Todo sobre la microscopia y sus funciones

1. MICROSCOPÍA
CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

2. MICROSCOPÍA
→Microscopio (del griego micro =
pequeño y skopein = observar)
Es el instrumento básico para el estudio
de células y tejidos.
Trata de obtener, a través del
microscópio, datos microscópicos
(imágenes microscópicas) de
organismos o partes de los mismos
normales (cerebro, riñón, etc.) o
alterados (lesiones: tumores,
inflamaciones, etc.)

3. Microscopio optico
Nos referimos a todo instrumento
que nos permite visualizar y
estudiar aquellas estructuras cuyo
tamaño se sitúa por debajo del nivel
de resolución del ojo humano, es
decir por debajo de las 250 µm.
Entre los microscopios ópticos:
→Microscopio compuesto es el más
utilizado, con un gran poder de
resolución de 0,2µm.
→Microscopio simple no es más que
una lupa, formada por un soporte y una
lente biconvexa, que produce pocos
aumentos y escaso poder de resolución.

4. Microscopio optico
El poder de resolución de los
instrumentos nos permite detectar
objetos cada vez más pequeños .

5. Oculares
Objetivos
Revolver
Cabezal
Brazo
Platina
Muestra
Condensador
Fuente luminosa
con diafragma
Tornillo
macrométrico
Tornillo
micrométrico
Mandos para de
desplazamiento de la platina
Componentes
de un
microscopio
óptico

6. ESTEREOSCOPIO
Este microscopio de disección es
muy utilizado para observar
especímenes disecados y
muestras.
→ Macro invertebrados
→ Pequeños vertebrados
→ Estructuras de flores
→ Hojas
→ Semillas
También es utilizado para analizar
suelos, rocas, fósiles, entre otros.
También conocido como
microscopio de disección.
Es binocular, con aumentos de 4 a
40 veces, permite observar
muestras opacas y realizar
disecciones de estructuras en
organismos pequeños, ya que en él
puede manipularse la muestra
mientras se observa. Proporciona
una imagen tridimensional.

7. Componentes
de un
estereoscopio
Oculares
Cabezal
Columna
Objetivos
Fuente de luz superior
Fuente de luz inferior
Platina
Tornillo
macrométrico
y
micrométrico

8. DIFERENCIAS ENTRE UN MICROSCOPIO ÓPTICO Y UN
ESTEREOSCOPIO
1
2
4
Visión
tridimensional 3D
Varios puntos de
vista y en
diferentes ángulos
Binocular
1
2
4
Nos permite
observar la
muestra desde un
solo punto de vista
Visión
bidimensional 2D
Monocular y
binocular
3
Dirección de la luz
de abajo-arriba 3
Iluminación de la
parte superior e
inferior
MICROSCOPIO ÓPTICO ESTEREOSCOPIO

9. SISTEMAS DE
MICROSCOPÍA
CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

10. MICROSCOPIA
El microscopio es un
instrumento óptico que permite
observar objetos que son
demasiado pequeños para ser
observados a simple vista.
El microscopio óptico, contiene
dos o más lentes que permiten
obtener una imagen aumentada
del objeto y funciona por
refracción.
Cuando la luz pasa de un medio transparente a
otro se produce un cambio en su dirección
debido a la distinta velocidad de propagación que
tiene la luz en los diferentes medios materiales. A
este fenómeno se le llama refracción

11. Microscopio Fotonico
Son microscopios que emplean la luz como
fuente de energía para formar imágenes
aumentadas y detalladas
Sistema optico
objetivos, los oculares, el condensador y
los prismas.
Sistema mecanico
pie o base, el tubo, el revólver, el
asa o brazo, la platina y los tornillos
Sistema de luz
Las fuentes de energía luminosa son de
dos tipos natural y artificial.

12. SISTEMA OPTICO
OCULARES
La imagen final se observa a
través de él acercando el ojo a
la lente “ocular”
OBJETIVOS
establece la calidad en la
nitidez en la imagen y la
capacidad que tiene para
captar los detalles de la misma
Resolución
concentra y regula los rayos
luminosos que provienen de la
fuente luminosa
CONDENSADOR
PRISMAS
Desvían los rayos luminosos
de la trayectoria rectilínea del
eje óptico del objetivo y
dirigirlos hacia el tubo óptico
ligeramente inclinado y luego
hacia el ocular.
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13. SISTEMA MECANICO
BRAZO o COLUMNA
Permite la sujeción y traslado
del microscopio. Soporta al
tubo óptico, a la platina y el
revolver.
BASE o PIE
Es un soporte metálico, amplio
y sólido en donde se apoyan y
sostienen los otros
componentes del microscopio
En ella se apoya la
preparación que se sujeta a la
platina mediante pinzas o con
un carrito o charriot
PLATINA
TUBO OPTICO
“Conecta” al revolver o
portaobjetivos y en el otro se
relaciona con el/los
ocular/oculares.
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14. SISTEMA MECANICO
Tornillos macrométrico
y micrométrico
permiten el desplazamiento de la
platina hacia arriba y hacia abajo
con la finalidad de acercar o alejar
la preparación hacia los objetivos
y así conseguir un enfoque óptimo
de la imagen..
REVOLVER
Gira alrededor de un eje con la
finalidad que los objetivos que
sostiene coincidan de manera
perpendicular con la
perforación central de la platina
Constituyen mecanismos de
desplazamientos de las
diferentes partes del
microscopio.
ENGRANAJES y CREMALLERA
CABEZAL
Alberga principalmente
prismas o espejos que sirven
para acondicionar en él dos
o más oculares-
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15. MONTAJE Y
DESMONTAJE DE
MUESTRAS

16. FORMACIÓN DE
LA IMAGEN EN EL
MICROSCOPIO
CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

17. SISTEMA OPTICO
Trayectoria de los rayos en el sistema óptico de
un microscopio óptico compuesto.
1) Formación de la imagen en el globo ocular.
2) trayectoria de los rayos en el ocular.
3) Longitud física o mecánica del tubo del
microscopio.
4) Trayectoria de los rayos en el objetivo.
5) Trayectoria de los rayos en el condensador.
6) Diafragma del condensador.
7) Diafragma de la fuente luminosa.
8) Fuente luminosa.
→ Son los objetivos, los oculares y el
condensador encargados de aumentar las
imágenes proporcionadas por los objetos
histológicos.

20. TINCIONES
HISTOLÓGICAS
CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

21. Para poner de manifiesto las diferentes estructuras que integran una
sección histológica, es necesario crear artificialmente un contraste
diferencial entre los diversos elementos del tejido. Por ello se desarrollaron
unas técnicas conocidas como tinciones
INTRODUCCIÓN
La primera coloración histológica la hizo Anton Van leeuwenhoek, al teñir
células de las fibras musculares con azafrán, inventó la primera y casual
tinción histológica. (1670)

22. Colorantes, son compuestos orgánicos y son los reactivos necesarios
para las tinciones, que facilitan la observación al microscopio. Cada tipo
de colorante tiene afinidad por determinados componentes celulares,
actúan mediantes reacciones de intercambio iónico entre el colorante y
los elementos celulares.

23. TIPOS DE COLORANTES
NEPTUNE
Neptune is the
fourth-largest planet
in the Solar System
Por su comportamiento
químico
Por su origen → Colorantes ácidos, también
llamados aniónicos, poseen
grupos cargados negativamente
como carboxilos (-COOH).
→ Colorantes básicos, también
llamados catiónicos, poseen
grupos cargados positivamente
→ Colorantes neutros, es una sal
compuesta de un colorante ácido
y un colorante básico. Ej: eosinato
azul de metileno.
→ Colorantes indiferentes,
insolubles en agua, y solubles en
alcohol, no predomina carga *; -;
neutro.
Ej: colornates lipidos.
→ Naturales: extraídos de
de los animales y plantas
Ej: Hematoxilina viene del
tronco de una planta que por
oxidación origina a hematina
o el carmín, extraído de un
animal, la cochinilla.
→ Artificiales: productos de
derivados quimicos.
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24. TINCIONES HISTOLÓGICAS MÁS COMUNES

25. Tinción con hematoxilina y eosina
→ La más utilizada con frecuencia. Es una tinción topográfica y se utiliza para poner
en evidencia las características estructurales del tejido.
Hematoxilina (base) tiñe de color azul.
Eosina(ácido) produce un color rosado

26. OTRAS TINCIONES
A pesar de los méritos de la tinción con H&E, el procedimiento no permite ver de forma
adecuada ciertos componentes estructurales de los cortes histológicos tales como elastina,
fibras reticulares, membranas basales y lípidos.
Tricromico de Masson
Esta modalidad de tinción se utiliza sobre todo
para tejido conjuntivo. Las fibras de colágeno se
tiñen de azul/verde, el citoplasma se vuelve
rojo/rosa, los eritrocitos rojos y los núcleos se
colorean en negro.

27. OTRAS TINCIONES
Colorante de Weigert
Weigert para la elastina, su uso específico es la
coloración de fibras elásticas, que se tiñen de
azul/negro.
Colorante de Wright - Giemsa
Esta técnica de tinción se usa para el teñido de células
sanguíneas. Los gránulos de neutrófilos adquieren un
color púrpura o rosa, los gránulos de eosinófilos se
tiñen de rojo brillante o anaranjado,los gránulos de
basófilos se quedan en un púrpura intenso y los
gránulos de plaquetas se colorean de rojo.

28. OTRAS TINCIONES
A pesar de los méritos de la tinción con H&E, el procedimiento no permite ver de forma
adecuada ciertos componentes estructurales de los cortes histológicos tales como elastina,
fibras reticulares, membranas basales y lípidos.
Tricromico de Masson
Esta modalidad de tinción se utiliza sobre todo
para tejido conjuntivo. Las fibras de colágeno se
tiñen de azul/verde, el citoplasma se vuelve
rojo/rosa, los eritrocitos rojos y los núcleos se
colorean en negro.

29. Esquema del proceso
histológico