Mediante la cromatografía de papel se identificaron varios pigmentos fotosintéticos en las hojas de espinaca, incluyendo la clorofila-a, clorofila-b, carotenos y xantofilas. Estos pigmentos se separaron y visualizaron como bandas de diferentes colores debido a su diferente solubilidad en el solvente. La clorofila-a apareció de color verde intenso, la clorofila-b de color verde oliva, los carotenos de color amarillo y las xantofilas de color naran

1. SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFIA SOBRE
PAPEL
Sotto, A., maya, G.,
Estudiante de ingeniería de alimentos, programa de ingenierías.
Universidad de la amazonia.
RESUMEN
Por medio de la practica realizada en los laboratorios de la universidad de la
amazonia denominada separación de pigmentos vegetales; con el método de la
cromatografía a de papel se logró identificar que las hojas de espinaca al igual que
otras plantas contiene clorofila –a, clorofila - b, carotenos y xantofilas las cuales
son los componentes encargados de la fotosíntesis, puestos que los carotenos son
el transporte de la luz a la clorofila y los xantofilas para transformación de la misma
en energía denominada como la fotosíntesis.
Palabras claves: pigmentos vegetales, clorofila, célula vegetal, cromatografía de
papel, carotenos, xantofilas.
INTRODUCCIÓN
En las células vegetales, hay unos orgánulos llamados cloroplastos que poseen
distintos pigmentos fotosintéticos con colores diferentes; clorofila-a (verde intenso),
clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y xantofilas (amarillo anaranjado) en
diferentes proporciones. [1] Cuando se observa una hoja, el pigmento clorofila es
usualmente el único pigmento que parece estar presente, de hecho, la clorofila es
solamente uno de varios tipos de pigmentos presentes en las hojas y uno de tantos
pigmentos que están involucrados en el proceso de fotosíntesis. Una vez removidos
de la hoja, los pigmentos fotosintéticos pueden ser separados uno de otro e
identificados mediante cromatografía. [2]
La cromatografía es un método usado principalmente para la separación de los
componentes de una muestra en la cual los componentes son distribuidos entre dos
fases una de las cuales es estacionario, mientras que la otra es móvil, la fase
estacionaria puede ser sólido o líquido soportado en un sólido o en un gel (matriz),
la fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna extendida en una
capa, distribuida como una película, la cromatografía en papel tiene como soporte
un papel de celulosa y es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar

2. análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy potente no requiere de
ningún tipo de equipamiento. [3] la cromatografía de papel se clasifica en
descendente al cual se trata de una caja saturada de vapor de agua, atravesada
por una cajetín semicilíndrico lleno con el solvente orgánico. En él se deposita, como
muestra la figura el papel con la banda de muestra justo al salir el papel del cajetín.
Para sujetar el papel introducimos una varilla a lo largo de la caja. El solvente
comenzará ascendiendo por el papel por capilaridad y continuará bajando al salir
de la cajetilla, pasando por la zona de muestra y arrastrándola, consiguiéndose así
la separación. [4] Encontramos también la forma
ascendente e l solvente se encuentra en la parte inferior de la cubeta y asciende por
el papel haciendo que se separe la muestra. La resolución de la cromatografía en
papel descentente es mayor. [5] Para separar y obtener estos pigmentos se puede
utilizar la cromatografía que es una técnica que permite la separación de las
sustancias de una mezcla, de tal manera que al introducir una tira de papel poroso
en esa mezcla el disolvente arrastra con distinta velocidad a los pigmentos según la
solubilidad que tengan, permitiendo identificarlos perfectamente según su color.
Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores, que poseerán diferente
grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución. [6]
MATERIALES
Los materiales a utilizados para la práctica constan de:
Equipos:
 Balanza, hornilla eléctrica
Vidriería:
 Matraz
 Embudo
 Un tubo graduado fondo plano
 Con tapón de corcho
 Capilares

3. Material:
 Mortero manual
 Gradilla
Otros:
 papel de filtro Whatman # 1
 una tachuela
 tijeras
Biológicos:
 Hojas de espinaca.
Reactivos:
 alcohol etílico al 96%
 éter de petróleo
 benceno
METODOLOGÍA
Se trituro 10 g. de hojas de espinaca con 50 cm3 de alcohol al 96% y se calentó
suavemente en una hornilla. Cuando las hojas se decoloraron y el alcohol adquirió
un color verde intenso, se dejó enfriar y se filtró el extracto a través del papel filtro,
utilizando el embudo y un matraz donde se deposite el filtrado.
Se recortó una tira de papel filtro como se indico en la figura 1. Se colocó con el
capilar una gota del extracto alcohólico y se dejó secar, se realizó este mismo
procedimiento por dos veces más. Luego se procedió a llenar el fondo del tubo
con una solución de 9 partes de éter de petróleo y una parte de benceno (aprox. 3
a 1 ml). Y se Introdujo la tira de papel cargada con el extracto, teniendo en cuenta
de evitar que el solvente alcanzara el extracto, y se sostuvo la tira con la tachuela,
y se tapó el tubo y se observó.

4. RESULTADO

5. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Por medio de la macerada de las hojas de espica se inicia un rompimiento del tejido
vegetal, con la adición del alcohol etílico al 96% se realiza una extracción de los
distintos componentes que se encuentran contenidos en las células vegetales de la
espinaca. Por medio de la impregnación del papel con la solución se adsorbió una
parte de estos compuestos.
Por medio de la evaporación ascendente se muestra la distribución de los colores
tales como verde oliva, verde intenso, amarrillo y por ultimo color naranja intenso.
CONCLUSIÓN
Por medio de la práctica se logró identificar que la espinaca contiene distintos tipos
de clorofila denominadas como (a) y (b), observadas por medio de la coloración
que se distinguió en el papel. Según (Aguilera., 2012) que la clorofila-a tiene la
característica del (verde intenso), clorofila-b del (verde oliva).
De igual manera se observó la coloración amarrillo tenue y naranja. Lo que indica
que el amarrillo es representado y/o característico de las xantofilas y el naranja por
los carotenos.
Los carotenos son los encargados del transporte de la luz a la clorofila el cual son
los encargados de la transformación de la luz en energía y/o encargados de la
fotosíntesis con la ayuda de las xantofilas.
BIBLIOGRAFÍA
[1] [3] Aguilera, F., (2012).Cromatografía de pigmentos vegetales. En línea.
http://www.apccc.es/arch_apccc/fichas2012/lasvinas/lasvinas_cromatografiapvege
tales.pdf. Visitada el 4 / 11/2016.
[2] [6] Velastegui, R., (2014).
Separación de pigmentos vegetales mediante cromatografía en papel. En línea.
https://es.scribd.com/doc/45304864/Separacion-de-Pigmentos-Vegetales-
Mediante-Cromatografia-en-Papel. Visitada el 4 / 11/2016.
[4] Bermúdez, G., (2001). Cromatografía en papel. En línea.
http://www.elergonomista.com/tecnicas/cp.htm. Visitada el 4 / 11/2016.
[5] Quiroz, T., (2007). Técnicas Cromatográficos, Introducción a los métodos de
separación. En línea.
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf. Visitada el
4 / 11/2016.