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Diagnóstico de Laboratorio de TB:
Baciloscopía
• Rápida
• Fácil de realizar
• Bajo costo
• Detecta la mayoría de los casos
infecciosos
• Relativamente sensible
Sintomático Respiratorio
• Tos con expectoración por más de
15 días
• Pérdida de peso
• Sudoración nocturna
• Dolores del tórax
Efectividad del examen directo
• Recolección de la muestra
• Transporte
• Conservación
• Procesamiento
Tipo de muestras
• Esputo
• Orina
• Lavado gástrico
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Recogida en
forma no
aséptica
• LCR
• Liquido pleural
• Liquido ascítico
• Sangre
• Médula ósea
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Recogidas
asépticamente
La obtención adecuada de
muestras de buena calidad es
crítica para asegurar la
exactitud de los resultados de
la microscopía de BAAR
• 50ml de capacidad: para evitar
derrames y facilitar la selección de la
partícula útil
• Boca ancha y tapa a rosca: evitar
derrames y aerosoles cuando se abre.
• Material claro y traslúcido: para
observar la calidad de la muestra
• Paredes de fácil rotulado
Especificaciones del recipiente
• Inspirar profundamente 2-3 veces, respirar
fuerte cada vez, retener el aire y
• Toser profundamente desde el tórax
• Recoger el esputo en el envase sin
ensuciar la parte externa.
Instrucciones al Paciente:
Recolección
Conservación de la muestra
• No dejar transcurrir más de 7
días entre la recolección y
procesamiento de la muestra
• Conservar en heladera
Transporte de muestra
• Protección del calor excesivo
• Protección de la luz solar
• Acondicionamiento para evitar
derrames
Principio de la coloración
• El colorante primario (fucsina) se une a
los ácidos micólicos de la pared celular
• La decoloración intensiva no libera la
fucsina de la pared celular de los BAAR
• Color de BAAR-basado en el colorante
primario:fucsina
• El colorante de contraste provee fondo
azul de contraste
Ziehl-Neelsen
Procedimiento de
coloración
• Colorante primario (fucsina)
• Decoloración (ácido +/-
alcohol)
• Coloración de contraste (azul
de metileno)
Colorante: fucsina básica fenicada
Contenido por litro
• Fucsina básica 3 gramos
• Fenol acuoso 55 ml.
• 95% etanol 100 ml.
• Agua hasta 1 l.
Preparación
• disolver la fucsina en alcohol
• disolver cristales en fenol en agua, calentando
• mezclar bien y dejar reposar hasta el día siguiente y
luego se agrega agua hasta 1 l. Filtrar
Solución decolorante
Contenido por litro
• Acido clorhídrico 30 ml.
• Alcohol 95º GL hasta 1 l.
Preparación
• Agregar el ácido al alcohol
Colorante: azul de metileno
Contenido por litro
• Azul de metileno 1 gr.
• Agua 1 l.
Preparación
• disolver el colorante en la mitad del
agua
• adicionar el agua restante, mezclar
bien
• reposar 24 hs., filtrar
Criterios de clasificación
• Calidad de la muestra:
✔ Mucopurulenta: la mayoría de los campos
presenta leucocitos, además de mucus
✔ Mucosa: la mayoría de los campos
presenta mucus con muy aislados
leucocitos
✔ Saliva: en la mayoría de los campos se
observan células epiteliales, escasos mucus
y muy escasos leucocitos
Muestra Mucopurulenta
• Calidad del extendido:
✔ Bueno: ocupa las 2/3 partes del portaobjetos. Está
homogéneamente distribuido y la mayoría de los campos
presenta cantidad suficiente de material, de manera que
al mover el micrométrico se observan 1 y 3 niveles
✔ Fino: la mayoría de los campos presenta escasos
materiales
✔ Grueso: la mayoría de los campos presenta abundante
material y al mover el micrométrico se observan más de 3
niveles
✔ No homogéneo: presenta zonas finas y zonas gruesas
✔ Corto: abarca la mitad o menos del portaobjetos
• Calidad de la coloración:
✔ Buena: se pueden leer 100 campos microscópicos
buenos
✔ Buena (con cristales de fucsina): se pueden leer 100
campos microscópicos buenos, a pesar de que en el resto
del extendido se encuentren campos con cristales de
fucsina
✔ Buena (con falta de decoloración): se pueden leer 100
campos microscópicos buenos, a pesar de que en el resto
del extendido se encuentren campos con decoloración
insuficiente
✔ Deficiente: cuando la presencia de cristales o falta de
decoloración no permiten leer correctamente al menos
100 campos microscópicos
2 x 3cm
Tamaño del extendido
Bueno Bueno
Material desprendido No homogénea
Homogeneidad del extendido
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Grueso
Fino
Grosor del extendido
No homogéneo
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Calidad de extendido
No homogéneo –
Decoloración insuficiente
Desprendimiento de
material
No homogéneo –
Decoloración insuficiente
Calidad de extendido
Un buen extendido es:
• realizado con esputo mucopurulento,aunque
nunca hay que desechar una muestra salivosa
• extendido homogéneamente y en forma de
círculo
• aproximadamente 2-3cm X 1-2 cm en tamaño
• no demasiado grueso
• no demasiado fino
Recordar
Informe de resultados
• Negativo (-): no se encuentran BAAR en
100 campos observados
• Positivo (+): menos de un BAAR por
campo de promedio en 100 campos
observados
• Positivo (++): de uno a diez BAAR
promedio por campo, en 50 campos
observados
• Positivo (+++): mas de 10 BAAR por
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  • 1. Diagnóstico de Laboratorio de TB: Baciloscopía • Rápida • Fácil de realizar • Bajo costo • Detecta la mayoría de los casos infecciosos • Relativamente sensible
  • 2. Sintomático Respiratorio • Tos con expectoración por más de 15 días • Pérdida de peso • Sudoración nocturna • Dolores del tórax
  • 3. Efectividad del examen directo • Recolección de la muestra • Transporte • Conservación • Procesamiento
  • 4. Tipo de muestras • Esputo • Orina • Lavado gástrico • Lavado bronquial Recogida en forma no aséptica
  • 5. • LCR • Liquido pleural • Liquido ascítico • Sangre • Médula ósea • Tejidos Recogidas asépticamente
  • 6. La obtención adecuada de muestras de buena calidad es crítica para asegurar la exactitud de los resultados de la microscopía de BAAR
  • 7. • 50ml de capacidad: para evitar derrames y facilitar la selección de la partícula útil • Boca ancha y tapa a rosca: evitar derrames y aerosoles cuando se abre. • Material claro y traslúcido: para observar la calidad de la muestra • Paredes de fácil rotulado Especificaciones del recipiente
  • 8. • Inspirar profundamente 2-3 veces, respirar fuerte cada vez, retener el aire y • Toser profundamente desde el tórax • Recoger el esputo en el envase sin ensuciar la parte externa. Instrucciones al Paciente: Recolección
  • 9. Conservación de la muestra • No dejar transcurrir más de 7 días entre la recolección y procesamiento de la muestra • Conservar en heladera
  • 10. Transporte de muestra • Protección del calor excesivo • Protección de la luz solar • Acondicionamiento para evitar derrames
  • 11. Principio de la coloración • El colorante primario (fucsina) se une a los ácidos micólicos de la pared celular • La decoloración intensiva no libera la fucsina de la pared celular de los BAAR • Color de BAAR-basado en el colorante primario:fucsina • El colorante de contraste provee fondo azul de contraste
  • 12. Ziehl-Neelsen Procedimiento de coloración • Colorante primario (fucsina) • Decoloración (ácido +/- alcohol) • Coloración de contraste (azul de metileno)
  • 13. Colorante: fucsina básica fenicada Contenido por litro • Fucsina básica 3 gramos • Fenol acuoso 55 ml. • 95% etanol 100 ml. • Agua hasta 1 l. Preparación • disolver la fucsina en alcohol • disolver cristales en fenol en agua, calentando • mezclar bien y dejar reposar hasta el día siguiente y luego se agrega agua hasta 1 l. Filtrar
  • 14. Solución decolorante Contenido por litro • Acido clorhídrico 30 ml. • Alcohol 95º GL hasta 1 l. Preparación • Agregar el ácido al alcohol
  • 15. Colorante: azul de metileno Contenido por litro • Azul de metileno 1 gr. • Agua 1 l. Preparación • disolver el colorante en la mitad del agua • adicionar el agua restante, mezclar bien • reposar 24 hs., filtrar
  • 16. Criterios de clasificación • Calidad de la muestra: ✔ Mucopurulenta: la mayoría de los campos presenta leucocitos, además de mucus ✔ Mucosa: la mayoría de los campos presenta mucus con muy aislados leucocitos ✔ Saliva: en la mayoría de los campos se observan células epiteliales, escasos mucus y muy escasos leucocitos
  • 18. • Calidad del extendido: ✔ Bueno: ocupa las 2/3 partes del portaobjetos. Está homogéneamente distribuido y la mayoría de los campos presenta cantidad suficiente de material, de manera que al mover el micrométrico se observan 1 y 3 niveles ✔ Fino: la mayoría de los campos presenta escasos materiales ✔ Grueso: la mayoría de los campos presenta abundante material y al mover el micrométrico se observan más de 3 niveles ✔ No homogéneo: presenta zonas finas y zonas gruesas ✔ Corto: abarca la mitad o menos del portaobjetos
  • 19. • Calidad de la coloración: ✔ Buena: se pueden leer 100 campos microscópicos buenos ✔ Buena (con cristales de fucsina): se pueden leer 100 campos microscópicos buenos, a pesar de que en el resto del extendido se encuentren campos con cristales de fucsina ✔ Buena (con falta de decoloración): se pueden leer 100 campos microscópicos buenos, a pesar de que en el resto del extendido se encuentren campos con decoloración insuficiente ✔ Deficiente: cuando la presencia de cristales o falta de decoloración no permiten leer correctamente al menos 100 campos microscópicos
  • 20. 2 x 3cm Tamaño del extendido
  • 21. Bueno Bueno Material desprendido No homogénea Homogeneidad del extendido
  • 24. No homogéneo – Decoloración insuficiente Desprendimiento de material No homogéneo – Decoloración insuficiente Calidad de extendido
  • 25. Un buen extendido es: • realizado con esputo mucopurulento,aunque nunca hay que desechar una muestra salivosa • extendido homogéneamente y en forma de círculo • aproximadamente 2-3cm X 1-2 cm en tamaño • no demasiado grueso • no demasiado fino Recordar
  • 26. Informe de resultados • Negativo (-): no se encuentran BAAR en 100 campos observados • Positivo (+): menos de un BAAR por campo de promedio en 100 campos observados • Positivo (++): de uno a diez BAAR promedio por campo, en 50 campos observados • Positivo (+++): mas de 10 BAAR por campo, en 20 campos observados