Separación de pigmentos vegetales mediante cromatografia de papel.

1. CETIS 62
PRÁCTICA No. 2
Separación de pigmentos vegetales
mediante cromatografía en papel
EQUIPO: 1
Lerma Acosta NohemíYunuen
Pérez Álvarez Ernesto
Valenzuela ToledoKatya Elizabeth
Yepez VázquezMariana

2. OBJETIVO: Extraer diferentes pigmentos, de productos vegetales, así como la
identificación de estos.
INTRODUCCION:
Los cloroplastos deben su color verde a un pigmento denominado clorofila. Sin
embargo, lo que en realidad existe en los cloroplastos es una mezcla de
pigmentos representados principalmente por dos tipos de clorofila (clorofila a y
clorofila b), por β caroteno y por xantofila.
La cromatografía es un método usado principalmente para la separación de los
componentes de una muestra en la cual los componentes son distribuidos entre
dos fases una de las cuales es estacionario, mientras que la otra es móvil.
La cromatografía en papel tiene como soporte un papel de celulosa y es un
proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar análisis cualitativos ya que
pese a no ser una técnica muy potente no requiere de ningún tipo de equipamiento

3. MATERIALES:

4. TECNICA:
1. Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las
nervaduras más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter etílico.
2. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde
intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica).
3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es
suficiente con 2 o 3 cc. de solución de pigmentos).
4. Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta una
altura de 0.5 a 1cm.
5. Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y unos 10 a 15
cm de altura.
6. Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10 gotas de
solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya
secándose el éter etílico y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se
pondrán siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lápiz), situado
a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel.
7. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y colocarlo en la placa de petri con
la mancha de pigmento a 1 cm de la superficie del eluyente. Podemos
sustituir la placa Petri por un vaso de precipitados y fijar el papel
cromatográfico con una pinza a un soporte horizontal colocado en el borde
del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio).
8. Espera unos 30 minutos y observar.
9. Repite el mismo procedimiento con otro vegetal.

5. RESULTADOS:
En la coloración de la espinaca sus pigmentos se deben a que son xantofilas más
resistentes a la oxidación y clorofilas A y B. Poco a poco empezó a tomar mas
coloración verdosa en conforme pasaba el tiempo.
En la coloración de pigmentos de la Zanahoria resultaron más resistentes a la
oxidación por la identificación en su color amarillo opaco y son xantofilas por lo
mismo de la resistencia a la oxidación.
También al final de un largo tiempo se obtuvo ver los pigmentos de los carotenos
por su color mas fuerte .

6. OBSERVACIONES:
Logramos observar que nuestros vegetales no lograban una pigmentación rápida
debido a que le faltaba mucho mas éter y es por eso que tuvimos que colocar
mas.
Fue después de 30 min de espera que empezó a tomar diferentes coloraciones
referentes a la clorofila A y B en base a la espinaca.
En el caso de la zanahoria el color fue muy bajo que apenas y se logro observar
que sus pigmentos pertenecían a xantofilas.

7. CUESTIONARIO:
1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor:
carotenos: Los carotenoides son pigmentos orgánicos del grupo de
los isoprenoides que se encuentran de forma natural en plantas y otros
organismos fotosintéticos como algas, algunas clases de hongos y bacterias. Se
conoce la existencia de más de 700 compuestos pertenecientes a este grupo.
clorofila a y clorofila b: son una familia de pigmentos de color verde que se
encuentran en las cianobacterias y en todos aquellos organismos que
contienen cloroplastos en sus células, lo que incluye a las plantas y a los diversos
grupos , que son llamados algas. La clorofila es una biomolécula extremadamente
importante, crítica en la fotosíntesis, proceso que permite a las plantas absorber
energía a partir de la luz solar.
Xantofila: Las xantófilas son compuestos pigmentados que se encuentran de
forma natural en muchas plantas y presentan también acción fotosintética.
Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan a
las hojas secas sus tonos amarillentos y parduzcos.
2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?
Por qué la clorofila son compuestos insolubles en agua pero solubles en
compuestos orgánicos como el éter
3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?
El caroteno y la xantofila
4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda ¿Qué significado
tiene?
Por que el pigmento es mas abundante
5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.

8. Las diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos dan como
resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y, por tanto, una
separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente
de la mezcla.
6. Explica que es el beta-caroteno. Cuáles son los beneficios de su
consumo.
1. POR SU ALTO CONTENIDO DE AGUA
2. FUENTE CASI EXCLUSIVA DE VITAMINA C
3. POR SU APORTE DE FIBRA
4. RICOS EN ANTIOXIDANTES
5. POR SU EFECTO DIURÉTICO
6. NOS APORTAN ÁCIDOS ORGÁNICOS

9. CONCLUSIONES:
Los pigmentos de las espinacas tienen un tono más intenso, por lo que a la hora
de hacer la cromatografía se pudo apreciar más claramente cómo se iban
separando los colores, con la ayuda del alcohol etílico.
En cambio los pigmentos de la zanahoria eran un tono muy tenue, y a la hora de
vaciar el líquido al tubo de ensaye, su tono naranja era muy clarito, por esa razón
a la hora de realizar lo de la cromatografía, no se alcanzó a percibir mucha la
separación de los colores de los pigmentos.
BIBLIOGRAFÍA:
http://ies.mariasarmiento.climantica.org/files/2011/12/imaxen7.pdf
http://www.scribd.com/doc/45304864/Separacion-de-Pigmentos-Vegetales-
Mediante-Cromatografia-en-Papel#scribd