1. Principios de Catálisis Enzimática
y Cinética Enzimática.
Dra. Valeska Ormazabal
Depto. de Ciencias Básicas
Facultad de Medicina
Medicina 2012

2. ¿ De dónde viene la Energía necesaria para
producir un descenso de la energía libre de
activación de reacciones específicas?
1. Reordeamiento de los enlaces covalentes de
las reacciones catalizadas por enzimas.
• Activación del sustrato por
formación de un enlace covalente
transitorio.
• Transferencia de un grupo del
sustrato a la enzima en forma
transitoria.
2. Formación de interacciones no covalentes
enzima-sustrato.

5. ¿Cómo las enzimas usan la energía de la unión no
covalente?
• 1. La energía de fijación proporciona especificidad y catálisis.
• 2. Las interacciones débiles están optimizadas en el estado de
transición.

9. 1. Reducción de la Entropía

10. 2. Romper la capa de Solvatación del
sustrato.

11. 1. Orientación adecuada del sustrato, respecto
a sus grupos funcionales y a posibles
distorciones.

12. En el estado de transición las interacciones
entre la enzima y el sustrato son óptimas

13. Especificidad Enzimática: Especificidad de sustrato.

14. *La energía de Fijación regula tanto la catálisis
como la especificidad

19. • Cinética Enzimática

21. Curva de progreso de una reacción enzimática en el
tiempo

22. Curva de progreso de una reacción enzimática en el
tiempo
Varias Causas pueden contribuir a que se
produzca esta disminución:
1. El producto puede inhibir.
2. Agotamiento del sustrato.
3. La reacción inversa se hace más
importante.
4. Disminuye la cantidad de P formado
por unidad de Tiempo.
5. Velocidad de formación de producto
y de la reacción inversa es igual.

30. Determinación de Km y Vmáx por el gráfico de Eadie Hofstee

31. Métodos de linealización para determinación
parámetros cinéticos
Método Eje Y Eje X Intercepto Intercepto Pendiente
Eje Y Eje x
Lineweaver- 1/v 1/s 1/V -1/Km K/V
Burke
Eadie- v v/s V V/Km -Km
Hofstee

32. Kcat: Describe la velocidad limitante de cualquier reacción
enzimática.
Kcat= Vmax/[Et]

34. Cálculo de Actividad
Enzimática
• La velocidad de reacción catalizada por 0,1ml
de una dilución 1:100 de Fosfatasa Alcalina es
0,3umoles / min. de producto. ¿Cuál es su
actividad enzimática?
• 0,1ml-------- 0,3umoles producto / min.
1,0ml------------3,0umoles producto / min.
dil 1:100-------------300umoles producto / min.
Respuesta: 300UI/ml

35. Para comparar actividades enzimáticas se utilizan
parámetros cinéticos