Este documento resume las principales características de las enteroparasitosis, incluyendo sus ciclos biológicos, mecanismos de transmisión y técnicas de diagnóstico por laboratorio. Describe los protozoos y helmintos intestinales más comunes, sus formas de infestación, y métodos como el examen directo de heces, técnicas de concentración como la sedimentación y la flotación, y tinción como la hematoxilina-férrica para su detección.

1. Tema 3.- Diagnóstico de laboratorio de las
Enteroparasitosis
• Características generales de las Enteroparasitosis
• Principales protozoosis y helmintiasis intestinales
• Ciclos biológicos tipo: a) Entamoeba histolytica
b) Taenia saginata
c) Enterobius vermicularis
d) Anquilostómidos
• Principios y utilidad de las técnicas de estudio
parasitológico de heces. El examen coproparasitario
• Elementos no parasitarios de las heces
• El método de Graham

2. ENTEROPARASITOSIS. Características generales
• Tracto digest humano  Numerosos parásitos:
• Protozoos COMENSALES
• Helmintos PATOGENOS
• Infestación
• Vía digestiva (mayoría de casos)
• Vía cutánea
• Formas infestantes
• QUISTES / OOQUISTES  Protozoos
• HUEVOS  Helmintos
• LARVAS  Tenias, Triquina

3. ENTEROPARASITOSIS. Características generales
Mecanismos transmisión
• Infestación por FECALISMO
• Infestación por CARNIVORISMO
• Infestación s/ ciclo ANO-MANO-BOCA
• Infestación CUTANEA
Mecanismos transmisión  Relación con ciclo biológico

4. INFESTACION POR FECALISMO
• Característico de parásitos de ciclo biológico MONOXENO
PROTOZOOS
a) PARASITOS b) COMENSALES
• Entamoeba histolytica • Entamoeba coli
• Giardia lamblia • Endolimax nana
• Isospora belli • Iodamoeba butschlii
• Cryptosporidium spp. • Chilomastix mesnili
• Balantidium coli • Blsatocystis hominis
• Entamoeba polecki
• Enterocytozoon spp.
HELMINTOS
• Asacaris lumbricoides
• Trichuris trichiura
• Hymenolepis nana

5. INFESTACION POR FECALISMO
Medio Externo
Contam suelo
Formas
infestantes Ingestión
Quistes
Ooquistes
Huevos
Larvas
Hosp Infestado (=) Hosp Susceptible

6. www./dpd.cdc.gov/dpdx

7. INFESTACION POR CARNIVORISMO
• En parásitos con ciclos biológicos complejos, con uno o
varios Hosp. Intermediarios ( Ciclos HETEROXENOS)
• Entre los hospedadores existe una relación PREDADOR -
PRESA
• El PREDADOR soporta al parásito en su intest, donde se
realiza la f sexuada (Se comporta como Hosp DEFINITIVO)
• La Presa se infesta por fecalismo, a partir de las formas
que elimina el H D con las heces (hosp intermediario)
• En el caso del hombre la infestación se adquiere por
ingestión de carnes y pescados crudos, o insuficientemente
cocinados

8. INFESTACION por la piel
Contacto con
• Algunas especies de helmintos intestinales H. Definitivo
(s/t nematodos)
• Eliminación de:
• larvas
Penetración piel
• huevos muy desarrollados
• Se transforman en LARVAS INFESTANTES
(larvas filariformes)
Migr viscerales
• Ancylostoma duodenale
• Necator americanus
• Strongyloides stercoralis Local definitiva
en intestino

9. Diagnóstico de laboratorio de las Enteroparasitosis
Consideraciones generales:
• Numerosas técnicas de examen coproparasitario
• Finalidad diferente
• Aplicación
• General
•  Selectiva o específica
• Utilidad en función de su capacidad para:
• Concentrar elementos parasitarios
• Cuantificar la carga parasitaria
• Evidenciar difs estadíos evolutivos
• Preparar extensiones permanentes

10. Diagnóstico de laboratorio de las Enteroparasitosis (2)
• IMPORTANTE:
• 1) Selección técnica(s) s/ casos
• Grupo o especies de parásitos
• Fase evolutiva
• 2) Examen de varias muestras (3) por paciente

11. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES
• Evidenciación de parásitos que:
• Viven en el tracto digestivo
• Realizan su tránsito al m ext a través del mismo
• I) No todas las técnicas son adecuadas para todos los parásitos:
• Importante conocer ciertos datos:
• Procedencia geográfica del enfermo
• Resumen HC
• Resultados otras pruebas/análisis
• Información relativa a trattos recientes
• II) Un ex aislado con result negativo no tiene ningún valor
eliminatorio
• III) La muestra debe ser examinada rápidamente

12. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES
Para descartar una parasitosis intestinal:
• Realizar al menos 3 exámenes coproparasitarios seriados
(a dias alternos)
• Tras una adecuada preparación del paciente
• Remitiendo las muestras lo mas rápidamente posible al lab

13. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES
El examen PARASITOLOGICO DE HECES forma parte del
ESTUDIO COPROLOGICO, mas general, que informa sobre:
• Aspecto macroscópico de las heces
• Consistencia / agua / Veloc tránsito.....
• Color (calidad/cantidad flujo biliar)
• Presencia de sangre, mucus ......
• Aspecto microscópico restos alimenticios
• Presencia mucus, hematíes, leucos, céls epiteliales ......
• Presencia de parásitos (trofoz, quistes, huevos, larvas....)
• Elementos micóticos, su relación o proporción con bacterias

14. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES
El examen COPROPARASITARIO no resulta de utilidad cuando:
• La eliminación de los parásitos no se realiza por el intestino
• La puesta de huevos no se lleva a cabo en el intestino
• Los parásitos son inmaduros o estériles, y no dan lugar a
formas de diseminación
• Parasitismo por un único individuo (esp dioicas)
• Parasitismo reciente (fase adulta no desarrollada)

15. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES. Preparación paciente
Régimen alimenticio estricto desde 72 h antes a la recogida de la
muestra ( UTOPIA ??)
Condiciones mínimas:
• Evitar medicamentos opacos no absorbibles
• Carbón vegetal
• Contrastes radiológicos (papilla baritada)
• Sustancias grasas (s/t supositorios)
• Evitar alimentos con muchos residuos
• Legumbres
• Frutas de cutícula resistente
• Vegetales con céls duras
• Frutos con semillas duras y pequeñas (p ej higos)

16. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES. Muestras
Considerar adecuadamente las condiciones de :
• Toma de muestra
• Asepsia?
• Momento? / lugar?
• Recipiente ?
• Envío de muestra
• En hospital
• Por correo
• Conservación de las muestras
• Provisional por frio (att trofozoítos amebas)
• Definitiva (soluciones fijadoras)

17. TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO
• 1) Examen directo de una pequeña porción de heces frescas
• 2) Examen después de aplicar un método de concentración
• 3) Examen de extensiones o preparaciones permanentes
Examen directo
Observación microscópica minuciosa de toda la preparación
• Objetivo seco débil (10 x)
• Objetivo seco fuerte (25-40 x)
• Habitualmente no se emplea obj de inmersión
• Importante: No diluir demasiado las muestras

18. TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO
Examen directo
SF Lugol
Movilidad Tinción
(Trofozoítos) Vacuolas
Núcleos

19. TECNICAS DEL EXAMEN COPROPARASITARIO
2) Examen post-concentración
• Reunión en un pequeño vol los elementos parasitarios
inicialmente dispersos en una gran masa de heces
• Numerosos métodos
• Ninguno evidencia todos los tipos de parásitos, (cada uno tiene
sus indicaciones precisas)
Métodos físicos Métodos difásicos
• Por sedimentación
• Por flotación • Empleo de 2 fases no miscibles
Agua // Eter o Acetato etilo

20. METODOS DE CONCENTRACION
Métodos físicos
• Dilución minuciosa heces en líquido o solución de densidad:
• Inferior a la de los parásitos (Técnicas de sedimentación)
• Superior (Técnicas de flotación)
• Ventajas:
• Realización muy simple
• Precisan poco material
• Inconvenientes:
• Procesos largos
• Exigen mucha manipulación
• No aplicables a series grandes de muestras
En ciertos casos se puede acelerar x centrifugación suave

21. TECNICAS DE CONCENTRACION. Mét de sedimentación simple
• Triturar las heces (10-20 g) en agua
de grifo
• Poner la dil en una probeta de 250-500 cc
y rellenar (agua grifo)
• Dejar reposar aprox 1 h
• Deshechar sobrenadante
• Resuspender en agua de grifo
• Dejar sedimentar 45 min
• Deshechar sobrenadante
• Repetir esta op varias veces, hasta que
el sobrenadante quede transparente
• Recoger y examinar el mat sedimentado.
Hacer tres tomas:
• Superficie
• Media altura
• Fondo

22. TECNICAS DE CONCENTRACION. Mét de flotación
Características a considerar:
Densidad sol empleada > Dens parásitos
Película
 Concentración en superficie superficial
Importante:
• Manipular rápidamente
• Impreg huevos operculados  Sediment Sulfato
de cinz
• Alteración morfol huevos (Identificación)
Sedimento

23. METODOS DE CONCENTRACION
Métodos físicos. Ejemplos
Técnicas de sedimentación
• Método de sedimentación simple
• Método de Faust e Ingalls
• Sedimentación en columna alta
Técnicas de flotación
• Método de Fulleborn
• Método de Willis (flotación en salmuera)
• Método de Faust (flotación en sulfato de zinc)

24. METODOS DE CONCENTRACION
Métodos difásicos
• Derivados todos del mét de Telemann (1.908)
• Empleo de dos fases no-miscibles
• Fase acuosa (sol. formaldehido)
• Fase éter o disolv de lípidos (Acetato de etilo)
• Los elementos fecales y los parásitos se localizan en la fase
acuosa o en la interfase agua-éter, en función de una
característica, el balance hidrófilo-lipófilo

25. METODOS DE CONCENTRACION
Métodos difásicos
• Realización :
• Dilución de las heces en agua Eter
(o el la fase acuosa)
Restos
• Adición y emulsión con el éter Líp disueltos
( o acet de etilo)
• Centrifugación suave
Formalina
• Algunos ejemplos:
• Método de Telemann
• Método de Rivas
• Método de Ritchie Sedimento
• Método de Blagg, Schloegel, Parásitos
Mansoer y Khalaf

26. Acetato de etilo
Restos fecales y grasa
Formalina
Sedimento (Parásitos) 12

27. Examen directo, conc por
flotación y tinción de
hematoxilina-férrica
%
Examen directo y
d conc por flotación
e
t
e Examen directo
c
t
a
d
o
Número de exámenes
Incremento de la detección de Entamoeba histolytica en relación
al número de muestras fecales examinadas y a las técnicas empleadas

28. OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE
ENTEROPARASITOSIS
Técnicas del Examen Coproparasitario. Resumen
1.- Observación macroscópica
2.- Observación microscópica
2.1.- Observación microscópica de preparaciones “en fresco”
(entre porta y cubre)
• Muestras de heces directamente en SF o Lugol
• Muestras de técnicas de concentración
2.2.- Observación microscópica de preparaciones teñidas,
permanentes o no, que permiten la conservación y la
observación cuidadosa y detallada de los parásitos

29. OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE
ENTEROPARASITOSIS
TINCIONES ACIDO-ALCOHOL RESISTENTES
• Utilidad: Demostración de ooquistes de Cryptosporidium spp.
Evidenciación de Cyclospora spp.
• Aplicables a frotis de heces (tb ciertos concentrados)
• Técnicas: Las mas empleadas son la de KINYOUN y una
modificación de la ZIEHL-NEELSEN
TINCION DE HEMATOXILINA-FERRICA
• Utilidad: Observación detallada de quistes, pero s/t de
trofozoítos de protozoos.
Si se realiza montaje, buena colección permanente
Exige una realización cuidadosa,

30. COLORACIÓN DE KINYOUN (Cryptosporidium // Cyclospora)
• Fijación frotis: Metanol 30 seg
•Tinción : 5 min (frio) con sol de Fuscina básica
• Fusc básica 4g
• Fenol 8g
• Etanol (95%) 90 ml
• A dest 100 ml
• Lavado
• a) Etanol 50%: 3-5 min
• b) Agua corriente
• Decoloración: Acido sulfúrico 1%: 2 min
• Contracoloración: Azul metileno Loeffler: 1-2 min
• Azul de metileno 0,3 g
• Alcohol 95% 30 ml
• KOH 0,01% 100 ml

31. ESTUDIO PARASITOLOGICO DE HECES.
Elementos no parasitarios de las heces
• Restos alimenticios semi-digeridos
• Células epiteliales (mucosa intestinal)
• Células sanguíneas
• Leucocitos (úlceras intestinales)
• Macrófagos  amebas patógenas
• Hematíes
• Bacterias
• Hongos

32. Elementos no parasitarios de las heces (2)
RESTOS ALIMENTICIOS
• Tejido conjuntivo
• Fibras musculares estríadas (carne) Att tamaño / ángulos
• Grasas neutras  Glóbulos refringentes tamaño variable
• Acidos grasos  Agujas finas
• Almidón
• Crudo: Granos en capas concéntricas
• Céls reserva amilácea (s/ procedencia)
• Celulosa
• Digerible: Masas celulósicas (céls reserva)
• No digerible: Traqueídas, pelos vegetales, polen etc
CRISTALES
• Origen alimentario (oxalato de calcio)
• Endógeno (Ox calcio, fosfato amónico-magnésico,
Charcott-Leyden)
• Medicamentos

33. OTROS EXAMENES DIRECTOS PARA DIAGNOSTICO DE
ENTEROPARASITOSIS
1.- Examen directo de líquido duodenal
• Se obtiene por sondaje duodenal o con càpsula entérica o test
del cordón"“Enterotest”
• Observación
• Fresco (directo o tras centrifugación)
• Extensiones (frotis) coloreados (tinc AAR)
• Utilidad / Rendimiento
• Trofozoítos de Giardia lamblia
• Ooquistes de Isospora y Cryptosporidium
• Huevos de Fasciola hepatica
• Larvas de Strongyliodes stercoralis

34. 2.- Técnica de Graham (Mét de la cinta adhesiva o espátula adhesiva)
• Método mas empleado para el diagnóstico de la oxiuriasis
o enterobiasis (Enterobius vermicularis)
• Observación microscópica del material recogido de la zona
perianal, por aplicación de una sup adhesiva (celofán o similar)
• La cinta se dispone sobre un soporte rígido (depresor lengua),
con la sup adhesiva hacia el exterior
• Se aplica varias veces sobre la piel, en los márgenes anales
• Se envia al laboratorio y se observa a microscopio (10X)
IMPORTANTE
• Realizar al menos 3-5 tomas antes de informar un resultado
negativo
• Realizar la toma de muestra a 1ª hora por la mañana, antes
de salir de la cama