Este informe describe una práctica de laboratorio en la que se separaron los pigmentos vegetales de varias muestras utilizando cromatografía en papel. Los objetivos fueron revisar conceptos sobre polaridad y separación cromatográfica, aprender a realizar montajes de cromatografía en papel para separar mezclas de pigmentos, y separar los componentes coloreados de extractos vegetales. Los resultados mostraron que los pigmentos se separaron de acuerdo a su polaridad relativa, con las xantofilas eluían primero

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
CURSO DE: LABORATORIO TÉCNICAS BÁSICAS EN QUÍMICA (1000025-05)
PROGRAMA CALENDARIO: PRIMER SEMESTRE DE 2012
INFORME DE LABORATORIO
PRACTICA N°4 SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LAS MEZCLAS:
SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFÍA.
FECHA: MARZO 30 DE 2012
PRESENTADO A: JOSÉ LEOPOLDO ROJAS A. /MAURICIO VARGAS
PRESENTADO POR: DANIEL ARAMBURO VELEZ-01143081
MÓNICA ALEJANDRA MÉNDEZ VÁSQUEZ-01125487
ISABELLA QUIROZ CUARÁN-011225443
OBJETIVOS
1. Revisar conceptos relacionados con polaridad y separación por cromatografía.
2. Aprender a realizar montajes sencillos para separar por cromatografía en papel, los
componentes coloreados de una mezcla.
3. Conocer los criterios de selección de fases móviles considerando las diferencias de
polaridad de compuestos de una mezcla.
4. Separar los componentes coloreados de un extracto obtenido de una fuente vegetal.
5. Comprender en los principios generales de la separación en cromatografía.
METODOLOGÍA
La seguida por las guías
TABLAS DE DATOS Y OBSERVACIONES
Tabla de datos No. 1. Datos de características del soluto y longitudes a y b para
calcular el factor de retención
SOLUTO COLOR a (cm) ± 0.05 b (cm) ± 0.05
Tinta azul Azul 8.30 3.00
Zanahoria Amarillo-Naranja 8.30 7.50
Pimentón Naranja 8.10 8.10
Espinaca Amarillo-Verde 8.10 8.10

2. Imagen No. 1. Significado de las mediciones a y b en el papel usado para la
cromatografía.
[4]
TRATAMIENTO DE DATOS
 Muestra del tratamiento de datos para determinar el factor de retención para
cada uno de solutos utilizados, a partir de los datos de las mediciones a y b
de la zanahoria. Se utilizaran las siguientes convenciones.
- FR= Factor de retención.
- a y b = (ver imagen No. 1.)
TABLAS DE RESULTADOS
Tabla de resultados No. 1. Datos de el factor de retención para los diferentes solutos..
SOLUTO FACTOR DE RETENCION (FR)
Tinta azul 0.361
Zanahoria 0.904
Pimentón 1.00
Espinaca 1.00
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Todas las sustancias presentan un grado diferente de solubilidad en disolventes
apolares, debido a esto, es posible su separación. Dicha solución desciende por la
columna sobre una fase móvil que se facilita gracias al solvente orgánico. Las más

3. solubles se desplazarán rápidamente junto con el disolvente que va descendiendo, por
lo cual los menos solubles avanzarán menos en la columna. Por ello observamos que a
medida que se desplaza poco a poco, se escriben distintos colores según la muestra
que hemos tomado. De igual manera es importante tener en cuenta que la velocidad al
desplazarse depende de la concentración en el punto se siembra. Según literatura, los
carotenos y xantofilas, son familiares para nosotros gracias a los colores naranja y rojo
de algunos alimentos bien conocidos [1]. Un ejemplo son las zanahorias en las que
pudimos observar una sola mancha de un color amarillo-anaranjado pálido, que indica
la presencia de los carotenos, (ß-carotenos) y xantofilas en la zanahoria. De igual
manera pasa algo muy similar con el pimentón rojo, quien posee carotenos, debido a
que la mancha escrita era de color naranja muy suave, dichos pigmentos carotenoicos
son los que le dan el color rojo del pimentón cuando está maduro [2]. La espinaca
posee, según la literatura, clorofilas a y b, carotenos y xantofilas; de las cuales solo
observamos la clorofila a que se manifestaba con un color verde muy suave, y la
clorofila b estaba presente debido a que nuestra mancha tenía también un color verde
un tanto más fuerte [3]. Atendiendo a la naturaleza polar y apolar de los pigmentos que
tratamos, afirmamos que las primeras manchas en formarse corresponden a los
compuestos más grandes y polares, según lo que observamos, en orden, primero se
forman las xantofilas, enseguida la clorofila a, y por último los carotenos, aunque si
tomamos en cuenta la literatura, este orden cambia cuando hablamos de la xantofila, ya
que señala que es mas apolar. Es correcto afirmar entonces que los carotenos son los
pigmentos más apolares.
Si hablamos de los valores de retención, podemos decir que hay un forma en la que se
podrían modificar dichos valores, que sería variando la relación entre el tipo de fase
móvil, con la de la muestra, de tal manera que se cambia las distancias a las cuales se
pueden separar los componentes de cada mezcla. En tal caso de que la fase móvil
fuera agua, los resultados cambiarían drásticamente ya que las muestras con las cuales
trabajamos demostraron ser solubles con los solventes orgánicos, por tanto en el agua
son insolubles. Si se llega a utilizar una fase estacionaria de mayor polaridad, esta
retendrá los componentes más polares de la mezcla. Si la polaridad es menor en la fase
móvil, la velocidad de los pigmentos vegetales aumentaría.

4. CONCLUSIONES
1. Las primeras clorofilas que se obtienen son las xantofilas, las cuales son de color
amarillo y se presentan en poca cantidad.
2. Se obtuvo en mayor cantidad la clorofila α, ya que esta es la que constituye (por
literatura) aproximadamente el 75 % de toda la clorofila en las plantas verdes y de color
verde azulado. De igual manera se obtiene la clorofila beta en menor proporción,
manifestándose con un color verde amarillento leve.
3. Se podría mejorar el proceso de separación de pigmentos al cambiar la fase móvil,
teniendo en cuenta los solventes de acuerdo a su polaridad.
4. Los valores del factor de retención se pueden modificar variando la relación entre el
tipo de fase móvil con el tipo de muestra.
5. Si la fase estacionaria es de mayor polaridad, esta retendrá los componentes más
polares de la mezcla.
6. Si la polaridad es menor en la fase móvil, la velocidad de los pigmentos vegetales
aumentaría.
7. La cromatografía se lleva a cabo con éxito debido a que tenemos a nuestra
disposición una fase estacionaria (de mayor polaridad) y una fase móvil (de menor
polaridad)
BIBLIOGRAFÍA
[1] Identificación de pigmentos en las plantas superiores por cromatografía liquida de
alta eficacia en fase reversa
http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r49995.PDF
[2]. Aparición de los carotenoides: http://www.food-info.net/es/caro/occ.htm
[3].Los colores de las plantas:
http://www.profes.net/varios/feria/fichas2/coloresplantas.html
[4]. Guías Técnicas básicas en el laboratorio de química. Profesores: Harold Ardila,
Ivonne Cubillos, Manuel Molina, Luis Moreno, Harold Lozano, Liliam Palomeque, Carlos
Soto, Adriana Umaña, Carlos Trujillo. Universidad Nacional de Colombia. 2010