Articulo cientifico de la e xpresion de CD4

1. Inmunología Dulce María Cordero Cordero

2. Introducción Las células T CD4+ CD25+ FOXP3 + son células reguladoras naturales , que se cree cumplen un papel fundamental en la represión de la autoinmunidad y la tolerancia periférica. Célula T Aun se desconoce como se regula su supervivencia en la periferia • CD4+ CD25+ FoxP3+ (naturales o inducibles por citoquinas;actúan por contacto célula-célula pero también dependen de la producción de citoquinas como IL-10 y TGF-b)

3. Generación de células T reguladoras naturales

5. TOLERANCIA: (ANERGIA) Es la inducción y mantenimiento de un estado de no respuesta de los LT o LB maduros hacia exo o autoantígenos encontrados en el compartimiento extratímico Alguna evidencia muestra que los propios péptidos son importantes en la respuesta de manera homeostática de la expansión de células T reguladoras en la periferia. Mecanismos de regulación de las células reguladoras Estimulación FAS TCR TREG células con privación de citocinas es causa de muerte, mientras que un consumo de citocinas en células T CD4 son causa de supresión de la apoptosis La ausencia de esta población de células T provoca una respuesta aguda autoinmune; condición llamada Inmune disregulación inmunitaria, poliendocrinopatía y enteropatía ligada al cromosoma X (IPEX) en el ser humano y es mortal en ratones .

6. Diferentes células reguladoras

8. Las pruebas muestran que los auto-péptidos son homeostáticamente importantes para la expansión de las células TREG en la periferia A pesar de la abundante disponibilidad de péptidos de ayuda , la frecuencia de células TREG siempre es de 10-15% Población CD4 +. Aumento o disminución de los números TREG se traduciría en un desequilibrio inmunológico

9. LA IL-2 es un importante factor de supervivencia celular Objetivo: Demostrar el papel que juegan las células T reguladoras, y su supervivencia en la periferia

11. ELISA IL-2 IL-7 IL-4 IL-15 IL-21 Cultivos celulares Suplemento FCS 100 U/ml penicilina 100 µg/ml estreptomicina 2 m M glutamina 10 m M Hepes 1 m M piruvato de sodio 50 µ M B-mercaptoetanol

12. Purificación celular Esplenocitos fueron cultivados 5 a 12 semanas Incubado con FITC. Conjugado con anti-CD4 y biotina conjugado con anti-CD25 Se purificaron las células CD4 y se separaron del cultivo Incubación de las celulas alfa biotina 90 a 95 % fueron positivas para CD4 y CD 25

13. Células muertas y cultivos Las células muertas fueron medidas mediante citometría de flujo después de 4 días (a) Viabilidad de células estimuladas por 4 días con anti-CD3 Y anti CD-28 , IL-2 fue añadido

14. ( b ) Proliferación de los cultivos celulares, ex vivo o estimulado con citocinas en una concentración de 20 ng/ml

15. ( c ) Viabilidad de las células estimuladas con diferentes citocinas

16. ( c ) Viabilidad de las células, bloqueando IL-2

17. ( d ) Proliferación de células CFSE labeled Foxp3+ Treg

18. ( e ) Microscopio confocal análisis de células reguladoras

19. ( f ) Células mostrando apoptosis en diferentes estados

20. Células reguladoras expresando citocinas y recetores de quimiocinas ex vivo

21. Células reguladoras susceptibles al bloqueo de citocinas apoptosis in vivo

22. Células estimuladas con diferentes citocinas y su nivel de CD25 y Foxp3

23. Experimentos de represión de IL-2 en células reguladoras

25. Por otra parte, las células TREG Bim-/ - en ratones no dependen de citocinas para la supervivencia in vitro. Además de mejorar su supervivencia, las citocinas también mantienen la expresión de CD25 y Foxp3 por lo que las TREG células, mantienen así su potencial de supresión. Por lo tanto, este estudio pone de relieve el importante papel de las citocinas en la regulación TREG , supervivencia LTCD4+/CD25+ foxp3+ in vitro inhiben la transcripción de IL2 y la proliferación de otros linfocitos