBRIFORME
· ALGODONOSO
· AFELPADO
· ATERCIOPELADO
DESARROLLO
· POBRE
· REGULAR
· ABUNDANTE
9 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
INSTRUMENTAL DE LABORATORIO Y METODOS
Materiales:
 1 Una balanza ordinaria.
 1 Estufa
 1 rejilla.
 1 probeta graduada.
 4 vasos de precipitado.
 1 Varillas o braguetas de vidrio.
 Pipetas graduadas de 1 ml al 0.01
 Pipetas graduadas de 5 ml al 0.1
 Tubos de prueba 16x150 mm.
 Placas Petri 15x100 mm.
 1 Gradillas.
 1 Espátulas para pesar.
 1 asa de siembra
 Pinzas de punta roma. 1 pro pipeta
 Microscópico
 Espátulas Drigalsky
 Láminas y laminillas
 Hisopos estériles.
 Homogenizador
 Mechero de bunsen
Medios de cultivo:
 Agar licuado.
 Agar papa dextrosa
 Agar extracto de lavadura-malta
 Agar Sabouraud glucosado
 Agar extracto de malta
Reactivos:
 Azul lactofenol
 Agua destilada
10 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
PROCEDIMIENTOS
Procedimiento 1: Aislamiento de Zigomycetes Acuáticos.
 Depositamos aproximadamente 15 ml de agua de charco o acequia en una placa
Petri estéril.
 Con ayuda de una pinza depositamos 2 a 3 carnadas (moscas), previamente
cortadas en trozos pequeños y sometidos a una sumersión rápida en agua
hirviendo, sobre la superficie del agua. Utilizamos un sólo tipo de carnada por
placa.
 Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente.
 Para la observación microscópica recogemos con ayuda del asa de siembra y
pinzas, la carnada que se encuentra recubierta por hifas y depositamos sobre
una gota de azul de Lactofenol en una lámina. Cubrimos con una laminilla.
11 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Procedimiento 2: Aislamiento de Zigomycetes Terrestres.-
 Depositamos un pequeño trozo de estiércol sobre una placa de agar papa
dextrosa.
 Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente.
 Observamos en el microscopio.
Procedimiento 3: Aislamiento de Ascomycetes - Levaduriformes
 Sembramos la bebida alcohólica (vino) en una placa de agar extracto de
lavadura-malta.
 incubamos a temperatura ambiente por 2 a 3 días.
 observamos la formación de colonias elevadas, opacas, grandes y bien definidas.
 Con el asa de siembra, recogimos parte de la colonia y depositarla sobre una gota
de azul de Lactofenol en una lámina y cubrir con una laminilla.
 Observamos en el microscopio.
12 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Procedimiento 4: Aislamiento de Deuteromycetes - Filamentosos
 Con ayuda de una asa de siembra, depositamos una pequeña porción de la
muestra sobre un tubo con agar papa dextrosa.
 Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días.
 hicimos el estudio de las colonias que desarrollan visto en el microscopio.
13 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Procedimiento 5: Aislamiento de Deuteromycetes – Levaduriformes
 Utilizamos un hisopo estéril, bien lavado y esterilizado en autoclave.
 Frotamos la superficie de la piel (de preferencia planta y espacios interdigitales de
los pies) enérgicamente en sentido circular.
 Estriamos el hisopo sobre un placa con agar Sabouraud glucosado más
Cloramfenicol.
 incubamos a temperatura ambiente, sin invertir la placa, durante 48 horas.
 hicimos el estudio de las levaduras aisladas observadas en el microscopio.
14 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Procedimiento 6: Aislamiento de Basidiomycetes – Levaduriformes
 Identificamos los soros cerrados en plantas infectadas.
 Abrimos el soro, con asa de siembra estéril, tomamos una muestra de las esporas
y sembramos en una placa con agar extracto de malta.
 Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días.
 Observamos el desarrollo de colonias y resembrar el micelio en tubos con agar
extracto de malta.
15 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
RESULTADOS
Los integrantes del grupo I - 1 del laboratorio de microbiología general realizamos la
práctica de aislamiento de hongos. De los cuales trabajamos en la identificación de los
hongos sembrados con anticipación y también la identificación de su crecimiento a una
temperatura ambiente. De una forma segura en relación con la bioseguridad de cada
uno de nosotros para poder así lograr una buena y exitosa práctica de laboratorio
(experimentación).
Asimilamos los procedimientos de la práctica que el docente nos daba a conocer todo
esto en relación al aislamiento de hongos, ante toda mucha limpieza en la mesa de
trabajo para poder desarrollar una buena práctica.
Se dio el siguiente reporte de resultados:
CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS
MUESTRAS TIPO DE HONGOS FORMA ELEVACION MARGEN DESARROLLO
BEBIDA
FERMENTADA –
VINO
Ascomycetes
-
Levaduriformes
Circular
(esporangios
-poras)
Pulvinada Entero Abundante
AGUA DE
CHARCO CON
CARNADAS
(MOSCAS)
Zigomycetes
-
Acuáticos
Filamentosa Convexa Lobulada Abundante
ESTIERCOL DE
VACUNO
(Mucoráceos)
Zigomycetes
-
Terrestre
Irregular Umbonada Ondulado Abundante
INODORO DEL
BAÑO
Basidiomycetes Filamentosa Umbonada Lobulada Abundante
DURAZNO
CONTAMINADO
Deuteromycetes Rizoide Elevada Lobulada Abundante
16 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
MUESTRAS OBSERBACIONES
VINO
AGUA DE CHARCO CON MOSCAS
17 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
ESTIERCOL DE VACUNO
MUESTRAS OBSERBACIONES
INODORO DEL BAÑO
DURAZNO CONTAMINADO
18 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
DISCUSION DE RESULTADOS
En la discusión de resultados especificamos y analizamos el aislamiento de hongos, en
medios de cultivo, que nos permitieron reconocer los diferentes tipos de hongos siendo
de muchísima importancia en el laboratorio de microbiología por lo que un control en su
preparación y conservación en uso dando por seguro la exactitud y confiabilidad de
nuestros resultados obtenidos en el proceso de observación en el microscopio.
Por otro lado se encontraron diferentes fuentes bibliográficas de esta práctica de
laboratorio donde se dieron procesos de identificación de los tipos de hongos, donde se
suscitaron el crecimiento y morfología de los hongos, por la cual para la redacción de la
discusión de resultados el grupo Nº I - 1 tuvo que analizar y responder las aspectos
importantes de cada proceso de experimentación.
 REFERENCIA BIBLIOGRAFICA :
- UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS
AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS A SINTOMAS DE
ENFERMEDADES.
DISCUCIÓN.
En este trabajo sus objetivos son diferentes a los nuestros ya que ellos consideraron a
las enfermedades y sus síntomas a diferencia de nosotros que las cuales eran de
identificación de tipos de Hongos y caracterización de las colonias formadas por hongos
aislados y sembrados en placas Petri. Trabajaron únicamente con frutas a diferencia de
nosotros que trabajamos con alimentos en estado de descomposición, agua estancada,
etc.
En lo que es los procedimientos nosotros utilizamos con ayuda de las asas de siembras
aislar directamente de las muestras y sembrarlas en agar. Este informe citado realiza
19 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
algunos pasos más como por decir: cortan los trozos de cascara de naranja una de ellas
infectada y la otra sin infectar.
Luego de ello, realizan una desinfección de ambos trocitos de cascara de naranja con
ayuda de unas gasas cortadas sumergiéndolas en etanol y luego en agua destilada,
para que posteriormente lo sembraran en una placa Petri con PDA acidulado en mismo
tiempo que nosotros de 7 a 8 días a temperatura ambiente (25°C).
En lo que son resultados ellos encontraron lo que es Penisillum en la naranja. En
nuestro informe nosotros encontramos diferentes tipos de hongos de acuerdo a su
habitad. Caracterizamos sus formas de colonias formadas y también observamos en el
microscopio sus partes como son las hifas, etc.
- Los resultados que obtuvimos de nuestro trabajo de laboratorio, expresa a través de
imágenes las propiedades físicas (Características macro morfológicas, etc.) que tiene
cada tipo de hongo, conociendo el origen (hábitat) en donde los podemos encontrar,
nuestras imágenes tomadas y plasmadas en el informe, dicho trabajo hace eco de
las formas que presenta cada hongo, algunos benéficos para el hombre y también
perjudiciales, lo importante del trabajo de laboratorio, no es solo limitarnos a observar
lo que obtuvimos al ver en el microscopio si no interpretar las funciones peculiares
que cada tipo de hongo tiene y genera frente a una situación, a lo largo de la vida los
hongos han sido de ayuda para el hombre en aspectos alimenticios, salud, etc. Por
ello es importante poder experimentar acerca de las propiedades que estas nos
ofrecen y poder darles un uso adecuado para nuestro bien. Los puntos limitantes que
se observaron , fueron las deficiencias que tuvimos al momento observar las
muestras en el microscopio, ya que en algunos medios no lograron prosperar el
crecimiento de nuestro hongos, causante de que no podamos observar todos los
tipos de hongos que inoculamos en los distintos medios de cultivo.
- http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003
El presente link es sobre una revista científica, en la cual se estudiaron hongos
presentes en los libros y el ambiente de una biblioteca del cual se aislaron un total de
409 unidades formadoras de colonias (UFC) en agar con dextrosa y papa y agar
celulosa, localizadas en el ambiente (89.7%) y en los libros (10.3%). El 37.16% de las
UFC se detectaron en el Depósito General, el 9.78% en el Depósito de la Hemeroteca y
20 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
un 34.97% en la Colección de Libros Antiguos. En total se encontraron 17 géneros,
predominando Cladosporium (59.72%), Fusarium (9,31%), Curvularia(6,62%), Aspergillu
s (6,37%) y Chaetomium (5,64%). Todos mostraron capacidad para crecer en agar
celulosa.
De los cuales a través de las muestras tomadas y el método aplicado se llegó a obtener
Los principales géneros causantes de biodeterioro en la biblioteca los cuales
fueron: Aspergillus, Penisillum y Chaetomium. La abundancia de UFC pertenecientes a
los géneros Aspergillus, Cladosporium y Fusarium coloca en riesgo la salud de los
funcionarios de la biblioteca. Las condiciones ambientales de la biblioteca de la
Universidad del Valle necesitan controlarse en todas las salas ajustándolas a las
siguientes condiciones ambientales: temperatura entre 19 y 20 °C; humedad relativa
entre 45 y 55 %. Se debe implementar un programa de mantenimiento y conservación
con periodicidad anual por parte de la Universidad. Además de limpiar periódicamente
estanterías, paredes y aspirar el exterior de los libros, desinfectando los pisos con
productos químicos inocuos para el papel. También es necesario establecer un
programa de monitoreo continuo de las colecciones para detectar focos de
contaminación y realizar labores puntuales de prevención y control. Se recomienda
realizar un trabajo de investigación sobre los diferentes tipos de control empleando
técnicas de combinaciones cruzadas de termonebulización y luz ultravioleta, debido a la
importancia de proteger las colecciones de la biblioteca central de la Universidad.
De la presente revista científica, el punto que nos llama la atención es que, aparte de
perjudicar a los materiales que se encuentran en dicho lugar, son también un riesgo a la
salud de los trabajadores, de allí parte la importancia de poder conocer los medios en los
cuales estos se pueden proliferar, para no vivir a expensas de riesgos de rutina, el
mundo de los hongos es muy amplio, los podemos encontrar en muchos lugares, más
cerca de los que creemos, el convivir con ellos es necesario, el alterar su medio a veces
no es viable, el conocer más sobre estos nos permitirá, poder tomar acciones en las
situaciones que creamos de riesgo, por ello en necesario el análisis o interpretación que
nos muestra cada tipo de hongo, y así poder seguir con la cadena trófica sin alterarla.
- http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf
En el laboratorio de microbiología se aisló cuatro tipos (Zigomycetes, ascomicetes,
deuteromicetes, basidiomicetes) de hongos pertenecientes a Eumycota. Después se
visualizó con el azul de lactofenol.
Se sabe que los hongos intervienen en forma importante en ciclos como del carbono,
nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas muertas y
troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden ser
utilizados para el ciclo, estos son saprofitos o parásitos; que se encuentran dondequiera
que exista substancia orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y
húmedos. Algunos hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy
desfavorables, resisten considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en
soluciones concentradas de sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el
21 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
micelio y establecer contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que
desdoblan las proteínas, carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios.
Por ello en los últimos tiempos se ha realizado investigaciones sobre biorremediación
con hongos, como se es sabido el Cr (VI) es elemento soluble perjudicial para los seres
humanos y animales, ya que son tóxicos para las células, por ello se hace
investigaciones que reduzcan al Cr(VI) a Cr(III) ya que este es insoluble e incluso
participa como elementos traza, para la recucion de este elemento se utilizó la acción de
los hongos Candida sp., Saccharomyces cerevisiae, Lecythophora sp., Candida sp.,
Aureobasidium pullulans y los hongos filamentosos Aspergillus sp., Aspergillus
tubingensis y Penisillum sp. Concluyendo con lo siguiente Los mecanismos fúngicos de
interacción con el cromo promisorios en el contexto de la Biotecnología Ambiental son la
biosorción, la bioacumulación y la biotransformación; de éstos, el menos entendido a
nivel bioquímico es la biotransformación.
Existen escasos estudios en relación con las respuestas a cromo en los hongos, por lo
que se espera que la aplicación de los enfoques de proteómica, genómica y
metabolómica contribuya al entendimiento de los cambios asociados con respuestas a la
toxicidad del ión y/o de importancia para la destoxificación del mismo. A futuro, esta
información puede servir para el desarrollo de nuevas variedades fúngicas con
capacidades mejoradas.
Se requiere contar con un mayor número de estudios en birreactores que conduzcan a
mejoras en la ingeniería de los procesos para el biotratamiento de efluentes industriales
y de procedimientos para la biorremediación de sitios contaminados.
- Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y parásitos:
métodos de laboratorio”, México, 2002
- Teniendo en cuenta el informe referencial mostrado, comparando con puntos
importantes con el nuestro, podemos afirmar de que compartimos las ideas más
importantes en la preparación donde hay algunos procedimientos iguales al de
nosotros. hay procedimientos extensivos donde daremos a conocer a continuación
en lo que nosotros no realizamos y no estaba planteado en el guía de prácticas:
Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES
AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS
OBJETIVOS:
1. Aislar hongos acuáticos de diferentes zonas de agua dulce.
2. Identificar las estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos.
FUENTE: FACULTAD DE BIOLOGÍA- UNIVERSIDAD DE MICHOACANA
DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO- PRACTICAS DE LABORATORIO DE
MICOLOGPIA-“OBSERVACIÓN DE HONGOS ACUÁTICOS”
22 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
MATERIALES:
Microscopio óptico.
Microscopio estereoscópico.
Portaobjetos.
Cubreobjetos.
Agujas de disección.
9 cajas Petri.
3 frascos de vidrio.
Cebos: 15 moscas, 3 exoesqueletos de camarón, 30 fragmentos de uñas.
PROCEDIMIENTO. PARTE 1.
1. Colectar 3 muestras de agua de diferentes cuerpos de agua.
2. Colocar cada muestra de agua en 3 cajas de Petri
3. Colocar las carnadas de la siguiente manera:
4. Dejar las cajas de Petri tapadas durante 8 días y a temperatura ambiente. 18
PROCEDIMIENTO PARTE 2.
5. Revisa cada una de las cajas Petri en el microscopio estereoscópico y busca
estructuras somáticas y reproductoras. Esquematiza las estructuras observadas.
6. En el microscopio óptico observar preparaciones de micelio y esquematizar las
estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos encontrados.
Estructuras que pueden encontrarse: micelio cenocítico, esporangios, zoosporangios,
zoosporas, oogonios, oosporas y anteridios.
RESULTADOS:
23 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Nuestro objetivo es poder identificar el crecimiento de hongos utilizando moscas que
nos permitirán observar el crecimiento, a diferencia del experimento de la otra
universidad utilizamos como cebo solo moscas, pinzas, para comenzar a realizar nuestro
experimento solo utilizamos una caja Petri donde se colocó 15mL de agua de rio, y se
puso a hervir las moscas y cortarlas en tres partes cabeza, tórax y abdomen antes de
colocarla en la caja Petri junto al agua de rio, lo cual la universidad a discutir solo agrego
las moscas en tres tipos de agua en tres cajas Petri sin hacerlas hervir, lo mismo hizo
con los exoesqueletos de los camarones y los fragmentos de uñas y como resultado
después de observar en el microscopio óptico pudimos observar las hifas de los hongos
que crecieron alrededor de las moscas, lo cual no coincidimos con los resultados de
ellos por que encontraron micelio cenocítico, esto tal vez por qué se siguió
procedimientos distintos y aparte que también utilizaron el microscopio estereoscópico.
AISLLAMIENTO DE ZIGOMYCETES TERRESTRES: AISLAMIENTO DE
MUCORÁCEOS
Al observar la muestra después de haber seguido sigilosamente lo especificado en la hoja de laboratorio
notamos que la muestra de estiércol vacuno formo colonias de hogos las culas se notan a simple vista
como si fueran gránulos que sobre salen de la muestra después del tiempo que especifico la práctica y la
correctaposicióndecadapedacitodeestiércolenlacajaPetri.
Nos preguntamosel por qué se da elorigen de estosmicroorganismo ylas causas que lo producen ycasi
la mayoría del equipo considera que se debe a la interacción de estos microorganismos y el agar papa
dextrosa así dando como resultado a que se produzca esa formación y también al ambiente al cual
sometimos a las bacterias en si esto ocurre gracias a la intervención de diversos factores como físicos y
ambientales.
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
24 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Consideramos también que el crecimiento de las colonias alrededor del estiércol también se a la
putrefaccióndelestiércolyaqueestotalmenteasquerosos,perodealgunamaneraestetambiéncontribuye
comoabonoparalafertilidaddelsuelo.
Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES
LEVADURIFORMES
Al observar nuestra muestra después de haber realizado el experimento siguiendo todos
los pasos sin equivocarnos, notamos que durante la elaboración de la práctica teníamos
que esperar que la parte solida de la chicha de jora se encuentre en la base del vaso de
precipitación, porque lo que nos importaba estriar es la parte solida de la chicha de jora,
después del estriado pudimos observar el crecimiento de colonias muy pequeñas de
hongos, durante la realización de la práctica no hubo ninguna dificultad ya que solo era
estriar la muestra de la chicha de jora, y después ponerlo en el horno a una temperatura
adecuada para el crecimiento de los hongos, que es lo que se esperaba y se logró el
propósito de poder observar la colonia de hongos formados en la caja Petri con el agar
de extracto de levadura.
Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES
FILAMENTOSOS
Durante el desarrollo dela práctica de laboratorio de aislamiento de hongos, para poder
seguir los procedimientos de la práctica teníamos que tener 5muestra de frutas,
vegetales, etc., que estas deberían estas malogradas, con hongos si era posible la
dificultad que tuvimos fue el de poseer solo dos cebos malogrados totalmente el resto
solo está un poco malogrado lo que tuvimos mayor crecimiento de mohos fue el del
durazno y de la zanahoria ya que esto se debe que se pudo introducir de mejor forma en
los tubos de ensayo que contenían agar papa dextrosa la cual es la más utilizada para
para el cultivo de hongos, y para el crecimiento de estos mohos, la dificultad que se tuvo
es el no poder introducir con la asa de siembra correctamente en la parte media del
agar, para tener un mejor crecimiento, pero si se logró el crecimiento de mohos en todos
los tubos (zanahoria, durazno, manzana, tomate y limón).
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
25 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
LEVADURIFORMES
Con unos hisopos esterilizados se prepararon las muestras necesarias para estriar, en
este caso se preparó la frotación del todo el tórax y la parte axilar, y otro fue solo la
palma de la mano, lo cual después estriamos en dos cajas Petri respectivamente las
cuales contenían agar sabouraud glucosado que es utilizado para el aislamiento,
identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos, lo cual nos permitió
observar el crecimiento de mohos delas manos y del tórax, pero se pudo observar que
los mohos de las manos formaban grandes colonias de mohos, esto debido que antes
que se frote la mano nuestra compañera no se lavó la mano y tal vez estaba más sucio
de lo común, mientras que en el tórax solo se vio pequeñas colonias de mohos.
Se observaron las características de los Levaduriformes que habían contaminado a
cultivos como es la flora de la piel. Así mismo, se realizaron preparaciones para
observar sus características microscópicas, que no se lograron observar muy
claramente.
Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES
En el laboratorio el docente lo que pidió fue gongos comestibles, pero lo que utilizamos
fue hongos del campo lo cual nos facilitó el trabajo ya que era mejor cortarla y poder
echar las esporas a la caja Petri con agar de extracto de malata, donde se observó el
crecimiento de hongos, es decir colonias no tan pequeñas, pero si se formó bastantes
colonias, lo cual nos indica que se llegó al resultado esperado, lo que nos dificultamos
un poco fue el corte longitudinal que se le tenía que hacer al hongo, pero aparte de eso
todo el experimento nos salió bien y obtuvimos los resultados esperados.
CONCLUSIONES
 Logramos identificar algunos hongos como son los geofílicos, acuáticos,
zoofílicos, fitofilicos o antropofílicos, según su habitad.
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE
CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA-
“AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
26 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
 Se logró aislar a los hongos de las muestras y sembrarlas en placas con cultivos
diferentes para que puedan desarrollarse.
 Pasado una semana de haber sembrado correctamente nuestras muestras de
hongos en placas, observamos a las colonias que se formaron en las placas,
caracterizándolas en sus diferentes aspectos. Esto nos ayudó a conocer a las
diferentes: coloraciones, aspectos y consistencia que tienen los hongos,
relacionados con el origen de sus muestras biológicas y ambientales.
 Con ayuda de asas de siembras logramos obtener pequeñísimas muestras de
hongos y posteriormente adicionándole una gota de azul de lacto fenol a casa
muestra que pudimos observarlas correctamente.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. “MICROBIOLOGIA AMBIENTAL”, ATLAS RONAL
2. Tortora Gerald J., Funke BerdellR., Case Christine L., “Introducción a la Microbiología”,
Editorial Medica Panamericana, 9° Edición, Buenos Aires, 2007, Pág. (345 -352)
3. Prescott, Lansing M., Harley, John P., Klein, Donald, “Microbiología”, Editorial McGraw-
Hill, 5° Edición, España, 2004, Pág. 595
4. Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y
parásitos: métodos de laboratorio”, México, 2002
5. UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE
CIENCIAS AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS
A SINTOMAS DE ENFERMEDADES.
6. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003
7. CLAUDE A. VILLEE EDITORIAL Mc Graw Hill pAG 183 – 193
8. http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf
ANEXOS
Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES
27 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS
AISLLAMIENTO DE ZIGOMYCETES TERRESTRES: AISLAMIENTO DE
MUCORÁCEOS
Ponemos a hervir agua junto con
las moscas, después de eso con
ayuda de una pinza cortamos la
mosca en tres parte (cabeza, tórax
y abdomen)
Preparamos una caja Petri con 15
mL de aguade rio, después se le
agrega las moscas partidas para
luego llevarlas a una temperatura
ambiente para observar el
crecimiento de los mohos.
1. Depositamos pequeños trozos
de estiércol en forma de una
cruz en la papa dextrosa.
2. Dejamos incubar una semana
en el horno a una temperatura
adecuada para luego observar
Presencia de mohos
alrededor de una parte de la
mosca.
28 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES
LEVADURIFORMES
1. Se siembra la parte sólida en
una caja Petri con agar
extracto de levadura.
2. Se lleva al horno a una
temperatura adecuada para la
observación del crecimiento de
los mohos.
Se observa la abundante
presencia de mohos casi en
toda la caja Petri.
29 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES
LEVADURIFORMES
Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES
Estriar la frotación del tórax y
axilas en el agar sabouraud
glucosado y llevarlo a incubar una
semana
Estriar la frotación de las manos en el
agar sabouraud glucosado y llevarlo
a incubar una semana
Crecimiento de mohos pero en
colonias pequeñas.
Crecimiento en pequeñas
cantidades de mohos.
Crecimiento grande dela
colonia de mohos en la palca
Petri
30 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL
Sembrar en una placa Petri con agar
extracto de malta las esporas del hongo y
luego llevarlo a incubar una semana para
luego observar.
Crecimiento de colonias
de mohos

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Informe nº 9 aislamiento de hongos - grupo nº i - 1

  • 1. V CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL PROFESOR: CORDERO AZABACHE, Jorge Eduardo INTEGRANTES: CODIGO:  HUAYLLANI HILARIO, Kael U2011116833  ILARES QUISPE, Henry U2010208193  LARA NINAHUANCA, Jorge U2010114090  RIVERA VILLANES, Diana U2010207091  TICSE HUAMAN, Jesid U2010208687 SECCION: BI1001 GRUPO: I - 1 HUANCAYO – PERU 2013 - I AISLAMIENTO DE HONGOS
  • 2. 2 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL ÍNDICE OBJETIVOS……………………………………………………………………………....3 GENERAL……………………………………………………………....….3 ESPECIFICO………………………………………………………………3 INTRODUCCIÓN………………………………………………………………….……..4 MARCO TEÓRICO................................................................................................5 MATERIALES Y METODOS….……………………………………………………..…9 PROCEDIMIENTOS…..........................................................................................10 RESULTADOS……………………………………………………….……………….…15 DISCUCIÓN DE RESULTADOS…………………………………..………………….18 CONCLUSIONES……………………………………………………..………………...25 BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………..……………..26 ANEXOS…………………………………………………………………..……………..26
  • 3. 3 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL OBJETIVOS Objetivo general  Identificar los distintos tipos de hongos que se pueden encontrar en muestras biológicas y ambientales.  Aislar y sembrar a estos hongos en placas Petri utilizando correctamente sus respectivos agares y caldos de cultivo, en distintos métodos de aislamiento. Objetivo específico  Conocer las características macro morfológicas de colonias fúngicas de distintos tipos de hongos ya sea en: color, superficie, borde, consistencia, aspecto y desarrollo.  Atender las explicaciones y sugerencias de nuestro docente antes de realizar las prácticas de laboratorio de microbiología en el aislamiento de hongos.
  • 4. 4 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL INTRODUCCION Los hongos no son plantas ni animales, aunque se parezcan en algunas de sus características tanto a las unas como a los otros. A las plantas, por ser organismos sedentarios que se encuentran fijos a un sustrato y, mientras están vivos, no cesan de crecer. A los animales, pues, aunque las células de los hongos poseen pared como las de las plantas, las paredes celulares fúngicas son ricas en quitina, la misma sustancia que hace duro el esqueleto externo de los insectos. En realidad, los organismos que conocemos como hongos tienen diferentes orígenes en el árbol de la vida, razón por la cual se distribuyen en tres distintos reinos. La mayoría, los más familiares y reconocibles, conforman el reino de los hongos verdaderos (Fungí o Eumycota). Otros se ubican en el mismo reino de las amebas, el llamado Protozoo, como es el caso de los hongos mucilaginosos; y otros más, entre los que se cuentan ciertos mohos acuáticos que parasitan peces, comparten un tercer reino, el denominado Chromista, con las diatomeas, esas particulares algas microscópicas de curiosa simetría. En el presente informe se presentara como se da el crecimiento de hongos en los alimentos, aguas, etc, para lo cual se está detallando cada procedimiento y se está dando a conocer cada resultado para tener una idea más clara de cómo actúan. El éxito de la práctica está en la observación de cada detalle en la morfología de los tipos de hongos, en seguir en orden correcto los pasos de cada experimento, en la habilidad en el manejo adecuado de cada material y reactivo .Es por eso que para una correcta realización de trabajo de práctica es necesario familiarizarse con los nombres, funciones, manejo adecuado del material de laboratorio de microbiología para la preparación de aislamientos de hongos.
  • 5. 5 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL MARCO TEÓRICO LOS HONGOS Los hongos son un grupo extraordinariamente diverso de eucariontes que difieren mucho por sus características estructurales y sus modos de reproducción. Tienen muy poco en común, excepto la nutrición heterotrófica obligada, por la ausencia de clorofila. Sus células están incluidas en paredes celulares por lo menos en alguna de su ciclo vital, y producen algún tipo de espora, generalmente en gran número. Existen dos grupos de hongos: 1. Myxomycota o mohos del légamo incluyen los mohos plasmodiales del légamo que difieren netamente en su estructura y por sus medios de reproducción. Los mohos de légamo celulares son parecidos a los protozoarios y remedan amibas durante la mayor parte de sus etapas vitales. No tienen células flageladas y las esporas no se producen por divisiones citoplasmáticas, como en otros hongos, sino por formación de paredes alrededor de células amiboides individuales. 2. Eumycota u hongos verdaderos hay unas 80000 especies de hongos verdaderos, coinciden en muchas propiedades con las algas, por lo que se piensa que proceden de una o varias divisiones de algas. Los hongos verdaderos comprenden desde levaduras, ciertos mohos, mildéu, royas, tizones y setas. Algunos hongos verdaderos son unicelulares, pero la mayoría son pluricelulares formados de filamentos ramificados llamados hifas. La pared celular externa del hongo puede estar expuesta de quitina, lignina o celulosa. Toda la masa de hifa ramificada que forma un solo hongo se llama micelio. La presencia de micelio es una de las características de Eumycophyta. En el moho común del pan este micelio se presenta de forma presenta en forma de una masa de hebras entrelazadas sobre la superficie, las que penetran en el interior del pan. En otros hongos, por ejemplo las setas, gran parte del micelio se encuentra bajo tierra. El sombrero del hongo que comemos es el cuerpo esporífero, una estructura reductora especializada que se desarrolla del micelio subterráneo. Los hongos son saprofitos o parásitos; se encuentran dondequiera que exista substancia orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y húmedos. Algunos hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy desfavorables, resisten
  • 6. 6 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en soluciones concentradas de sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el micelio y establecer contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que desdoblan las proteínas, carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios. En esta forma muchos hongos intervienen en forma importante en ciclos como del carbono, nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden ser utilizados para el ciclo. CLASES DE EUMYCOTA  ZYGOMICETES Es una división de hongos, que incluye alrededor de mil cincuenta especies. Los hongos pertenecientes al filo Zygomycota se caracterizan por formar zigosporas con gruesas paredes, de origen sexual y esporangiosporas no nadadoras, de origen asexual. El moho negro del pan (Rhizopus nigricans), un representante bien conocido de este grupo del orden Mucorales, produce masas de hifas sobre pan, fruta y otros alimentos deteriorados. El cuerpo de este hongo, compuesto de hifas no septadas, muestra que a pesar de una pequeña diferenciación celular entre los hongos, las hifas pueden especializarse por varios propósitos. Los hongos del orden Entomoftorales son parásitos de las moscas, miniaturas y de otros insectos. Son organismos sapotróficos, se mantienen de restos de plantas y animales del suelo. Tienen esporangiosporas sencillas dentro de unos receptáculos; en el interior de cada uno de ellos se desarrollan unas estructuras que llegan a independizarse y funcionar como conidios. El orden Zoopagales comprende hongos parásitos de amebas, nematodos y artrópodos. Los hongos zigospora producen esporas dentro de los esporangios y durante la reproducción sexual, se forma una zigospora antes de la meiosis y la producción de esporas. La mayoría de los hongos conocidos como mohos, como los del pan o la fruta, pertenecen a esta división.  ASCOMYCETES Son hongos con micelio tabicado que producen ascosporas endógenas. Hay unas 64.000 especies. Es la División (Filo) más grande del Reino Fungí. Pueden ser unicelulares y talófitos. La reproducción puede ser de dos tipos: asexual, por esporas exógenas (conidios o conidioesporas), y sexual, esporas endógenas (ascospora).Han sido aislados de lugares extremos,
  • 7. 7 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL desde dentro de rocas en la planicie helada de Antártica hasta las profundidades del mar. En los grupos más evolucionados se forman ascocarpos o cuerpos de fructificación (esporocarpo). Existen en ambientes terrestres y acuáticos, en sustratos como la madera, materiales de queratina (uñas, plumas, cuernos y pelos), estiércol, suelo y alimento, entre otros. Pueden ser parásitos de animales y el hombre, además de atacar a las plantas. Entre los más sencillos destacan las levaduras responsables de la fermentación.  DEUTEROMYCETES Los hongos imperfectos (fungí imperfecto), antiguamente llamados deuteromicetes (Deuteromycetes) o deuteromicotas (Deuteromicotas), comprenden más de 15000 especies diferentes1 que se clasifican juntas porque no se conoce en ellas la fase sexual de reproducción. De ordinario, se trata de hongos de los filos Ascomycota y Basidiomycota que se reproducen asexualmente. Son de gran importancia para el hombre por ser el filo de mayor patogenicidad humana dentro del Reino Fungí y tienen una gran peso en el campo de la Biotecnología. Entre sus miembros asimismo se encuentran los géneros Penicillium2 y Aspergillus, entre otras de gran fama. El término deuteromicotas antes considerado un filo formal ha caído hoy en desuso dado que los hongos imperfectos no encajan en la clasificación taxonómica común de los hongos basada en el concepto de especie biológica o en las características morfológicas de las estructuras sexuales (porque, como ya se dijo, no se conoce su fase de reproducción sexual); de ahí deviene la denominación de "imperfectos". Los deuteromicetes son organismos saprófitos oportunistas que se reproducen asexualmente por medio de conidios. Cada conidio forma una hifa y el conjunto de hifas luego forman los micelios constituidos por hifas tabicadas.  BASIDIOMYCETES Son una división del reino Fungí que incluye los hongos que producen basidios con basiodiosporas. Contiene a las clásicas setas y hongos con sombrero. Este filo es el más evolucionado y el más conocido pues comprende numerosos y variados tipos de hongos. Cuando son de carácter heterotálico, el micelio primario sufre dicariotización (somatogamia o espermatización) produciendo hifas dicarióticas que corresponden al micelio
  • 8. 8 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL secundario. En los hongos de carácter homotálico una basiodiospora produce el micelio dicariótico. Hay presencia de quitina en las paredes celulares, y aparecen unas estructuras llamadas fíbulas, muy parecidas a los uncínulos de los ascomicetos.  CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS COLOR · ANVERSO · REVERSO producción de pigmento difusible SUPERFICIE · LISA · ACUMINADA · CRATERIFORME · RADIADA · UMBILICADA · CEREBRIFORME BORDE · LISO · RADIADO · FESTONEADO · LOBULADO CONSISTENCIA · BLANDA · FILANTE · ADHERENTE · LEÑOSA ASPECTO · CREMOSO · YESOSO · CEREBRIFORME · ALGODONOSO · AFELPADO · ATERCIOPELADO DESARROLLO · POBRE · REGULAR · ABUNDANTE
  • 9. 9 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL INSTRUMENTAL DE LABORATORIO Y METODOS Materiales:  1 Una balanza ordinaria.  1 Estufa  1 rejilla.  1 probeta graduada.  4 vasos de precipitado.  1 Varillas o braguetas de vidrio.  Pipetas graduadas de 1 ml al 0.01  Pipetas graduadas de 5 ml al 0.1  Tubos de prueba 16x150 mm.  Placas Petri 15x100 mm.  1 Gradillas.  1 Espátulas para pesar.  1 asa de siembra  Pinzas de punta roma. 1 pro pipeta  Microscópico  Espátulas Drigalsky  Láminas y laminillas  Hisopos estériles.  Homogenizador  Mechero de bunsen Medios de cultivo:  Agar licuado.  Agar papa dextrosa  Agar extracto de lavadura-malta  Agar Sabouraud glucosado  Agar extracto de malta Reactivos:  Azul lactofenol  Agua destilada
  • 10. 10 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL PROCEDIMIENTOS Procedimiento 1: Aislamiento de Zigomycetes Acuáticos.  Depositamos aproximadamente 15 ml de agua de charco o acequia en una placa Petri estéril.  Con ayuda de una pinza depositamos 2 a 3 carnadas (moscas), previamente cortadas en trozos pequeños y sometidos a una sumersión rápida en agua hirviendo, sobre la superficie del agua. Utilizamos un sólo tipo de carnada por placa.  Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente.  Para la observación microscópica recogemos con ayuda del asa de siembra y pinzas, la carnada que se encuentra recubierta por hifas y depositamos sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina. Cubrimos con una laminilla.
  • 11. 11 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Procedimiento 2: Aislamiento de Zigomycetes Terrestres.-  Depositamos un pequeño trozo de estiércol sobre una placa de agar papa dextrosa.  Dejamos en incubación por 3 a 4 días, a temperatura ambiente.  Observamos en el microscopio. Procedimiento 3: Aislamiento de Ascomycetes - Levaduriformes  Sembramos la bebida alcohólica (vino) en una placa de agar extracto de lavadura-malta.  incubamos a temperatura ambiente por 2 a 3 días.  observamos la formación de colonias elevadas, opacas, grandes y bien definidas.  Con el asa de siembra, recogimos parte de la colonia y depositarla sobre una gota de azul de Lactofenol en una lámina y cubrir con una laminilla.  Observamos en el microscopio.
  • 12. 12 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Procedimiento 4: Aislamiento de Deuteromycetes - Filamentosos  Con ayuda de una asa de siembra, depositamos una pequeña porción de la muestra sobre un tubo con agar papa dextrosa.  Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días.  hicimos el estudio de las colonias que desarrollan visto en el microscopio.
  • 13. 13 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Procedimiento 5: Aislamiento de Deuteromycetes – Levaduriformes  Utilizamos un hisopo estéril, bien lavado y esterilizado en autoclave.  Frotamos la superficie de la piel (de preferencia planta y espacios interdigitales de los pies) enérgicamente en sentido circular.  Estriamos el hisopo sobre un placa con agar Sabouraud glucosado más Cloramfenicol.  incubamos a temperatura ambiente, sin invertir la placa, durante 48 horas.  hicimos el estudio de las levaduras aisladas observadas en el microscopio.
  • 14. 14 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Procedimiento 6: Aislamiento de Basidiomycetes – Levaduriformes  Identificamos los soros cerrados en plantas infectadas.  Abrimos el soro, con asa de siembra estéril, tomamos una muestra de las esporas y sembramos en una placa con agar extracto de malta.  Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 4 días.  Observamos el desarrollo de colonias y resembrar el micelio en tubos con agar extracto de malta.
  • 15. 15 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL RESULTADOS Los integrantes del grupo I - 1 del laboratorio de microbiología general realizamos la práctica de aislamiento de hongos. De los cuales trabajamos en la identificación de los hongos sembrados con anticipación y también la identificación de su crecimiento a una temperatura ambiente. De una forma segura en relación con la bioseguridad de cada uno de nosotros para poder así lograr una buena y exitosa práctica de laboratorio (experimentación). Asimilamos los procedimientos de la práctica que el docente nos daba a conocer todo esto en relación al aislamiento de hongos, ante toda mucha limpieza en la mesa de trabajo para poder desarrollar una buena práctica. Se dio el siguiente reporte de resultados: CARACTERÍSTICAS MACROMORFOLOGICAS DE COLONIAS FÚNGICAS MUESTRAS TIPO DE HONGOS FORMA ELEVACION MARGEN DESARROLLO BEBIDA FERMENTADA – VINO Ascomycetes - Levaduriformes Circular (esporangios -poras) Pulvinada Entero Abundante AGUA DE CHARCO CON CARNADAS (MOSCAS) Zigomycetes - Acuáticos Filamentosa Convexa Lobulada Abundante ESTIERCOL DE VACUNO (Mucoráceos) Zigomycetes - Terrestre Irregular Umbonada Ondulado Abundante INODORO DEL BAÑO Basidiomycetes Filamentosa Umbonada Lobulada Abundante DURAZNO CONTAMINADO Deuteromycetes Rizoide Elevada Lobulada Abundante
  • 16. 16 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL MUESTRAS OBSERBACIONES VINO AGUA DE CHARCO CON MOSCAS
  • 17. 17 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL ESTIERCOL DE VACUNO MUESTRAS OBSERBACIONES INODORO DEL BAÑO DURAZNO CONTAMINADO
  • 18. 18 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL DISCUSION DE RESULTADOS En la discusión de resultados especificamos y analizamos el aislamiento de hongos, en medios de cultivo, que nos permitieron reconocer los diferentes tipos de hongos siendo de muchísima importancia en el laboratorio de microbiología por lo que un control en su preparación y conservación en uso dando por seguro la exactitud y confiabilidad de nuestros resultados obtenidos en el proceso de observación en el microscopio. Por otro lado se encontraron diferentes fuentes bibliográficas de esta práctica de laboratorio donde se dieron procesos de identificación de los tipos de hongos, donde se suscitaron el crecimiento y morfología de los hongos, por la cual para la redacción de la discusión de resultados el grupo Nº I - 1 tuvo que analizar y responder las aspectos importantes de cada proceso de experimentación.  REFERENCIA BIBLIOGRAFICA : - UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS A SINTOMAS DE ENFERMEDADES. DISCUCIÓN. En este trabajo sus objetivos son diferentes a los nuestros ya que ellos consideraron a las enfermedades y sus síntomas a diferencia de nosotros que las cuales eran de identificación de tipos de Hongos y caracterización de las colonias formadas por hongos aislados y sembrados en placas Petri. Trabajaron únicamente con frutas a diferencia de nosotros que trabajamos con alimentos en estado de descomposición, agua estancada, etc. En lo que es los procedimientos nosotros utilizamos con ayuda de las asas de siembras aislar directamente de las muestras y sembrarlas en agar. Este informe citado realiza
  • 19. 19 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL algunos pasos más como por decir: cortan los trozos de cascara de naranja una de ellas infectada y la otra sin infectar. Luego de ello, realizan una desinfección de ambos trocitos de cascara de naranja con ayuda de unas gasas cortadas sumergiéndolas en etanol y luego en agua destilada, para que posteriormente lo sembraran en una placa Petri con PDA acidulado en mismo tiempo que nosotros de 7 a 8 días a temperatura ambiente (25°C). En lo que son resultados ellos encontraron lo que es Penisillum en la naranja. En nuestro informe nosotros encontramos diferentes tipos de hongos de acuerdo a su habitad. Caracterizamos sus formas de colonias formadas y también observamos en el microscopio sus partes como son las hifas, etc. - Los resultados que obtuvimos de nuestro trabajo de laboratorio, expresa a través de imágenes las propiedades físicas (Características macro morfológicas, etc.) que tiene cada tipo de hongo, conociendo el origen (hábitat) en donde los podemos encontrar, nuestras imágenes tomadas y plasmadas en el informe, dicho trabajo hace eco de las formas que presenta cada hongo, algunos benéficos para el hombre y también perjudiciales, lo importante del trabajo de laboratorio, no es solo limitarnos a observar lo que obtuvimos al ver en el microscopio si no interpretar las funciones peculiares que cada tipo de hongo tiene y genera frente a una situación, a lo largo de la vida los hongos han sido de ayuda para el hombre en aspectos alimenticios, salud, etc. Por ello es importante poder experimentar acerca de las propiedades que estas nos ofrecen y poder darles un uso adecuado para nuestro bien. Los puntos limitantes que se observaron , fueron las deficiencias que tuvimos al momento observar las muestras en el microscopio, ya que en algunos medios no lograron prosperar el crecimiento de nuestro hongos, causante de que no podamos observar todos los tipos de hongos que inoculamos en los distintos medios de cultivo. - http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003 El presente link es sobre una revista científica, en la cual se estudiaron hongos presentes en los libros y el ambiente de una biblioteca del cual se aislaron un total de 409 unidades formadoras de colonias (UFC) en agar con dextrosa y papa y agar celulosa, localizadas en el ambiente (89.7%) y en los libros (10.3%). El 37.16% de las UFC se detectaron en el Depósito General, el 9.78% en el Depósito de la Hemeroteca y
  • 20. 20 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL un 34.97% en la Colección de Libros Antiguos. En total se encontraron 17 géneros, predominando Cladosporium (59.72%), Fusarium (9,31%), Curvularia(6,62%), Aspergillu s (6,37%) y Chaetomium (5,64%). Todos mostraron capacidad para crecer en agar celulosa. De los cuales a través de las muestras tomadas y el método aplicado se llegó a obtener Los principales géneros causantes de biodeterioro en la biblioteca los cuales fueron: Aspergillus, Penisillum y Chaetomium. La abundancia de UFC pertenecientes a los géneros Aspergillus, Cladosporium y Fusarium coloca en riesgo la salud de los funcionarios de la biblioteca. Las condiciones ambientales de la biblioteca de la Universidad del Valle necesitan controlarse en todas las salas ajustándolas a las siguientes condiciones ambientales: temperatura entre 19 y 20 °C; humedad relativa entre 45 y 55 %. Se debe implementar un programa de mantenimiento y conservación con periodicidad anual por parte de la Universidad. Además de limpiar periódicamente estanterías, paredes y aspirar el exterior de los libros, desinfectando los pisos con productos químicos inocuos para el papel. También es necesario establecer un programa de monitoreo continuo de las colecciones para detectar focos de contaminación y realizar labores puntuales de prevención y control. Se recomienda realizar un trabajo de investigación sobre los diferentes tipos de control empleando técnicas de combinaciones cruzadas de termonebulización y luz ultravioleta, debido a la importancia de proteger las colecciones de la biblioteca central de la Universidad. De la presente revista científica, el punto que nos llama la atención es que, aparte de perjudicar a los materiales que se encuentran en dicho lugar, son también un riesgo a la salud de los trabajadores, de allí parte la importancia de poder conocer los medios en los cuales estos se pueden proliferar, para no vivir a expensas de riesgos de rutina, el mundo de los hongos es muy amplio, los podemos encontrar en muchos lugares, más cerca de los que creemos, el convivir con ellos es necesario, el alterar su medio a veces no es viable, el conocer más sobre estos nos permitirá, poder tomar acciones en las situaciones que creamos de riesgo, por ello en necesario el análisis o interpretación que nos muestra cada tipo de hongo, y así poder seguir con la cadena trófica sin alterarla. - http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf En el laboratorio de microbiología se aisló cuatro tipos (Zigomycetes, ascomicetes, deuteromicetes, basidiomicetes) de hongos pertenecientes a Eumycota. Después se visualizó con el azul de lactofenol. Se sabe que los hongos intervienen en forma importante en ciclos como del carbono, nitrógeno; desintegran los compuestos orgánicos que existen en las hojas muertas y troncos muertos, y los transforman nuevamente en compuestos que pueden ser utilizados para el ciclo, estos son saprofitos o parásitos; que se encuentran dondequiera que exista substancia orgánica disponible; se desarrolla mejor en lugares obscuros y húmedos. Algunos hongos pueden crecer aún bajo condiciones al parecer muy desfavorables, resisten considerablemente la plasmólisis, pueden desarrollarse en soluciones concentradas de sal o azúcar, por ejemplo sobre confitura. Al ramificarse el
  • 21. 21 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL micelio y establecer contactos con substancia orgánica, secreta enzimas que desdoblan las proteínas, carbohidratos y grasas, y absorbe productos secundarios. Por ello en los últimos tiempos se ha realizado investigaciones sobre biorremediación con hongos, como se es sabido el Cr (VI) es elemento soluble perjudicial para los seres humanos y animales, ya que son tóxicos para las células, por ello se hace investigaciones que reduzcan al Cr(VI) a Cr(III) ya que este es insoluble e incluso participa como elementos traza, para la recucion de este elemento se utilizó la acción de los hongos Candida sp., Saccharomyces cerevisiae, Lecythophora sp., Candida sp., Aureobasidium pullulans y los hongos filamentosos Aspergillus sp., Aspergillus tubingensis y Penisillum sp. Concluyendo con lo siguiente Los mecanismos fúngicos de interacción con el cromo promisorios en el contexto de la Biotecnología Ambiental son la biosorción, la bioacumulación y la biotransformación; de éstos, el menos entendido a nivel bioquímico es la biotransformación. Existen escasos estudios en relación con las respuestas a cromo en los hongos, por lo que se espera que la aplicación de los enfoques de proteómica, genómica y metabolómica contribuya al entendimiento de los cambios asociados con respuestas a la toxicidad del ión y/o de importancia para la destoxificación del mismo. A futuro, esta información puede servir para el desarrollo de nuevas variedades fúngicas con capacidades mejoradas. Se requiere contar con un mayor número de estudios en birreactores que conduzcan a mejoras en la ingeniería de los procesos para el biotratamiento de efluentes industriales y de procedimientos para la biorremediación de sitios contaminados. - Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y parásitos: métodos de laboratorio”, México, 2002 - Teniendo en cuenta el informe referencial mostrado, comparando con puntos importantes con el nuestro, podemos afirmar de que compartimos las ideas más importantes en la preparación donde hay algunos procedimientos iguales al de nosotros. hay procedimientos extensivos donde daremos a conocer a continuación en lo que nosotros no realizamos y no estaba planteado en el guía de prácticas: Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS OBJETIVOS: 1. Aislar hongos acuáticos de diferentes zonas de agua dulce. 2. Identificar las estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos. FUENTE: FACULTAD DE BIOLOGÍA- UNIVERSIDAD DE MICHOACANA DE SAN NICOLÁS DE HIDALGO- PRACTICAS DE LABORATORIO DE MICOLOGPIA-“OBSERVACIÓN DE HONGOS ACUÁTICOS”
  • 22. 22 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL MATERIALES: Microscopio óptico. Microscopio estereoscópico. Portaobjetos. Cubreobjetos. Agujas de disección. 9 cajas Petri. 3 frascos de vidrio. Cebos: 15 moscas, 3 exoesqueletos de camarón, 30 fragmentos de uñas. PROCEDIMIENTO. PARTE 1. 1. Colectar 3 muestras de agua de diferentes cuerpos de agua. 2. Colocar cada muestra de agua en 3 cajas de Petri 3. Colocar las carnadas de la siguiente manera: 4. Dejar las cajas de Petri tapadas durante 8 días y a temperatura ambiente. 18 PROCEDIMIENTO PARTE 2. 5. Revisa cada una de las cajas Petri en el microscopio estereoscópico y busca estructuras somáticas y reproductoras. Esquematiza las estructuras observadas. 6. En el microscopio óptico observar preparaciones de micelio y esquematizar las estructuras somáticas y reproductoras de los hongos acuáticos encontrados. Estructuras que pueden encontrarse: micelio cenocítico, esporangios, zoosporangios, zoosporas, oogonios, oosporas y anteridios. RESULTADOS:
  • 23. 23 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Nuestro objetivo es poder identificar el crecimiento de hongos utilizando moscas que nos permitirán observar el crecimiento, a diferencia del experimento de la otra universidad utilizamos como cebo solo moscas, pinzas, para comenzar a realizar nuestro experimento solo utilizamos una caja Petri donde se colocó 15mL de agua de rio, y se puso a hervir las moscas y cortarlas en tres partes cabeza, tórax y abdomen antes de colocarla en la caja Petri junto al agua de rio, lo cual la universidad a discutir solo agrego las moscas en tres tipos de agua en tres cajas Petri sin hacerlas hervir, lo mismo hizo con los exoesqueletos de los camarones y los fragmentos de uñas y como resultado después de observar en el microscopio óptico pudimos observar las hifas de los hongos que crecieron alrededor de las moscas, lo cual no coincidimos con los resultados de ellos por que encontraron micelio cenocítico, esto tal vez por qué se siguió procedimientos distintos y aparte que también utilizaron el microscopio estereoscópico. AISLLAMIENTO DE ZIGOMYCETES TERRESTRES: AISLAMIENTO DE MUCORÁCEOS Al observar la muestra después de haber seguido sigilosamente lo especificado en la hoja de laboratorio notamos que la muestra de estiércol vacuno formo colonias de hogos las culas se notan a simple vista como si fueran gránulos que sobre salen de la muestra después del tiempo que especifico la práctica y la correctaposicióndecadapedacitodeestiércolenlacajaPetri. Nos preguntamosel por qué se da elorigen de estosmicroorganismo ylas causas que lo producen ycasi la mayoría del equipo considera que se debe a la interacción de estos microorganismos y el agar papa dextrosa así dando como resultado a que se produzca esa formación y también al ambiente al cual sometimos a las bacterias en si esto ocurre gracias a la intervención de diversos factores como físicos y ambientales. FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS” FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
  • 24. 24 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Consideramos también que el crecimiento de las colonias alrededor del estiércol también se a la putrefaccióndelestiércolyaqueestotalmenteasquerosos,perodealgunamaneraestetambiéncontribuye comoabonoparalafertilidaddelsuelo. Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES LEVADURIFORMES Al observar nuestra muestra después de haber realizado el experimento siguiendo todos los pasos sin equivocarnos, notamos que durante la elaboración de la práctica teníamos que esperar que la parte solida de la chicha de jora se encuentre en la base del vaso de precipitación, porque lo que nos importaba estriar es la parte solida de la chicha de jora, después del estriado pudimos observar el crecimiento de colonias muy pequeñas de hongos, durante la realización de la práctica no hubo ninguna dificultad ya que solo era estriar la muestra de la chicha de jora, y después ponerlo en el horno a una temperatura adecuada para el crecimiento de los hongos, que es lo que se esperaba y se logró el propósito de poder observar la colonia de hongos formados en la caja Petri con el agar de extracto de levadura. Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES FILAMENTOSOS Durante el desarrollo dela práctica de laboratorio de aislamiento de hongos, para poder seguir los procedimientos de la práctica teníamos que tener 5muestra de frutas, vegetales, etc., que estas deberían estas malogradas, con hongos si era posible la dificultad que tuvimos fue el de poseer solo dos cebos malogrados totalmente el resto solo está un poco malogrado lo que tuvimos mayor crecimiento de mohos fue el del durazno y de la zanahoria ya que esto se debe que se pudo introducir de mejor forma en los tubos de ensayo que contenían agar papa dextrosa la cual es la más utilizada para para el cultivo de hongos, y para el crecimiento de estos mohos, la dificultad que se tuvo es el no poder introducir con la asa de siembra correctamente en la parte media del agar, para tener un mejor crecimiento, pero si se logró el crecimiento de mohos en todos los tubos (zanahoria, durazno, manzana, tomate y limón). FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS” FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
  • 25. 25 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL LEVADURIFORMES Con unos hisopos esterilizados se prepararon las muestras necesarias para estriar, en este caso se preparó la frotación del todo el tórax y la parte axilar, y otro fue solo la palma de la mano, lo cual después estriamos en dos cajas Petri respectivamente las cuales contenían agar sabouraud glucosado que es utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos, lo cual nos permitió observar el crecimiento de mohos delas manos y del tórax, pero se pudo observar que los mohos de las manos formaban grandes colonias de mohos, esto debido que antes que se frote la mano nuestra compañera no se lavó la mano y tal vez estaba más sucio de lo común, mientras que en el tórax solo se vio pequeñas colonias de mohos. Se observaron las características de los Levaduriformes que habían contaminado a cultivos como es la flora de la piel. Así mismo, se realizaron preparaciones para observar sus características microscópicas, que no se lograron observar muy claramente. Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES En el laboratorio el docente lo que pidió fue gongos comestibles, pero lo que utilizamos fue hongos del campo lo cual nos facilitó el trabajo ya que era mejor cortarla y poder echar las esporas a la caja Petri con agar de extracto de malata, donde se observó el crecimiento de hongos, es decir colonias no tan pequeñas, pero si se formó bastantes colonias, lo cual nos indica que se llegó al resultado esperado, lo que nos dificultamos un poco fue el corte longitudinal que se le tenía que hacer al hongo, pero aparte de eso todo el experimento nos salió bien y obtuvimos los resultados esperados. CONCLUSIONES  Logramos identificar algunos hongos como son los geofílicos, acuáticos, zoofílicos, fitofilicos o antropofílicos, según su habitad. FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS” FUENTE: FACULTAD DE INGENIERIA- UNIVERSIDAD CONTINENTAL DE CIENCIAS E INGENIERIA-PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA- “AISLAMIENTO DE LOS HONGOS”
  • 26. 26 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL  Se logró aislar a los hongos de las muestras y sembrarlas en placas con cultivos diferentes para que puedan desarrollarse.  Pasado una semana de haber sembrado correctamente nuestras muestras de hongos en placas, observamos a las colonias que se formaron en las placas, caracterizándolas en sus diferentes aspectos. Esto nos ayudó a conocer a las diferentes: coloraciones, aspectos y consistencia que tienen los hongos, relacionados con el origen de sus muestras biológicas y ambientales.  Con ayuda de asas de siembras logramos obtener pequeñísimas muestras de hongos y posteriormente adicionándole una gota de azul de lacto fenol a casa muestra que pudimos observarlas correctamente. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. “MICROBIOLOGIA AMBIENTAL”, ATLAS RONAL 2. Tortora Gerald J., Funke BerdellR., Case Christine L., “Introducción a la Microbiología”, Editorial Medica Panamericana, 9° Edición, Buenos Aires, 2007, Pág. (345 -352) 3. Prescott, Lansing M., Harley, John P., Klein, Donald, “Microbiología”, Editorial McGraw- Hill, 5° Edición, España, 2004, Pág. 595 4. Teresa Mier, Conchita Toriello y Miguel Ulloa, “Hongos microscópicos saprobios y parásitos: métodos de laboratorio”, México, 2002 5. UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS TUNJA 2011 AISLAMIENTO DE HONGOS ASOSIADOS A SINTOMAS DE ENFERMEDADES. 6. http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-31802009000100003 7. CLAUDE A. VILLEE EDITORIAL Mc Graw Hill pAG 183 – 193 8. http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/21150/1/D-92862.pdf ANEXOS Experimento N°1: AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES
  • 27. 27 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL AISLAMIENTO DE ZIGOMYCETES ACUÁTICOS AISLLAMIENTO DE ZIGOMYCETES TERRESTRES: AISLAMIENTO DE MUCORÁCEOS Ponemos a hervir agua junto con las moscas, después de eso con ayuda de una pinza cortamos la mosca en tres parte (cabeza, tórax y abdomen) Preparamos una caja Petri con 15 mL de aguade rio, después se le agrega las moscas partidas para luego llevarlas a una temperatura ambiente para observar el crecimiento de los mohos. 1. Depositamos pequeños trozos de estiércol en forma de una cruz en la papa dextrosa. 2. Dejamos incubar una semana en el horno a una temperatura adecuada para luego observar Presencia de mohos alrededor de una parte de la mosca.
  • 28. 28 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Experimento N°2: AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES LEVADURIFORMES 1. Se siembra la parte sólida en una caja Petri con agar extracto de levadura. 2. Se lleva al horno a una temperatura adecuada para la observación del crecimiento de los mohos. Se observa la abundante presencia de mohos casi en toda la caja Petri.
  • 29. 29 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Experimento N°3: AISLAMIENTO DE DEUTEROMYCETES LEVADURIFORMES Experimento N°4: AISLAMIENTO DE BASIDIOMYCETES Estriar la frotación del tórax y axilas en el agar sabouraud glucosado y llevarlo a incubar una semana Estriar la frotación de las manos en el agar sabouraud glucosado y llevarlo a incubar una semana Crecimiento de mohos pero en colonias pequeñas. Crecimiento en pequeñas cantidades de mohos. Crecimiento grande dela colonia de mohos en la palca Petri
  • 30. 30 MICROBIOLOGIA GENERAL - INGENIERÍA AMBIENTAL Sembrar en una placa Petri con agar extracto de malta las esporas del hongo y luego llevarlo a incubar una semana para luego observar. Crecimiento de colonias de mohos