Medidas de bioseguridad en el laboratorio

1. BIOSEGURIDAD.
Definición
Conjunto de medidas preventivas de sentido común
para proteger la salud del personal que trabaja en el
laboratorio, frente a diferentes riesgos producidos
por agentes biológicos.
Se incluyen normas contra los riesgos producidos por
agentes físicos y químicos.
La seguridad incluye:
1. El personal debe cumplir con las normas de bioseguridad.
2. Los directivos deben hacer cumplir las normas.
3. La administración debe dar las facilidades para que se
cumplan las normas.

2. Agentes de Riesgo
1.AGENTES BIOLÓGICOS: Transmitidos por
ingestión, inhalación, inoculación y por contacto
con la piel y mucosas.
2.AGENTES FISICOS Y MECANICOS:
Temperaturas dañinas, radiaciones ionizantes,
contactos eléctricos, etc.
3.AGENTES QUIMICOS: Sustancias corrosivas,
tóxicas, carcinogénicas, inflamables, explosivas, etc.

3. Principios de bioseguridad
El método seguro para el manejo de agentes
infecciosos en el laboratorio es el de CONTENCION.
En él intervienen:
1.Las técnicas de procesamiento de las muestras.
2.Los equipos de seguridad diseñados para la
protección personal
3.El diseño de la infraestructura (edificio).

4. Fluidos biológicos
 Sangre
 Orina
 Heces
 Esputo
 Vomito
 Exudados
 tejidos
 Sudor
 LCR
 Sesos
 Huesos
 Medula ósea
 Otros.

5. Contención
PRIMARIA:
1.Protección del personal y del medio ambiente
inmediato contra la exposición a los agentes.
2.La técnica microbiológica y el uso apropiado del
equipo de seguridad. Uso de vacunas.
SECUNDARIA:
1.Protección del medio ambiente externo contra la
exposición de material infeccioso.
2.Se logra por una combinación de las características
de la edificación y prácticas operacionales.

6. EPI

8. Objeto de la Contención
Reducir la exposición del personal de los
laboratorios y de otras personas a los agentes
potencialmente peligrosos y prevenir el escape
de éstos al exterior
Los laboratorios están frecuentemente expuestos a
niveles muy altos de agentes infectantes, por los que
los periodos de incubación pueden ser mas cortos que
los del mismo tipo de infección por una exposición
normal.

12. Factores asociados con la transmisión
de infecciones o accidentes de
trabajo
• RUTAS DE INFECCION. Ingestión: pipeteo (13%),
salpicaduras a la boca, dedos llevados a la boca,
consumo de alimentos. Inoculación: Pinchazos (27%),
cortes (16%), picaduras, mordeduras y rascados
(insectos y animales). Inhalación: trasvasado y
decantado de líquidos, estornudos (gotitas menores de
5 µm llegan a los alvéolos del pulmón, mayores de 5 µm
son atrapados en las mucosas), las mayores infecciones
son debidas a Brucella sp, Chlamydia sp y
Mycobacterium tuberculosis. Piel y Mucosas:
Derramamientos y salpicaduras en los ojos, boca y
maríz (25%), en la piel, superficies y equipos
contaminados.

13. • FORMAS DE TRANSMISION DE LA ENFERMEDAD.
Contacto directo e indirecto, vehículos común y
vectores.
• TIPOS DE LESIONES O DAÑOS. cortaduras,
quemaduras, microfaunas, Envenenamientos,
intoxicaciones.
• FACTORES AMBIENTALES. Ventilación, tipo de
equipo, procedimiento peligroso, control
ambiental, hacinamiento.
• FACTORES BIOLOGICOS. Patogenicidad del
microorganismo, dosis infectante (extensión y
cantidad), rutas de infección, susceptibilidad del
huésped (estado inmune, embarazo, edad, sexo,
raza, etc.), reacciones alérgicas

14. Clasificación por grupos de riesgo
RIESGO I. Escaso riesgo individual y para la comunidad. P. e.
Enthamoeba, B. subtilis, B. cereus, Naegleria,
Plasmodium, protozoarios y helmintos intestinales.
RIESGO II. Riesgo individual moderado, pero limitado para la
comunidad. Pueden producir enfermedad, pero no
representan un riesgo grave para el personal de
laboratorio, la comunidad, los animales o el medio
ambiente. Si se dispone de medidas eficaces, el riesgo
de propagación es limitado. P. e. Acinetobacter,
Aeromonas, Bordetella, bArtonella bacilliformis,
Blastomyces dermatitidis, Clostrium, Corynebacterium,
E. histolytica, Haemophilus, Neisseria, S. typhi, T.
pallidum, E. coli, Leishmania, Yersinia, Mycoplasma,
Pseudomonas, Staphylococcus, Vibrio, Campylobacter,
Leptospira, Shigella, Streptococcus, VHB, etc.

15. RIESGO III. Presentan un riesgo individual elevado, pero
limitado para la comunidad. Suelen provocar
enfermedad grave en el hombre, pero de ordinario no
se propagan de una persona a otra. P. e. Brucella,
Mycobacterium tuberculosis, M. ovis, Pasteurella,
Taenia solium, T. cruzi, Paracoccidioides brasilensis,
Histoplasma capsulatum, etc.
RIESGO IV. Constituyen alto riesgo para los individuos y para
la comunidad. Suelen provocar enfermedades graves
en las personas o en los animales y pueden propagarse
fácilmente de un individuo a otro, directa o
indirectamente. P. e. Virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH), Virus de fiebres hemorrágicas (Ebola,
Dengue), etc.

16. ¿DOCUMENTAR ?
 Definir el sistema de calidad:
BPL : Buenas prácticas de laboratorio
BPM : Buenas prácticas de manufactura
HACCP : Análisis de riesgos y control de
puntos críticos
ISO : Organización internacional para la
estandarización
 Análisis de procesos

17. DOCUMENTOS
MANUAL
DE CALIDAD
PROCEDIMIENTOS
DEL SISTEMA DE CALIDAD
DOCUMENTOS DE TRABAJO
( INSTRUCCIONES,ETIQUETAS,
REGISTROS, ESPECIFICACIONES,
INFORMES, NORMAS Y OTROS )

18. Relación de grupos de riesgo con los
niveles de bioseguridad, las prácticas y
el equipo
Grupo
de
riesgo
Nivel de
bioseguridad
Ejemplos de
laboratorios
Prácticas de
laboratorio
Equipo de
seguridad
I Laboratorio
básico – Nivel de
bioseguridad 1
Enseñanza TMA Ninguno;
trabajo en la
mesa de
laboratorio al
descubierto
II Laboratorio
básico – Nivel de
bioseguridad 2
Atención primaria
de salud. Hospital
de nivel primario;
Dx, enseñanza y
salud pública
TMA y ropa
protectora;
riesgo
biológico.
Trabajo en la
mesa de
laboratorio y
CSB.
TMA: Técnicas Microbiológicas Apropiadas. CSB: Cámara de Seguridad Biológica.

19. Grupo
de
riesgo
Nivel de
bioseguridad
Ejemplos de
laboratorios
Prácticas de
laboratorio
Equipo de
seguridad
III Laboratorio de
contención –
Nivel de
bioseguridad 3
Diagnóstico
especial
Prácticas de
nivel 2 y ropa
especial,
acceso
controlado,
flujo
direccional de
aire.
CSB y/o la
restante
contención
primaria para
todas las
actividades
IV Laboratorio de
contención
máxima – Nivel
de bioseguridad
4
Unidades
patógenas
peligrosas.
Igual que el
nivel 3 y
entrada con
cámara de
aire, salida
para la ducha
y eliminación
especial de
residuos.
CSB de clase
III o ropa de
presión
positiva,
autoclave de
doble
extremo, aire
filtrado

20. Cuadro Resumen de los requisitos por nivel de bioseguridad
Requisitos 1 2 3 4
Aislamiento del laboratorio
Lab. de cierre hermético para descontam.
Ventilación: flujo de aire de entrada
mecánica por el sist. Del edif.
mecánica e independiente
salida de aire filtrado
Entrada de doble puerta
Cámara de aire
Cámara de aire con ducha
Tratamiento de efluente
Autoclave: in situ
en el laboratorio
de doble extremo
Cámaras de Seguridad Biológica
Clase I o II
Clase III
NO
NO
NO
NO
NO
NO
NO
NO
NO
NO
SI
NO
NO
NO
NO
NO
NO
DES
DES
NO
NO
NO
NO
NO
NO
SI
NO
NO
SI
NO
DES
SI
SI
DES
DES
SI
SI
NO
NO
NO
SI
SI
DES
SI
DES
SI
SI
SI
NO
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
DES
SI

21. Etiqueta que debe
exhibirse en las
puertas de
entradas donde
existe riesgo
biológico
Señalización de
ambientes de
laboratorios de
análisis
biológicos

22. MUESTRAS: MANEJO Y CONSERVACION
 Fluidos biológicos:
– sangre, suero
– LCR
– orina
 Evitar adsorción de H2O, CO2 y
oxidaciones por contacto con la
atmósfera

23. NORMAS GENERALES DE
BIOSEGURIDAD EN EL
LABORATORIO

24. Riesgos Infecciosos

26. Tipos de Daño
 Etiológico

27. NIVEL A

28. ¿Cuándo usare el Nivel B?
 Se requiere mayor
protección respiratoria
 Menor protección
cutánea.
 La atmósfera contiene
menos 19.5% de
oxigeno.

29. NIVEL C

30. NIVEL D
 La ropa de trabajo estándar sin un
respirador no proporciona
ninguna protección respiratoria y
protección mínima de la piel.
 Por ejemplo en hospital un Nivel D
consistiría en las precauciones
universales (el vestido quirúrgico,
la máscara y guantes de látex.

31. 1. Medidas Generales :
 Acceso.
 Personal implicado en
el cumplimiento de las
normas.
 Áreas marcadas con la
señal de riesgo y nivel
de contención.
 Superficies de trabajo.
 Limpieza y orden.
 Ropa protectora.
 Guantes y gafas
protectoras.
 Aerosoles.
 Informar accidentes.

32. 2. Higiene :
 Cabello recogido.
 No comer, beber,
fumar o aplicarse
cosméticos en el
laboratorio.
 Lavado de manos.
 Heridas y cortes.

34. 3.Barreras Primarias :
Primera línea de defensa al manipular
posibles agentes patógenos.
3.1.Equipos o prendas de Protección Personal
 Equipo de protección individual (EPI).
 Consideraciones Generales:
• Protección de ojos y cara.
• Protección de manos y brazos.
• Protección respiratoria.
• Vestuario como protección.
• Protección auditiva.

35. Equipo de Protección
Individual (EPI)

36. 3.2.Cabinas de Seguridad Biológica (CSB)
 Cámaras de circulación forzada. Diferentes
niveles de protección.
 Diferencia entre campana de gases,
cabinas de flujo laminar y cabinas de
seguridad biológica.
 Las CSB se dividen en 3 categorías: clase
I, clase II y clase III.
 Usos de la CSB :
• Control de aerosoles infecciosos.
• Protección de material de la contaminación
externa.

37. Seguridad en el trabajo

38. 4.Barreras Secundarias :
 Diseño y construcción de un laboratorio: protección
del personal y las personas que se localizan fuera del
laboratorio.
 Se tiene en cuenta:
• Localización.
• Acceso de personal.
• Lavado y lavaojos.
• Superficies interiores.
• Superficies de trabajo.
• Señalización.
• Presión negativa.
• Filtros HEPA.
• Residuos.
• Nivel 4 de contención.

39. Primero … SEGURIDAD

40. Flujo de aire
A = Abertura frontal
B = Ventana
C = Escape con filtro HEPA
D = Rejilla posterior
E = Filtro HEPA adicional
F = Recirculador de aire
Cabinas de bioseguridad
Clase II Tipo A

41. EQUIPO DE SEGURIDAD - NIVEL IV

42. IDENTIFICACIÓN DE MATERIALES
PELIGROSOS (NFPA 704

43. NFPA 704
1
4
3
Acetona 1 3 0
Acetileno 1 4 3
Acido acetico 2 2 1
Acido clorhídrico 3 0 1
Acido sulfurico 3 0 2
Alcohol etílico 0 3 0
Alcohol metílico 2 4 0
Amoniaco 3 1 0
Azufre 2 1 0
Butano 1 4 0
Cloro 3 0 0
Cloroformo 2 0 0
Nitroglicerina 2 2 4
Soda cáustica 3 0 1

44. Contención de fuga de ácido

45. Decontaminación

46. TRATAMIENTO DE DESECHOS DE
LABORATORIOS
REQUISITOS DE CALIDAD DE EFLUENTES Y AGUA (ESTADOS UNIDOS)
Parámetro Efluente de las aguas
residuales
Calidad de la corriente
DBO 30 mg/L máx 4 mg/L máx
SS 30 mg/L máx -----
OD ---- 4 mg/L. mín
COLIF. TOT. ---- 5000/100 mL máx (abasto de agua)
1000/100 mL máx (área de natación)
COLIF. FEC. 200/100 mL máx 500/100 mL máx (abasto de agua)

47. ALGUNOS CONTAMINANTES Y SUS PROPIEDADES BIOLOGICAS Y FISICAS ASOCIADAS
Compuesto Tasa de
biodegradación
Kb x 102 L/mg.h
Cte. De la ley de Henry
H x 103 atm. m3/mol
Cte. De distribución
entre las fases octanol-
agua (KOW)
ACETONA 0,020 2,5 x 10 –2 0, 57
ANTRACENO 0,30 8,6 x 10 –2 2,8 x 10 4
BENCENO 2,9 5,5 140
CLOROBENCENO 0,30 3,6 6,9 x 10 2
CLOROFORMO < 10 –3 3,4 91
CLORDAN 3,0 x 10 –4 9,4 x 10 –2 3,0 x 10 5
2,4-DICLOROFENOL 10 2,8 x 10 –3 790
ENDRIN 1,0 x 10 –2 4,0 x 10 –4 3,4 x 10 4
ETILBENCENO 3,0 6,4 1, 400
FLUORENO 1,0 6,4 x 10 –2 1, 5 x 10 4
HEXACLOROBENCENO 3,0 x 10 –4 0, 68 2,6 x 10 6
NAFTELENO 10 0, 46 2, 000
NITROBENCENO 1,5 1,3 x 10 –2 72
PIRENO 1,0 x 10 –2 5,1 x 10 –3 8,0 x 10 6
TETRACLOROETANO 3,0 x 10 –4 11, 0 1,100
TOLUENO 10 6, 7 6,20
TRICLOROMETILENO 1,0 x 10 –4 9, 1 260
CLORURO DE VINILO 0,30 11, 9 140

48. DESTINO DE ALGUNOS COMPUESTOS ORGANICOS VOLATILES
SELECCIONADOS (COMBINACION DE DEGRADACION Y
ADSORCION A FANGOS, EVAPORACION Y ESCAPE
Compuesto Tasa de separación (g/día) por: Porcentaje de separación
por:
Carga
afluente
(g/dia)
Biodegrad
ación y
adsorción
Evapora
ción
Escape Biodegra
dación y
adsorción
Evapora
Escape
ción
Benceno 31 27 4 ND 87 13 0
Cloroformo 435 271 85 79 62 20 18
Diclorometano 4,198 514 2.316 1,368 12 55 33
Etilbenceno 215 120 92 3,5 56 43 1
Tolueno 1,469 1.091 361 17 74 25 1
Tricloroetileno 72 36 21 15 50 29 21

49. ALTERNATIVAS / COMPLEMENTOS CON PROCESOS BIOLOGICOS PARA EL
TRATAMIENTO CONVENCIONAL DE COMPUESTOS PELIGROSOS CON
CARACTERISTICAS FISICAS Y BIOLOGICAS DIFERENTES
Características de los
compuestos peligrosos
Alternativas / adicionales al tratamiento convencional
Fácil de biodegradar
aeróbicamente
(Kb alto)
Ninguna necesaria
Volátil (H alto) Arrastrar con el aire del afluente, tratar el aire con un
biofiltro para fase gaseosa. Tratar los gases con fango
activado utilizando un biofiltro para fase gaseosa.
Proceso PACT. Pretratamiento anaerobio.
adsorción a fangos (Kow
alto)
Estabilización de fangos anaerobios. Pretratamiento o
tratamiento único con reactor biopelícula aerobio o
anaerobio. Proceso PACT.
Escape
(Kb, H y Kow bajos)
Pretratamiento anaerobio o tratamiento único. Proceso
PACT
PACT: Powdered Actived Carbon Treatment

50. RENDIMIENTO DEL BIORREACTOR ANAEROBICO DE LECHO FLUIDIZADO
COMPUESTO Conc. del
Afluente (mg/L)
Carga del
afluente (g/Kg
CAG/día)
Porcentaje
de
separación
Catecol 200 – 1,000 1.29 – 6.45 >99
Fenol 3 – 2.959 0.03 – 8.0 >97
p-cresol 70 – 280 0.19 – 0.76 >99
Indol 50 – 300 0.14 – 0.80 >99
Quinoleina 50 – 300 0.14 – 0.80 >99
O-clorofenol 2.000 4.0 >98
2,4-diclorofenol 400 0.8 >99.99
2,4,6-triclorofenol 150 0.3 >99.99
di-n-butil ftalato 0.215 – 100 0.002 – 0.8 >83
Naftaleno 30 0.24 >99.9
p-nitrofenol 100 0.8 >99.9
Nitrobenceno 0.5 – 100 0.005 – 0.8 >98
Lindano 10 0.08 >99.9

51. COMPUESTO Conc. del
Afluente (mg/L)
Carga del
afluente (g/Kg
CAG/día)
Porcentaje
de
separación
Acetona 10.0 – 755 0.10 – 4.0 >96
Metil-etil-acetona 12 0.10 >97
Metil-isobutil-acetona 10 0.01 >94
Tetracloroetileno 20 0.16 >99.99
Tricloroetileno 0.4 0.0004 >98
Cloruro de metileno 1.2 – 20 0.01 – 0.16 >96
1,1,1-tricloroetano 20 – 400 0.04 – 0.8 >99.97
1,1-dicloroetano 0.1 0.001 >87
Tetracloruro de carbono 20 0.16 >99.9
Cloroformo 10 – 20 0.08 – 0.16 >97
Clorobenceno 1.1 – 20 0.01 – 0.16 >85
1,2,4- triclorobenceno 0.2 0.002 >93
Etilbenceno 0.6 0.006 >86
CONTINUACION

52. TECNICAS DE TRATAMIENTO
REMEDIACION – ACONDICIONAMIENTO - BIOAUMENTACION

53. FACTORES QUE AFECTAN LAACTIVIDAD
ECOLOGICA Y DINAMICA POBLACIONAL DE LOS
MICROORGANISMOS EN HABITATS NATURALES
•Fuentes de carbono y energía
•Nutrientes minerales
•Factores de crecimiento
•Agua disponible
•Temperatura
•Presión
•Composición atmosférica
•Radiación electromagnética
•pH
•Potencial REDOX
•Superficies
•Relaciones espaciales
•Genética de los microorganismos
•Interacción de los microorganismos