Este documento describe un estudio para determinar la presencia de alcaloides en una muestra de orina mediante métodos de precipitación cualitativa. Se realizaron extracciones con éter etílico y cloroformo de la orina, y las muestras extraídas se sometieron a las pruebas de Dragendorff, Mayer, Bouchardat y Mandelin. Los resultados de las pruebas indicaron la presencia del alcaloide 2C-B, un análogo estructural del DOB con efecto alucinógeno. Aunque las pruebas de

1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO
Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán
Departamento de Ciencias Biológicas
Sección de Bioquímica y Farmacología Humana
Licenciatura en Bioquímica Diagnostica.
Asignatura: Toxicológica Grupo: 2701 Equipo: 7
Fecha de realización de la práctica: 19/04/13
Fecha de entrega del reporte: 26/04/13
“Determinación cualitativa de alcaloides en orina mediante los métodos de precipitación, Dragendorff, Mayer,
Bouchardat y Mandelin”
Alvarado Mendieta, AngélicaBs,1., Arellano Ugalde, XochitlBs,2., Campos García, VictoriaBs,3.
Bs1,2,3. Bachelor Students of Biochemistry.Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán. Av. 1° de Mayo, Col. Sta.
María las Torres Cuautitlán Izcalli, Estado de México CP.54740.
RESUMEN:Los alcaloides son uno de los grupos de metabolitos secundarios más diversos encontrados en los organismos biológicos. Los
alcaloides se han reportado en varias familias vegetalesdel orden Gentianales. Químicamente se definen como compuestos químicos
heterocíclicos donde el nitrógeno se encuentra unido al anillo intracíclico, derivados del metabolismo de aminoácidos, de carácter más o
menos básico, de distribución restringida, con propiedades farmacológicas importantes a dosis bajas y que responden a reacciones comunes
de precipitación. Lamentablemente estas sustancias se han usado con fines de abuso, por lo cual se determinan éstos en muestras
biológicas como la orina. Existen pruebas presuntivas(Dragendorff, Mayer, Bouchardat, Mandelin) que orientan sobre la presencia de
alcaloides en distintas muestras biológicas, basadas en la capacidad que tienen los alcaloides en estado de sal (extractos ácidos), de
combinarse con el yodo y metales pesados como bismuto, mercurio, vanadio formando precipitados en la presencia de un alcaloide. De
acuerdo a estas pruebas la muestra dio positivo a 2C-B, alcaloide análogo a DOB, relacionado en la mescalina y anfetaminas con efecto
alucinógeno. Las determinaciones cualitativas han sido remplazadas por metodologías más exactas y precisas (p. ej. HPLC), sin embargo
dentro del laboratorio de análisis siguen siendo utilizadas debido a su practicidad.
PALABRAS CLAVE: Alcaloides, muestra biológica de orina, reacciones de precipitación, extracción orgánica.
SUMMARY:Alkaloids are one of most diverse groups of secondary metabolites found inbiological organisms. Alkaloids are present in several
family plants from the Gentiales order. Chemically defined as chemical compounds where the heterocyclic nitrogen ring is attached to
intracíclico, derivatives of amino acid metabolism, of a more or less basic, restricted distribution, with important pharmacological properties at
low doses and respond to common reactions of precipitation.Unfortunately these chemicals have been used for purposes of abuse, whereby
these are determined in biological samples such as urine. Guiding presumptive evidence (Dragendorff, Mayer, Bouchardat, Mandelin) of the
presence of alkaloids in various biological samples, based on the ability of alkaloid salt status (acidic extracts), combined with iodine and
heavy metals such as bismuth, mercury, vanadium precipitates forming about the presence of an alkaloid.According to these tests the sample
tested was positive for 2C-B, which is similar to DOB, related to mescaline and amphetamine with hallucinogenic effect. Qualitative
determinations have been replaced by more accurate and precise methodologies (eg. HPLC), however within the analytical laboratory are still
used because of their practicality.
Keywords:Alkaloids, urine biological sample, precipitation reactions, organic extraction.
INTRODUCCIÓN
Desde el punto de vista químico, todos los alcaloides
son compuestos nitrogenados, estando en la mayoría
de los casos el nitrógeno formando parte de un
heterociclo y en algunas ocasiones formando parte de
una cadena abierta. Están constituidos además por
carbono e hidrógeno, muchos llevan oxígeno, lo que
les confiere una serie de propiedades físicas (sólida,
cristalizable), y raramente suelen contener azufre. Se
derivan del metabolismo de los aminoácidos(Evans,
2000).
De acuerdo a las características de esta definición,
algunos autores han dividido a los alcaloides en cuatro
clases (Ver Figura 1: Esquema de la clasificación de los
alcaloides).
• Alcaloides verdaderos

2. • Protoalcaloides
• Pseudoalcaloides
• Alcaloides imperfectos
Alcaloides Verdaderos cumplen estrictamente con las
características de la definición de alcaloide: son
formados a partir de aminoácidos, tienen siempre un
nitrógeno intracíclico, son de carácter básico y existen
en la naturaleza normalmente en estado de sal(Grau,
2005).
Protoalcaloides son aminas simples con nitrógeno
extracíclico, de carácter básico y son productos del
metabolismo de los aminoácidos(Grau, 2005).
Pseudoalcaloides presentan algunas de las
características de la definición de alcaloide, pero no
son derivados de aminoácidos (Huang 2006).
Alcaloides imperfectos son derivados de bases
púricas, no precipitan con los reactivos específicos
para alcaloides. No son alcaloides los aminoácidos, las
betalaínas, los péptidos, los amino azúcares, las
vitaminas nitrogenadas, las porfirinas, algunas bases
como la tiamina ampliamente distribuida en los seres
vivos y los alkil aminas de bajo peso molecular
(Guinaudeau, 2005)
algunas sugerencias sobre el “rol” que juegan estas
sustancias en los vegetales(Guinaudeau, 2005) como:
Sirven como productos de desecho o almacenamiento
del nitrógeno sobrante, esta función es equivalente a la
del ácido úrico o de la urea en los
animales(Guinaudeau, 2005).
Debido a que en su mayoría, los alcaloides son
asociados con ácidos orgánicos que le facilita el
transporte en la planta, pueden servir como productos
de almacenamiento del nitrógeno no metabolizado o
para transporte del mismo; en el caso de las
Solanaceas midriáticas, los ésteres del tropano se
forman en las raíces y son transportados a las partes
aéreas donde pueden ser hidrolizados(Guinaudeau,
2005), (Huang 2006).
Los alcaloides pueden servir de reguladores del
crecimiento, se ha demostrado que los alcaloides
derivados de la putrescina se incrementan
notablemente durante la germinación de algunas
plantas como la cebada, cuando se encuentran en
suelos deficientes de potasio(Huang 2006).
De acuerdo a su propiedades fisicoquímicas, insolubles
o muy poco solubles en agua, pero se disuelven bien
en alcohol, éter, cloroformo u otros solventes
orgánicos, se basa el método general de extracción
orgánica(Cortes, 2007).
La extracción en ampolla es aplicable a material líquido
o en general, toda sustancia líquida o posible de ser
solubilizada fácilmente. En el extracto éter alcalino se
encontrarán la mayoría de los alcaloides, mientras que
en el extracto cloroformo alcalino se encontrarán a la
morfina, estricnina, brucina y atropina(Pendell, 2002).
Figura 1: Esquema de la clasificación de los alcaloides
(Grau, 2005).
En cuanto a su estado natural, los alcaloides son
esencialmente sustancias presentes en todos los
órganos de la planta, pueden encontrarse
mayoritariamente en hojas (cocaína, nicotina,
pilocarpina), en flores (escopolamina, atropina), en
frutos (alcaloides del opio, peletiarina, coniina), en
semilla (piperina, arecolina), en corteza (quinina,
tubocurarina), en la raíz (emetina y cefalina).La función
de los alcaloides en las plantas no es aun clara, existen
Las técnicas de reconocimiento son basadas en la
capacidad que tienen los alcaloides en estado de sal
(extractos ácidos), de combinarse con el yodo y
metales pesados como bismuto, mercurio, vanadio y
iones I2 formando precipitados; estos ensayos
preliminares se pueden realizar en el laboratorio o en el
campo(Cortes, 2007).
En el presente estudio se evalúo la presencia de
alcaloides en una muestra biológica, orina, mediante su
tratamiento previo de extracción orgánica con éter
etílico para posteriormente someterla al análisis
cualitativo de las reacciones de precipitación.

3. MATERIALES Y MÉTODOS
RESULTADOS
Pruebas presuntivas
Extracto
EE1
EE2
EC
Dragendorff
+/-
Mayer
+/-
Boucharda
+/-t
-
Mandelin
+/+
+
+
Tabla 1:Resultados experimentales de las reacciones de
precipitación presuntivas para alcaloides. (Los extractos son
EE1=extracto etéreo 1, EE2=extracto etéreo 2 y EC=extracto
clorofórmico)
Figura 2. Muestra de orina, aspecto turbio, color:
Voguel II, abundantes sedimentos.
Figura 3. Resultados de las pruebas de precipitación.
EE1: Extracto Etéreo 1; EE2: Extracto Etílico 2 y EC:
Extracto clorofórmico
Alcaloide
2C-B
2C-B
2C-B

4. ANÁLISIS DE RESULTADOS
Puesto que los alcaloides son compuestos de carácter
básico, su solubilidad en los diferentes solventes varía
en función del pH, es decir según se encuentre en
estado de base o de sal(Pendell, 2002).
extracción con cloroformo y lo que se obtuvo de la fase
acuosa se evaporó casi a sequedad.
Para la identificación de alcaloides se utilizaron 4
pruebas de precipitación con los extractos etéreos 1 y
2, y con la fase clorofórmica evaporada.
Las técnicas de reconocimiento son basadas en la
capacidad que tienen los alcaloides en estado de sal
(extractos ácidos) de combinarse con el yodo y metales
pesados (Arango, 2008).
En forma de base, son solubles en solventes orgánicos
no polares como benceno, éter etílico, cloroformo,
diclorometano, acetato de etilo(Pendell, 2002).
En forma de sales, son solubles en solventes polares
agua, soluciones ácidas e hidroalcohólicas(Pendell,
2002).
El reactivo de Dragendorff es una mezcla de Yoduro de
potasio y de nitrato de bismuto, se detecta el alcaloide
al producirse una coloración naranja-rojiza (Marcano,
2002). No obtuvimos un precipitado de éstas
características en los 3 extractos, lo que indica ser
negativo para morfina y papaverina (entre otros) en el
paciente (Wagner, 2009).
En la reacción de Mayer precipitan los alcaloides (los
clorhidratos) en forma de sales en medio básico. El
yoduro de potasio y el bicloruro de mercurio junto con
el alcaloide forman un precipitado blanco que es
soluble en ácido acético y etanol (Marcano, 2002).
Para los tres extractos el resultado fue negativo; la
prueba de Mayer se realiza para identificar morfina,
cocaína, heroína, entre otros (Burgot, 2012).
De una muestra de orina se realizaron extracciones
con diferentes solventes y reactivos para obtener los
alcaloides de manera libre y posteriormente poder
identificarlos.
En primer lugar se realizó una extracción ácida. Con
ésta se eliminan las proteínas del medio, los alcaloides
quedan solubles en la fase etérea. La segunda
extracción es de carácter básico.
Puesto que los alcaloides son compuestos de carácter
básico, su solubilidad en los diferentes solventes varía
en función del pH, es decir se encuentre en estado
base o sal. Las bases se encuentran solubilizadas en
éter etílico y cloroformo(Arango, 2008).
La extracción se basa en el carácter básico de los
alcaloides y en el hecho de su existencia como sales
de ácidos orgánicos o como recombinaciones solubles
en otras sustancias (Arango, 2008).
Por último se realizó una purificación de la fase
orgánica con la finalidad de eliminar todas las
partículas que pudieran interferir con los resultados en
las pruebas de precipitación, se llevó a cabo la
El ión triyoduro presente en el reactivo de Bouchardart
reacciona con los alcaloides formando un precipitado
color rojo-naranja en medio ácido. Nuevamente
obtuvimos resultados negativos al no presenciar la
formación de éste precipitado podemos asegurar que el
paciente no consume morfina (Bell, 2004)
Finalmente se sometieron los extractos obtenidos a la
prueba de Mandelin para detectar anfetaminas (entre
otras sustancias como la cocaína, heroína, codeína,
quinina, etcétera), es una reacción óxido-reducción que
se da en medio ácido con vanadato de amonio
(vanadio), el color que se revele al agregar el ácido es
para diferenciar los alcaloides (Bell, 2004).
La coloración que resultó fue amarillo canario, siendo
esta tonalidad característica de la droga 2C-B
(DanceSafe).
La 2C-B (4-bromo-2,5-dimetoxifenilanfetamina) es un
análogo estructural del DOB (presente en anfetaminas
y mescalina) conocido como “after Turner” “toonies” y
“nexus”. Causa un efecto de relajación del pensamiento
en dosis bajas, si es en altas se presenta los cuadros
de alucinaciones y estados de agitación(Fernández,

5. 2009). Esta droga se une con los receptores de
serotonina lo cual explicaría las alucinaciones (Rozas,
2009).
Como todas las pruebas son presuntivas los resultados
del color no es suficiente para identificar una droga por
lo cual se llegan a utilizar otro tipo de técnicas
instrumentales (Bell, 2004).
CONCLUSIONES
Se logró identificar el alcaloide 2C-B en una muestra de
orina mediante la reacción presuntivas de precipitación
Mandelin. Por otro lado, en las demás pruebas no se
obtuvieron resultados positivos al no encontrarse en el
tipo de sustancias que detectan.
Este tipo de análisis son aplicados con el fin de obtener
resultados rápidos y relativamente confiables en cuanto
a la consumo de alcaloides de diversa índole.
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