Este documento describe procedimientos para obtener y conservar muestras micóticas. Explica las diferencias entre levaduras y mohos, y los métodos para identificarlos. Detalla los pasos para preparar muestras patológicas y no patológicas usando hidróxido de potasio y azul de lactofenol respectivamente. Presenta resultados de muestras de tomate, queso y chicha identificando diferentes hongos. Concluye que estos reactivos permiten una observación clara facilitando el análisis de microorganism

1. Obtención y Conservación de Muestras II
MICOSIS
Alumna: Katherine Espinoza Bentura
Ciclo: IV
Turno: Diurno B
Profesora: Diandra Martínez Cano
«Año de la Inversión para el Desarrollo Rural y la Seguridad Alimentaria»
08 de Julio de 2013

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ÍNDICE
Pág.
1. Introducción 3
2. Marco Teórico 4
3. Procedimiento 5 - 6
4. Resultados 7
5. Discusión 7

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INTRODUCCION
En general, todos los hongos son heterótrofos, precisan compuestos orgánicos que
contengan carbono como fuente de energía, son aerobios o anaerobios facultativos y, la
mayoría de ellos viven como saprofitos en el suelo y agua.
Para la identificación de levaduras se recurre a pruebas bioquímicas similares a las que se
utilizan para las bacterias, sin embargo, los mohos se identifican en base a su aspecto
físico, lo que incluye las características de las colonias y la formación de esporas. Las
colonias de mohos se describen como estructuras vegetativas porque están compuestas
de células implicadas en el catabolismo y en el crecimiento. Los hongos suelen
reproducirse por esporas.
Las levaduras son hongos unicelulares no filamentosos, con una morfología característica
esférica u ovalada. La mayoría de las levaduras forman colonias de organismos
unicelulares y la colonia crece a medida que aumenta el número de levaduras. Este
aumento suele ocurrir por gemación. En la gemación, la célula forma una protuberancia o
yema sobre su superficie externa. Algunas especies de levaduras forman yemas que no
logran separarse y dan lugar a una corta cadena de células llamada “Pseudohifa”.
Las levaduras son capaces de crecer como anaerobias facultativas. Si disponen de oxígeno,
realizan la respiración aeróbica para metabolizar azúcares hasta CO2 y H2O. Por el
contrario, si carecen de oxígeno, fermentan azúcares produciendo Etanol y CO2.
El talo o colonia de moho consiste en largos filamentos celulares agrupados. Estos
filamentos se llaman hifas. En la mayoría de los mohos las hifas contienen unos tabiques
llamados septos que dividen a las hifas en unidades diferenciadas, mononucleares,
semejantes a células. Este tipo de hifas se denominan hifas tabicadas, sin embargo, en
algunas clases de hongos la hifa no contiene tabiques y aparecen como largas células
continuas con numerosos núcleos. Estas se conocen como hifas cenocíticas. Las hifas del
talo crecen alargándose por sus extremos. Cada parte de una hifa es capaz de crecer y,
cuando se separa un fragmento, puede alargarse para formar una nueva hifa. Cuando las
condiciones ambientales son apropiadas las hifas crecen, se entrelazan y forman una masa
llamada micelio. La parte del micelio implicada en la obtención de nutrientes de
llamamicelio vegetativo y la relacionada con la reproducción micelio reproductor o aereo,
llamado así porque se proyecta sobre la superficie del medio en el que crece el hongo.
Algunos hongos y especialmente, las especies patógenas, muestran dimorfismo, es decir,
dos formas de crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o como levadura. A
menudo, este dimorfismo depende de la temperatura de incubación: a 37ºC el hongo es
levaduriforme mientras que a 25ºC es filamentoso.

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MARCO TEÓRICO
Muestras Patológicas
El hidróxido de potasio (también conocido como potasa cáustica) es un compuesto
químico inorgánico de fórmula KOH. Es utilizado en la realización de preparaciones
microscópicas para la observación de hongos es muestras patológicas. El KOH destruye
todas las células no micóticas presentes en la muestra, facilitando asi la observación de los
microorganismos buscados.
Muestras no Patológicas
La tinción con azul de lactofenol es un método utilizado en la realización de preparaciones
microscópicas para la observación de hongos es muestras no patológicas.
El azul de algodón posee la capacidad de adherirse a la quitina presente en las hifas y
conidios y de los hongos microscópicos.
Cada uno de los componentes del colorante azul de lactofenol cumple una función
determinada. El fenol actúa como fungicida destruyendo la flora acompañante, el acido
láctico conserva las estructuras fúngicas al provocar un cambio de gradiente osmótico con
relación al interior del fúngico generando una película, la glicerina nos permite tener una
preparación semipermanente.

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PROCEDIMIENTO
Material
 Muestra
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Asa de siembra
 Aceite de inmersión
 Mechero
Reactivos:
 Hidróxido Potasio
 Azul de Lactofenol
Composición: Reactivo azul de Lactofenol
- Fenol...............0,1gr
- Ácido láctico.......8mL
- Agua destilada.....1mL
- Glicerina.......... 20mL
- Azul de anilina....0,5gr

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TÉCNICA:
Tomar muestra con el asa de
siembra y colocarla en un
portaobjeto
Muestra
Muestra Patológica
Esterilizar Asa de Siembra
(Mechero)
Muestra no Patológica
Tomar muestra con el asa de
siembra y colocarla en un
portaobjeto
Colocar una gota de Hidróxido de
Potasio sobre la muestra
(portaobjeto)
Colocar una gota de Azul de
Lactofenol sobre la muestra
(portaobjeto)
Cubrir con una
lamina cubreobjetos
Observar al microscopio
a 40x y 100x

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RESULTADOS
Muestra: Tomate
Hongo: Mucor sp. (Levadura)
Muestra: Queso Roquefort
Hongo: Penicillium Roqueforti (Moho)
Muestra: Chicha de Jora
Hongo: Saccharomyces Cerevisiae (Levadura)

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DISCUCIÓN
El azul de lactofenol y el hidróxido de potasio usados para la evaluación de
muestras micóticas no patológicas y patológicas respectivamente, poseen
características (eliminación de células no micóticas, etc) que nos permiten una
observación mas clara de la muestra, facilitando así el análisis de los
microorganismo buscados.