A continuación les dejamos una presentación donde podrán ver cómo se realiza el diagnóstico de las infecciones gastrointestinales COPROCULTIVO, incluyendo el diagnóstico de dos bacterias de importancia clínica: Salmonella spp. y Shigella spp.

1. Diagnóstico
infecciones
gastrointestinales
o entéricas
Autores:
- Carolina Farfán
- Luis Salazar
Tecnología Médica. Bioanálisis clínico,
Hematología y Banco de Sangre
- Diciembre 2012 -

2. Agentes etiológicos más frecuentes
E. Coli diarreogénicos
(ECET, ECEP, ECEH, ECEI,
ECEAg, ECAD)
Vibrio
Salmonella cholerae
AGENTES
Campylobacter
Shigella
Yersinia Clostridium

3. Manifestaciones clínicas de
infecciones entéricas
Diarrea acuosa o secretora
•ECET, EPEC, ECEAg, ECEI, Shigella, Campylobacter,
Yersinia enterocolítica, Vibrio spp.
Diarrea con sangre (disentérica)
•Shigella, Salmonella, Campylobacter, Yersinia,
ECEH, ECEI
Fiebre entérica (enfermedad sistémica)
•Salmonella Typhi

4. Protocolo de rutina

5. Paso 1: Examen macroscópico
Aspecto
Color
Consistencia

6. Paso 2: Examen microscópico
a. Examen en fresco
Bacterias
b. Tinción de Gram Bacilos Gram -

7. Paso 3: Coprocultivo
Agar McConkey
Colonias Lactosa –
(translúcidas)
Incubación 37ºC,
Agar SS aerobiosis, 18-24 hrs
Colonias Lactosa -,
con un punto negro
al centro

8. Paso 4: Gram cultivo
Bacilos Gram -
sin agrupación
definida

9. Salmonella Enteritidis
Paso 5: Batería bioquímica
Prueba Lectura de resultados Interpretación
bioquímica
1. TSI (Triple - Agar tendido de color rojo (alcalinidad) → K/A, gas (+), H2S (+) 1 2 3 4 5
Sugar Iron Agar) ausencia de fermentación de lactosa y
sacarosa.
- Agar profundo de color amarillo (acidez) →
fermentación de glucosa.
- Ruptura del agar → producción de gas.
- Ennegrecimiento del agar → producción de
H2S.
2. LIA (Lysine Iron - Agar tendido y profundo de color violeta K/K, H2S (+)
Agar) (alcalinidad) → descarboxilación de la lisina.
- Ennegrecimiento del agar → producción de
H2S.
3. CIT (Citrato) Agar tendido de color azul (alcalinidad) → uso Citrato (+)
de citrato de sodio por parte de la bacteria,
como fuente de carbono.
4. MIO - Enturbiamiento del agar → movilidad. M (+), I (-), O (+)
(Movilidad Indol - No hay variación del color del reactivo de
Ornitina) Kovacs al ser agregado al agar → no hay
producción de indol, por tanto, ausencia de
triptofanasa.
- Agar de color azul-violeta (alcalinidad) →
descarboxilación de la ornitina.
5. UREA Agar mantiene su color amarillo original → Ureasa (-)
ausencia de ureasa.

10. Salmonella Typhi
Paso 5: Batería bioquímica
Prueba bioquímica Lectura de resultados Interpretación
1.TSI (Triple Sugar Iron - Agar tendido de color rojo (alcalinidad) → K/A, gas (-), H2S (-)
Agar) ausencia de fermentación de lactosa y 1 2 3 4 5
sacarosa.
- Agar profundo de color amarillo (acidez) →
fermentación de glucosa.
2.LIA (Lysine Iron Agar) - Agar tendido y profundo de color violeta K/K, H2S (-)
(alcalinidad) → descarboxilación de la lisina.
3.CIT (Citrato) Agar mantiene su color verde original → Citrato (-)
bacteria no usó el citrato de sodio como
fuente de carbono.
4.MIO (Movilidad Indol - Enturbiamiento del agar → movilidad. M (+), I (-), O (-)
Ornitina) - No hay variación del color del reactivo de
Kovacs al ser agregado al agar → no hay
producción de indol, por tanto, ausencia de
triptofanasa.
- Agar de color amarillo (acidez) → ausencia
de descarboxilación de la ornitina.
5.UREA Agar mantiene su color amarillo original → Ureasa (-)
ausencia de ureasa.

11. Paso 1 (examen macroscópico) y 2 (examen microscópico):
ídem a diagnóstico de Salmonella

12. Paso 3: Coprocultivo
Agar McConkey
Colonias Lactosa –
(translúcidas)
Incubación 37ºC,
Agar SS aerobiosis, 18-24 hrs
Colonias Lactosa -

13. Paso 4: Gram cultivo
Bacilos Gram -
sin agrupación
definida

14. Shigella spp.
Paso 5: Batería bioquímica
Prueba Lectura de resultados Interpretación
bioquímica
1. TSI (Triple Sugar - Agar tendido de color rojo (alcalinidad) →
Iron Agar) ausencia de fermentación de lactosa y sacarosa.
K/A, gas (-), H2S (-)
1 2 3 4 5
- Agar profundo de color amarillo (acidez) →
fermentación de glucosa.
- No hubo ruptura del agar → no producción de
gas.
- No hubo ennegrecimiento del agar → no
producción de H2S.
2. LIA (Lysine Iron - Agar tendido de color violeta (alcalinidad) → K/A, H2S (-)
Agar) descarboxilación de la lisina.
- Agar profundo de color amarillo → fermentación
de glucosa
3. CIT (Citrato) Agar mantiene su color verde original → bacteria Citrato (-)
no usó el citrato de sodio como fuente de
carbono.
4. MIO (Movilidad - Turbidez solo en picadura→ inmóvil. M (-), I (-), O (+)
Indol Ornitina) - No hay variación del color del reactivo de
Kovacs al ser agregado al agar → no hay
producción de indol, por tanto, ausencia de
triptofanasa.
- Agar de color azul-violeta (alcalinidad) →
descarboxilación de la ornitina.
5. UREA Agar mantiene su color amarillo original → Ureasa (-)
ausencia de ureasa.

15. Paso 6: Serología
Para determinar la especie: utilizar antisueros
Antisuero D → Shigella sonnei
Antisuero B → Shigella flexneri

16. En resumen…
Salmonella spp. Shigella spp.
Movilidad Móvil, flagelos perítricos Inmóvil
Morfología Bacilo Gram -, sin Bacilo Gram -, sin
agrupación definida agrupación definida
Característica colonias Lactosa - (translúcidas Lactosa - (translúcidas)
con punto negro central)
Batería Bioquímica TSI K/A, gas (-), H2S (-) K/A, gas (-), H2S (-)
LIA K/K, H2S (-) K/A, H2S (-)
CIT (-) (-)
MIO M (+), I (-), O (-) M (-), I (-), O (+)
UREA (-) (-)