Este documento describe varias pruebas para identificar carbohidratos, incluyendo la reacción de la bencidina, la prueba de anilina, las pruebas de azúcares reductores (Tollens, Fehling, Benedict), y la prueba del ácido pícrico. Explica los materiales, reactivos y procedimientos para cada prueba, y proporciona tablas de resultados que muestran las observaciones como positivas o negativas para diferentes carbohidratos en cada prueba.

1. CETIS 62
PRACTICA No. 3
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
EQUIPO: 1
Lerma acosta Nohemí yunuen
Leyja Rangel Selene Guadalupe
Pereza Álvarez Ernesto
Valenzuela Toledo Katya Elizabeth
Yepez Vázquez Mariana
OBJETIVO: Realizar diferentes experimentos, donde se identifiquen, las
características de los carbohidratos.

2. Los carbohidratos comprenden los azucares, los almidones, las celulosas y las
sustancias inmediatamente relacionadas con ellos. Es difícil formular una
definición del termino “carbohidrato” que incluya todos los miembros de esta
familia de compuestos pero a partir de formulas estructurales. Deberá notarse que
un carbohidrato es un polioxiadehido una polioxicetona o una sustancia que
produce por hidrólisis cualquiera o ambas de estos tipos de compuestos. Ejemplo:
la glucosa y la arabinosa son polioxialdehídos, mientras que la fructuosa es una
polioxicetona.
Los nombres de los carbohidratos se caracterizan por la terminación “osa”. Los
principales grupos de carbohidratos se designan como monosacáridos. Los
monosacáridos comprenden todos los carbohidratos sencillos que no se pueden
hidrolizarse en sustancias de menor estructura molecular. Los disacáridos incluyen
aquellos carbohidratos que pueden hidrolizarse en dos azucares simples. De la
misma manera, un trisacárido proporciona por hidrólisis tres moléculas de
monosacáridos y una molécula de polisacárido origina muchas moléculas de
monosacáridos. Todos los carbohidratos con excepción de los polisacáridos, se
disuelven en agua, poseen un sabor más o menos dulce y son llamados azúcares.
El metabolismo de los carbohidratos en el cuerpo animal es esencialmente el de la
glucosa y sustancias a fines de la misma en sus procesos metabólicos.
El azúcar característica de la sangre y líquidos titulares es la glucosa. La digestión
de los alimentos ricos en carbohidratos, como almidón, sacarosa y lactosa,
produce los monosacáridos: glucosa, fructuosa y galactosa, que pasan al torrente
circulatorio. La galactosa y fructuosa son transformados en el hígado.
REACCIÓN DE LA BENCIDINA
La bencidina es una sustancia que cristaliza con una molécula de agua si se hace
la cristalización por debajo de 60° C, y anhidrasis porque el sulfato de bencidina

3. es insoluble. Se emplea también para investigar la adición de agua oxigenada a la
leche y para identificar la sangre en líquidos biológicos, empleada también en la
preparación de colorantes, para perfumar jabones baratos y en las cremas para el
calzado. Su constante criocóspica (6.9; agua 1.8) lo hace útil, junto con su poder
disolvente, en criometría
BENCIDINA (primaria)
Prueba específica para pentosas. Una pentosa está formada por 5 átomos de
carbono, por lo tanto cuando se habla de una aldopentosa se hace referencia a un
monosacárido que contiene 5 átomos de carbono y puede contener también el
grupo cetosa, por el cual toma el nombre de cetohexosa.
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Reactivo de bencidina
1 gradilla Carbohidratos al 1%
6 pipetas de1 ml
1 baño maría
TÉCNICA
1. En un tubo de ensayo colocar 0.5ml del reactivo de bencidina.
2. Añadir 1 ó 2 gotas de solución de carbohidrato.
3. Calentar en agua hirviendo durante varios minutos, inmediatamente
después enfriar con agua.
4. Si se forma un color rosa o rojo la prueba es positiva.
Esta prueba parece muy satisfactoria para pentosas, las hexosas comunes no
interfieren en esta prueba.
PRUEBA DE ANILINA
Esta prueba sirve para diferenciar las pentosas de los ácidos urónicos y de las
hexosas que no dan la prueba.

4. Por deshidratación de las pentosas, se forman furfural, que reaccionan primero
con una molécula de anilina dando un compuesto que es una base de Schiff, de
poco color
Con otra molécula de anilina, se parte del ciclo del furano dando un compuesto
que por tener doble enlace conjugador, tiene un color rojo intenso.
Dando también la prueba positiva los polisacáridos que por hidrólisis dan
pentosas.
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Ácido acético glacial
1 gradilla Anilina
3 pipetas de 5ml Carbohidratos al 1%
1 baño maría
TÉCNICA
1. Colocar 1 ml de carbohidrato.
2. Añadir 2 ml de ácido acético glacial y 3 gotas de anilina.
3. Calentar a hervir durante 1 minuto la coloración roja es positiva

5. Esta prueba la dan positiva las pentosas, puede servir para diferenciar las
pentosas de ácidos urónicos.
AZÚCARES REDUCTORES
(Tollens, Fehling, Benedict)
OXIDACIÓN
Aunque la oxidación de los aldehidos, y en algunos casos las cetonas
pueden emplearse como un método de preparación de ácidos carboxílicos, las
reacciones que se describen son principalmente como pruebas cualitativas que
permiten diferenciar los aldehídos y determinar acetonas de otras clases de
compuestos orgánicos.
La oxidación de los aldehídos a ácidos carboxílicos se efectúa muy
fácilmente en una solución alcalina. Estos reactivos alcalinos son agentes
oxidantes moderados, oxidan los aldehídos al mismo tiempo que ellos se reducen.
El reactivo Tollens se prepara por la adición de hidróxido de amonio en una
solución de nitrato de plata hasta que el precipitado de óxido de plata formado
inicialmente se disuelve nuevamente es conveniente considerar a este reactivo
como óxido de palta en lugar de
Ag + 2OH -H2O Ag2O +4NH3 2Ag (NH3)2OH
Una solución que contiene el ión plata amonicéo, y a menudo así es
considerado en sus reacciones como aldehído.
H O
CH3-C-C=O + Ag2O CH3-C-OH + 2Ag
La reacción conocida, la “prueba del espejo de plata” (Tollens), comprende
en realidad al aldehído, una pequeña concentración de ión plata y los iones
oxidrilo.
La solución de Fehling consiste en dos partes:

6. a) Una solución de sulfato cúprico.
b) Una solución de hidroxilo de sodio y tartrato de sodio y potasio (sal de
Rochelli).
Cuando se mezclan cantidades iguales de estas soluciones, se forma un
complejo soluble de tartrato cúprico de color azul obscuro, el cual proporciona una
pequeña concentración de iones cúprico. Los aldehídos reducen la solución de
Fehling y forman un precipitado rojo de óxido cuproso.
OH OH
CH3-C=O + 2Cu + 5OH CH3-C=O + Cu2 + 3H2O
La solución de Benedict es semejante a la de Fehling con la modificación
de que se utiliza citrato de sodio en lugar del tartrato de sodio y potasio. Tiene
como ventaja sobre la solución de Fehling de que no es necesario dividirla en dos
reactivos separados.
Las 3 soluciones mencionadas nos sirven para distinguir los aldehídos de
las acetonas sencillas, porque las últimas no reaccionan. Pueden además
indicarse que la reducción de las soluciones permite diferenciar un aldehído de un
alcohol. Aunque los alcoholes pueden oxidarse por agentes oxidantes fuertes no
son atacados por estos reactivos moderados.
El benzaldehído puede oxidarse hasta ácido benzoico con el reactivo de
Tollens, pero no es atacado por las soluciones de Fehling o de Benedict.
Los aldehídos reducen con dificultad las soluciones neutras o ácidas de las
sales de plata o de cobre. Solo en soluciones alcalinas se observa la fuerte acción
reductora de los aldehídos, aunque no se conoce con certeza el papel que en ella
juega el ión oxidrilo.
PRUEBA DE TOLLENS
MATERIAL REACTIVOS
Tubos de ensayo Reactivo de Tollens
Pipeta de 1 ml Carbohidratos en
polvo

7. Mechero
Baño María
TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidrato.
2. Añadir 1 ml de reactivo de Tollens.
3. Agitar perfectamente.
4. Calentar a baño maría durante 5 minutos máximo. Observar la forma de
espejo que se forma en los positivos.
PRUEBA DE FEHLING
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Fehling “A”
2 pipetas de 1 ml Fehling “B”
1 mechero Carbohidratos al 1%
TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de carbohidratos.
2. Añadir 1 ml de Fehling “A” y 1 ml de Fehling “B”.
3. Mezclar bien y ponerlo a baño maría o en la flama del mechero durante
cierto tiempo.
4. Sí mira a marrón o rojo la prueba es positiva.
Esta prueba es una reacción de oxido-reducción, los alcoholes del azúcar se
oxidan a aldehídos y ácidos, el cobre se reduce de cúprico a cuproso por eso
cambia de color la solución y se forma el precipitado.
PRUEBA DE BENEDICT
MATERIAL REACTIVOS
5 tubos de ensayo Reactivo de Benedict
6 pipetas de 5 ml Carbohidratos de 1%
1 gradilla

8. 1 baño maría
TÉCNICA
1. Colocar en varios tubos de ensayo 1 ml de solución de Benedict
2. Añadir 3 gotas de cada solución de carbohidratos en cada tubo.
3. Agitar y colocar los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo durante 3
minutos.
4. Enfriar la solución y hacer comparaciones.
5. Obsérvese el precipitado formado. Un cambio de color NO indica reacción
positiva, solo el precipitado.
NOTA: Deberán darse los resultados comparativos de las 3 pruebas de
azúcares reductores.
PRUEBA DEL ÁCIDO PICRICO
2, 4,6 TRINITROFENOL
Se puede obtener, pero con mal rendimiento, por acción de la mezcla sulfónica
sobre fenol.
Se obtiene mejor la acción sucesiva de los ácidos sulfúricos y nítricos.
O por nitración de coloro benceno, hidrólisis de nitrito cloro benceno
obtenido a dinitrofenol, y después nitración de este por mezcla sulfonítrica.

9. El ácido pícrico es un sólido cristalizado, amarillo pálido (p.f. 122°C), un poco
soluble en agua, con sabor amargo (picros-amarillo)
Su descomposición explosiva, desencadena por un detonador (fulminante
de mercurio) lo hace útil como explosivo (melenita), si bien tiene el inconveniente
de corroer el alma del cañón por su carácter ácido, por lo que tiene más empleo
en bombas de aviación.
El ácido pícrico es un ácido relativamente fuerte que ataca los metales dando
picratos metálicos muy inestables y explosivos, lo que requiere proteger el acero
de abuses con un barniz o vidriados.
Los picratos de amonio C6H2(NO2)3(ONH4) y de potasio, son pocos solubles en
agua.
El picrato de amonio se utiliza como explosivo. El ácido pícrico se emplea para
teñir de amarillo la lana, como reactivo de alcaloides y proteínas (investigación de
albúminas en líquidos biológicos: reactivo de Esboch).
El ácido pícrico, como otros nitrofenoles, existe en dos formas: la normal que da
cristales cuando se cristaliza la ligroína.

10. Y la ací, que da soluciones amarillas en agua y cristales amarillos de esta
solución, especialmente si es alcalina.
Así el 2,4, dinitrofenol se utiliza como indicador del pH en la escala de Michaelis,
debido a la mayor intensidad de coloración amarilla que presenta una solución
según variaciones pH del medio, se utiliza también para adelgazar, pero su
empleo es muy delicado, debido a su toxicidad.
El grupo aldehído le da característica reductora a monosacáridos.
El grupo aldehído de las aldohexosas se oxida con facilidad el carboxílico
correspondiente. Esto sucede con un pH neutro o poco alcalino, empleando
agentes oxidantes o enzimas.
El ácido monocarboxílico que se produce se conoce con el nombre de
ácido aldónico (a partir de galactosa). En presencia de este agente oxidante se
oxidan tanto el grupo aldehídico como la función alcohólica primaria.
MATERIAL REACTIVOS
6 pipetas de 5 ml Ácido pícrico saturado
1 pipeta de 1 ml Carbonato de sodios al 10%
1 gradilla Carbohidratos al 1%
1 baño maría
5 tubos de ensayo
TÉCNICA
1. A 3 ml de solución de carbohidratos añadir 1 ml de solución saturada de
ácido pícrico.
2. Agregar 0.5 ml de solución de carbonato de sodio al 10%.
3. Calentar en agua hirviendo durante 1.5 minutos.
Un color café denota prueba positiva.

11. RESULTADOS Y OBSERVACIONES:
REACCIÓN DE LA BENCIDINA
N.º TUBO CARBOHIDRATO RESULTADO
1 L-arabinose negativo
2 miel Negativo
3 dextrosa Negativo
4 sacarosa Negativo
5 fructuosa Negativo
6 maltosa Negativo
7 glucosa Positivo
8 glactosa Negativo
9 Xilosa Negativo
En esta reacción solo hubo una coloración rosada con naranja en el carbohidrato
de Glucosa y en los demás carbohidratos fue muy poca la diferencia de color.
PRUEBA DE ANILINA
N.º TUBO CARBOHIDRATO RESULTADO
1 L-arabinose Positivo
2 miel Negativo
3 dextrosa Negativo
4 sacarosa Negativo
5 fructuosa Negativo
6 maltosa Negativo
7 glucosa Negativo
8 glactosa Positivo

12. 9 Xilosa Positivo
REACCION DE TOLLENS
N.º TUBO CARBOHIDRATO RESULTADO
1 L-arabinose Positivo
2 miel Positivo
3 dextrosa Negativo
4 sacarosa Negativo
5 fructuosa Positivo
6 maltosa Negativo
7 glucosa Positivo
8 glactosa Positivo
9 Xilosa Positivo
En la mayoría de los carbohidratos se noto una reacción positiva y reacciono de
una manera de espejo color plata.
PRUEBA DE FEHLING
Arabinose NEGATIVO, No se formo precipitado
Miel POSITIVO, Si se formo precipitado

13. Dextrosa POSITIVO, Si se formo precipitado
Glactosa POSITIVO, Si se formo precipitado
Glucosa Anhidra NEGATIVO, No se formo precipitado
Sacarosa NEGATIVO, No se formo precipitado
Fructuosa POSITIVO, Si se formo precipitado
Maltosa NEGATIVO, No se formo precipitado
Xilosa POSITIVO, Si se formo precipitado
Durante la realización de la practica observamos un cambio de tonalidades a la
hora de agregar los reactivos, y al ser sometidas al baño María durante al menos 5
minutos solo algunos de los 9 carbohidratos presentaron coloración “Marrón” que
indica una reacción oxidativa.
PRUEBA DE BENEDICT

14. Se pudieron observar varios cambios de color oscuro al entrar en baño maria pero
muy poquitos dieron con resultado positivo.
• Mediante la reacción de Benedict podemos identificar azúcares reductores
• La reacción de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen
su OH libre del C anomérico), en disacáridos la sacarosa negativo porque no es
un azúcar reductor y la maltosa positiva.
PRUEBA DEL ACIDO PICRICO
CARBOHIDRATO RESULTADO
Arabinose POSITIVO
Miel POSITIVO
Dextrosa POSITIVO
Sacarosa NEGATIVO
Fructuosa NEGATIVO
Glucosa Anhidra POSITIVO
Xilosa POSITIVO
Maltosa POSITIVO
Galactosa POSITIVO
compuesto caracteristicas resultado
miel
Se mostro un color
café y en la parte
inferior se quedo el
color azul
Negativo
sacarosa Color azulado con
rojizo
negativo
fructosa cambio a un color
rojizo
Negativo
dextrosa Se mostro un cambio
de color café oscuro
espesoso
Negativo
arabinosa Se mostro un color
café oscuro mas
intenso en el
precipitado
Negativo
g-lactosa Se observaron dos
capas una de colo café
oscuro y otra con el
precipitado azulado
negativo
xilosa Se observaron dos
capas una rojiza y la
inferior azulada
negativo
maltosa No se produjo ningún
cambio de coloración
positivo
amDRA Se observaron dos capas una
de colo café oscuro y otra
con el precipitado azulado
negativo

15. Esta práctica fue sencilla y con su elaboración pudimos identificar propiedades de
los carbohidratos, como se dijo anteriormente los resultados arrojaron positivo a 7
de 8 carbohidratos, su identificación pudo ser notoria por la coloración café
después de realizar el procedimiento de la manera indicada.
CUESTIONARIO
1. Escribe las formulas de los carbohidratos utilizados en la practica.
CARBOHIDRATO FORMULA
Arabinose C5H10O5
Miel
Dextrosa C6H12O6
Sacarosa C12H22O11
Fructuosa C6H12O6
Glucosa Anhidra C6H12O6
Xilosa C5H10O5
Maltosa C12H22O11
Galactosa C6H12O6
Estrutura:

16. 2. ¿Qué es un azúcar reductor? Los azúcares reductores son aquellos
azúcares que poseen su grupo carbonilo intacto, y que a través del
mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas.
3. ¿Qué usos tiene el reactivo de Fehling?
Sirve para demostrar la presencia de glusosa, así como para detectar
derivados de ésta tales como la sacarosa o la fructosa.
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos. Éste se oxida a ácido y reduce la sal
de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando un precipitado
de color rojo.
4. Explica por que el yodo da coloración azul marino, con el almidón.
El yodo entra a la estructura helicoidal del almidón, es decir, que los
átomos de yodo se introducen entre las espirales provocando la
absorción o fijación de yodo en las moléculas del almidón

17. 5. ¿Qué importancia farmacológica, tiene el identificar los carbohidratos?
Para analizar el metabolismo celular.
OBSERVACIONES:
En cada reactivo existió una reacción con los carbohidratos. En algunos resulto
positiva inmediatamente al estar en contacto con el agua hirviendo y en otros tardo
más.
Es importante cuidar manejar el tiempo correcto en que se debe poner el reactivo
con el carbohidrato en el agua caliente.
CONCLUSIONES
En la realización de esta práctica aprendimos de manera fácil como es que
algunos reactivos nos ayudan a identificar los carbohidratos.
Como identificar los colores y cambios en cada tipo de reacción, como cambia su
color y aspecto.
BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA.
https://www.google.com.mx/url?
sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjU2czK7LLMAhUis4M
KHSgPDwoQFggdMAE&url=https%3A%2F%2Fes.wikipedia.org%2Fwiki%2FAz
%25C3%25BAcar_reductor&usg=AFQjCNHj_rg8wYiWx59lGLW7Ps4VbDf0bw&sig2=iHrEnWveIl2hA
FdAznGE1g
https://blog.uchceu.es/eponimos-cientificos/reactivo-de-fehling/
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-i/prueba-del-almidon
https://www.google.com.mx/#q=formula+quimica+de+la+GALACTOSA
https://www.google.com.mx/#q=formula+quimica+de+la+Glucosa
https://www.google.com.mx/#q=formula+quimica+de+la+MALTOsa
http://www.ecured.cu/Reactivo_de_Fehling

18. https://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar_reductor
https://mx.answers.yahoo.com/question/index?qid=20070717231845AAwYRu8