3. IL-10
Cytokine with the most
powerfull anti inflammatory
effect
Decrease the activity of
linfocites T and macrophages
Suppression of Th1 cells
Neutrophil
First in inflammatory
response
Phagocytosis and pinocytosis
Granules (MPO, Peroxide,
etc…)
4. Seminar objective
• How Maresin1 regulates neutrophil recruitment and
IL-10 expression in Aspergillus fumigatus keratitis
5. Materiales y metodos
PCR: Reaccion en cadena de la polimerasa
La reacción en cadena de la polimerasa, o PCR,
es una técnica para hacer muchas copias de una
determinada región de ADN in vitro.
La PCR depende de una ADN polimerasa
termoestable, la Taq polimerasa, y requiere de
cebadores de ADN diseñados específicamente
para la región de ADN de interés.
B actinina, CXCL1, IL10
6. Western Blot
Western blot es una técnica de laboratorio
utilizado para detectar una proteína
específica en una muestra.
El método implica el uso de electroforesis en
gel para separar las proteínas de la muestra.
Las proteínas separadas se transfieren del gel
a la superficie de una membrana.
La membrana se expone a un anticuerpo
específico contra la proteína en estudio. La
unión del anticuerpo se detecta usando un
marcador radiactivo o químico.
IL10, CXCL1, GSK3B, B actinina
7. Inmunofluoresencia
Técnica que se utiliza para la detección de
estructuras subcelulares que nos permiten
estudiarlas con la utilización de anticuerpos
acoplados a fluoróforos.
NIMP-R14 en las corneas de los ratones
pruebas
13. Discusión
Li
proved that maresin1 could
improve survival rates and
mitigate
inflammation in a sepsis
model.
TRUE
H.
Ghasemi
For example, IL-10 can
inhibit the production and
release of
many cytokines such as IL-1
and TNF-a, and can
suppress a Th1 type
immune response
TRUE
Rodrigo
et al
we found that treatment
with
maresin1 inhibited the
influx of neutrophils into
the corneal stroma
during A. fumigatus
infection.
TRUE
14. Conclusion
The study concluded that the maresin1 have anti
inflammatory effects decreasing the levels of CXCL1 which
is a proinflammatory molecule and increasing levels of IL-
10 which is a molecule that stimulates macrophages
phagocytosis.
the maresin1 proves their effects regulating the
inflammatory process in Aspergillus fumigatus keratitis
regulating the neutrophil recruitment. This can be used in
possible future treatment for various inflammatory
procceses
la PCR utiliza altas temperaturas repetidamente para desnaturalizar el molde de ADN o separar sus cadenas.
En cada reacción de PCR se utilizan dos cebadores que están diseñados para flanquear la región blanco
En la PCR, la reacción se somete repetidamente a un ciclo de cambios de temperatura que permiten la producción de muchas copias de la región blanco.
En la muestra tratada con maresina1, 3 días después mostro una disminución en la cantidad de neutrófilos los cuales fueron marcados con NIMP-R14, la muestra que no recibió tratamiento con maresina sino que solo se le fue agregado pbs siguió mostrando una cantidad elevada de neutrófilos
EN AMBAS GRAFICAS FUE USADA LA B ACTININA COMO CONTROL
B: en la grafica B se observa que el tratamiento con maresina 1 induce en la expresión de IL-10 la cual es una molecula anti inflamatoria, a comparación de la muestra con pbs, la muestra con maresina al 1dia y al 3dia mostraban altas cantidades de IL-10, con un pico max al tercer dia, al 5dia se vio una disminución de la inflamación y por ende de la IL-10
D: en la grafica B se observa que en el dia 1, las cantidades de CXCL1 eran iguales en las 2 muestras, la tratada con maresina y la que no, la diferencia se empieza a ver desde el 3 dia, en el cual la muestra sin maresina mostro una producción de CXCL1 mayor a la muestra que si tenia maresina, al dia 5 las cantidades de CXCL1 disminuyeron en las 2 muestras en comparación con el dia 3, las cantidades de CXCL en la muestra tratada con maresina 1 volvieron a valores aproximados a los del dia 1 mientras que la muestra con pbs disminuyo a comparación con el dia 3 pero seguía con una expresión alta
B ACTININA USADA COMO CONTROL
LAS MUESTRAS “N” SON MUESTRAS A LAS CUALES NO SE LES PUSO NI EL HONGO ASPARAGILLUS FUMIGATUS, NI TAMPOCO FUE AGREGADO PBS NI MARESINA1
B: en la grafica B se observa que en la muestra a la cual solo se le agrego el hongo mostro una gran producción de CXCL1, otra muestra a la cual fue agregada el hongo y pbs mostro prácticamente los mismos niveles de CXCL1 que la muestra con solo el hongo por lo cual la pbs no afecta en la producción o no de esta molecula, en otra muestra a la cual se le agrego el hongo y también maresina1 como pretratamiento mostro que las cantidades de CXCL1 producido fue menor a la mitad que las 2 muestras anteriores
D: en la muestra a la cual se le agrego el hongo y se le hizo pretratamiento con maresina1 mostro valores de IL-10 de casi el doble a comparación de las muestras a las que solo se les agrego el hongo o el hongo con pbs, mostrando los efectos antiinflamatorios de la maresina
Maresina 1 estimula producción de p-GSK3B, usada para choques isquémicos, glucógeno sinstasa kinasa, glucógeno sintasa