PPT LACTOBACILLUS

1. EFICIENCIA DEL MICROENCAPSULADO DEL LACTOBACILLUS
CASEI ATCC 393 CON JUGO DE MASHUA MORADA Y
SUPERVIVENCIA EN CONDICIONES GASTROINTESTINALES
SIMULADAS””
UNIVERSIDAD NACIONAL JOSE FAUSTINO SANCHEZ
CARRION
ESCUELA DE POSGRADO
UNIDAD DE POSGRADO DE LA FACULTAD DE INGENIERÍA
EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
PRESENTADO POR:
FRANCISCA NINFA TELLO GAMARRA
HUACHO– PERÚ
2023

2. 1.1 PROBLEMA GENERAL
1.2 PROBLEMAS ESPECIFICO
 ¿Cuál es el efecto de la concentración de maltodextrina y la temperatura de
atomización en la eficiencia del encapsulado y supervivencia del
Lactobacillus casei ATCC 393?
¿Cuál es la eficiencia del microencapsulado del Lactobacillus casei ATCC 393
con jugo de mashua morada y supervivencia en condiciones gastrointestinales
simuladas”
 ¿Cuál es el porcentaje de supervivencia del Lactobacillus casei
ATCC 393 microencapsulado con jugo de mashua morada en
condiciones de jugo gástrico simulado?
 ¿Cuál es el porcentaje de supervivencia del Lactobacillus casei
ATCC 393 microencapsulado con jugo de mashua morada en
condiciones de jugo intestinal simulado?
1. Formulación del
problema

3. 2.1OBJETIVO GENERAL
2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Analizar el efecto de la concentración de maltodextrina y la temperatura de
atomización en la eficiencia del encapsulado y supervivencia del
Lactobacillus casei ATCC 393.
 Evaluar la eficiencia del microencapsulado del Lactobacillus casei ATCC
393 con jugo de mashua morada y supervivencia en condiciones
gastrointestinales simuladas.
• Determinar el porcentaje de supervivencia del Lactobacillus casei
ATCC 393 microencapsulado con jugo de mashua morada en
condiciones de jugo gástrico simulado).
• Cuantificar el porcentaje de supervivencia del Lactobacillus casei
ATCC 393 microencapsulado con jugo de mashua morada en
condiciones de jugo intestinal simulado.
2. Objetivos

4. 3. Hipótesis de
Investigación
3.1 HIPOTESIS GENERAL
La mayor eficiencia del microencapsulado del Lactobacillus casei ATCC 393 con
jugo de mashua morada y supervivencia en condiciones gastrointestinales
simuladas se da empleando 10% de maltodextrina y una temperatura de 100 °C.
3.2 HIPOTESIS ESPECÍFICOS
A mayor concentración de maltodextrina y menor temperatura la eficiencia del
microencapsulado y la supervivencia del Lactobacillus casei ATCC 393 será
mayor, debido a que las altas concentraciones de encapsulante protegen
mejor al microorganismo, y las bajas temperaturas ayudan a mantener la
viabilidad de los microorganismos.
El porcentaje de supervivencia del Lactobacillus casei ATCC 393
microencapsulado con jugo de mashua morada en condiciones de jugo
gástrico simulado es mayor cuanto mayor sea el pH, debido a que el
probiótico generalmente crece en medios ácidos con pH cercanos a 4 por
eso cuanto mayor sea mayor será la supervivencia.

5. 4 Operaciones de variabilidad
4 Operaciones
de variabilidad
Tipo de
variable
Variable Definición conceptual Definición operacional
Dime
nsion
es
Indicadores
Unidad
de
medida
Escala
Independientes
Concentración de encapsulante
Es la proporción o relación
entre la cantidad de soluto y la
de disolvente.
Se emplearán tres concentraciones de
maltodextrina para el
microencapsulado de la mashua
morada con Lactobacillus casei ATCC
393.
% p/v
5 %
10 %
15 %
% 5 – 15 %
Temperatura de atomizado
Es una magnitud que
corresponde a las ideas típicas
de calor que se mide con un
termómetro
Se considerarán tres temperaturas
para el proceso de atomización; estas
temperaturas se programarán en el
equipo y se evaluarán en función de la
eficiencia del microencapsulado.
Temp
eratu
ra
100 °C
120 °C
140 °C
°C
100 °C a
140 °C
pH del jugo gástrico simulado
El pH sirve como indicador de la
acidez o alcalinidad de una
solución. La concentración de
iones hidrógeno [H]+ en una
solución determinada se indica
mediante el pH.
Se utilizará para medir la supervivencia
de Lactobacillus casei ATCC 393 en
entornos del estómago creados
artificialmente y a tres medidas de pH.
pH
1,0
1,5
2,0
- 1 – 2
pH del jugo intestinal simulado
Se utilizará para medir la supervivencia
de Lactobacillus casei ATCC 393 en
entornos de los intestinos creados
artificialmente y a dos medidas de pH.
pH
7,0
8,0
- 7 – 8
Dependientes
Eficiencia del microencapsulado
la capacidad de desempeñar
una función o de hacerlo
adecuadamente.
La eficiencia de la microencapsulación
del Lactobacillus casei ATCC 393 es
una medida de lo bien que se atrapan
y mantienen las células vivas a lo largo
del proceso.
porce
ntaje
Ef. Encap =
(N/N0)*100
%
0 – 100
%
Porcentaje de supervivencia del
Lactobacillus casei ATCC 393
Cantidad de individuos que
logran la preservación de la
vida, especialmente cuando se
produce ante la adversidad o
tras un incidente o momento
de peligro.
Número de colonias de Lactobacillus
casei ATCC 393 que siguen vivas tras
ser microencapsuladas y sometidas a
circunstancias que simulan el sistema
digestivo.
porce
ntaje
%S = (S/S0) *
100
%
0 – 100
%

6. 5.1. Tipo y Nivel de Investigación
Investigación aplicativo: (Reyes & Sánchez, 2002 y Córdova, 2014).Para la ejecución del
presente trabajo de investigación se usó la investigación aplicada. Este tipo de investigación,
es aquella que está orientada a la utilización de conocimientos, interesa conocer para aplicar.
Se caracteriza por el interés en la aplicación de los conocimientos teóricos a determinada
situación concreta y las consecuencias prácticas que de ella se deriven
Nivel Explicativo: (Yarlequé, Javier, Monroe, & Muñoz, 2007; Córdova, 2014; Hernández,
Fernández, & Baptista, 2014). El nivel de investigación es explicativo, en la medida que a
través de los resultados se pretende determinar y explicar las causas de los fenómenos,
verificar hipótesis o teorías; los estudios explicativos generan un sentido de entendimiento y
son sumamente estructurados
(Yarlequé et al., 2007 y Córdova, 2014). El método general para el desarrollo del trabajo fue
el método científico y el específico fue el experimental, que consiste en manipular la o las
variables que se consideran independientes, con el objeto de verificar los efectos de tal
manipulación en la o las variables dependientes
5. Diseño
metodológico
CAPÍTULO II
DISEÑO METODOLÓGICO
5.2. Métodos de investigación

7. 5.2. Diseño de la investigación
2. Diseño
metodológico
• La cepa probiótica de Lactobacillus casei será inoculada en 100 mL de caldo MRS e incubada
a 37°C durante 18 h para obtener aproximadamente 109 UFC/mL en fase logarítmica tardía. Las
bacterias serán recuperadas del medio mediante centrifugación a 6000 rpm por 3 min y se
lavarán dos veces en solución salina estéril al 0,085%. (Murua, Sánchez, Castaño, & Amaya,
2016 y De La Cruz & Terán, 2013)
Preparación de la
cepa para la
microencapsulación.
• Los pellets serán diluidos con 20 mL de solución salina estéril al 0,085% para obtener
concentraciones de 1010 UFC/mL. Se suspenderá 1 mL del cultivo lavado de Lactobaillus
casei a una concentración de 1010 ufc/mL, en 5 mL de solución salina estéril al 0,085%. La
suspensión activa será mezclada con 45 mL de una solución de jugo de mashua con
maltodrextina con concentraciones variables (5, 10 y 15,0 % p/v), a temperatura de entrada
de (100 °C, 120 °C y 140 °C), recomendado por Mendoza, (2015) (Murua et al., 2016).
Microencapsulación
• Se suspenderán por triplicado 0,5 g de cápsulas en tubos con 4,5 mL de diluyente de peptona
al 0,1%. Las suspensiones serán homogeneizadas en vortex a velocidad máxima durante 1
min. Diluciones adecuadas de las muestras serán sembradas en agar MRS e incubadas con
las condiciones descritas para conteo de microorganismos (Murua et al., 2016).
Determinación de la
viabilidad de
Lactobacillus casei
después del proceso
de secado por
aspersión.

8. 2. Diseño
metodológico
• Saliva artificial: Se diluirán Cloruro de sodio 6,20 g/L; Cloruro de potasio 2,20 g/L;
Cloruro de calcio 0,22 g/L y Bicarbonato de sodio 1,20 g/L en agua destilada estéril
(Sánchez, 2012).
• Jugo gastico simulado (JGS): Se preparará disolviendo 3 g de pepsina en un litro de
solución salina estéril (0,05 % NaCl w/v) y a diferentes pH (1,0; 1,5; 2,0) ajustando
con HCl al 0,1 M.
• Jugo intestinal simulado (JIS): Se preparará disolviendo 1 g de pancreatina y 1,5 g
de sales biliares en un litro de solución salina estéril 0,05 % y a diferentes pH (7; 8)
ajustándolo con NaOH al 0,1 M.
Preparación de
soluciones
• Se adicionará 3 mL de saliva artificial y 24 mL de JGS a 3 mL de la muestra de jugo
de maca simbiótico, se homogenizará las muestras manualmente por 1 min y se
colocaran a 37 °C durante 2 h. Se monitoreará la cuenta viable recién colocada las
muestras en saliva y JGS y a las dos horas siguientes.
• A continuación, las mismas muestras serán expuestas a las condiciones
intestinales simuladas. Para ello se tomarán 25 mL de las suspensiones y se
centrifugarán a 1 000 RPM por 3 minutos. Se decanta el sobrenadante, de ellos se
toma 1 mL más 9 mL de JIS, las muestras se colocarán a 37 °C durante 4 horas. La
cuenta viable de estas suspensiones será determinada recién agregado el JIS a las
2 y a las 4 horas de residencia.
Tolerancia a
condiciones
simuladas del
tracto
gastrointestinal

9. 6.1 DISEÑO DE LA INVESTIGACION
6. Diseño
metodológico
Jugo de mashua con Lactobacillus
casei ATCC 393
T1 T3
C1
T1 T3
C2
T2 T2 T1 T3
C3
T2
Figura 7: Diseño experimental para medir
la eficiencia de microencapsulación
Donde:
C1, C2 y C3, concentraciones de encapsulante
(maltodextrina 5, 10 y 15 %)
T1, T2 y T3, temperatura de atomización (100, 120
y 140 °C)
Lactobacillus casei ATCC 393
Microencapsulado con jugo de mashua morada
JGS1 JGS2
JIS1 JIS2 JIS1 JIS2
JGS3
JIS1 JIS2
Figura 8: Diseño experimental para
ensayo de supervivencia
Para determinar la supervivencia del Lactobacillus
casei ATCC 393 se utilizarán dos factores de
prueba, el JGS y el JIS. Para el JGS se utilizarán
tres valores de pH diferentes (JGS1 = 1, JGS2 =
1,5 y JGS3 = 2), y para el JIS se utilizarán dos
valores de pH (JIS1 = 7, JIS2 = 8). La variable de
respuesta en este momento es la proporción de
supervivencia de Lactobacillus casei ATCC 393

10. . Diseño
metodológico
POBLACIÓN
La población de mashua para el trabajo
estuvo conformada por tubérculos de
mashua morada cultivados en el Centro
Poblado de La Victoria distrito de
Paucartambo, provincia y región Pasco y el
todos los cultivos de cepa pura de
Lactobacillus casei.
MUESTRA
La muestra estuvo constituida por 5 kg de
mashua morada cultivados en el Centro
Poblado de La Victoria distrito de
Paucartambo, provincia y región Pasco.
Solo se adquirió un tubo de Lactobacillus
casei ATCC 393
6. 2 POBLACIÓN Y MUESTRA

11. GRACIAS