productos biologicos

1. Instituto Politécnico
Nacional
Escuela Nacional de Ciencias
Biológicas
Departamento de Microbiología
Laboratorio de Microbiología General

2. INTRODUCCIÓN
El cuerpo humano presenta una gran superficie cutánea y mucosa por la
que entra en contacto con el medio ambiente. En esta superficie existen
diversos sectores, donde residen microorganismos con diferentes
características de humedad, temperatura, pH y disponibilidad de
nutrientes.

3. Se denomina microbiota normal al conjunto de microorganismos que viven
de forma habitual en un cuerpo sano. Los lugares donde se encuentran
pueden ser muy variados y en ellos desarrollan tareas beneficiosas para el
ecosistema general del cuerpo.
MICROBIOTA

4. MICROBIOTA
INTESTINALLa flora normal intestinal
contribuye a la síntesis de
vitaminas K y vitaminas del
complejo B y colabora con
procesos digestivos. Intestino delgado
La densidad de bacterias es relativamente
baja(Intestino delgado).
 Streptococcus α hemolíticos.
BACTERIAS ANAEROBIAS ESTRICTAS
 Lactobacillus sp.
 Peptococcus sp.
 Fusobacterium sp.
 Clostridium sp.
Intestino grueso
BACTERIAS ANAEROBIAS FACULTATIVAS
 Escherichia coli.(100%)
 Klebsiella sp.(40-80%)
 Enterobacter sp.
 Proteus sp.(5-50%)
 Citrobacter sp.
 Pseudomonas sp.
 Enterococccus sp.(100%)
 Staphylococcus sp.(30-50%)

5. Fig. 1. Lactobacillus sp.
Bacilo largo, Gram +.
100x
MORFOLOGÍA
Fig. 3. Fusariobacterium
sp. Bacilo Gram - . 100x
Fig. 2.Peptococcus sp.
Coco, Gram +. 100x
Fig. 3. Clostridium sp.
Bacilo, Gram +. 100x
Fig. 4.Escherichia coli.
Bacilo, Gram -. 100x
Fig. 5.Klebsiella sp.
Bacilo, Gram -. 100x

6. Fig. 6. Proteus sp.
Bacilo Gram -. Fig. 7. Pseudomonas sp.
Bacilo Gram -. 100x
Fig. 8. Enterococcus sp.
Coco Gram +.
Fig. 9. Staphylococus sp.
Coco Gram +. 100x

7. MICROBIOTA ORAL
Existen diversos nichos dentro de
la cavidad oral y pueden
reconocerse diferencias si se
estudia la flora de dientes, lengua
y surco periodontal.
La flora oral es de tipo mixto,
con asociación de gérmenes
aerobios y anaerobios.
COMPOSICIÓN
 Streptococcus α hemolíticos.
 Streptococcus mutans
 Streptococcus sanguis se
hallan a nivel de la placa
dentaria.
 Streptococcus salivarius
predomina en la mucosa
lingual.
 Actinomyces sp. a nivel de la
placa.
 Algunas especies de
Lactobacillus, en menor
cantidad.
 También pueden encontrarse
espiroquetas del género
Treponema.
 Pueden además aislarse
especies de Mycoplasma y
levaduras del género Cándida.

8. Fig. 10. Streptococcus sp.
Coco Gram +.
Fig. 11.Actinomyces sp.
Bacilo Gram +. 100x
Fig. 12. Mycoplasma sp.
Coco Gram -.
Fig. 13.Treponema sp.
MORFOLOGÍA

9. MICROBIOTA URINARIA
Salvo la uretra anterior, el aparato
urinario es estéril. La orina contribuye
a mantener la vía urinaria libre de
gérmenes, debido al arrastre, al pH
ácido y a su elevada osmolaridad.
La orina, producida en el riñón y
descargada a través de la pelvis renal
y los uréteres hacia la vejiga, es estéril
en el individuo sano. Se desarrolla
infección cuando las bacterias logran
ingresar a ese ambiente y pueden
persistir en él.
COMPOSICIÒN:
 Proteus
 Estafilococos coagulasa negativa
 Corinebacterium sp.
 Streptococcus sp
 Enterobacter sp.
 Klebsiella sp.
 Escherichia sp.
 Haemophilus sp.

10. Fig. 14. Proteus sp.
Bacilo Gram -. 100x
Fig. 15. Estafilococo
coagulasa negativa.
Coco Gram +.
Fig. 16.Corynebacterium
sp.
Bacilo Gram +. 100x
Fig. 17. Streptococcus
sp.
Coco Gram +. 100x
Fig. 18. Enterobacter sp.
Bacilo Gram -.
Fig. 19.Haemophilus sp.
Bacilo Gram -.

11. MICROBIOTA NASAL
El tracto respiratorio está en
contacto directo con el medio
ambiente y se encuentra expuesto
continuamente a los
microorganismos suspendidos en el
aire que respiramos. El aparato
respiratorio está divido
anatómicamente en superior e
inferior. EL TRS comprende: la boca,
fosas nasales, orofaringe,
nasofaringe y senos paranasales.

12. Fig. 20. Streptococcus
pyogenes Coco Gram +.
Fig. 21.Corynebacterium sp.
Bacilo Gram +.
Fig. 23.Actinomyces sp.
Bacilo Gram +. 100x
Fig. 22.Bordetella pertussis.
Coco Gram -. 100x
Fig. 24.Klebsiella
pneumoniae. Bacilo Gram -.

13. El método tradicional para identificar y estudiar microorganismos en el
cuerpo humano ha sido aislar o separar las bacterias de las muestras y
cultivarlas en el laboratorio. Así se ha logrado identificar cientos de especies
de bacterias tanto benéficas como patógenas.
¿Cómo conocer la identidad y
fisiología de nuestras bacterias, si
son tan numerosas y variadas?
COMPOSICIÒ
N
CLASIFICACIÒN DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO
Medios ricos
Abundancia en la
cantidad, variedad
y calidad de los
nutrientes.
Medios simples
Formulaciòn
limitada
Medios
enriquecidos
Medio base como
apoyo del crecimiento
al cual se le puede
agregar un
suplemento(sangre)
Medios
selectivos
Componente que inhibe el
crecimiento de
microorganismos permitiendo
el crecimiento de otros.
Medios
diferenciales
Permiten distinguir los
microorganismos que crecen
en ellos por diferencias de
actividad metabólica.
Medios de
transporte
Medios para asegurar la
viabilidad del microorganismo
durante su traslado.

14. MEDIOS DE CULTIVO
 Crecimiento de grupo
de microorganismos
inhibiendo otro.
 Aislar microorganismos
a partir de poblaciones
mixtas.
 Distinción de grupos de
microorganismos
(género-especie) a
través de metabolismo.
SELECTIV
OS
DIFERENCIAL
ES

15. OBJETIVOS
• Conocer y aplicar las técnicas correctas para el asilamiento de
MO’S a partir de productos biológicos.
• Conocer los medios de cultivo y sus componentes que provee
las características de estos mismos, para el aislamiento y
cultivo de MO’S.

16. METODOLOGÍA
Tomar con el
asa estéril una
asada de
materia fecal.
Depositar en
placas.
Aislar por estría
cruzada.
Incubar a 37°c
(24-48h)
AISLAMIENTO DE
BACTERIAS DE MATERIA
FECAL
(EMB,MaC,SS)
Tomar con el asa
estéril cuatro
asadas de orina.
Depositar en
medios de
cultivo.
Aislar por estría
cruzada.
Incubar a 37°c
(24-48h)
AISLAMIENTO DE
BACTERIAS DE ORINA
(EMB,BHI,MaC,ASM)

17. AISLAMIENTO DE
BACTERIAS DE EXUDADO
FARÍNGEO
Tomar exudado
faríngeo
Depositar
muestra en
placas.
Aislar por estría
cruzada.
Incubar a 37°c
(24-48h)
(GS,BHI,ASM)
AISLAMIENTO DE
BACTERIAS DE EXUDADO
NASOFARÍNGEO
Tomar exudado
nasofaríngeo.
Depositar
muestra en
placas.
Aislar por estría
cruzada.
Incubar a 37°c
(24-48h)

18. RESULTADOSMedio Composición Uso Agente selectivo
Agar
MacCkonkey
• Aislamiento de bacilos Gram
negativos( aerobios y
anaerobios facultativos), en
especial familia
Enterobacteriaceae.
• Utilización de lactosa.
• Cristal violeta
• Mezcla de sales
biliares
• Lactosa(hidrato de
carbono
fermentable)
Fórmula (en gramos por litro)
Peptona 17.0
Pluripeptona 3.0
Lactosa 10.0
Mezcla de sales biliares 1.5
Cloruro de sodio 5.0
Agar 13.5
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001
pH final: 7.1 ± 0.2

19. Caracteri
sticas
Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia
Forma Circular Circular Circular Circular Irregular Irregular Circular Circular
Tamaño 3mm 2 mm 1mm 3mm 4mm 3mm 3mm 3mm
Color Rosa Rosa Rosa Rosa Rosa Rosa Rosa Rosa
Borde Entero Entero Entero Entero Entero Ondulad
o
Entero Entero
Superfici
e
Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa
Luz
trasmitid
a
Opaca Opaca Opaca Opaca Traslucid
a
Opaca Traslucid
a
Opaca
Luz
reflejada
Brillante Brillante Brillante Brillante Brillante Mate Mate Brillante
Elevació Convexa Convexa Plana Convexa Plana Plana Convexa Convexa
Aspecto Húmedo Húmedo Húmeda Húmedo Húmedo Seco Seca Húmedo
Consiste
ncia
Suave ------- ------ Suave Suave
mucoide
Suave Burtirosa Mucoide
Efecto
sobre el
medio
Lactosa
+
Precipita
do
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Equipo 4
Lab 4
3
Lab 4
1
Lab 4
8
Lab 4
6
Lab 4
5
Lab 4
1
Lab 3
2
Lab 3
Agar MacCkonkey

20. Agar Eosina Azul de
Metileno
• Aislamiento
selectivo de bacilos
Gram negativos de
rápido desarrollo y
escasas exigencias
nutricionales.
• Diferenciación
organismos
de utilizar la lactosa
y/o sacarosa.
• Azul de metileno y
eosina.
Fórmula (en gramos por litro)
Peptona 10.0
Lactosa 5.0
Sacarosa 5.0
Fosfato dipotásico 2.0
Agar 13.5
Eosina 0.4
Azul de metileno 0.065
pH final: 7.2 ± 0.2

21. Caracte
risticas
Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia
Forma Circular Circular Circular Circular Circular Circular Circular Irregula Circular
Tamaño 3mm 2mm 2mm 2mm 1mm 2mm 2mm 3mm 2mm
Color Purpura Verde
brillante
Verde
metálic
o
Negro Morado Verde
brillante
Morado Morado Negro
Borde Entero Entero Enteros Entera Entero Entero Entero Ondula
do
Entero
Superfic
ie
Lisa Liso Lisa Lisa Liso Liso Lisa Liso Liso
Luz
trasmiti
da
Opaca Opaca Opaca Opaca Opaca Opaca Opaca Trasluci
da
Opaca
Luz
reflejad
a
Brillante
s
Brillante Brillante Brillante Brillante Brillosa Brillante Brillante Brillante
Elevació
n
Convex
s
Convex Convex Convex Convex Convex
plana
Convex Plana Plana
Aspecto Húmed
o
Húmed
o
Húmed Húmed Húmed
o
Húmed Húmed
o
Húmed
o
Humed
Consist
ncia
Butirosa Mucoid
e
Butirosa Suave -------- ------ Suave Suave
mucoid
e
Suave
Efecto
sobre el
medio
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Lactosa
+
Agar Eosina Azul de Metileno EMB

22. Agar Salmonella
Shigella
• Aislamiento de
Salmonella spp. y
de algunas
de Shigella spp. a
partir de muestras
clínicas.
• Sales biliares
• Lactosa
• Rojo neutro
Fórmula (en gramos por litro)
Pluripeptona 5.0
Extracto de carne 5.0
Lactosa 10.0
Mezcla de sales biliares 8.5
Citrato de sodio 8.5
Tiosulfato de sodio 8.5
Citrato férrico 1.0
Agar 13.5
Verde brillante 0.00033
Rojo neutro 0.025
pH final: 7.0 ± 0.2
Caracteristicas Colonia Colonia Colonia
Forma Puntiforme Circular Circular
Tamaño ------ 1mm 2mm
Color Rosa Verde Trasparente con punto
centro de color negro
Borde ------ Entero Entero
Superficie ------ Liso Lisa
Luz trasmitida ------ Opaca Transparente
Luz reflejada ------ Brillosa Brillante
Elevación ------ Plana Convexa plana
Aspecto ------ Húmeda Húmedo
Consistencia ------ ------ Suave
Efecto sobre el
medio
Lactosa + ------ --------
Tipo de prueba M.fecal M.fecal M.fecal
Equipo 1
Lab 3
1
Lab 4
5
Lab 4

23. Agar Sal Manitol
• Aislamiento y
diferenciación de
estafilococos.
• Manitol
• Rojo de fenol
• Cloruro sódico
Fórmula (en gramos por litro)
Extracto de carne 1.0
Pluripeptona 10.0
d-Manitol 10.0
Cloruro de sodio 75.0
Agar 15.0
Rojo de fenol 0.025
pH final: 7.4 ± 0.2

24. Medio Composición Uso Agente selectivo
Agar BHI
• Es un medio de uso
general adecuado para
el cultivo de una
variedad de tipos de
organismos, incluidos
las bacterias, levaduras
y hongos filamentosos,
a partir de muestras
clínicas.
• La glucosa es el hidrato
de carbono fermentable.
• El cloruro de sodio
mantiene el balance
osmótico.
• El fosfato disódico otorga
capacidad buffer.
Fórmula (en gramos por litro)
Infusión de cerebro de
ternera
200.0
Infusión corazón 250.0
Peptona 10.0
Cloruro de sodio 5.0
Glucosa 2.0
Fosfato disódico 2.5
Agar 15.0
pH final: 7.4 ± 0.2

25. Caracteristi
cas
Colonia Colonia
Forma Circular Circula
Tamaño 2 mm 1mm
Color Blanco Blanca
Borde Entero Entero
Superficie Lisa Lisa
Luz
trasmitida
Opaca Opaca
Luz
reflejada
Mate Brillante
Elevación Convexa Pulvinada
Aspecto Húmedo Húmeda
Consistenci
a
Mucoide Mucoide
Efecto
sobre el
medio
--------- --------
Tipo de
prueba
Orina Orina
Equipo 5
Lab 3
5
Lab 4
Agar BHI

26. Agar Gelosa Sangre
• Aislamiento y
cultivo de
microorganismos
aerobios y
anaerobios
nutricionalmente
exigentes.
• Detecciòn de
hemólisis.
• Cloruro de sodioFórmula (en gramos por litro)
Infusión de músculo de 375.0
Peptona 10.0
Cloruro de sodio 5.0
Agar 15.0
pH final: 7.3 ± 0.2
Tipo de Hemolisis Observaciones
Beta o hemolisis total Se observa un halo claro brillante
alrededor de la colonia.
Alfa o hemolisis parcial Se observa un halo de color verdoso
alrededor de la colonia.
Gama o sin hemolisis No presenta modificaciones en el
medio.

27. Caracteris
ticas
Colonia Colonia Colonia Colonia
Forma Circular puntiform
e
Circular Circular
Tamaño 2mm ------- 1mm 3mm
Color Blanco ------- Verde Blanca
Borde Entero ------- Entera Entero
Superficie Lisa ------- Lisa Lisa
Luz
trasmitida
Opaca ------- Traslucida Traslucida
Luz
reflejada
Brillante ------- Mate Brillante
Elevación Convexa ------- Plana Convexa
Aspecto Húmeda ------- Seco Húmedo
Consisten
cia
Butirosa ------- Suave Cremosa
Efecto
sobre el
medio
Alfa
hemolisis
Alfa
hemolisis
Alfa
hemolisis
Hemolisi
beta
Tipo de
prueba
Exudado
faríngeo
Exudado
faríngeo
Exudado
faríngeo
Exudado
faríngeo
Equipo 1
Lab 3
5
Lab 3
4
Lab 4
1
Lab 4
Agar Gelosa Sangre

28. Agar Baird Parker
• Aislamiento y
recuento de
estafilococos
coagulasa positiva.
• Glicina
• Piruvato
• Telurito de potasio
• Cloruro de litio
Fórmula (en gramos por litro)
Peptona de caseína 10.0
Extracto de carne 5.0
Extracto de levadura 1.0
Cloruro de litio 5.0
Agar 17.0
Glicina 12.0
Piruvato de sodio 10.0
pH final: 6.8 ± 0.2
Telurio de potasio y cloruro de litio.
Act.lesitanasica

29. Caracterist
icas
Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia Colonia
Forma Circular Circular Circular Circular Circular Puntiform
e
Tamaño 2 mm 1mm 1mm 2mm 1mm 1mm
Color Negro Negro Negro Negro Negro Negra
Borde Entero Entero Entero Entero Entero Entero
Superficie Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa Lisa
Luz
trasmitida
Opaca Opaca Opaca Opaca Opaca Opaca
Luz
reflejada
Mate Mate Brillante Mate Brillante Mate
Elevación Convexa Convexa Convexa Convexa Convexa Convexa
Aspecto Seca Húmedo Húmeda Seco Húmeda Húmeda
Consisten
ia
Dura Mucoide Butirosa Suave -------- Mucoide
Efecto
sobre el
medio
------ ------- ------- ---------- --------- ---------
Tipo de
prueba
E. E. E. E. E. E.
Equipo 1
Lab 3
5
Lab 3
2
Lab 3
8
Lab 4
3
Lab 4
5
Lab 4
Agar Baird Parker

30. Morfología microscópica
Característic
s
Materia
fecal
Orina Faríngeo Nasofarínge
Gram
- - + +
Forma Bacilos Bacilos Cocos Cocos
Agrupación Aislado Aislado Racimo Racimo
Esporas
- - - -

31. Discusión:
◦ Los datos recaudados, concuerdan con las especificaciones de cada
medio.
◦ No hubo diferencias con respecto a la morfología colonial de cada
medio sobre las características que tiene estos mismos.
◦ En cuanto la toma de muestra, esta fue correcta ya que corresponde con
lo citado en la bibliografía.

32. Conclusión:
◦ Se comprendió el fundamento de cada medio.
◦ En agar gelosa sangre se obtuvo hemolisis.
◦ Se observaron las diferentes características que produce el medio a
partir de determinados MO’S.

33. CUESTIONARIO
3.-¿Tiene alguna importancia para su carrera o desarrollo
profesional estas técnicas?
Las técnicas empleadas son de gran importancia en el campo de la
microbiología clínica, debido a que se obtiene información acerca de la
identidad de patógenos potenciales en tejidos, líquidos corporales o
secreciones de pacientes y es posible diagnosticar una enfermedad
infecciosa.
4.-¿Qué características en común tienen los medios de cultivo
usados para cada muestra?. Porqué cree que se seleccionaron en
particular en cada muestra?
Que son selectivo y diferenciales.
Cada muestra contiene diferentes microorganismos con distintas
necesidades que cubre un determinado medio de cultivo.

34. BIBLIOGRAFÍA
Mellado,.E, Jos,.A.2007. Importancia de la microbiota del tracto
gastrointestinal en toxicología alimentaria. Editorial Diez Santos.
Madrid,España. Pp-40-41.
Ingraham,.J. 1998. Introducción a la Microbiología. Editorial
Revertè.Barcelona, España. Pp-322.
Prats,.G. 2007. Microbiología Clínica. Editorial Médica Panamericana.
México. Pp-24-25
Romero,.R. 1999. Microbiología y Parasitología Humana. Tercera Edición.
Editorial Médica Panamericana.Pp-643.
López Tevés Leonor. 2006. Trabajo Practico Nº4. Medios de Cultivo.
Recuperado de http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf.