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Santiago Ortiz Mesa
Biología Molecular
Introduction
•  Staphylococcus aureus : it’ a
Gram-positive bacteria with a
cocci shape and tend to be
arrange in clusters, the Staph
can causes a wide variety of
clinical manifestations like boils,
Staphylococcal scalded skin
syndrome and others.
•  Drug resistance: it’s the mutation
of the bacteria to be less
susceptible to a drug compound.
Introduction
•  MRSA has cause worldwide concern
•  Vancomicin as a gold standard treatment but
researchers are concern because of the resistance of the
Staph to the vancomicine.
Objective
•  Identify the healthcare-associated MRSA (HA-
MRSA) clonal types currently circulating in
Zhejiang Province and update the information on
MRSA clonal evolution.
•  Evaluate the in vitro activity of different anti-MRSA
agents, compare the antimicrobial susceptibility
among the different clonal types, and investigate
the possible resistance mechanisms.
Materiales y Métodos
•  De Enero del 2012 a mayo del 2013 se recogieron
391 bacterias de HA-MRSA no duplicados.
•  Se recogieron las
muestras en 12 hospitales
diferentes de 5 ciudades
de la provincia de
Zhejiang.
•  Las muestras de Staph se
recogieron de sangre,
drenajes, pus, catéter
venoso central y el esputo
•  Se identifico el S. Aureus
con Vitek y el MRSA se
identifico utilizando el
método de difusión del
disco de cefoxitina y la
detección del gen mecA
mediante pcr
Materiales y Métodos
•  Prueba de susceptibilidad antimicrobiana:
•  Es una prueba que se puede realizar utilizando el CIM
(concentración inhibitoria mínima) Las pruebas de la CIM
pueden ser realizadas usando como medios de cultivo en
caldo o agar.
•  Secuenciación de nucleótidos:
•  Es un método utilizado para buscar la presencia de los
genes blancos.
•  MLST:
•  La técnica consiste en amplificación mediante pcr seguida
de la secuenciación de ADN.
Materiales y Métodos
•  Electroforesis en gel:
•  Es una técnica muy utilizada en microbiología o en
biología molecular para separar fragmentos de
macromoléculas como DNA, RNA y/o proteínas según
su peso y carga.
•  Tipificación SCCmec:
•  Se utiliza para diferenciar el cromosoma mec del Staph
utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (pcr).
Materiales y Métodos
(Ejemplo de electroforesis en gel)
Resultados
Resultados
Resultados
Resultados
Discussion
Author What he says Yes or no
Peiqioing Zhu et al. The ST239-MRSA-III to be the most
epidemic HA-MRSA clone in chine,
including Zhejiang Province
NO
Chen et al; Xiao et
al
t002 to be dominant in ST5 clonal
isolates
NO
Kong et al. reported an increasing prevalence of
the ST5-II-t311 in a teaching hospital
YES
Conclusion
•  the amount of MRSA is increasing and it is a
problem that concerns everyone not only China
and the United State
•  stop using antibiotics for everything, formulate and
investigate which antibiotic the patient needs to be
treated in order to prevent the bacteria from
becoming more resistan
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  • 2. Introduction •  Staphylococcus aureus : it’ a Gram-positive bacteria with a cocci shape and tend to be arrange in clusters, the Staph can causes a wide variety of clinical manifestations like boils, Staphylococcal scalded skin syndrome and others. •  Drug resistance: it’s the mutation of the bacteria to be less susceptible to a drug compound.
  • 3. Introduction •  MRSA has cause worldwide concern •  Vancomicin as a gold standard treatment but researchers are concern because of the resistance of the Staph to the vancomicine.
  • 4. Objective •  Identify the healthcare-associated MRSA (HA- MRSA) clonal types currently circulating in Zhejiang Province and update the information on MRSA clonal evolution. •  Evaluate the in vitro activity of different anti-MRSA agents, compare the antimicrobial susceptibility among the different clonal types, and investigate the possible resistance mechanisms.
  • 5. Materiales y Métodos •  De Enero del 2012 a mayo del 2013 se recogieron 391 bacterias de HA-MRSA no duplicados. •  Se recogieron las muestras en 12 hospitales diferentes de 5 ciudades de la provincia de Zhejiang. •  Las muestras de Staph se recogieron de sangre, drenajes, pus, catéter venoso central y el esputo •  Se identifico el S. Aureus con Vitek y el MRSA se identifico utilizando el método de difusión del disco de cefoxitina y la detección del gen mecA mediante pcr
  • 6. Materiales y Métodos •  Prueba de susceptibilidad antimicrobiana: •  Es una prueba que se puede realizar utilizando el CIM (concentración inhibitoria mínima) Las pruebas de la CIM pueden ser realizadas usando como medios de cultivo en caldo o agar. •  Secuenciación de nucleótidos: •  Es un método utilizado para buscar la presencia de los genes blancos. •  MLST: •  La técnica consiste en amplificación mediante pcr seguida de la secuenciación de ADN.
  • 7. Materiales y Métodos •  Electroforesis en gel: •  Es una técnica muy utilizada en microbiología o en biología molecular para separar fragmentos de macromoléculas como DNA, RNA y/o proteínas según su peso y carga. •  Tipificación SCCmec: •  Se utiliza para diferenciar el cromosoma mec del Staph utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (pcr).
  • 8. Materiales y Métodos (Ejemplo de electroforesis en gel)
  • 13. Discussion Author What he says Yes or no Peiqioing Zhu et al. The ST239-MRSA-III to be the most epidemic HA-MRSA clone in chine, including Zhejiang Province NO Chen et al; Xiao et al t002 to be dominant in ST5 clonal isolates NO Kong et al. reported an increasing prevalence of the ST5-II-t311 in a teaching hospital YES
  • 14. Conclusion •  the amount of MRSA is increasing and it is a problem that concerns everyone not only China and the United State •  stop using antibiotics for everything, formulate and investigate which antibiotic the patient needs to be treated in order to prevent the bacteria from becoming more resistan