1. Biotecnología y terapia génica
utilización de la biología
molecular
Aspectos sobre biología molecular, con los últimos avances en la biología
como sea ido de la morfología hasta la parte molecular como ahora, también
este curso lo llevamos de la misma forma. La terapia génica con otras
aplicaciones A través de la biología molecular son cada vez mayores y
mejores, esperamos que el profesional esté al tanto y los sepa aplicar en su
trabajo. Al respecto han visto que en trayecto del curso, desde de la célula
tanto morfo-químicamente, se llego al núcleo y ahí adentro encontramos el
ADN , responsables de la síntesis de proteínas. Importantísimas en la serie de
actividades y conocimientos que significa la biología molecular. En ese sentido
vieron lo que es la síntesis de dna, transcripción, traducción, para hacer las
proteínas. Todo ese juego que hay entre proteínas y acido nucleíco es lo que a
permitido el desarrollo de una tecnología que se llama “biotecnología” que
modifica tanto la estructura genética y proteica de los seres vivos con
caracteres específicos.
Hoy revisaremos la aplicación de estas tecnologías para la biotecnología y
otras para la terapia génica.
En el caso de la evolución de los seres vivos desde la bacteria hasta los
mamíferos si relacionamos ese desarrollo y referencias de estructuras y función
con el número de nucleótidos podemos establecer una línea recta. No es tan
recta posee levantamientos donde hay estructuras que se salen de la línea
recta, los organismos más evolucionados (mamíferos) tienen más partes de
nucleótidos que bacterias y hongos etc. Podemos decir que la evolución
significa pares de nucleótidos. Ósea acido nucleíco. Si revisamos de forma
simple, los genes no el acido nucleíco y comparamos algunos seres vivos,
veremos que los que tienen menos desarrollo evolutivo como insectos y
gusanos 19 o 20 mil genes y mamíferos 30mil genes. Relación entre número de
genes y desarrollo evolutivo. Mamíferos muestran que son más evolucionados
por su número.
Sin embargo dentro de los mamíferos podemos ver que todos ellos tienen
alrededor de 30mil, pero vean que la rata es menos involucionada que el ser
humano, la evolución es por aumento de genes.
Qué pasa con el ADN , (imagen de la composición de ADN en un organismo)
si se revisa las secuencias y las distintas funciones en todo el ADN , se
encuentra que los genes (aquellas secuencias de nucleótidos que son
responsables de la síntesis de proteínas) son apenas un del 65% al 92% no
alcanza al 30, ese poco de ADN es responsable de la condición que
hablábamos,. Por ende hay una gran cantidad de ADN que no tienen nada
que ver con las características de los seres vivos, pero si está ahí es responsable
de algo. Hasta el momento los estudios muestran que esa secuencia es una
secuencia reguladora que permite decirte a la célula del páncreas que

2. produzca insulina y a la muscular que no produzca insulina, porque ambas
tienen el mismo genoma, pero sin embargo una secreta insulina y la otra no,
dependiendo de la secuencia reguladora de la célula. Funciones regulatorias
que tienen que ver con distintos aspectos de la síntesis de ADN y la síntesis de
proteínas,.
Sin embargo hay secuencias que quedan fuera de todo, hay algunos autores
que todavía creen que tienen razón en que el resto del ADN es un ADN
“basura”
A través de la evolución de bacterias a mamíferos ha habido una serie de
cambios en la condición genética en los seres vivos, pero la idea es que se
quede el concepto, en el caso del insecto o el gusano hay una diferente de 13
a 9 mil genes. La idea del ADN basura cuando el insecto se “transformo” a
gusano aumento el número de genes de su material genético, y la idea es que
el gusano no elimino los genes del insecto, porque necesitaba proteínas
diferentes, en el proceso evolutivo no elimino los genes del insecto quedando
en el genoma del gusano. Eso mismo se traslada al resto de seres vivos que
evolucionaron. Los mamíferos tienen mayor parte de ADN que se uso en
especies previas, que no se necesitan ahora porque tiene funcionamiento y
estructura distintos,. Ese es el ADN basura. El que explicaría el ADN demás que
hay presente y la gran cantidad de ADN.
Esto tiene por objeto que tengan importancia del ADN en las proteínas para
los seres vivos, y porque entonces en el desarrollo del estudio se ha podido ver
la biología molecular, porque es importante y significa una serie de
conocimientos que da respaldo explicando la simple biología celular.
En la biología molecular
hay una serie de métodos
de estudio donde hay una
serie de metodología de la
biología celular
manipulando ADN y
obtener información y
transformar un poco estas
estructuras para generar el
ADN y generar
“organismos nuevos”.
Entre las importantes
herramientas están las
encimas de restricción, que
cortan el ADN en distintas
partes dependiendo del
tipo de enzima que se
trate.
Eso nos permite por
ejemplo extraer y combinar
distintos tipos de ADN , ese
es un ejemplo clásico en que un plásmido (dna circular de la bacteria) con
una secuencia especifica puede ser cortada por una nucleasa especifica y al
cortarse ese plásmido se habla de separar donde se corta y los extremos
quedan abiertos a recibir la secuencia complementaria. Uniéndose
específicamente, a través de ligasa

3. Existe la clonación molecular, tomando un plásmido y ponerle un trozo de ADN
extraño a la bacteria.
Supongamos que tengo el gen de la insulina, proteína pequeña de 150 bases,
es pequeño para entrar en ese plásmido siempre y cuando tena la secuencia
correspondiente. Generándose una nueva molécula que es un ADN
recombinante.
Porque ese nombre?
Porque tiene ADN de plásmido (bacteria) y dna extraño (de otra bacteria o
de cualquier otra cosa), de esa manera queda conformado el ADN
recombinante el cual por supuesto se puede tomar y colocar en el interior de
una bacteria, (se pone a 42ª, se empiezan a generar agujeros donde ingresa el
plásmido) ya no es el plásmido solo sino que tiene el trozo de ADN extraño,
como todo el ADN es universal (las mismas secuencias de nucleótidos) por
ende la bacteria no tiene ni una razón para descartar ese nuevo trozo de ADN
que trae, que si significa generar proteína la bacteria lo genera. Así la bacteria
genera otra proteína que en condiciones normales no genera. Si hablamos de
insulina la bacteria comenzara a producir insulina.
Significa que las podemos poner en condiciones especiales obteniendo gran
cantidad de esas bacterias, donde se obtienen varios litros de bacterias que
produce esa proteína que es la insulina.
Después se sacan las bacterias se lisan se extraen sus proteínas y por
cromatografía se separan todas las demás proteínas y se obtiene la insulina
recombinante. Entonces es resultado de una tecnología que tiene que ver con
la biología molecular, para que vean su importancia para el ser humano.
Otro tipo de clonación es la llama clonación
celular en donde utilizando un organismo
determinado se puede colocar una célula
especifica (un cigoto) ósea un ovulo
fecundado, se puede poner en otro
organismo, diferente del progenitor, se pone
en un organismo diferente haciéndolo
desarrollar en ese organismo desarrollando
otro individuo que será igual que donde se
obtuvo el ovulo. (dolly) que era idéntica de
la oveja que se saco la célula de un tejido,
órgano. Por ende es una célula que tiene
todo el genoma. No es el ovocito, por ende
las células que se saco del animal tiene todo
el material genético necesario para dar
origen a otro animal, eso es lo que se
estimula para que pueda ser ubicado en el
interior de una madre sustituta donde se
desarrolla un nuevo organismo que es la
dolly. Ahí si es idéntico porque tiene el mismo
material genético del animal que se le
sacaron las células. “idénticos” porque en alguna de las clases vieron el ADN
mitocondrial, que está relacionado con las características.

4. La generalidad de las proteínas que se utilizan para el trabajo científico son
proteínas que no tienen color, no se pueden identificar fácilmente, en el caso
de clara de huevo, le echan un poco en un tubo con agua y después de
agitarlo no podemos distinguir albumina,. Eso pasa por la mayor parte del
organismo. Algunas pocas como la GFP y hemoglobina, hay que usar un
sistema para poder marcar la proteína, para ver su desplazamiento etc. Para
poder identificarlas en el trabajo que se realiza con ella se utilizan marcadores
(genes reporteros) uno de esos genes reporteros es la proteína fluorescente
verde, que la tiene una medusa que produce esa luz que fluorice, así los
organismos atraen a sus presas. Esa proteína GFP es una proteína bastante
pequeña (50 aa) es muy fácil de manipular.
Se puede mandar a hacer un gen de la GFP porque es simple. Se puede poner
en el interior de diferentes organismos, así ha sido puesta en todos los
organismos., y es posible tener un conejito verde. Observado con UV de color
verde. Lo mismo pasa con los pececitos y gusanos.
Si se le inyecta directo se lo comen los anticuerpos, esto se hace cuando el
organismo está en desarrollo . Para que el gen pueda estar en todas las
células., si no está en esa etapa solo se podría obtener resultados parciales si
es que ingresa, porque hay enzimas y el organismo se defiende porque hay
una sustancia extraña, así se hace en embriones
o cigotos.
En el caso de la lombriz, la utilización de esta
proteína es bastante “cool” así podemos seguir
algunas proteínas en el desarrollo del gusano.
Podemos ver en distintas etapas mostrando
distintas proteínas, si brilla el ganglio significa que
la proteína marcada con gfp significa que está
en ese lugar. Esa es la utilidad que tiene la
marcación, donde hay cuanto esta y como se
mueve la proteína.
También hay chanchitos verdes :D
Modelo de la molécula de la GFP, que tiene
atamos que producen la fluorescencia.

5. Yendo ahora a las aplicaciones de la biología molecular, en el tratamiento de
los minerales de diferentes tipos, existe un tipo , un genero de bacterias que es
el “thiobacillus” que lixivia minerales, ósea es capaz de tomar ciertas sales
como sulfuro de hierro o sulfato de hierro y las transforma en otras moléculas,.
Viendo eso algunos científicos lo aplicaron al cobre. Y se hizo un cambio
genético a la bacteria para que en vez de usar sales de hierro utilice sales de
cobre. Hay un grupo de esas bacterias que toma sulfuros de cobre
haciéndolos sulfato de cobre. Que es una de las sales que se utiliza en el
tratamiento de las mineras, se utiliza con acido sulfúrico, después de la
electricidad hay cobre legal y sulfato. La idea es colocar todos los metales del
cerro en sulfato de cobre. Estas bacterias hacen eso.
Son varias las miles de toneladas de cobre que diferentes empresas mineras
realizan utilizando bacterias. Es un procedimiento que los dejan ahí, para que
la bacteria trabaje y después se saca el cobre. Cada vez mas aumenta la
producción de ese tipo de cobre. Biolixivacion.
Otra aplicación de la biología molecular es lo que podemos nombrar en forma
general como identificación de organismos, especialmente personas.
Saben que normalmente cuando es difuso identificar una persona se va a la
prueba de ADN, que identifica en forma casi perfecta a una determinada
persona. Hay una serie de secuencias de nucleótidos en los intrones del ADN
del ser humano, (intrones que son partes de los genes que se quedan afuera)
tienen secuencias que se repiten a lo largo de los cromosomas del organismo
esa serie de secuencia se ha podido identificar distinta en cada una de las
personas que se a echo la determinación,. Si hay 50 citocina, cccccc después
otras bases y de nuevo 25 c seguidas. Cccccc y otras gggg a eso se le llama
polimorfismo (conjunto de repeticiones de bases) esas secuencias reptidas que
tienen los intrones, son diferentes en las diferentes personas, se ha podido
determinar que todos tienen diferentes ubicaciones de los polimorfismos
Con ese estudio se ha logrado establecer una serie de marcadores, se ha
seleccionado una serie de estos polimorfismos en diferentes cromosomas y al
tratar esos dna con una misma encima aparecen bandas distintas en personas
diferentes. Para trabajar con esto se han generado 17 lugares en todo el
genoma donde se estudian los polimorfismo,. (Generalmente con 13 basta) y
se determinan los polimorfismo. Cromosoma 18 brazo q 21.8 del centromero

6. etc. El número es con respecto al centromero. Esos marcadores se tratan con
determinadas encimas de restricción y se obtienen diferentes bandas como las
que mostro el profe.
Que significa del punto de estadística?
Permite realizar una labor importante en la vida del ser humano, esa
combinación de marcadores cuando se trata con la determinada enzima de
restricción, nos da una diferencia entre los distintos seres humanos. Como son
entre 15 marcadores, la probabilidad que se repita en 2 individuos el mismo
perfil es de 1 en 100.000.000.000.000.000.000.000.000 (7mil millones de seres
humanos) del punto de vista estadístico es imposible por este procedimiento.
Es decir que hay un 100% de certeza que la diferencia entre las personas se
determina con ese examen.
Que se logra al estudiar el polimorfismo en personas?
Identificar personas que no se conocen, investigación de la paternidad. Si es
un hombre que hace la petición es una “reclamación” y la otra es una
“impugnación” donde la mujer dice “ese hombre es el padre de mi hijo” esa
es la petición de una mujer para imputar a un hombre como el padre. Y eso se
hace en tribunales.
Si son fanáticos del criminal minds, ahí pueden ver lo que se puede hacer con
el ADN
Foto de prueba de paternidad, se realiza el análisis
en 4 marcadores usando enzima de restricción y las
bandas están ahí. Como se determina la
paternidad? La idea es que si hay 2 bandas iguales
en las personas hay relación filial, relación de
parentesco, hay todo un tratamiento estadístico de
todo lo del sistema. Básicamente es eso. Si tenemos
que allí que si fuera impugnación es lo más probable
que la persona de ahí sea el padre.
En la foto se cagaron al negro jajajajajaa XDDD

7. También en los casos de reconocimientos de una persona en un delito, se
encuentra en la ropa de los individuos hay manchas, y al hacer la
determinación del dna hay bandas que son idénticas a la víctima. Significa
que el tipo está asociado a la situación.
La biotecnología en general es la utilización de todos estos procedimientos
que son el manejo de ADN y proteínas transformación de ellas. Tomar un trozo
de ADN de una especie y ponerla a otra especie. Modificando organismos
para obtener características distintas, incluye cualquier técnica que utilice
organismos o partes para mejorar productos mejorar platas o crear nuevos
productos. La biotecnología persigue producir sustancias que es difícil
sustancias obtenerlas de manera difícil y los obtenemos fácil.
La insulina que se usaba hace 20 años atrás, era de cerdo, sacándoles el
páncreas, así se veía la resistencia a la insulina, así con los años se a purificado
la insulina humana con la misma secuencia de aminoácidos y la purificación
es mucho mejor teniendo menos rechazo por las personas que la utilizan.
Se produce en una forma dirigida se puede abaratan los costos de
producción.
Hay también mayor seguridad en los productos, hay materias primas nuevas y
más baratas., dentro del contexto también se puede trabajar los seres vivos
con otros objetivos, no solo producir sustancias, se puede estudiar resistencias
de enfermedades, estudiados en ratones. Donaciones de órganos, que
producen o tienen utilidad para los humanos desarrollado dentro del
organismo y luego pasarlo al ser humano.
Para que los vegetales transgénicos? características especificas, aumentando
su producción, a pesar de los grupos que están en oposición.

8. Ejemplos de vegetales transgénicos: tomate, maíz, canola laurica, freedom II
arroz dorado ,el choclo transgénico hace una proteína que infecta al insecto y
lo mata. Ese gen se inyecta en las plantas del maíz. Así todas las células
producen esa función. La larva come el primer grano y come veneno.
Si recordamos china es un país tan grande con tanta gente que apenas
pueden comer, no tienen buena alimentación, la idea es poner en el arroz la
mayor cantidad de sustancias útiles para el organismo como la pro vitamina A,
necesaria en el organismo para producir la vitamina A, siempre y cuando allá
pro vitamina A, si no hay se produce ceguera.
Además de alimentos es posible producir otras sustancias, entre ellas sustancias
que se utilizan como medicina. Tenemos el factor antihemofilico, que permite
factores 8 y 9 fibrina, para la coagulación. Eritopoyetina, insulina,
somatotoprina. Todas esas sustancias se sintetizan de forma transgénica
utilizándolo como medicamentos. Si no los son pueden ser sustancias de uso
industrial. Renina, usada para la producción de queso. Antes hacía que matar
vacas y sacarles la renina.
Yareta- planta del norte-
Terapia genética, la mayor parte en los seres humanos son trastornos a nivel
genético, cáncer complicado, diabetes complicado, porque tienen varias
proteínas involucradas, pero hay varias enfermedades que solo se resuelven
con 1 gen defectuoso, que son más simples., inmune deficiencia combinada
severa (niños cristal) con problema en adenosindesaminasa, los linfocitos T
están con enziima mutada sin producción de anticuerpos, así el niño sin
anticuerpo si le entra una bacteria se muere.
Los tratamientos en base a terapia génica son bastante buenos, ya hay hartas
personas que se han curado de la enfermedad. La otra enfermedad es la
hemofilia, en donde no hay coagulación porque no hay fibrina, empezando
con factor XII, la fibrina forma una malla en cualquier vaso se forma un trombo,
evitando la salida de la sangre. Hay hombres que el factor 8 esta mutado y
como esta mutado la enzima que lo transforma en factor 8a la reacción se
detiene ahí. La hemofilia b es cuando falla el factor 9. En ambos casos no se
produce fibrina y se produce hemorragia. Eso se está trabajando y hay varios
resultados positivos , se pone en un virus y la persona ingresa ese virus a las
células que
producen el
factor 8
normal. Que
empieza a
producir la
proteína ,así
hay varias
personas que
se están
curando.

9. Metabolismo del etanol. Etanol a través de la alcoholdeshidrogenasa hace
acetildehido y hace acetaldehidodeshidrogenasa produciendo c02 + h2o.
Hay personas que se toman un trago y no paran hasta quedar pal pico. En el
punto metabólico en el hígado la enzima alcohol deshidrogenasa hace
acetildahido y con la otra enzima lo hace co2 y agua. Y así los 4gr por litro ya
no existe ese alcohol. Pero resulta que en las personas que se toman más de 1
cerveza el alcohol no alcanza a ser digerido y empieza a circular por el
organismo y al hacerlo pasa al snc. Cerebro y causa problemas.
En los orientales el 40% de la población no debe alcohol, porque la
alcoholdeshidrogenasa no funciona y el acetaldehído se acumula generando
malestares. Colocar un gen de acetaldehidodeshidrogenasa mutado para
que no se digiera
todo el acetaldehído
, así se acumula y se
producen los
síntomas y se para de
tomar. Ese mismo
tratamiento se hace
del punto de la
medicina tradicional
La terapia génica
disminuye ese
alcoholismo.
BITCHES GET DRUNK
TONIGHT ITS
SATURDAY NIGHT!