diapositivas

1. SLIDEX Strepto Plus
MARCELA MAYORGA
ANDRES QUINTERO

2. SLIDEX Strepto Plus
Prueba de aglutinación de micro partículas de poliestireno
(látex) para la detección rápida de los estreptococos de los
grupos de Lancefiel A, B, C, D, F y G. Esta prueba se realiza
mediante el uso de colonias aisladas en medios sembrados con
muestras de origen humano.

3. FUNDAMENTO
Se recogen las colonias aisladas de estreptococos y se colocan en un tubo que
contiene la enzima de extracción. El antígeno específico de grupo se extrae de
forma enzimática de la pared celular del estreptococo. Se identifica el antígeno
en el extracto mediante partículas de látex sensibilizadas con el anticuerpo
antiestreptococo del grupo específico. Se forman aglutinaciones visibles en la
suspensión específica de partículas de látex que reaccionan con el antígeno
extraído. El látex permanecerá en suspensión si el antígeno no estuviera
presente en el extracto.

4. PROCEDIMIENTO
 Muestras (toma y preparación)
Selección de colonias
• Sembrar la muestra sobre un medio sólido adecuado.
• Después de 18-24 horas de incubación a 33-37°C en una atmósfera
enriquecida de CO2 al 5%, o en una atmósfera no enriquecida, escoger
las colonias sospechosas.
• Si la siembra se hubiera realizado sobre Agar chromID™ CPS® asegurarse
que la colonia es un estreptococo: color turquesa a violeta, morfología,
coloración Gram y catalasa.
• Si se hubiera sembrado sobre Agar chromID™ Strepto B, escoger las
colonias de color rosa pálido a rojo, y que sean redondas y nacaradas.

5. Procedimiento
 Reconstitución
Reconstituir la enzima de extracción con 10 ml de agua destilada estéril.
 Preparación del extracto
• Transferir 0,4 ml de enzima de extracción en un tubo de ensayo.
- Usar cultivos procedentes de un medio sólido, escoger de 3 a 5 colonias características según
su tamaño, y emulsionarlos en 0,4 ml de enzima de extracción.
• Homogeneizar en un mezclador tipo vórtex e incubar en la estufa durante 10 minutos a
37°C.

6. Identificación
1.Permitir que los reactivos alcancen la temperatura ambiente (18-25°C) al menos 10 minutos
antes de su uso.
2.Resuspender los reactivos de látex. Eliminar las burbujas retenidas en el cuentagotas.
3.Registrar la referencia de la cepa sobre una tarjeta (fuera de los pocillos de reacción).
4.Agitar bien las suspensiones de látex.
5.Depositar 1 gota de cada reactivo de látex en los pocillos de reacción de la tarjeta. Cuidar que
los frascos cuentagotas estén en posición vertical durante la distribución de las gotas.

7. 6. Distribuir 15 µl de extracto al lado de cada gota de látex.
7. Mediante un bastoncillo, mezclar las 2 gotas y extenderlas sobre toda la
superficie del pocillo.
8. Realizar cuidadosamente un ligero movimiento de rotación con la tarjeta
durante 2 minutos como máximo

8. LECTURA E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
• Un resultado positivo se manifiesta por la aparición de una aglutinación
visible con un reactivo de látex en menos de 2 minutos.
• Un resultado negativo viene indicado por la ausencia de aglutinación:
suspensión homogénea o granulación muy fina en 2 minutos.

9. • La reacción es ininterpretable cuando se observa la aglutinación en varias
de las suspensiones de látex. Esto puede corresponder a una cepa
poliaglutinante o a una mezcla de cepas. Un resultado es no-identificable
si no se observa ninguna aglutinación en ninguno de los reactivos de látex.
• La interpretación de los resultados de la prueba debería realizarse
teniendo en cuenta la historia del paciente, el origen de la muestra, los
aspectos macro y microscópicos de la colonia, y, si fuera necesario, los
resultados de cualquier otra prueba que se haya realizado.

10. Para cada serie de pruebas, comprobar:
•reactividad de las suspensiones de látex. Para ello, consultar la sección
"Identificación" y sustituir el extracto por el control positivo. La aglutinación
debería ser visible en cada una de las suspensiones de látex en menos de 2
minutos.
•especificidad del análisis de aglutinación. Para ello, consultar la sección
"Identificación" y sustituir el extracto por 0,15 mol/l de cloruro sódico, pH =
7. No se debería ver ninguna aglutinación en cualquiera de las suspensiones
de látex después de 2 minutos.