1. Lygdi, a novel ship-interactingprotein, is a negativeregulator of fcɣr-mediatedphagocytosis. Payal Mehta 1 , Anne-Sophie Wavreille 2 , Steven E. Justiniano 2 , Rachel L. Marsh 2 , Yu Jianhua 3 , Richard W. Burry 4 , David Jarjoura 5 , Timoteo Eubank 2 , 6 , Michael A. Caligiuri 2 , 6 , Jonathan P. Butchar 2 , 6 , SusheelaTridandapani 1 , 2 , 6 * Laura Isabel Gómez Rivas Estefani La Rotta Gallego Medicina UPB 10 de agosto 2011

2. INTRODUCTION The immune response is very important in our body, is regulated by lymphocytes, in this case, monocytes, macrophages. In this presentation we're gonna talk about the immune response by monocyteFcyR receptor. For this you need to know some importants concepts .

4. INTRODUCTION SHIP PROTEIN: Inositol phosphatases are enzymes that influence multiple signaling pathways. are also enzymes that regulate phagocytosis. FCɣR: Receptor mediator; binds ligands and is linked with the ability inmunofagococitica effector cells such as macrophages and neutrophils.

5. INTRODUCTION

6. OBJETIVE Knowing the effect of protein LyGDI linked to the phosphatase SHIP in the regulation of phagocytic receptor response FCyR.

7. METODOLOGÍA REACTIVOS: Anticuerpos: FCɣR RAC CD32 ACTINA SHIP LyGDI FUNCION: BLOQUEO DE ACTIVIDAD.

8. METODOLOGÍA INMUNOPRECIPITACIÓN Técnica que utiliza anticuerpos específicos para una proteína para quitar esas proteínas de la solución.

9. METODOLOGÍA WESTERN BLOT Técnica usada para detectar proteínas especificas en una muestra determinada, para separar proteínas (peso molecular y estructura). Detecta la unión antígeno-anticuerpo por actividad enzimática y analiza la cantidad de proteína.

10. METODOLOGÍA PROTEÍNA RECOMBINANTE Son aquellas que obtenemos a partir de una especie o línea celular distinta a la célula original. La proteína se obtiene por la expresión de un gen clonado en esa línea celular.

11. PÉPTIDOS PULL-DOWN Mezcla completa de proteínas. El péptido pull-down es una prueba imparcial para identificar lectores de proteínas que se unen a péptidos específicos modificado por una mezcla de proteínas complejas. METODOLOGÍA

12. ENSAYO COMPETENCIA Método en el que se utilizan dos células, en la cual una es estimulada, pero la otra no recibe estimulo ambas en presencia de un mismo receptor. METODOLOGÍA

13. CITOMETRÍA DE FLUJO Técnica que proporciona resultados que son aplicables en un diagnostico de forma rápida. Gran especificidad para detectar una población celular, en una muestra de varias poblaciones celulares. Ofrece información simultanea de cada célula analizada. METODOLOGÍA

14. TRANSFECCIONES Introducción de material genético externo en células eucariotas mediante vectores víricos. Se realiza abriendo poros en la membrana plasmática mediante electroporacion. METODOLOGÍA

15. MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA Microscopio de fluorescencia es una variación del microscopio de luz ultravioleta. Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia o sustancias marcadas con fluocromos. METODOLOGÍA

16. DIGE ELECTROFORESIS Separaciónsimultánea de máximo 3 muestras. Controlaperfilproteómico entre lascélulas. METODOLOGÍA

17. ENSAYO FAGOCITOSIS IgG con PKH26 Se marcaron GR de oveja, fueronanalizadaspormicroscopia de fluorescencia. El índicefagocítico se definiócomonumero total de GR ingeridospor los fagocitos. METODOLOGÍA

18. RESULTADOS DIGE Verde: inmunoprecipitaciones Amarillo: Pr- unidas a SHIP1 Rojo: Pr- unidas a SHIP2 Circulo: Puntos que se cortaron Flecha: LyGDI

19. LyGDI relacionado con SHIP.

22. Western blot Citometría Negro: CllsRNATRansfectadas Rojo: LyGDITransfectadas Gris: tinción en controles AC.

24. DISCUSSION

25. DISCUSSION

26. CONCLUSIONS Understand these interactions are important to know about autoimmune diseases. The immune system is highly regulated, this may cause deficiencies and bad effects as self-destruction of healthy tissue.

27. CONCLUSIONS It is important that the human mind different types of response against infections and other, necessarily fails because there are others. They should conduct studies to determine and eliminate the receptors that cause autoimmune diseases, developing methods for total eradication.

30. THANKS!