Este documento describe los cuatro niveles de bioseguridad (Niveles 1-4) y las prácticas y medidas de seguridad asociadas a cada nivel. El Nivel 1 se utiliza para organismos no patógenos, el Nivel 2 para patógenos moderados, el Nivel 3 para patógenos graves transmitidos por el aire, y el Nivel 4 para agentes altamente peligrosos sin tratamiento. También cubre instalaciones de animales y laboratorios clínicos.

1. NORMAS DE SEGURIDAD DE NIVEL 1-2-3-4
Niveles de Bioseguridad. En la Sección III se describen cuatro niveles de Bioseguridad
(BSLs), que constan de combinaciones de prácticas y técnicas de
Laboratorio, equipos de seguridad e instalaciones de laboratorio. Cada combinación es
Específicamente apropiada para las operaciones llevadas a cabo, las vías de transmisión
Documentadas o sospechadas de los agentes infecciosos, y la función o la actividad del
Laboratorio.
El o los Niveles de Bioseguridad para los organismos mencionados en la SecciónVII
(Informes Resumidos de Agentes) representan aquellas condiciones bajo las cuales el
Agente puede comúnmente manipularse en forma segura. El director del laboratorio es la
Persona específica y principalmente responsable de evaluar los riesgos y de aplicar
Adecuadamente los niveles de bioseguridad recomendados. En general, el trabajo con
Agentes conocidos debe realizarse al nivel de bioseguridad recomendado en la Sección VII.
Cuando se cuenta con información específica para sugerir que la virulencia, la
patogenicidad, los patrones de resistencia a antibióticos, la disponibilidad de vacunas o
tratamientos, u otros factores han sido alterados significativamente, se pueden especificar
prácticas más (o menos) estrictas
Nivel de Bioseguridad 1. Las prácticas, los equipos de seguridad, el diseño y la
construcción de la instalación del Nivel de Bioseguridad 1 son adecuados para laboratorios
destinados a la educación o capacitación secundaria o universitaria, y para otros
laboratorios en los cuales se trabaja con cepas definidas y caracterizadas de
microorganismos viables que no se conocen como generadores sistemáticos de
enfermedades en humanos adultos sanos. El Bacillus subtilis, Naegleria gruberi, el virus de
la hepatitis canina infecciosa, y los organismos exentos conformes a las NHI Recombinant
DNA Guidelines (Normas de ADN Recombinante de NIH) son representativos de los
microorganismos que cumplen con estos criterios. Muchos agentes no comúnmente
asociados con procesos de enfermedades en humanos son, no obstante, patógenos
oportunistas y pueden causar infección en individuos jóvenes, ancianos,
inmunodeficientes o inmunodeprimidos. Las cepas de vacunas que han sido sometidas a
múltiples pasajes in vivo no deben ser consideradas a virulentas por el simple de hecho de
ser cepas de vacunas. El Nivel de Bioseguridad 1 representa un nivel básico de contención

2. que se basa en prácticas microbiológicas estándar sin ninguna barrera primaria o
secundaria especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de manos.
Nivel de Bioseguridad 2. Las prácticas, los equipos, el diseño y la construcción de
instalaciones del Nivel de Bioseguridad 2 son aplicables a laboratorios educativos, de
diagnóstico, clínicos u otros laboratorios donde se trabaja con un amplio espectro de
agentes de riesgo moderado que se encuentran presentes en la comunidad y que están
asociados con enfermedad humana de variada gravedad. Con buenas técnicas
microbiológicas, estos agentes se pueden utilizar en forma segura en actividades
realizadas en una mesa de trabajo, siempre que el potencial de que se produzcan
salpicaduras o aerosoles sea bajo. El virus de la Hepatitis B, el HIV, el salmonela, y el
Toxoplasma spp. son representativos de los microorganismos asignados a este nivel de
contención. El Nivel de Bioseguridad 2 es adecuado cuando se trabaja con sangre derivada
de humanos, fluidos corporales, tejidos o líneas de células primarias humanas donde
puede desconocerse la presencia de un agente infeccioso. (El personal de laboratorio que
trabaja con materiales derivados de humanos debe consultar el Estándar de Patógenos de
Transmisión por Sangre 2 de OSHA, si desea información acerca de las precauciones
específicas requeridas).
Los riesgos primarios del personal que trabaja con estos agentes están relacionados con
exposiciones accidentales de membranas mucosas o percutáneas, o ingestión de
materiales infecciosos. Debe tenerse especial precaución con agujas o instrumentos
cortantes contaminados. Si bien no se ha demostrado que los organismos que se
manipulan de rutina en el Nivel de Bioseguridad 2 sean transmisibles a través de la vía de
aerosoles, los procedimientos con potencial de producir aerosoles o grandes salpicaduras
-que pueden incrementar el riesgo de exposición de dicho personal- deben llevarse a cabo
en equipos de contención primaria o en dispositivos tales como un BSC o cubetas
centrífugas de seguridad. Se deben utilizar las demás barreras primarias que
Correspondan, tales como máscaras contra salpicaduras, protección facial, delantales y
guantes. Se debe contar con barreras secundarias, tales como piletas para lavado de
manos e instalaciones de descontaminación de desechos a fin de reducir la contaminación
potencial del medio ambiente.
Nivel de Bioseguridad 3. Las prácticas, equipos de seguridad y el diseño y la construcción
de las instalaciones del Nivel de Bioseguridad 3 pueden aplicarse a instalaciones clínicas,
de producción, investigación, educación o diagnóstico, donde se trabaja con agentes
exóticos o indígenos con potencial de transmisión respiratoria, y que pueden provocar una

3. infección grave y potencialmente letal. La tuberculosis Mycobacterium, el virus de la
encefalitis de St. Louis, y el Coxiella burnetii son representativos de los microorganismos
asignados a este nivel. Los riesgos primarios del personal que trabaja con estos agentes
están asociados a la auto inoculación, ingestión y exposición a aerosoles infecciosos.
Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor énfasis en las barreras
primarias y secundarias para proteger al personal en áreas contiguas, a la comunidad y al
medio ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos
Por ejemplo, todas las manipulaciones de laboratorio se deben llevar a cabo en un BSC u
otros equipos cerrados, tales como cámaras de generación de aerosoles estancas al gas.
Las barreras secundarias para este nivel incluyen el acceso controlado al laboratorio y
requisitos de ventilación que minimizan la liberación de aerosoles infecciosos desde el
laboratorio.
Nivel de Bioseguridad 4. Las prácticas, equipos de seguridad, y el diseño y la construcción
de instalaciones del Nivel de Bioseguridad 4 son aplicables al trabajo con agentes
peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que
ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales
no existen vacunas o terapias disponibles. Los agentes con una relación antigénica cercana
o idéntica a los agentes de los Niveles de Bioseguridad 4 deben manejarse conforme a las
recomendaciones de este nivel. Cuando se han obtenido datos suficientes, el trabajo con
estos agentes puede continuarse a este nivel o a un nivel inferior. Los virus como Marburg
o la fiebre hemorrágica Congo-Crimeana se manipulan al Nivel de Bioseguridad 4.
Los riesgos principales para el personal que trabaja con agentes del Nivel de Bioseguridad
4 son la exposición respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposición de membranas
mucosas o piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculación. Todas las
manipulaciones de materiales de diagnóstico potencialmente infecciosos, cepas puras y
animales infectados en forma natural o experimental, implican un alto riesgo de
exposición e infección para el personal de laboratorio, la comunidad y el medio ambiente.
El aislamiento completo del personal de laboratorio de los materiales infecciosos en
aerosol se logra principalmente trabajando en un BSC Clase III o en un traje de cuerpo
entero, con provisión de aire y presión positiva. Por lo general, la instalación del Nivel de
Bioseguridad 4 es un edificio separado o una zona totalmente aislada con sistemas de
gestión de desechos y requisitos de ventilación especializados y complejos para prevenir la
liberación de agentes viables al medio ambiente.

4. El director del laboratorio es la persona específica y principalmente responsable de la
operación segura del laboratorio. Su conocimiento y criterio son esenciales en la
evaluación de los riesgos y en la aplicación correcta de estas recomendaciones. El nivel de
bioseguridad recomendado representa aquellas condiciones bajo las cuales el agente
puede comúnmente manipularse en forma segura. Las características especiales de los
agentes utilizados, la capacitación y experiencia del personal, y la naturaleza de la función
del laboratorio pueden influir más aún en la aplicación de estas recomendaciones por
parte del director.
Instalaciones de Animales. También se describen cuatro niveles de bioseguridad para
actividades que implican el trabajo de enfermedades infecciosas con animales
experimentales. Estas cuatro combinaciones de prácticas, equipos de seguridad e
instalaciones se denominan Niveles de Bioseguridad Animal 1, 2, 3 y 4, y brindan mayores
niveles de protección para el personal y el medio ambiente.
Laboratorios Clínicos. Los laboratorios clínicos, especialmente aquellos que funcionan
dentro de centros de atención de la salud, reciben especimenes clínicos con pedidos de
una variedad de servicios de soporte clínico y de diagnóstico. En general, se desconoce la
naturaleza infecciosa del material clínico, y los especimenes, habitualmente se entregan
con un amplio pedido de exámenes microbiológicos de agentes múltiples (por ejemplo,
esputo presentado para cultivos de rutina, acidorresistentes y fúngicos). El director del
laboratorio es el responsable de establecer los procedimientos estándar dentro del
laboratorio que tengan en cuenta en forma realista el riesgo infectivo de los especimenes
clínicos.
Excepto en circunstancias extraordinarias (por ejemplo, en caso de fiebre hemorrágica
sospechada), el procesamiento inicial de los especimenes clínicos y la identificación
serológica de cepas puras se puede realizar en forma segura al Nivel de Bioseguridad 2, el
nivel recomendado para trabajar con patógenos de transmisión por sangre tales como el
virus de la Hepatitis B y el HIV. Los elementos de contención descriptos en el Nivel de
Bioseguridad 2 están en línea con el estándar de OSHA, Occupational Exposure to
Bloodborne Pathogens 3, 4 (Exposición Ocupacional a Patógenos de Transmisión por
Sangre) de la Administración de Salud y Seguridad Ocupacional. Para esto es necesario el
uso de precauciones específicas con todos los especimenes clínicos de sangre u otros
materiales potencialmente infectados (Precauciones Universales o Estándar)5. Además, se

5. pueden obtener otras recomendaciones específicas para laboratorios clínicos del Comité
Nacional de Estándares para Laboratorios Clínicos.
Las recomendaciones del Nivel de Bioseguridad 2 y los requisitos de OSHA se centran en la
prevención de exposiciones de membranas mucosas o percutáneas a materiales clínicos.
Se deben utilizar barreras primarias como los gabinetes de seguridad biológica (Clase I o II)
cuando deban realizarse procedimientos que puedan provocar salpicaduras, rociado o
pulverización de gotitas. Los gabinetes de seguridad biológica deben también utilizarse
para el procesamiento inicial de especimenes cuando la naturaleza del test solicitado u
otra información sugiera la posible presencia de un agente fácilmente transmisible a
través de aerosoles infecciosos (por ejemplo, M. tuberculosis) o cuando el uso de un
gabinete de seguridad biológica (Clase II) es indicado para proteger la integridad del
espécimen.
La segregación de las funciones del laboratorio clínico y el acceso limitado o restringido a
dichas áreas es de responsabilidad del director del laboratorio. Es también
responsabilidad del director establecer procedimientos estándar, por escrito, destinados a
abordar los riesgos potenciales y las precauciones necesarias que se deban implementar.
Importación y Transporte Interestatal de Ciertos Materiales Biomédicos. La importación
de agentes etiológicos y vectores de enfermedades humanas está sujeta a los requisitos
de las normas de Public Health Service Foreign Quarantine. Otras reglamentaciones
similares del Servicio de Salud Pública y del Departamento de Transporte especifican los
requisitos de empaque, rotulado y transporte para agentes etiológicos y especimenes de
diagnóstico enviados con motivo del comercio interestatal (remítase al Anexo C).
El Departamento de Agricultura de los Estados Unidos reglamenta la importación y el
transporte interestatal de patógenos humanos y prohíbe la importación, posesión o el uso
de ciertos agentes exóticos de enfermedades animales que representan una seria
amenaza de enfermedad para el ganado y las especies avícolas locales (remítase al Anexo
D).
References:

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"Laboratories." In: ASHRAE Handbook, Heating, Ventilation, and Air-Conditioning
Applications, Chapter 13.
2. U.S. Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration. 1991.
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64182.
3. U.S. Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration. 1991. (2)
4. Richmond, J.Y. 1994. "HIV Biosafety: Guidelines and Regulations." In (G. Schochetman, J.
R. George, Eds.), AIDS Testing, Edition 2 (pp. 346-360). Springer- Verlag New York, Inc.
5. Centers for Disease Control. 1988. Update: Universal Precautions for Prevention of
Transmission of Human Immunodeficiency Virus, Hepatitis B Virus and Other Bloodborne
Pathogens in Healthcare Settings. MMWR, 37:377-382, 387, 388.
6. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). 1997. Protection of
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blood, body fluids, and tissue. Approved guideline. Dec. 1977, NCCLS Doc. M29-A (ISBN1-
56238339-6.