Este documento describe el cultivo del rotífero Brachionus plicatilis para su uso en acuacultura. B. plicatilis se puede cultivar exitosamente alimentándolo con microalgas como Chlorella o levaduras como Saccharomyces cerevisiae. La levadura permite altas densidades de rotíferos pero proporciona un valor nutricional deficiente. Un tratamiento verde usando Chlorella después de cultivar con levadura mejora la calidad nutricional. El documento también discute diferentes métodos de cultivo masivo de rotíferos y

1. III. CULTIVO DE ROTIFFROS
En el phylum rotífera se encuentran especies muy importantes objeto de estudio de Zoólogos y
Ecólogos, pues son organismos muy activos considerados depredadores en el mundo del
plancton pues consumen altas concentraciones de microorganismos, tienen una alta tasa de
reproducción y su afloramiento abate rápidamente la concentración de oxígeno en el medio. Es
por ello que su localización en los ambientes acuáticos permiten indicar la presencia de materia
orgánica (medios eutróficos) por lo que revisten gran interés en estudios de Ecología y
contaminación.
En la década de los 60's empezaron a considerarse seriamente como una alternativa de
alimentación en Acuacultura por sus características de desarrollo, facilidad de cultivo y aporte
nutricional.
Una de las especies seleccionadas para su uso en AcuaĎultura es Brachionus plicatilis del que
presentamos sus alternativas de producción en cultivo en los siguientes incisos.
1. CONSIDERACIONES CENERALES SOBRE LOS CULTIVOS DE ROTTFEROS
Brachionus plicatlis es miembro de la Familia Brachionidae. El ciclo de vida de este organismo
involucra una alternancia en la reproducción sexual y asexual; la taxonomía de este organismo es
descrita por Ruttner & Kolisko (1974). Este organismo ha sido tema de polémica sobre su
sistemática, ya que los datos aportados en cuanto a talla y forma concluyen que esta especie en
relación al hábitat es variable, ya que soporta amplios rangos paramétricos y está ampliamente
distribuida, y esta distribución se debe a la alta longevidad y resistencia de huevos latentes. Los
rangos de salinidad que soporta van desde 1 a 97 ppm (Ruthner & Kolisko, 1974) con el límite
extremo de 200 ppm. Este mismo autor concluye que el agua de mar es el medio óptimo de este
organismo. Es también importante mencionar que en dilución rápida del agua de mar se obtiene
un incremento en el número de hembras y producción de huevos. El número de huevos
producidos por hembra, es un indicador de las condiciones óptimas del medio. Su amplia
distribución indica que es una especie Euriterma (5~20°C). La Figura 12 describe la anatomía de
B. plicatilis (R. Huches, en: B. Pejler et al., 1983).
B. plicatilis es una especie que no selecciona su alimento (polífago), es un filtro-alimentador, se
puede alimentar de microalgas: Cianoficeas, Chloroficeas, Pheoficeas, etc., bacterias y levaduras
(Hirayama, 1973 y otros). Pejler (1983) señala que no se inlcuye en su dieta las Familias
Cryptomonas y Chrysophytas. Otros trabajos demuestran que sólo pueden ingerir partículas de
12–15μ en tamaño (Hirayama, 1978). Existen diferentes trabajos que reportan tasas de ingestión
de: 0.14μ 1/min de Chlamidomonas, 0.034 1/min de Olisthodiscus, 0.1 1/min de Chlorella,
0.025μ 1/min de Dunaliella (Hirayama et al., 1972, y otros.
2. CULTIVO MASIVO Y CALIDAD NUTRICIONAL
La producción masiva del rotífero Brachionus plicatilis se inició en Japón alrededor de los años
60's. Estos se cultivaron inicialmente transfiriéndolos de un estanque a otro de Chlorella con una

2. densidad de 10 a 20 × 106 c/ml (SISFFA, 1964a, b). Por lo impráctico de la técnica se iniciaron
una serie de investigaciones tratando de encontrar el método adecuado para la producción
continua de rotíferos, sin depender de los cultivos masivos de Chlorella y otras microalgas; una
de éstas propuso el uso de la levadura de pan (Saccharomyces cerevisiae) como alimento (Hirata
& Mori, 1963). Se pensó que ésta resolvería la producción de rotíferos, pues esta técnica permite
obtener densidades muy altas de más de 100 rotíferos/ml, después de la publicación de estos
resultados, otros investigadores se interesaron en estudiar la composición química de los
rotíferos alimentados con diferentes microalgas y levaduras (Fukusho et al., 1976; Hirata et al.,
1980; Imada, 1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al., 1980).
FIG. 11) Anatomía de Brachionus plicatilis (Rotífera) en: B. Pejler et al., 1983).
En la Figura 13 se muestran los resultados obtenidos por Hirata et al., en relación a la utilización
de: a) Chlorella, b) Levadura y c) Levadura/Chlorella. Como se puede observar los resultados
obtenidos con las dietas a y c, son densidades altas hasta de 100 R/ml. Por otro lado, se
realizaron investigaciones en cuanto al aporte nutricional de los rotíferos para el cultivo de larvas
de peces y se observó que en las larvas de peces alimentados con rotíferos producidos a partir de
ladieta de levadura o la mezcla 95% levadura y 5% Chlorella ocurrían altas mortalidades. Se
identificó la causa como un desvalance nutricional en cuanto a los ácidos grasos esenciales

3. (Fukusho et al., 1976; Kitajima et al., 1980ab; Watanabe, 1978). Otras investigaciones aportaron
la utilización de una levadura mejorada con ácidos grasos del tipo W3 altamente insaturados, la
cual recibe el nombre de “Levadura Omega” (Imada, 1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al.,
1980a,b, etc.). En la Tabla 18 se muestra la composición de aminoácidos en B. plicatilis con
diferentes dietas.
Los estudios comparativos de la concentración de ácidos grasos W3 que Chlorella (especies
marinas) posee, es de 29%, la levadura de pan 1.3% y la Levadura Omega 34.7%. Esta última se
produce comercialmente en Japón (Kitajima, 1980). Otros trabajos más prácticos y baratos
aportaron datos en relación a la determinación del contenido nutricional de diferentes especies
del zooplancton: Acartia clausi, Tigriopus japonicus, Artemia sp y Moina sp. Se encontró que la
abundancia y calidad de estas especies de zooplancton dependen de su nutrición, y que la
elección de una especie de microalgas, levadura u otro microroganismo para alimentar a éstos
depende de la composición química, temperatura, fotoperíodo y tipo de cultivo al que esté
sometida esta especie de microorganismo. Por ejemplo, las especies de zooplancton alimentados
con Chlorella obtienen un enriquecimiento en ácidos grasos de un 12.7 a un 18.8% (Imada et al.,
1979; Imada, 1980; Watanabe, 1978b, 1980).
Para fines prácticos, la producción masiva de microalgas y la utilización de levadura de pan
aportan buenos resultados en la producción masiva de larvas de peces y otros invertebrados,
tomando en cuenta que esta utilización permita un enriquecimiento de los cultivos de
zooplancton llamado “tratamiento verde”, (6 a 12 h en un cultivo de microalgas) después de
haber obtenido una alta densidad con levadura por tres a cuatro días (pueden ser obtenidos más
de 100 R/M).
Esto permite que el zooplancton obtenga la concentración necesaria de ácidos grasos y
aminoácidos esenciales para el buen desarrollo de las diferentes especies de invertebrados y
peces producidos mediante esta técnica. En la Tabla 19 se muestra la composición de
aminoaécidos en cuatro especies del zooplancton de uso en acuacultura.

4. FIG. 12) Densidad de rotíferos con diferentes alimentos A) Chlorella; B) Levadura; C)
Chlorella/Levadura; D) Control (Hirata, 1980).
TABLA 19. COMPOSICION DE AMINOACIDOS EN Brachionus
plicatilis, CULTIVADO CON DIFERENTES MICROALGAS
Y LEVADURAS (g/100 g PROTEINA CRUDA)
Nagasaki Gifu
1975 1976 1975

5. 2Levadur
a
1Levadur
a +
Chlorella
1Chlorell
a
Levadur
a
3Levadura
+
Chlorella
3Chlorell
a
Levadur
a
4Chlorell
a
Isoleucina 2.9 2.8 3.1 4.4 4.0 4.0 3.2 3.4
Leucina 5.5 5.3 5.6 6.9 6.1 6.2 6.2 6.1
Methionina 0.8 0.8 0.8 1.0 0.9 0.9 0.9 0.8
Cystina 0.7 1.1 0.8 0.7 0.7 0.7 0.9 0.6
Phenylalani
na
3.5 3.4 3.5 4.5 4.1 4.1 3.9 3.9
Tyrosina 3.0 3.0 3.2 3.0 2.8 2.9 3.2 3.1
Threonina 3.5 3.1 3.4 4.0 3.5 3.4 3.4 3.2
Tryptophano 1.1 1.2 1.2 1.1 1.1 1.2 1.2 1.2
Valina 3.6 3.5 3.8 4.4 4.0 4.2 4.0 4.2
Lysina 5.7 5.8 5.8 6.6 6.0 6.0 5.5 6.1
Arginina 4.2 4.5 4.6 5.2 4.6 4.8 4.4 4.6
Histidina 1.4 1.4 1.4 1.7 1.5 1.7 1.5 1.5
Alanina 3.2 3.2 3.7 3.9 3.5 3.5 3.9 3.8
Acido
Aspártico
7.7 7.5 8.0 9.8 8.9 8.8 8.5 8.0
Acido
Glutámico
8.9 8.8 9.3 10.1 9.7 9.5 10.1 9.8
Glycina 2.9 2.9 3.1 3.6 3.1 3.2 3.1 3.1
Prolina 5.2 5.9 5.8 5.0 4.8 4.9 6.1 6.7
Serina 3.7 3.7 3.9 3.7 3.6 3.7 4.2 4.0
TOTAL 67.5 67.9 71.0 79.5 72.9 73.7 74.2 74.1
Muestra obtenida con Etanol al 80%, por hidrólisis con éter dietílico.
1. Rotíferos cultivados con Chlorella minutissima.
2. Rotíferos cultivados con levadura.
3. Rotíferos cultivados con Chlorella marina y levadura (1 g de levadura/10
cel/ml agua de mar/día).
4. Rotíferos cultivados con levadura y enriquecidos con Chlorella
marinapor 36 horas (Watanabe, et al., 1978b; Hirata, 1983).
TABLA 20. COMPOSICION DE AMINOACIDOS EN
DIFERENTES
MICROCRUSTACEOS (g/100 g PROTEINA CRUDA)

6. (WATANABE et al., 1978b)
Aminoácidos
Artemia
salina1
Acartia
clausi
Trigriopus
japonicus
Moina
sp.
Isoleucina 2.6 3.5 2.5 2.5
Leucina 6.1 5.5 5.0 6.0
Methionina 0.9 1.5 1.1 1.0
Cystina 0.4 0.8 0.7 0.6
Phenylalanina 3.2 3.7 3.5 3.6
Tyrosina 3.7 3.6 4.0 3.3
Threonina 1.7 4.2 3.8 3.8
Tryptophano 1.0 1.1 1.1 1.2
Valina 3.2 4.5 3.3 3.2
Lysina 6.1 5.4 5.7 5.8
Arginina 5.0 4.3 5.2 5.1
Histidina 1.3 1.9 1.6 1.6
Alanina 4.1 5.4 4.9 4.9
Acido
Aspártico
7.5 9.0 9.0 8.3
Acido
Glutámico
8.8 9.5 10.8 9.8
Glycina 3.4 4.6 4.5 3.7
Prolina 4.7 4.6 4.8 4.2
Serina 4.6 3.3 4.3 4.0
TOTAL 68.3 76.4 75.8 72.6
1. Nauplios de Artemia recien eclosionados
3. TECNICAS ALTERNATIVAS DE PRODUCCION MASIVA
Para el cultivo de B. plicatilis en condiciones óptimas se recomienda la utilización de agua de
mar (32~35%), la temperatura óptima de 25°C (Hirata & Mori, 1963; Watanabe, 1978, e Hirata
1980), y en cuanto a la selección del mejor método de cultivo masivo a continuación se
describen esquemáticamente, algunos ejemplos de sistemas de cultivo desarrollados por
diferentes autores para la producción masiva de rotíferos.
El primer sistema utilizado fue el llamado método de estanque de transferencia en cultivos
sucesivos de Chlorella (SISFFA, 1964a,b) (Figura 14).

7. Posteriormente la producción de B. plicatilis con levadura de pan (Hirata & Mori, 1967) (Figura
15) sustituye la transferencia sucesiva por tanques de recirculación, mejorando el tanque con
grava en el fondo y colocando un ascensor de aire en el centro.
La Figura 16 muestra un cultivo sistemático, alternando la dieta de Chlorella y levadura llamado
“thinning out method” (Fukusho et al., 1976). Este método es el de mayor uso en cultivos
masivos pues reporta una alta producción de rotíferos (300 R/ml).
Y finalmente el método desarrollado por Hirata et al. (1977), llamado “sistema de
retroalimentación”, semejando un ecosistema con la participación de bacterias pseudomonas
(producción de nutrientes por biodegradación) para Chlorella y ésta como alimento de rotíferos,
los desechos de éstos hacia un biodepósito, etc. (Figura 17) (“Feedback System”; Hirata, 1980).
Las tasas de conversión de alimento de este tipo de sistemas diariamente se incrementan. Se
puede concluir que los sistemas de retroalimentación tienen dos ventajas al mismo tiempo: la
purificación del agua y la minimización de pérdida de energía a través de la alimentación. Esto
permite el establecimiento de un cultivo de producción continua, como se muestra en las Figuras
18 y 19.
4. IMPORTANCIA DEL CULTIVO DE Brachionus plicatilis
Las principales ventajas que ofrece el cultivo de Brachionus plicatilis son: rangos amplios de T°
y S%, y diferentes alternativas prácticas de cultivo masivo, su pequeño tamaño (100–300μ), lo
que permite a las lavas de peces y crustáceos ingerirlos cuando todavía no pueden ingerir
nauplios de artemia, su fácil y barata alimentación con diferentes especies de fitoplancton,
levaduras y dietas artificiales. Su alta velocidad de reproducción bajo condiciones óptimas de
cultivo, pudiendo duplicarse la población en menos de 24 horas, lo que permite obtener altas
densidades (Theilacker & McMaster, 1971; Amat, 1975; Funikowa & Idaka, 1973; Hirayama &
Kusano, 1972; Hirata, 1975; Hirata et al., 1985; Watanabe et al., 1979; Kitajima et al., 1979;
Imada et al., 1979; Yufera et al., 1983; Trotta, 1983).
En cuanto a su contenido nutricional, como ya se mencionó anteriormente B. plicatilis ofrece la
gran ventaja de incrementar su contenido nutricional en relación de su dieta como lo demuestran
los trabajos de Watanabe et al. (1983) y cuyos resultados en relación a contenido de ácidos
grasos esenciales se presentan en las Tablas 20 y 21.
Para el buen manejo de la población de rotíferos en cultivo, es recomendable el uso de
ecuaciones sencillas como las que se muestran en la Tabla 22, que nos permiten conocer la
concentración adecuada de alimento y la tasa de reproducción y fecundidad, factores que nos
indican el buen desarrollo del cultivo, que si son bien controlados nos permitirán el
establecimiento de cultivos continuos y densos para su uso como alimento vivo.

8. FIG. 13) Método del tanque de transferencia.
FIG. 14) Esquema del sistema de cultivo en tanque de recirculación: A) Bomba de aire; B)
Rotíferos en el medio; C) Tubo de vinil (25 cm de diámetro); D) Filtro de recirculación; E) Tina
de policarbonato (Pan-light), cubierta de fibra de vidrio..

9. FIG. 15) Técnica de cultivo desarrollada por la asociación The Seto Inland Farming Fisheries
Association (SISSFFA) y la Estación de Maricultura de Nagasaki. Este método es el más
comúnmente utilizado y es llamado “Thinning out method” (Fukusho et al., 1976).

10. FIG. 16) Sistema de retroalimentación de nutrientes (“Feedback System”) para el cultivo masivo
de rotíferos (Hirata, 1980).

11. FIG. 17) Variaciones en la densidad de rotíferos en el sistema de cultivo de retroalimentación
(“Feedback System”) en tanque de 2,700 l (Hirata et al., 1980).
FIG. 18) Sección del sistema de retroalimentación del cultivo de rotíferos: A) Tanque de 2,700 l;
B) Biodepósito en zig-zag; C) Aereador móvil; D) Motor de reducción; E) Regulador de
automóvil; F) Compresor.
TABLA 21. TIPO DE ACIDOS GRASOS PRESENTES EN
ROTIFEROS PRODUCIDOS
EN VARIOS SUSTRATOS
ACIDOS
GRASOS
CULTIVO
ROTIFERO
LEVADURA
(S.
cereviceae)
ROTIFERO
LEVADURA
+ Chbrella
marina
ROTIFERO
Chlorella
marina
ROTIFERO
AGUA
DULCE
16:0 8.7 11.7 16.8 8.9
16:1ω7 24.2 16.6 24.3 18.9
18:0 4.8 6.0 1.7 1.6
18:1ω9 33.9 22.8 10.1 9.0
18:2ω6 + 5.8 + 10.4 + 3.2 + 15.7 +
18:3ω3 + 0.6 + 2.2 + 0.4 + 10.2 +
20:1 6.0 + 3.3 2.4+ 0.3
20:3ω3 0.4 2.3 4.4 0.8
20:4ω6 0.4 2.3 4.4 0.8
20:4ω3 0.5 0.6 0.2 1.1
20:5ω3° 1.0° 8.1° 24.1° 1.9°
22:1 1.7 1.5 1.3 -
22:5ω3 0.2 1.7 3.8 0.3
22:6ω3° 0.5° 0.9° 0.5 -°

12. εω3HUFA° 2.2° 11.3° 28.6° -°
* Watanabe et al., 1983
° Acido graso esencial para especies marinas
+ Acido graso esencial para especies de agua dulce
TABLA 22. TIPO DE ACIDOS GRASOS PRESENTES EN ROTIFEROS
ALIMENTADOS
CON LEVADURA (Saccharomyces cerviceae) Y LEVADURA OMEGA
(W°)
ACIDOS
GRASOS
LEVADURA
(S. cereviceae)
LEVADURA
OMEGA
ROTIFEROS
LEVADURA
CULTIVADOS
EN LEVADURA
OMEGA
16:0 8.3 – 20.0 13.4 – 16.9 6–7 10 – 12
16:1ω7 14.2 – 38.2 5.0 – 6.6 26–27 10 – 11
18:0 3.4 – 8.4 2.3 – 2.6 3–4 2 – 3
18:1ω9 26.1 – 43.9 15.5 – 16.4 26–30 22 – 24
18:2ω6 2.8 – 15.1 1.0 – 1.1 7–9 2 – 4
18:3ω3 0.5 – 6.4 0.8 – 0.9 0.7 – 0.8
20:1 tr - 1.6 8.4 – 9.2 3–4 8 – 10
20:3ω3 3.0 – 3.4 1–2 3 – 4
20:4ω6 3.0 – 3.4 1–2 3 – 4
20:5ω3* -* 13.4 – 17.4* 1–2* 9 – 12*
22:5ω3 0.9 – 1.4 0–0.4 2 – 3
22:6 3 -* 12.8 – 15.6* * 7 – 9*
εω3
HUFA*
-* 33.5 – 35.8* 2–44* 25 – 26*
W° La levadura W está enriquecida con una fuente de ácidos grasos esenciales
* Son ácidos grasos esenciales
TABLA 23. TASAS DE ALIMENTACION, REPRODUCCION Y
FECUNDIDAD
EN CULTIVOS DE ROTIFEROS Brachionus plicatilis
donde: R = tasa de alimentación
S = suplemento alimenticio (g)
Tbω = peso total de la muestra de rotíferos
(g)

13. Reproducción:
donde: P.H. = producción de huevos
NRh = número de rotíferos con
huevos
T.R. = número total de rotíferos de la
muestra
donde: D.H. = densidad de
huevos
D.R. = densidad de
rotíferos
Indice de fecundidad:
Tasa de recuperación:
donde: A = población en momento t1
B = población en momento t2