La DBO (Demanda Bioquímica de Oxígeno) mide la cantidad de oxígeno requerida para la degradación biológica de la materia orgánica en el agua por microorganismos en 5 días. Es un indicador de la contaminación orgánica y se expresa en mg/L de oxígeno. El análisis de DBO implica incubar una muestra de agua a 20°C durante 5 días y medir la disminución de oxígeno debido a la actividad microbiana.

2. La DBO es una sigla que se traduce literalmente como la Demanda Bioquímica de Oxigeno.
Desde el punto de vista ambiental, las pruebas de DBO constituyen una estimación “semi
cuantitativa” de la cantidad de “materia orgánica fácilmente biodegradable (en cinco días) que
contiene una muestra de agua. Es decir, la DBO es la cantidad de oxigeno que se requiere para
oxidar biológicamente la materia orgánica presente en una muestra de agua.
Esta materia orgánica es biodegradada por microorganismos, especialmente bacterias (aeróbias o
anaerobias facultativas: Pseudomonas, Escherichia, Aerobacter, Bacillius), hongos y plancton,
consumen durante la degradación de las sustancias orgánicas contenidas en la muestra.
Cuanto mayor cantidad de materia orgánica contiene la muestra, más oxígeno necesitan sus
microorganismos para oxidarla (degradarla).

3. La DBO al ser un proceso de descomposición varía según la temperatura, este análisis se realiza
en forma estándar durante cinco días a 20 ºC; esto se indica como DBO5.
Según las reglamentaciones, se fijan valores de DBO máximo que pueden tener las aguas
residuales, para poder verterlas a los ríos y otros cursos de agua. De acuerdo a estos valores se
establece, si es posible arrojarlas directamente o si deben sufrir un tratamiento previo
El descenso en la concentración de oxigeno disuelto en una muestra de agua, es directamente
proporcional a su concentración en materia seca, la magnitud en su descenso es lo que se conoce
como DBO.
Materia Orgánica  O2 Microorganismos aeróbicos CO2  H2O

4. Se utiliza para medir el grado de contaminación y la cantidad de materia oxidable. Se expresa en
miligramos de oxígeno diatómico por litro.
(mgO2/l).
Son muchos los inconvenientes que presentan las pruebas de la DBO, para que sus resultados
puedan ser reproducibles, es así como principalmente se encuentran:
Obtención de un inoculo apropiado
Presencia de algas en la muestra o el inoculo
Presencia de tóxicos en la muestra

5. Es un método indispensable cuando se necesita determinar el estado o la calidad de las aguas
continentales (ríos, lagos o acuíferos), aguas negras, aguas pluviales o agua de cualquier otra
procedencia que pueda contener una cantidad apreciable de materia orgánica. Este ensayo es
muy útil para la apreciación del funcionamiento de las estaciones depuradoras.
La DBO fácilmente biodegradable es de gran relevancia en las aguas residuales que son vertidas
a causes receptores, dentro de la categoría de rápidamente biodegradables (dentro de 5 días)
encontramos a los carbohidratos, los simples y los de cadenas cortas (péctidos), los lípidos (los
ácidos grasos libres y los triglicéridos) y los fragmentos de cadenas proteicas (péptidos).
Dicho en otras palabras la DBO permite evaluar la tolerancia de los cuerpos de aguas receptores
para similar descargas de materia orgánica.

6. Que las muestras dispongan de una población bacteriana uniforme, capaz de digerir la materia
orgánica existente en la muestra.
Que las muestras estén exentas de algas o que si éstas existen, no puedan prosperar.
Que la incubación se efectué a una temperatura determinada y constante (20±1ºC)
Que existe un tiempo de incubación definido y homogéneo para todas las muestras, 5 días para la
DBO5 y 7 para la DBO7, con un margen que no exceda de  4 horas.
Que el consumo de oxigeno al finalizar el tiempo de incubación este comprendido dentro del 20 al
80%, del total de oxigeno disponible.
Que la muestra contenga todos los oligoelementos necesarios para garantizar el crecimiento
microbiano.

8. Se deben analizar las muestras inmediatamente después de que
han sido tomadas, en caso contrario congelar entre 0 a 4ºC por
un periodo no mayor de 6 horas desde que se tomo la muestra
para realizar el análisis. En ningún caso se debe analizar la
muestra después de 24 horas.
Al momento del análisis permitir que la muestra alcance la
temperatura ambiente.
Es preferible realizar la toma de muestras en
recipientes de vidrio, protegidos de la luz
sobretodo si la muestra contiene algas.
Y la toma de muestras..?

11. Preparación:
Homogeneizar muy bien las muestras antes de ser depositadas en la cubeta de reacción.
El pH de la solución debe ajustarse a un valor entre 6.8 a 7.2 para este proceso emplear
acido sulfúrico 1N o Hidróxido de sodio 1N.
Si el valor de la DBO de la muestra es muy alto se recomienda diluir para no operar con
volúmenes bajos que puedan inducir errores.
Pretratamiento de las muestras
Neutralizar el cloro residual presente, agregando la cantidad necesaria de una solución para
declorar de Na2S2O3 x 5 H2O en concentración de 3.5 g/l, considerando la siguiente relación,
usar 1 ml de solución para remover 1 mg/l de cloro residual en 500 ml de muestra.
Si la adición de la solución declorante excede en más de un 0.5% del volumen total de la
muestra, se debe preparar una solución de tiosulfato de sodio más concentrada, teniendo en
cuenta la relación descrita anteriormente.

12. Rango de medición de DBO
(mg/L)
Volumen de muestra (ml)
0-40 432
0-80 365
0-200 250
0-400 164
0-800 97
0-2000 43.5
0-4000 22.7
El volumen de muestra a utilizar en el análisis depende del valor de DBO esperado. En
general el valor esperado de la DBO es entre el 50% al 80% del valor de la DQO.
De acuerdo a la expresión anterior es posible establecer el volumen de muestra de
acuerdo a los rangos de DBO esperados.
El volumen de muestra puede ser diluido o concentrada, generalmente para valores de
DBO muy altos (superiores a 1000mg/L) se recomienda diluir la muestra y evitar de esta
forma un volumen muy pequeño que pueda inducir a errores por salpicado.
Volumen de muestra de acuerdo a la DBO esperada

13. Muestra Volumen de muestra para análisis
A. Cruda 164 ml
A. tratada 432 ml
Decantación Primaria 608 164 ml
Decantación Primaria 616 164 ml
Volumen de muestra a medir en nuestro laboratorio

14. 1. Tomar una botella ámbar de cultivo limpia e introducir un agitador magnético.
2. Adicionar a la botella 1 ml de las siguientes soluciones
Solución tampón fosfato
Solución de sulfato de magnesio
Solución de cloruro de calcio
Solución de cloruro férrico
3. Adicionar 5 gotas de inhibidor de nitrificación a la botella de cultivo
4. Mida exactamente un volumen definido de la muestra homogeneizada de acuerdo a la tabla
anterior y deposítelo en la botella ámbar.
5. Colocar entre 3 a 5 tabletas de hidróxido de sodio en el recipiente de caucho, con ayuda de una
pinza.
6. Colocar el recipiente de caucho en el cuello de la botella ámbar de cultivo que contiene la
muestra.
7. Cerrar la botella con el sensor Oxitop.
8. Iniciar la medición presionando S y M simultáneamente durante 2 segundos hasta que la pantalla
muestre 00. Ver Figura Nº1.
9. Colocar la botella con la muestra en la bandeja agitadora dentro de la incubadora. Ver Figura Nº
2
10. Mantenga la botella de medición con Oxitop en incubación por 5 días a 20ºC.
11. Después de 5 días leer los valores, parea ello presione S durante 1 segundo hasta que aparezca
el valor en pantalla. Ver Figura Nº3
12. Busque el valor del día siguiente presionando nuevamente S mientras el valor permanece
desplegado durante 5 segundos.

15. Figura Nº1
Figura Nº2
Figura Nº3

16. Los valores desplegados en la pantalla son convertidos en DBO de acuerdo a la siguiente
tabla y ecuaciones.
Volumen de muestra (ml) Factor
432 1
365 2
250 5
164 10
97 20
43.5 50
22.7 100
Valor de DBO para muestras directas. Valores medidos X factor = DBO en mg/L
Valor de DBO para muestras diluidas. Valores medidos X factor X Factor de dilución= DBO en mg/L

17. El sistema Oxitop controla el inicio de la medición ya que incluye en su función de ajuste
automática de temperatura el cual permite iniciar la medición solo cuando la temperatura de la
muestra se encuentre estabilizada en 20ºC.
Durante los 5 días de medición la muestra sigue agitándose continuamente.
El oxitop guardada automáticamente un valor cada 24 hrs por 5 días.
Si desea leer el valor de DBO actual, presionar M durante 1 segundo hasta que aparezca el valor
en pantalla.
Se debe considerar que la presencia a simple vista de aceites y grasa en el agua residual puede
interferir en la lectura entregada por el equipo.

18. Para conocer si nuestra metodología es correcta o no ha sufrido alguna variación es necesario
colocar entre nuestro set de muestras, un patrón con concentración conocida.
En nuestro laboratorio contamos con un patrón de DBO con una concentración de 200 mg/L.
El hecho de adicionar en nuestro set de muestras un patrón también nos permite conocer la
diferencia existente al variar de analista diariamente.