Este documento describe un experimento realizado en un laboratorio de toxicología en el que se estudió la intoxicación por metanol en un cobayo. El cobayo fue intoxicado con metanol por vía intraperitoneal e inyectado en dosis hasta su muerte. Luego se destiló el metanol de las vísceras del animal para identificarlo a través de reacciones químicas. El experimento mostró que el metanol es muy tóxico y puede causar la muerte a dosis elevadas, concluyendo que este compuesto estaba presente en el animal intoxicado.

1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Fernández Valarezo Gisela Katherine
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N° 5
Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 16 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 23 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 3
Título de la Práctica: Intoxicación por metanol.
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Intraperitonial
Tiempos:
o Inicio de la práctica: 8:20am
o Hora de administración del toxico al cobayo: 8:25 am
o Deceso del animal: 9: 45 am
o Inicio de la destilación: 10:30 am
o Finalización de la destilación: 11:00 am
o Final de la práctica: 11:30 am
 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por metanol.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
toxico.
3. Adquirir la destreza para realizar las reacciones de identificación, mediante la
transformación del metanol a metanal.
4. Reconocer mediante la observación de los colores características, la presencia de
metanal indicativo de la presencia del metanol.

2. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2
 MATERIALES
o Jeringa de 5 cc
o Varilla
o Espátula
o Probeta
o Campana
o Panema
o Perlas de vidrio
o Bureta
o Soporte universal
o Cinta plástica
o Lámpara de alcohol
o Fosforo
o Pinzas
o Cocineta
o Porta tubo
o Tabla de disección
o Cronómetro
o Equipo de disección
o Bisturí
o Vasos de precipitación 200 y
500 ml.
o Erlenmeyer
o Equipo de destilación.
o Tubos de ensayo
o Pipetas
o Guantes de látex
o Mascarilla
o Mandil
o Gorro
o Zapatones en caso de usar
sandalias
 SUSTANCIAS
 Metanol.
 Acido tartárico.
 Coluro de Fenilhidracina al 4%.
 Nitroprusiato de sodio al 2.5 %.
 Hidróxido de Sodio 0.1 N
 Ferricianuro de potasio.
 Hidróxido de potasio 12%.
 Ácido cromotrópico.
 Agua destilada.
 Ácido sulfúrico concentrado.
 Leche.
 Cloruro férrico

3. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3
 PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.
2. Colocamos el cobayo en el panema.
3. Tener todos los materiales a utilizar listos.
4. Administramos al cobayo, 5 ml de metanol por vía intraperitoneal y anotamos
el tiempo.
5. Observamos los efectos que produce en el cobayo.
6. Luego inyectamos 15 ml del toxico en tres dosis durante el lapso de 35 minutos
hasta la muerte del animal.
7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bisturí.
8. Observamos el estado de las vísceras.
9. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras
(picadas lo más finas posibles).
10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación.
11. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth),
asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado.
12. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara
de alcohol esto con movimiento circular.
13. Al producto de la destilación (destilado), le colocamos una lámina de cobre al
rojo vivo hasta que se observe el desprendimiento de partículas de color gris,
con esto convertimos el metanol a metanal y procedimos a realizar las
reacciones de identificación.
14. Una vez terminada la práctica se limpia todo el material y el área utilizada.
 REACCIONES DE REACIONES DE RECONICIMIENTO
1. REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml
de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de
ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de
solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla
adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle
nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml
de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso
color violeta en caso de positivo.
2. REACCIÓN DE RIMINI: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro
de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5%
recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una
coloración azul intensa.
3. CON LA FENILHIDRACINA: En un medio fuertemente acidificado con
ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de
cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 –
10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración
rojo grosella.

4. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 4
4. CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Con este ácido en un medio
fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una
coloración roja después de calentarla ligeramente.
5. REACCIÓN DE HEHNER: Se mezcla una gota de destilado con algunos
mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han
agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido
sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o
azul violeta.
 GRÁFICOS:
Animal de
experimentación cobayo
Extraer las vísceras del
cobayo
Inyectar 10 ml el toxico
(metanol)
Preparar el equipo de
destilación
Triturar las vísceras
Observar los síntomas del
cobayo luego de la
administración del toxico
Obtener el destilado para
realizar el análisis
Colocar al cobayo en la tabla
de disección
1
4
852
7
3
6
9
Transformación del metanol en
metanal para su identificación

5. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 5
 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
REACCIÓN DE SHIFF:
Reacción positivo no característico cambio de coloración
REACCIÓN DE RIMIDI
Reacción positivo no característico cambio de
coloración
CON LA FENIL HIDRACINA
Reacción positivo se observó el color rojo grosella.
Antes Después
Antes Después
Antes Después

6. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 6
CON ÁCIDO CROMOTRÓPICO
Reacción negativo no se observó la coloración roja.
REACCIÓN DE HEHNER
Reacción negativo no se formó el anillo violeta.
 OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal el
cobayo presentó cierta inmovilidad, depresión del SNC, a los 3 minutos se le cayeron
las orejas pero permanecía estable, a los 7 minutos el ritmo respiratorio disminuyo, a
los 11 minutos no responde a estímulos oculares, con la sobredosis que se le fue
administrado murió inmediatamente a los 70 minutos. Presentó necropsia de las
vísceras.
 CONCLUSIONES
Al término de esta práctica podemos concluir que el veneno utilizado (metanol) es muy
tóxico debido a las manifestaciones como la poca movilidad, convulsiones y coma que
se presentaron en el animal, en primera instancia no se logró la muerte ya que la dosis
fue muy baja pero al administrarle un total de 20 ml del toxico el deceso fue inmediato
y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo
presencia de metanol.
DespuésAntes
Antes Después

7. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 7
 RECOMENDACIONES
 Realizar la asepsia del área a trabajar.
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así
intoxicaciones.
 Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y
que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del
toxico.
 CUESTIONARIO
¿QUE ES EL METANOL?
El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol
metílico (o raramente alcohol de quemar), es el alcohol más sencillo. A temperatura
ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y
tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula
química es CH3OH (CH4O).
¿DÓNDE SE ENCUENTRA?
 Anticongelante
 Fuentes de calentamiento enlatadas
 Líquidos para copiadoras
 Líquido descongelante
 Aditivos para combustibles (mejoradores del octanaje)
 Removedor o disolvente de pintura
 Goma laca
 Barniz
 Líquido limpiador de parabrisas
¿CUÁLES SONLOS SINTOMAS ANTE UNA INTOXICACION?
Los síntomas pueden abarcar:
Pulmones y vías respiratorias
Dificultad respiratoria, paro respiratorio
Ojos
Ceguera, visión borrosa y dilatación de las pupilas
Corazón y vasos sanguíneos
Convulsiones y presión arterial baja
Sistema nervioso:
Comportamiento agitado, coma, dolor de cabeza y epiléptica

8. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 8
Piel y uñas
Uñas y labios azulados
Estómago e intestinos
Dolor abdominal (fuerte), diarrea, problemas con la función hepática, náuseas,
pancreatitis y vómitos.
¿TOXICIDAD DEL METANOL?
El metanol es extremadamente tóxico. Tan solo dos cucharadas pueden ser mortales
para un niño y alrededor de 2 a 8 onzas pueden ser mortales para un adulto. La ceguera
es común y a menudo permanente a pesar de los cuidados médicos. El pronóstico para
la persona depende de la cantidad de tóxico ingerida y de la prontitud con que se reciba
el tratamiento.
COMPRACIONES
USOS
El metanol tiene varios usos. Es un disolvente industrial y se emplea como materia
prima en la fabricación de formaldehído. El metanol también se emplea como
anticongelante en vehículos, combustible de estufetas de acampada, solvente de tintas,
tintes, resinas, adhesivos, biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también
añadido al etanol para hacer que éste no sea apto para el consumo humano (el metanol
es altamente tóxico) y para vehículos de modelismo con motores de combustión interna.
 BIBLIOGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico.
Madrid. España. 2010.
 WEBGRAFÍA
https://www.google.com.ec/?gfe_rd=cr&ei=I72nU8_2Ca_Q8gfx7IDgBQ&gws_
rd=ssl#q=metanol
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Metanol
 AUTORIA
Bioq. Farm. Carlos García MSc.

9. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 9
 FIRMAS DE LOS INTEGRANTES
__________________ __________________
Elizabeth Guzmán Geovanny Ramón
_________________________
Gisela Fernández
GLOSARIO
Embalsamamiento.- es una práctica que utiliza generalmente sustancias químicas, en
especial resinas o bálsamos, y cuyo objetivo es preservar de la putrefacción la integridad
de los cadáveres.
Aspartame.- es un edulcorante no calórico descubierto en 1965 por la multinacional
farmacéutica G.D. Searl and Company. Que se emplea en numerosos alimentos en todo
el mundo bajo varias marcas como Natreen y Canderel, además de NutraSweet, y que
corresponde al código E 951 en Europa.
Emanaciones: Desprendimiento o emisión de sustancias volátiles de un cuerpo hacia su
alrededor.
Mosto.- es el zumo de la uva que contiene diversos elementos de la uva como pueden
ser la piel, las semillas, etc. Se considera una de las primeras etapas de la elaboración
del vino.
Acidosis.- Es una dolencia en la cual hay demasiado ácido en los líquidos del cuerpo.
Es lo opuesto a alcalosis (una afección en la cual hay exceso de base en los líquidos
corporales).

10. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 10
ANEXOS:
METANOL
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro ay volátil a temperatura ambiente. Por si mismo es
inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Fuentes de Exposición
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de
plásticos, material fotográfico. Componente de la gasolina, anticongelantes, liquido limpia
cristales, líquido para fotocopias, limpiadores del hogar, etc.
La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han
dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas.
Toxicocinética
Cuando se ingiere, se absorbe rápidamente a partir del tracto gastrointestinal y los niveles en
sangre alcanzan su pico a los 30-60 minutos de la ingestión, dependiendo de a presencia o
ausencia de comida. La intoxicación usualmente se caracteriza por un periodo de latencia (40

11. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 11
minutos a 72 horas), durante el cual nos e observan síntomas. Esta fase sigue de acidosis con
anión gap elevado y de síntomas visuales.
El metabolismo del metanol comprende la formación de formaldehido por una oxidación
catalizada a través del alcohol deshidrogenasa. El formaldehido es 33 veces más toxico que el
metanol, pero es más rápidamente convertido a acido fórmico, que es 6 veces más toxico que el
metanol. Los niveles de ácido fórmico se correlacionan con el grado de acidosis y la magnitud
del anión gap. También la mortalidad y los síntomas visuales se correlacionan con el grado de
acidosis.
Mecanismos de acción
El metanol se absorbe por vía oral, a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de
distribución es 0.6 l/kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la
grasa. El hígado lo metaboliza en su mayor parte, a través del alcohol-deshidrogenasa, el
formaldehido, que es rápidamente convertido a acido fórmico por el aldehído-deshidrogenasa, el
cual es finalmente oxidado a dióxido de carbono. El 3-5% se excreta por el pulmón y el 12%
por vía renal. La vida media es de unas 12 horas, que puede reducirse a 2.5 mediante
hemodiálisis. La eliminación sigue una cinética de primer orden a bajas dosis y durante la
hemodiálisis, mientras que sigue una cinética de orden cero a altas dosis.
Se piensas que el ácido fórmico es el responsable de la toxicidad ocular asociada a la
intoxicación por metanol, como el ácido láctico, parecen ser los responsables de la acidosis
metabólica y del descenso del bicarbonato.
El metanol afecta principalmente al SNC, produciendo deterioro del nivel de consciencia
convulsiones y coma. La dosis toxica es de 10-30ml, considerándose potencialmente letal una
dosis de 60-240ml; los niveles plasmáticos tóxicos son superiores a 0.2g/l, y potencialmente
mortales los que superan 1l/g.
Cuadro clínico
La intoxicación por metanol habitualmente se produce por ingestión, pero también puede ocurrir
por absorción cutánea y por inhalación. El inicio del cuadro puede ser precoz, o retrasarse hasta
24 horas, si se han ingerido también alimentos. Los principales signos y síntomas son:
a) Perdida de agudeza visual con adema de papila. Además puede aparecer nistagmus
(movimiento involuntario de los ojos. Usualmente es de lado a lado pero sa veces es de
arriba abajo o en forma circular: es un movimiento rotatorio incontrolable) y alteración
de los reflejos pupilares. Asimismo, puede desarrollarse pérdida de visión y ceguera
irreversible por atrofia del nervio óptico.
b) Taquipnea medida por acidosis y parada respiratorio súbita
c) Síntomas digestivos como dolor abdominal, anorexia, náuseas y vómitos, acompañados
a veces, de aumento de transaminasas y enzimas pancreáticos

12. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 12
d) Síntomas neurológicos que van desde la confusión hasta el coma profundo,
convulsiones, cefalea vértigo, infarto de ganglios basales, etc.
e) Alteraciones hemodinámicas como bradiarritmias, hipotensión y depresión miocárdica.
f) La acidosis metabólica es un hallazgo constante en todos los casos graves, y se debe
principalmente al ácido fórmico. También esta aumentado el anión gap.
Diagnóstico
El diagnostico puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los acompañantes.
Sin una historia clínica de ingestión de metanol, el diagnóstico diferencial es amplio, e incluye
cetoacidosis diabética, pancreatitis, nefrolitiasis, meningitis, hemorragia subaracnoidea, etc.
En estos pacientes, está indicado realizar al ingreso analítica de sangre y orina de rutina.
Además es importante obtener una gasometría arterial para determinar acidosis metabólica. El
diagnostico de certeza nos lo dará el nivel de metanol en sangre.
Tratamiento
El tratamiento inicial de la intoxicación aguda por metanol es de soporte. Es prioritario asegurar
la vía aérea y mantener una ventilación y circulación adecuadas. La recuperación del paciente
parece estar directamente relacionada con el intervalo de tiempo transcurrido entre la ingestión
del toxico y el inicio del tratamiento. También depende del grado de acidosis, que a su vez, es
también en parte, función del tiempo.
Para prevenir la absorción se hará gástrico, a ser posible en las dos primeras horas o en las 4
primeras horas si la ingesta se acompaño de alimentos. El carbón activado y los catárticos son
ineficaces. Puede realizarse infusión de etanol para bloquear la metabolización hepática del
metanol por inhibición competitiva del alcohol deshidrogenasa, y forzar la eliminación del
toxico por rutas extra hepáticas. Para conseguir los niveles plasmáticos óptimos de etanol (entre
1 y 2g/l), se administra un bolo i.v. de 1.1 ml/kg disuelto en 100ml de suero glucosado al 5%
pasar en 15 minutos; a continuación 0.1ml/kg/h disueltos cada vez en 100ml de suero glucosado
al 5% se si trata de un alcohólico crónico, la dosis de mantenimiento es de 0.2 ml/kg/h. La
perfusión de etanol deben hacerse por vía central para evitar tromboflebitis. Deben controlarse
periódicamente los niveles de etanol y ajustar la dosis de perfusión.
Es necesario el aporte de volumen por la deshidratación y la inhibición de la hormono
antidiurética, que se realiza con suero salino. Se administrara bicarbonato para corregir la
acidosis. Se debe administrar ácido fólico, que aumenta la oxidación del ácido fórmico a
dióxido de carbono y agua.
La diuresis forzada no es eficaz, pero con la hemodiálisis se consigue depurar tanto el metanol
como el ácido fórmico y el formaldehido. Los criterios para indicar la diálisis serian cualquiera
de los siguientes: metanol >0.5 g/l, acidosis metabólica con pH< 7.20 trastornos visuales o
disminución del nivel de consciencia. Si se indica diálisis debe mantenerse durante varias horas,
y no interrumpirse hasta que el metanol sea <0.2g/l. Para controlar las convulsiones se utiliza
diazepan y fenitoína.
Reacciones de reconocimiento
Reconocimiento en medios biológicos

13. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 13
Las reacciones particulares para reconocer al metanol como tal, prácticamente no existen, por lo
que es necesario transformarlo en el respectivo aldehído con tal propósito. Esto se consigue
mediante un sencillo método que consiste calentar al rojo una lámina de cobre (exenta de grasa
y otras impurezas) e introducirla en el destilado, repitiéndose la operación hasta cuando la
lámina comienza a desprender pequeñas partículas color gris en el destilado, lo cual nos indica
que hemos conseguido el propósito de trasformar el metanol en metanal.
En consecuencia, las reacciones que se practican son las mismas que se realizan para el
reconocimiento del formaldehido, así:
1. Reacción de Shiff: Se produce color violeta.
2. Reacción de Rimini: Origina color azul intenso
3. Con la fenil hidracina: Da color rojo grosella
4. Reacción de Marquis: Se obtiene un color violeta
5. Con el ácido cromotrópico: Da color rojo
6. Reacción de Hehner: Se produce color violeta o rojo violeta.

14. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 14

15. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 15