Practica med 333 mayo agosto 2017 [recuperado]

• LABORATORIO
• MICROBIOLOGIA MEDICA

• PRACTICA NUMERO 1
1. REGLAS GENERALES DEL LABORATORIO
Organización De La Practica, Características
Del Laboratorio.
2. Trabajo Aséptico uso de desinfectantes :
cloro, alcohol , germicidas (yodo), etc.

REGLAS DE BIOSEGURIDAD
INDISPENSABLES• Asistencia Obligatoria
• Uso De Bata, Guantes, Bosal
• Evitar Salpicadura De Las Muestras Y De Los Cultivos Que
Manipulamos.
• Desinfectar La Meseta De Trabajo Antes Y Después De La
Manipulación
• Depositar Todos Los Materiales Descartables En Soluciones
Germicidas, O Esterilizarlos En El Autoclave
• No Se Debe Ingerir Alimentos Dentro Del Laboratorio
• No Se Deben Depositar Objetos Personales En La Mesetas De
Trabajo
• No Se Debe Pipetear Con La Boca
• Durante El Trabajo Evite Tocarse Con Las Manos Contaminadas.

PRESENTACION DE EQUIPOS Y
MATERIALES
• ASAS Y AGUJAS BACTERIOLOGICAS:
• Están formados por un mango (mango de Kolle) y
un hilo preferiblemente de platino u otro material
no toxico para las bacterias, deben tener la
propiedad de ser resistente al calor, no oxidarse,
encandecer y enfriar rápidamente. Cuando el hilo
termina en un aro se llama asa, cuando esta recto
se denomina aguja. Son usadas para la pesca y
siembra del material biológico

Placa de petri
• Son contenedores de vidrios o material
desechables de diferentes tamaños, consta de
un fondo y una tapa dispuesta de forma tal
que el fondo descansa invertido dentro de la
tapa. En ellas se colocan medios de cultivos
solidos. Son usadas para desarrollar cultivos
en amplias superficies para facilitar el
aislamiento de colonias.

Tubos de ensayo
• Son recipientes de cristal o material
desechables de diferentes tamaños. Se usan
para colocar medio de cultivo semi-sólidos o
liquidos.

Porta objetos y cubreobjetos
• Son laminas de vidrios de diferentes
dimensiones rectangulares o cuadradas
utilizadas regularmente para la observación de
las bacterias al microscopio, tanto en fresco
como coloreadas.

Medios de cultivos
• Son mezclas de nutrientes, factores de
crecimientos y otros componentes que crean
las condiciones nesesarias para el desarrollo
de los microorganismos.

cepas
• Cultivo puro de una especie bacteriana.
Utilizadas para cultivos, coloraciones y
pruebas bioquímicas.
• También se le conoce con el nombre de
colonia.

colorantes
• Sustancia que puede transmitir su color a
otras sustancia. Se utilizan en las practicas
para realizar diferentes técnicas de coloracion.

microscopio
• Es un instrumento que nos `permiten visualizar
los microorganismos. Existen diferentes tipos de
acuerdo al procedimiento empleado, en las
practicas de bacteriología el mas empleado es
el óptico con objetivo de inmersión. Es
importante señalar que para enfocar el objetivo
de inmersión se utiliza aceite de cedro.

campanas de flujo laminar
• También llamadas cabinas de bioseguridad, campanas
microbiológicas.
• Son equipos que han sido diseñados para mantener
una zona de trabajo libre de partículas o de probables
contaminantes que puedan afectar la salud del
trabajador o del medio ambiente mediante la
combinación de elementos electromecánicos,
eléctricos, y procesos físicos. Dependiendo de su
diseño y clasificación las cabinas de seguridad biológica
( CSB) son adecuadas para proteger al trabajador,
medio ambiente,y a los productos (muestras).

Campana de flujo laminar o cabina de
bioseguridad

Mechero de Bunsen
• Instrumento constituido por un tubo vertical
que va enroscado a un pie metálico con
ingreso para el flujo de combustible ( gas
propano). Permite mantener esterilidad en el
área inmediata de trabajo. Es usado para
esterilizar asas y agujas ( al rojo vivo), bocas
de tubos de ensayo y pipetas ( flameado
suavemente ).

Incubadora
• Equipo constituido por una caja metálica de
dimensiones variables de acuerdo con los
modelos, conteniendo una capa aislante de
calor. Esta destinada a proporcionarle a los
microorganismos la temperatura optima y
estable para su desarrollo. En microbiología
clínica se controla entre 35 °C– 37 °C .

autoclave
• El autoclave es un instrumento habitual en los
laboratorios de Microbiología. Es un sistema
cerrado donde se forma vapor de agua que se
somete a una presión elevada, una atmósfera, lo
que hace que el agua alcance una temperatura de
121ºC causando la desnaturalización de enzimas
lo que conlleva a la muerte de los
microorganismos y la destrucción de las esporas.
Habitualmente, se esteriliza a 121ºC durante 20
minutos

Horno
• Los hornos de aire caliente, también
llamados hornos de calor seco, son
dispositivos eléctricos utilizados
para esterilización que forman parte
del equipamiento de laboratorio. El horno
utiliza calor seco para esterilizar los objetos
que se introducen en él. En general, pueden
funcionar con temperaturas comprendidas
entre 50 y 300 °C (de 122 a 572 °F).

• Los virus son organismos que solo pueden
sembrarse en medios animados porque solo
pueden vivir en células vivas al igual que las
bacterias Rikessias y chlamydias; por tanto su
cultivo es totalmente diferente al de las demás
bacteria y los hongos, pues estos pueden
cultivarse en medios inanimados. Otra
diferencia es que los virus requieren pruebas
mas especificas como las de inmunología.
Diferencia entre la manipulación de
bacterias y hongos y el estudio de los virus.

Datos que debe tener el microbiólogo
al momento de procesar la muestra
• No se tomara muestra si el Pcte ha tomado
medicamentos en las primeras 72 horas previas a la
toma de muestra
• Identificación de la muestra:
• Nombre completo del paciente
• Edad
• Sexo
• Lugar de la toma de muestra
• Fecha y hora de muestra
• Dirección y teléfono
• Nombre del medico dirección y teléfonos

Marchas o Rutas en bacteriología
• Son los pasos que se realizan a partir del momento en que se recibe
el espécimen (muestras ) en el laboratorio los cuales son:
• Toma de muestra (transporte)
• Siembra en medio de cultivo, incubación ( 18-24 h.)
• Clasificación del cultivo microscopia y microscopia. Utilización de
pruebas fisiológicas, bioquímicas o serológicas.
• Interpretación del resultado. Completar reporte con antibiograma

Principales patógenos bacterianos
• Cocos Gram positivos
Staphylococcus Streptococcus Enterococos

• Cocos gran negativos mas comunes:
neisserias gonorrhoeae neisseria meningitidis

• Los Bacilos Anaeróbicos Esporulados
Bacillus Clostridium
• Bacilos Aeróbicos no esporulados:
Corinebacteriun Listerias Actinomyces nocardias

• Bacilos del tracto gastrointestinal fuera del tracto:
Klebsiella Enterobacter Serratia
Pseudomona Proteus Bacteroides.

• Bacilos del tracto respiratorio:
Haemophillus Legionellas Bordetellas
• Bacilos gram negativos de fuentes animales:
Brucellas Francisellas Pasteurella Versinia

• Parasitos intracelulares no obligados
• Mycobacterium Mycoplasma Treponema Leptospiras
• Parasitos intracelulares obligados.
Chlamydia Ricketssia.

MICROSCOPIA DE HONGOS
levaduras, hifas

División Zygomycota: Zigomicetos

División Basidiomycota:
bacidiomiceto (lesion por criptococos neoforman
y por roya)

División Deuteromycota:
Deuteromicetos u Hongos Imperfectos

Practica # 2
Materiales necesarios Para el
procesamiento de las muestras
• PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS.
ESTERILIZACION EN AUTOCLAVE

Medios de cultivos y su preparación.
Generalidades:
• Uno de los sistemas mas importantes para la
identificación de microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales
preparadas en el laboratorio.
• Los medios de cultivo son formulaciones que
contienen proporciones adecuadas de nutrientes, asi
como de otros aditivos que cumplen otras funciones.
• El material alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el medio de cultivo y el
crecimiento de los microorganismos es el cultivo.

• Cultivar una bacteria significa colocarla en un
medio que posea los nutrientes y sustancias
necesarias que le permitan cumplir con sus
funciones de metabolismo y reproducción. Esto
unido a otras condiciones como son :
• PH adecuado
• Una temperatura optima dependiendo del tipo
de microorganismo en estudio.

clasificacion
• Los medios de cultivos se clasifican en dos grandes
grupos:
• Medios de cultivos vivos o animados
estos estan formados por celulas vivas, huevos
embrionados para el desarrollo de microorganismos
muy exigentes como son los Virus, las Chlamidias y las
Rickettsias.
• Medios de cultivos muertos o inanimados esto estan
formados por mezclas de sustancias nutritivas para el
desarrollo de microbios menos exigentes como son la
mayoria de las bacterias y los hongos, son los mas
usados en microbiologia.

composicion de los medios de cultivo
• Los medios de cultivo estan constituidos por:
• Bases nutritivas:
• De compuestos organicos,
• como las peptonas, hidrolizados acidos, extractos de carne y azucares entre
otros.
• De compuestos inorganicos como las sales inorganicas.
• Agentes solidificantes:
• denominado Agar.
• Indicadores De ph:
• Como azul de bromotimol (ej. Agar Simmons citrate agar).
• Rojo neutro (ej. Agar maconkey)
• Rojo fenol (ej. Agar base urea).
• Colorantes biologicos:
• Como el Azul de metileno verde brillante y cristal violeta entre otros.
• Inhibidores de crecimiento:
• Como los antibioticos y las sales biliares.

• Clasificacion segun su estado fisico o consistencia
• Liquidos: caldo simple
• Semi-solido:agar semisolido.
• Solido:agar base o nutritivo.
• De acuerdo a su composicion quimica se clasifican en:
• Sinteticos o artificiales:
• son los que se obtienen en el laboratorio y se conoce su
composicion quimica exacta.
• No sinteticos o naturales:
• son los que su composicion quimica no es conocida o se
conoce de forma parcial.

tipos de medios de cultivos de acuerdo a su finalidad o
uso
• Medios para fines generales o nutritivos
• mantienen el crecimiento de muchos microorganismos
que no son exigentes. ejemplo: Los medios como el
caldo simple y el agar de soja triptonado .
• medios enriquecidos.
• Son medios nutritivos a los cuales se le incorporan
nutrientes por ejemplos La sangre, el suero, huevos,
glicerol liquido de ascitis, extracto de levadura y otros
nutrientes para favorecer el crecimiento de
determinados microorganismos

• Medios selectivos ;
• Incluyen en su formulación ingredientes que Impiden
el desarrollo de microorganismos indeseables y
contienen otras sustancias que promueven el
crecimiento de microorganismos particulares.
• Las sales biliares o colorantes como la Fucsina y el
cristal violeta favorecen el crecimiento de bacterias
Gram negativas, al inhibir el crecimiento de las Gram
positivas sin afectar las primeras.
• Otros medios son el agar macconkey, medios de
telurito, medio de sabureaud entre otros.

• Medios Diferenciales :
• son medios que posibilitan la diferenciación entre microorganismos, estos
contienen indicadores de pH, colorantes biológicos, que permiten cumplir
esa función, según sus características biológicas.
• El agar sangre es tanto un medio diferencial como enriquecido, sirve para
distinguir entre bacterias hemolíticas y no hemolíticas.
• El agar Maeconkey es tanto diferencial como selectivo, con el las colonias
fermentadoras de lactosa aparecen de color rojo neutro por la lactosa que
tiene . También tenemos el agar azul de metileno y el agar fucsina
• Medios especiales:
• Estos crean un medio favorable especifico para determinados
microorganismos. Por ejemplo el medio Nickerson y el Lowenstein.
• os medios de cultivo se adquieren en el mercado deshidratados y traen
especificaciones de la cantidad que hay que pesar para un litro de agua.
• Todas las cristalerías que se usa debe estar limpia y libre de detergente.

• Clasificacion del cultivo segun tipo de siembra
• Cultivos primarios:
• Estos resultan de la siembra del material bacteriologico
procedente de sus fuentes naturales.
• Cultivos secundarios o sub-cultivos:
• Estos se obtienen despues de haber obtenido un cultivo
primario y resembrandolo nuevamente.
• Frotis o extension:
• Consiste en dispersar el material a observar al
microscopio en una lamina portaobjeto, con la finalidad
de conocer las caracteristicas microscopicas de un
microorganismos.
• Este paso es previo a la coloracion.
• Los medios de cutivos se adquieren en el Mercado
deshidratados y traen especificaciones de la cantidad
que hay que pesar para un litro de agua.
• Toda la cristaleria que se usa debe ser limpia y libre de
detergente.

Clasificación del medio de cultivo de
acuerdo al pH
• El Ph tambien influye para el crecimiento de la mayoría de las
bacterias y este oscila entre 6.5 a 7.5 aunque algunas bacterias
necesitan de un PH alcalino ( 8.5 ) como el Vibrio Cholerae.
• acidofilos.
• Para Los microbios que crecen en aguas ácidas.
• Neutrofilos
• para aquellos que prefieren un pH neutro ( la gran mayoría ).
• alcalinofilos
• Para Algunos que crecen en aguas alcalinas como los que se
encuentran en lagos. .

Clasificación del medio de cultivo de acuerdo a la temperatura
• Psicrofilos:
• Para las bacterias capaces de desarrollarse a 0 Centigrado o
menos aunque crecen mejor a temperaturas superiores d 15
grados o 20 grados.
• Mesofilas:
• Para las bacterias que crecen en limites de temperaturas que
estan entre 25 y 40 grados con una optima de 35 a 37 grados.
• Termofilas:
• Para las bacterias Que crecen mejor entre 45 y 60 grados,
algunas lo hacen a temperaturas superiores de 90 grados.

• Clasificación del medio de cultivo de acuerdo a los
requerimientos de sal.
• Halófilas.
• Para las célula Procariota que crece en altos
ambientes de sal.
• Halófila facultativa
• Para las célula que crece en ambientes típicos, pero
también puede adaptarse y sobrevivir en ambientes de
sal más altos.
• Halófila extrema
• Para las célula que tiene la proteína y las
modificaciones de la membrana que les permiten para
vivir en altos ambientes de sal como lagos de sal y no
son capaces de sobrevivir en ambientes de sal bajos.

Efecto del oxigeno en el crecimiento bacteriano
• Medio para Aerobicos obligados:
• Para las célula que Sólo puede crecer si el oxígeno está presente.
• Medios para Anaerobicos obligados:
• Para las célula que No puede sobrevivir en la presencia de oxígeno.
• Medios para Anaerobicos aerotolerantes:
• Para las célula que no mueren fácilmente al ser expuestas al
oxigeno a un siendo anaerobios.
• Medios para Anaerobios facultativos:
• Para las célula que Puede usar el oxígeno en su metabolismo, pero
puede sobrevivir si el oxígeno es ausente.
• Medios para Microaerofilos:
• Para las célula que Crece en concentraciones bajas de oxígeno.

• Importante
• PASOS A SEGUIR EN LA PREPARACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS:
• 1ro: se pesa la cantidad del medio deshidratado necesario para el
volumen de agua a preparar.
• 2do. Se mide en un cilindro graduado la cantidad de agua destilada.
• 3ro. Se vierte el agua en el recipiente de preparación. Se añade el polvo
deshidratado y se mezcla hasta disolución completa. Los medios que
contienen agar necesitan ser calentados hasta ebullición para lograr su
disolución.
• 4to. Los medios se distribuyen en los frascos de cultivo antes de
esterilizarlos en autoclave.
• Los medios líquidos y semisólidos se distribuyen en tubos y quedan en
posición vertical
• Los medios solidos que se distribuyen en tubos y después de esterilizados,
aun calientes se colocan sobre un plano inclinado para que al enfriarse
quede en lo denominado punta de flauta (observándose 2 regiones, la
superficie y la profundidad). El medio que se destina a placas se esteriliza
primero y aun caliente se vierte sobre placas estériles.
• 5to. Los medios preparados deben ser incubados por 2 horas antes de
utilizarlos para controlar su esterilidad.

Esterilización en autoclave
• Este método se basa en aplicar sobre el material a esterilizar vapor de agua
sobrecalentado por estar sometido a sobrepresión. La temperatura que
alcanza el vapor con sobrepresión de 1 atm equivale a 121 gados centígrados.
• El tiempo de esterilización depende del volumen del material a esterilizar.
• Los medios de cultivo se esterilizan siguiendo las recomendaciones del
fabricante.
• PASOS A SEGUIR PARA ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE:
• 1ro. Revisar el nivel del agua del equipo.
• 2do. Introducir el material a esterilizar en la cámara de esterilización. Los
materiales deben quedar espaciados para que el vapor pueda tocar los
diferentes puntos de esa área.
• 3ro. Se cierra la tapa y se comienza el calentamiento. La válvula de seguridad
debe quedar abierta.
• 4to. Cuando comienza a salir a través de la válvula el vapor, se cierra y se
espera a que la aguja del manómetro marque la temperatura y presión
requeridos.
• 5to. Se mantienen esas condiciones de esterilización por el tiempo necesario.
Al final del periodo se elimina el calentamiento.
• 6to. Se espera a que el manómetro vuelva a cero.

MEDIOS DE CULTIVO MÁS UTILIZADOS
• Caldo simple o nutritivo:
•
Este es una mezcla
formada de extracto de
carne, peptona y agua.
• Agar nutritivo o base:
•
Es una mezcla igual al
caldo pero con agar.

Agar TSI (agar triple sugar iron):
Contiene Peptona, Extracto de
levadura, Extracto de carne,
proteosa de peptona, Glucosa,
Lactosa, Sacarosa, Sulfato de hierro,
Cloruro sódico, Tiosulfato de sodio,
Rojo fenol, Agar.
Es el mas usado para determinar el
ph de las bacterias, si fermentan o
no la glucosa y se producen gas o
no.
Caldo lactosado (Bilis
verde brillante):
Este se utiliza para
observar las bacterias que
producen gas como los
coliformes

Agar sangre:
Es una mezcla de agar nutritivo y
sangre desfibrinada. Se produciran
dos tipos de hemolisis (alfa) y (beta).
En la alfa hemolisis alrededor de la
colonia aparece un color verdoso, que
es debido a la parcial ruptura de
hematies.
En la beta hemolisis alrededor de la
colonia aparecera una zona traslucida
bien definida, debido a una
destruccion completa de los hematies.
Agar chocolate:
Se prepara como el agar sangre, pero
al calentarse mucho la sangre toma un
color achocolatado , de esta forma se
liberan algunos nutrientes que no se
encuentran en el agar sangre.

• Agar Mac Conkey:
• Contiene azucar lactosa y el indicador es
rojo neutro. Si toma un color rosado
significa acidez ( la bacteria fermenta
lactosa), si no colorea entonces la
bacteria no fermenta la lactosa.
• Manitol salado:
• este se usa para diferenciar estafilococos
patogenos (fermentadores) de los no
patogenos ( no fermentadores).

• Agar Schaedler:
– Es un medio con sangre y
vitamina K muy adaptado
para el cultivo de
anaerobios.
• Agar Gardnerella:
– Agar con sangre humana
más una mezcla de
antibióticos que permiten
la observación de colonias
betahemolíticas
características de
Gardnerella vaginalis

Löwenstein-Jensen:
Este medio se utiliza para el
cultivo de Mycobacterium
tuberculosis. Y Leprae
Contiene verde malaquita para
inhibir parcialmente el
crecimiento de otras bacterias.
El huevo se utiliza como
sustancia de enriquecimiento
Agar BCYE (Buffer Charcoal
Yeast Extract):
Se utiliza para el aislamiento
de bacterias del género
Legionella y es carbon con
extracto de levadura.

Campylosel:
Se utiliza para el aislamiento
de Campylobacter
intestinales creciendo a 42º
C en microaerofilia.contiene
antibioticos con agar sangre.
Agar Cetrimida. Agar King:
Permiten el crecimiento de
Pseudomonas, inhibiendo
Gram positivos y la mayoría
de enterobacterias. El
segundo pone además de
manifiesto la pigmentación
fluorescente de
Pseudomonas bajo luz UV.

• Agar Levine ó EMB
(Eosina azul de
metileno):Se utiliza para
aislamiento de
enterobacterias, pues
impide el crecimiento de
Gram positivos y
diferencia muy bien a E.
coli, cuyas colonias
adquieren un color
negruzco con un brillo
metálico característico.

Caldo selenito-F: Se utiliza
exclusivamente para
enriquecimiento de
Salmonellas.
Thayer-Martin: utilizado para el
aislamiento del gonococo y que
no es otra cosa que un agar
chocolate enriquecido al cual se
ha añadido una mezcla de tres
antibióticos específicos que
impedirán el crecimiento del
resto de la flora acompañante

Medio de Loeffler:
Es un medio específico para
el cultivo de
Corynebacterium difteriae.
Agar Mueller-Hinton:
Es el medio universalmente
aceptado para la realización
de los antibiogramas o
pruebas de sensibilidad a los
antimicrobianos.

AGAR SS
• El agar SS es un medio selectivo empleado
para el aislamiento de Salmonella y Shigella
a partir demuestras fecales. El medio
contiene sales biliares y verde brillante
para impedir el crecimiento de coliformes y
gérmenes Gram positivos.
• La presencia de lactosa y rojo de metilo nos
permiten diferenciar las colonias que
fermentan la lactosa (rosas o rojas) de las
que no lo hacen (incoloras).
• El agar SS es doblemente diferencial,
porque además de indicarnos el
comportamiento de los gérmenes con
relación a la lactosa, nos muestra los
gérmenes que son capaces de producir
ácido sulfhídrico, que se manifiesta como
un precipitado de color negro en el centro
de la colonia.
• El agar SS es un medio muy inhibidor que a
veces impide incluso el crecimiento de
ciertas especies

• Agar Chapman:
– Es un medio selectivo para el
aislamiento de estafilococos. Su
elevado contenido en cloruro
sódico permite la inhibición de la
mayoría de los otros gérmenes.
La presencia de manitol y rojo
fenol convierten a este medio en
diferencial: así se puede
identificar presuntivamente el
Staphylococcus aureus, ya que
este gérmen crece bien en
medios salados y fermenta el
manitol (colonias amarillas).
• Agar Baird-Parker:
– Permite el crecimiento de
estafilococos coagulasa
positivos, a la vez que los
diferencia del resto
– .

• Agar Hektoen :
– Es un medio más diferencial y menos
selectivo que el agar SS. Se utiliza para
facilitar el aislamiento de las enterobacterias.
– La presencia de tres azúcares (lactosa,
sacarosa y salicilina ) permiten ampliar el
poder diferencial de este medio.
– Las cualidades del agar Hektoen se deben a
su riqueza en peptonas y azúcares, que
neutralizan el efecto inhibidor de las sales
biliares respecto a ciertos gérmenes de
cultivo delicado (Shigella en particular).
• C.P.S. ID3. :
– Medio cromogénico desarrollado por
Biomerieux, que permite la identificación de
E. coli, P. mirabilis y E. faecalis, con la simple
visualización del cambio de color de la
colonia sobre el medio (rojo burdeos, azul o
marrón).
– La identificación solo requiere la adición de
un reactivo para confirmar o descartar la
especie sospechada..

• Agar C.L.E.D.:
• El medio C.L.E.D. (Cistina, Lactosa Electrólito
– Está recomendado para el recuento e
identificación presuntiva de los
microorganismos de las vías urinarias.
– Su bajo contenido en electrolitos evita la
invasión de los cultivos por Proteus.
– La presencia de lactosa en su composición le
confiere el carácter de medio diferencial,
aunque la interpretación sea diferente al
anterior medio por la incorporación de otro
indicador: el azul de bromotimol. Las colonias
lactosa positivas aparecerán de color amarillo y
las lactosa negativas lo harán con un color
verdoso, blanco o azulado.
• El agar Sabouraud
– Es un tipo de agar que contiene glucosa,
peptona, cloranfenicol.
– Se usa para cultivar dermatofitos y otros tipos
de hongos.

Necesidades nutritivas y condiciones físicos
químicas:
• fototrofas.
• Todo organismo vivo necesita una fuente de energía,
algunas formas de vida, como las plantas verdes,
pueden consumir la energía del sol.
• quimiotrofos. Otros como los animales, se valen de
la oxidación de compuestos químicos para obtener
energía.
• Entre las bacterias se utilizan los dos tipos de
nutrición fototrofos y quimiotrofos.

• autótrofos.
• Son las bacterias que necesitan del dióxido de
carbono como su fuente de carbono verde.
• Todo organismo vivo necesita obtener carbono de
alguna manera.
• Las plantas mediante la fotosíntesis utilizan dióxido
de carbono ( CO2 ) y lo transforman en
carbohidratos.

• Heterótrofos.
• son bacterias incapaces de absorber el dióxido de
carbono como su fuente de carbono y tienen que
valerse de los autótrofos y su producción de
carbohidratos y otros compuestos orgánicos para
tomarlo como alimento
• Todo organismo vivo además necesita obtener
nitrógeno de alguna manera.
• Las plantas lo asimilan en forma de sales inorgánicas
como el nitrato de potasio, mientras que los animales
necesitan compuestos de nitrógeno orgánico, las
proteínas y productos de su degradación como
péptido y aminoácidos.

Practica # 3
toma de muestra y siembra primaria
Objetivo:
Conocer las diferentes muestras que se
toman en el laboratorio clínico, así
como los procedimientos para ello

SIEMBRAS :
• antes de hablar de siembra debemos recordar dos
términos importantes que son :
• Agar :
• es un medio gelatinoso utilizado para la siembra de
microorganismos. no esta constituido por nutrientes
sino que hay que agregarlos para convertirse en un
medio de cultivo.
• placa de Petri :
• es una placa utilizada para
colocar el agar y es donde
sembramos los
microorganismos.

Toma de muestra de procedencia humana
• Uno de los propósitos mas importantes del laboratorio de
microbiología es establecer el diagnostico de las infecciones,
es decir identificar el microrganismo que esta causando la
infección.
• Esto se consigue mediante:
1. Estudios directos, o búsqueda del microorganismo en la
muestra biológica o sus componentes ( antígenos, productos
del metabolismo etc.).
• A través de :
• Frotis en fresco
• Tinciones
• Cultivos
• Uso de técnicas químicas y bioquímicas entre otras.
2. Estudios indirectos :
basados en la respuesta inmune del huésped frente al antígeno.

Medidas que se deben tener en cuenta
para identificar un agente infeccioso
1. seleccionar el lugar anatómico de la toma de
muestra.
2. Evitar la contaminación con la flora residente.
3. Obtener la muestra, de ser posible, antes de la
administración de antibióticos.
4. Evitar contacto con antisépticos y
desinfectantes.
5. Recoger el volumen adecuado en cada caso.
6. Utilizar recipientes estériles apropiados.

Medios comúnmente utilizados para
transportar muestras
• AMIES :
• es un medio de transporte utilizado para todo
tipo de muestra tomada con hisopos

Cary Blair:
es un medio de transporte para coprocultivos

Medidas para garantizar la viabilidad
de la muestra
1. En el caso que se utilice un medio de transporte deben
mantenerse refrigerado el material para evitar
desecación.
2. Mantenerse a una temperatura ambiente al momento
utilizarlos.
3. El material tomado no deberá pasar de 72 horas después
de haberse tomado.
4. En las muestras de liquido tomados en frascos con medio
de transporte (frasco de hemocultivo) y que se soliciten
tinción de Gram, se deberá enviar una muestra adicional
en frascos estéril sin medio de transporte, ejemplo liquido
ascíticos, liquido pleural entre otros.

• Muestra:
• En microbiología una muestra es aquel fluido biológico que se recoge asépticamente
con el objetivo de sembrarlo sobre un medio de cultivo.
• Clasificación de fluidos:
• Se clasifican en líquidos y emisiones.
• Líquidos:
• Son fluidos que están presentes siempre en el organismo. Son estériles en
condiciones normales, no presentan flora normal. Y son: sangre, orina, semen, LCR.
• Las emisiones
• están presentes en algunos casos, pueden desaparecer y variar en cantidad, y
composición en el organismo:
1. Expectoraciones:
Son productos del tracto respiratorio (pulmón).
1. Defecación.
2. Productos de desechos del intestino (heces fecales)
3. Micción Urinaria.
4. Productos de las vías urinarias (orina)
5. Secreciones y Excreciones (todos los demás fluidos del cuerpo). Ya sean de boca
faringe, vagina, óptico, nasal, y otico.

Metodos de siembra
• Por siembra microbiologica se entiende el acto de
colocar las bacterias en los medios de cultivos con el
objeto de que crezcan y se multipliquen.
• El resultado logico de una siembra, si las condiciones
son apropiadas, es el desarrollo de una colonia o
cultivo microbiano.
• Esta se realizan con asas o agujas de platino, tambien
se utilizan isopos y pipetas.

• Las siembras Esta pueden ser:
• primarias o secundaria.
• Despues de la incubacion de la muestra primaria puede
ocurrir que se observe o no crecimiento. En caso
positivo puede obtenerse:
• un cultivo puro;
• Que sucede si solo crece un solo tipo de microorganismo
• Cultivo Mixto:
• Sucede si crece mas de un tipo de microorganismo.
• Cultivo Contaminado:
• Sucede si hay crecimiento de microorganismos que no
pertenecen al lugar de donde se tomo la muestra.
• Cultivos primarios:
• Estos resultan de la siembra del material bacteriologico
procedente de sus fuentes naturales.
• Cultivos secundarios o sub-cultivos:
• Estos se obtienen despues de haber obtenido un cultivo
primario y resembrandolo nuevamente.

colonias
• Una colonia
• es una agrupación de microorganismos de una
misma especie son macroscopicamente visibles en
un medio sólido, semi-sólido y liquido cada colonia
representa un cultivo puro.
• Para el estudio macroscopico de una colonia
debemos tener en cuenta la siguientes
características:
• Olor, tamaño, aspecto, consistencia, color, bordes,
forma, altura, tipo de cultivo, cantidad de
crecimiento del cultivo.

Tipos de siembras :
• Siembra por extensión o embadurnamiento:
es una forma directa y fácil en ella se pasa un
volumen pequeño de muestra microbiana al
centro del agar y se extiende uniformemente
sobre la superficie con una varilla doblada de
vidrio estéril.

Siembra por extensión o
embadurnamiento:

Siembras por estrías:
aquí las colonias puras se pueden obtener
también si se pasa la mezcla microbiana a un
extremo de la placa con un asa de inoculación
o un hisopo y se extiende formando estrías
sobre la superficie siguiendo uno de los
posibles patrones recomendados.

Método de aislamiento por estria

• Siembra de profundidad o por picadura:
• Esta se emplea ampliamente con bacterias y
hongos.
• Se utiliza para demostrar la movilidad de las
bacterias.
• La mezcla se prepara en agar semi-solido.

Siembra de profundidad o por picadura:

Siembra por dilucion:
• Aquí el asa o aguja cargados con el material a
sembrar se introduce en el seno de los medios
de cultivo liquido y se agita moderadamente,
• El proposito es el de producir una dilucion
uniforme del material bacteriologico en el
medio liquido o caldo

• Siembra por agotamiento en la superficie de placa (
para aislar colonias):
• Mediante este metodo las bacterias procedentes de
un material puro o mixto, son dispersadas y
agotadas en cantidad en forma progresiva sobre la
superficies de un medio semi solido o liquido .
• Esto es asi para lograr que las bacterias se siembren
aisladas unas de otras y crezcan formando colonias
separadas que se puedan pescar facilmente para
realizar cultivos puros y otras pruebas adecuadas.

Siembra por dilucion en la superficie de placa y tubos( para
aislar colonias):

• Las bacterias algunas absorben el nitrógeno atmosférico, otras
lo obtienen de compuestos inorgánicos y otros lo toman de las
proteínas y de prácticamente cualquier compuesto orgánico
que los tenga.
• Los microorganismos además necesitan de diversos elementos
entre los que citaremos, el azufre, fósforos, vitaminas sodio
potasio calcio hierro zinc etc.
• Estos nutrientes se clasifican en ;
• Macro nutrientes (C, H, O, N, P, S, K, Mg)
• -Micro nutrientes o elementos traza (Co, Cu, Zn, Mo...)

Practica # 4
la resiembra :cultivos puros
OBJETIVOS:
1.Reconocer los cultivos puros
2.Conocer los tipos de resiembra que permiten la purificación
de los cultivos
3.Reconocer según las características macroscópica
4.Cultivos de diferentes representantes bacterianos

PRACTICA # 5
CRITERIOS MICROSCOPICOS PARA LA
IDENTIFICACION DE BACTERIAS
• OBJETIVOS:
• 1. EJERCITARSE EN A MANIPULACION DE LAS
TINCIONES DIFERENCIALES
• 2. DISTINGUIR DIFERENTES BACTERIAS SEGÚN
LA RESPUESTA A LAS TICIONES APLICADAS.

COLORACION Y METODOS EN BACTERIOLOGIA:
Aunque los microorganismos vivos se pueden examinar directamente con
un microscopio óptico, a menudo hay que fijarlos y teñirlos para aumentar
la visibilidad, acentuar las características morfológicas y conservarlos para
estudios futuros
• Frotis o extension:
• Consiste en dispersar el material a observar al microscopio en una lamina
portaobjeto, con la finalidad de conocer las caracteristicas microscopicas de
un microorganismos.
• Este paso es previo a la coloracion.
FIJACION :
• Es el proceso por el cual se conservan y fijan en su posición las estructuras
internas y externas de las células de los microorganismos Existen dos clases
:
• Fijación con calor en la que los bacteriólogos utilizan calor para fijar los
frotis bacterianos .
• Fijación química : en la que se utilizan compuestos químicos como el ácido
acético, cloruro mercúrico. el alcohol.

muestras clínicas Sin Tinción
• Muchas veces podemos ver los microorganismos en el
microscopio sin necesidad de teñirlos.
• No se utiliza ningún tipo de colorante.
• Es el montaje directo húmedo o examen en fresco: las
muestras se extienden directamente sobre la superficie de un
portaobjetos para su observación.
• El material que es demasiado espeso para permitir la
diferenciación de sus elementos puede diluirse con igual
volumen de solución salina fisiológica estéril.

muestras clínicas Sin Tinción
En la imagen: Candida sp en un examen en fresco.

• LA TINCION
• es un proceso nocivo que mata las bacterias,
por eso se observan muertas
• COLORANTES :
• Una solución colorante es una sustancia que
puede transmitir su color a otras sustancias;
tiene por finalidad teñir las células o partes de
la célula.
• . Los colorantes son sales y son en su mayoría
derivados de la anilina.

• colorantes básicos (cationicos): estos se unen a
las moléculas cargadas negativamente como los
ácidos nucleicos y las proteínas de las células, son
los mas usados en bacteriología. Por ejemplo azul
de metileno, fucsina básica, cristal violeta, o
violeta genciana (usado en la tincion de Gram) y
Violeta de Cresilo
• Colorantes ácidos (aniónicos) : debido a su carga
negativa se unen a estructuras celulares cargadas
positivamente. Por ejemplos ; eosina, rosa de
bengala y fucsina ácida.

Tipos de tinción :
• Tinción negativa: en esta no se tiñe el cuerpo de las bacterias
sino el medio.
• Tinción positivas : en esta se tiñe el cuerpo de las bacterias o
partes de ellas
• Agrupa dos métodos que son:
• métodos de coloración simple esta utiliza solamente un
colorante, los colorantes ionizables se pueden dividir en dos
clases generales, tomando como base la naturaleza de su
grupo cargado.

metodo de coloracion simple
imagen: Cryptococcus neoformans
china stain.

• Método de coloración compuesto aquí empleamos
mas de un colorante y/o reactivo.
• Método de tinción diferencial :
• este clasifica las bacterias en grupos diferentes a según
sus propiedades de tinción.
• Su representante es la tinción de Gram. desarrollada
por el medico Danés Cristian Gram, en 1884, se trata
de un metodo que divide las bacterias en Gram
negativas y Gram positivas, este metodo es positivo,
compuesto y diferencial .
• Un moldiente no es mas que una solución que se
utiliza para aumentar la interacción entre la célula y el
colorante de forma que aquella se tiñe mas
intensamente.

• Las bacterias Gram negativas
• son ricas en lípidos, por eso cuando se agrega durante el proceso
el alcohol acetona los lípidos se disgregan, y así el colorante
penetra a la célula bacteriana y esta se decolora.
• Las bacterias Gram positivas por el contrario son pobres en lípidos
por eso no se decoloran permaneciendo con el primer colorante que
se uso, estas bacterias son ricas en ácido teicoico. los protoplastos se
obtienen a partir de las bacterias
Gran Positivas.
• Las paredes de las bacterias Gram. Positivas tiene:capas gruesas y
homogéneas de Peptidoglucano y acido teitcoico
• Las paredes de las bacterias Gram. Negativas tienen capa mas fina
rodeados de una membrana externa compleja de
lipopolisacaridos

• Las bacterias Gram negativas son
ricas en lípidos, cuando se agrega
durante el proceso el alcohol
acetona los lípidos se disgregan, y
el colorante penetra a la célula
bacteriana y esta se decolora. Las
paredes de las bacterias Gram
Negativas tienen capa mas fina
rodeados de una membrana
externa compleja de
lipopolisacaridos.
• Las bacterias Gram positivas son
pobres en lípidos por eso no se
decoloran reteniendo el primer
colorante que se uso, estas
bacterias son ricas en ácido
teicoico. Las paredes de las
bacterias Gram Positivas tienen
capas gruesas y homogéneas de
peptidoglucanos y acido teicoico.

Cont... Gram –positive Bacterias
• Cells form Rods.
3.Bacilos
• Clostridium sp,

Gram –negative Bacterias Tinción GRAM
negative
• Cocos Gram-negatives
• Diplococus:
• Neiseria sp, .

Gram –negative Bacterias Tinción GRAM
negative
• Cocobacilos:
Haemophillus sp, [ H.
influenzae ]

Método de la tinción Acido Alcohol Resistente : o metodo de Ziehl-
Neelsen O metodo para BAAR.
• es otro metodo importante de tincion diferencial, unas pocas
especies particularmente los Mycobactrium y las nocardias no
se unen con los colorantes simples facilmente y hay que teñirlas
con un tratamiento mas fuerte, calentando una mezcla de
fucsina basica y fenol ( esto se llama metodo de Ziehl- Neelsen)
en ella las celulas Acido alcohol resistente no se decoloran con
la solucion, permaneciendo de color rojo, esto es por el alto
contenido de lipidos que tienen las paredes de la celula.

Mycobacterium xenopi Nocar
dia

TINCION DE ESTRUCTURAS ESPECIFICAS
• Este método se utiliza para poder observar algunas
partes de la célula de manera diferencial y clara por
ejemplo, observar los flagelos, el núcleo etc. para
observarlos se aumenta grosor cubriéndolos con
mordientes, como acido tanico y alumbre y
tiñéndolos con parasonilina ( método de Leifson )
para flajelos, o con verde malaquita para esporas, o
con azul de metileno (metodo de Novelli) para
capsulas,entre otros.

TINCION DE ESTRUCTURAS
ESPECIFICAS

Practica # 6
identificación de cocos Gram positivos
• Objetivos:
• 1. conocer las características que identifican
las especies que con mayor frecuencia
aparecen en la muestras.
• 2. ejercitarse en las técnicas de identificación.

BACTERIAS GRAM (+)
• GENERALIDADES:
• Las bacterias Gram – positivas deben su
nombre al bacteriólogo Danes Hans C. J.
Gram (1853-1938), que desarrollo el método
de teñir los microorganismos, usando una
tinta violeta para marcarlos y dividirlos.
• El microorganismo se caracteriza por tener
una pared bacteriana rígida y gruesa,
formada por Peptidoglucano.

ESTAFILOCOCOS
• CARACTERISTICAS:
• crecen aislados, en parejas, en tetradas o en masas
irregularmente agrupadas como racimos de uvas.
• Morfologicamente los Staphylococcus son cocos
grampositivos.
• Los estafilococos crecen fácilmente sobre casi todos los
medios bacteriológicos, su crecimiento es mejor en el
medio sal manitol y agar sangre,
• Es un coco anaerobio facultativo.
• Producen catalasa, lo que los diferencia de los
estreptococos.
• Tiene importancia médica principalmente el S. aureus, y
en humanos además de éste, el S. saprophiticus y el S.
epidermidis.

• Contiene varias características en sus factores de
virulencia. En su estructura se encuentran los ácidos
teicoico y lipoteicoico, y los peptidoglicanos.
• Produce una proteina A que se une a la porcion Fc
de la IgG este es un factor de virulencia
caracteristico.
• Los ácidos le sirven para adherirse a superficies
corporales junto con las especies de estafilococo que
tienen cápsula, y en conjunto los ácidos teicoicos y el
péptido glicano tienen la característica que activan el
sistema inmune del complemento y sirven además de
evasores de la fagocitosis.

Staphylococcus aureus
• Caracteristicas:
• Cocos gram positivos formando agrupaciones.
• Coagulasa positivo
• Catalasa positivo.
• La mayoria producen beta-lactamasa.
• Esta especie es DNAsa positiva, produce acido lactico,
maltosa y manitol, Necesita una fuente nitrogenda organica
ya que reduce los nitratos, hidroliza la urea y reduce el azul
de metileno.
• Es por lo general fosfatasa positivo, aunque no crece en agar
fosfato de amonio sino en agar sangre principalmente, donde
se observan colonias amarillas o doradas.
• La produccion del pigmento amarillo dorado es
probablemente la caracteristica mas variable que lo distingue
• en sus necesidades de oxigeno es facultativo.
• Su abitad es la nariz principalmente.

STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS
• CARACTERISTICAS:
• Igual que el S. Aureus. Pero es coagulasa negativo.
• la prueba de la coagulasa, en las que las bacterias
coagulan el plasma, se utiliza para distinguir
estafilococos aureus de estafilococos epidermidis
• Habitad y transmision:
• Forma parte de la flora de la piel y las membranas
mucosas humanas.

• Patogenia:
• Las cepas productoras de glicocalix pueden producir
infecciones en cateteres y sondas.
• Es un microorganismo poco virulento, que afecta
principalmente a inmunocomprometidos.
• No produce exotoxinas,
• es la principal causa de infecciones nosocomiales.

• Diagnostico de laboratorio:
• Se observan colonias blancas no hemoliticas en agar
sangre.
• Coagulasa negativo.
• Tratamiento:
• Es sensible a la vancomicina mas rifampicina. Produce
beta lactamasa que lo hace resistente a muchos
antibioticos.
• Prevencion:
• No existe vacuna, la prevencion es igual al aureus.

STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS
• Es coagulasa negativos.
• Causa comunmente infecciones del aparato
urinario en mujeres jovenes despues del
Escherichia Coli.

Necrosis toxica estafilococcica
( septicemia estafilococica)

Patologías del Staphylococcus aureus
• De origen no tóxico „Infecciones cutáneas:
• impétigo forúnculos „
Infección de heridas „

• De origen tóxico „
• Síndrome de la piel escaldada
„ Shock tóxico

Estreptococo
• Los estreptococos son un genero de bacterias Gram
positivas, esféricas pertenecientes al grupo de las
bacterias acidolacticas.
• Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde
cada division celular ocurre a lo largo de un eje. De
allí que su nombre, streptos, significa que se dobla o
retuerce con facilidad, como una cadena.
son oxidasa– y catalasa–negativos.
• Las infecciones estreptocócicas comprenden la
faringitis, la escarlatina, erisipelas, fiebre puerperal y
algunas neumonías.

• Las especies de estreptococus que producen
enfermedades son:
• Estreptococos del grupo A: Streptococcus pyogenes
producen amigdalitis e impetigo.
• Estreptococos del grupo B: Streptococcus agalactiae
producen meningitis en neonatos y trastornos del
embarazo en la mujer.
• Neumococo: Streptococcus pneumoniae es la principal
causa de neumonía adquirida en la comunidad.
• Streptococcus viridans es una causa importante de
endocarditis y de abscesos dentales.
• Streptococcus mutans causa importante de caries dental.
Pertenece al grupo de estreptococos viridans.

• Los fármacos de elección en el tratamiento de
estas infecciones son la penicilina y la
eritromicina.
• Los cultivos de los Estreptococo no patogénicos
lácticos se emplean en la fermentación de
productos lácteos como el queso y la
mantequilla.
• El patógeno humano más importante es el
Estreptococo Pneumoniae.

• El sistema de clasificación se basa en:
• el aspecto de las colonias,
• si producen hemólisis y
• por el pigmento que producen.
• Los patógenos más importantes en el grupo de los que
producen hemólisis son Estreptococo del grupo A como el
Estreptococo Agalactiae y Estreptococo del grupo B como
el Estreptococo Pyogenes.
• En cuanto al pigmento que producen tenemos al
Estreptococo Viridian el cual es de color verde.

STREPTOCOCO PYOGENES(GRUPO A)
• Enfermedades:
• Trastornos supurativos por ejemplo, impétigo
,faringitis y celulitis y trastornos no supurativos por
ejemplo,, fiebre reumática , carditis y glomérulo
nefritis aguda.
• Características:
• cocos gran positivos en cadenas. Beta hemolítico,
catalasa negativo.

• Habitad y transmisión:
• es la garganta y la piel humana, la transmisión es
por gotitas respiratorias.
• Patogenia:
• en infecciones supurativas, produce una
hialuronidasa (factor de diseminación,) que
media la propagación subcutánea observada en
la celulitis y en el impétigo.
• La toxina que produce es eritrogena y causa
eritema en la fiebre escarlatina, la proteína M
impide la fagocitosis.

• En infecciones no supurativas:
• la fiebre reumática es causada por reacción
cruzada inmunológica entre el antígeno
bacteriano y el tejido cardiaco humano, afecta
piel y articulaciones
• y en la glomérulo nefritis aguda es causada por
complejos inmunitarios unidos a los glomérulos.
• frotis teñido con Gram y cultivo. Se observan
colonias beta hemolítica en agar sangre. (Por
hemólisis debida a estreptolisina O y S).

• El grupo se determina por antisuero contra el
polisacárido C de la pared celular en la prueba de
precipitina.
• El análisis por anticuerpos en suero no se hace
para infecciones supurativas.
• En sospecha de fiebre reumática, se analiza el
suero del paciente por el titulo de anticuerpos
antiestreptolisina O (ASO) para determinar si hubo
exposición previa al S. pyogene

• Tratamiento:
• Penicilia G.y bencilpenicilinas.
• Prevencion
• En pacientes con fiebre Reumatica se emplea
penicilina benzatinica para prevenir faringitis,
carditis y glomerulo nefritis.

ESTREPTOCOCO AGALACTIAE
(GRUPO B)
• Enfermedades:
• Meningitis neonatal y sepsis
• Cocos gram positivos en cadenas, beta hemolítico
poco definida, catalasa negativo.
• El habitad es la vagina humana. La transmisión
ocurre durante el nacimiento

• Patogenia :
• no se han identificado toxinas ni factores de
virulencia.
• frotis teñido por Gram y cultivo, colonias beta
hemolíticas en agar sangre. Los microorganismos
hidrolizan hipurato y son positivos a la prueba de
CAMP. El grupo se determina por antisueros contra
el polisacarido de la pared celular en la prueba de
la precipitina.

• Tratamiento: penicilina G
• Prevencion:
• no hay vacunas, es posible que la ampicilina
antes del nacimiento sea util si la madre da
cultivo positivo.

ESTREPTOCOCO FAECALIS (ENTEROCOCOS
GRUPO D)
• Enfermedades:
• principalmente infecciones de vias urinarias
y biliares.
• cocos Gram positivos en cadenas,alfa
hemoliticos o no hemoliticos, catalasa
negativo

• el habitad es el colon humano, uretra y vias
genitales femeninas donde se coloniza. Es
posible su entrada al torrente sanguineo durante
manipulaciones gastrointestinales o en vias
genito urinarias. Puede infectar otros sitios por
ejemplo, Endocarditis.

• Patogenia;
• no se han identificado toxinas ni factores de
virulencia.
• Diagnostico de laboratorio;
• frotis teñidos con Gam y cultivos. Colonias alfa,
o no hemoliticas. Prolifera en Nacl al 6.5 % e
hidroliza la escalina en presencia de bilis al 40 %.
Las pruebas serologicas no son utiles.

• Tratamiento:
• penicilina mas un aminoglucocido como
Gentamicina tienen efecto sinergico.
• El microorganismo es resistente a estos agentes
cuando se administran por separados.
• La resistencia a los aminoglucocidos se debe a una
incompetencia para penetrar la membrana de la
bacteria. La penicilina debilita la pared,
permitiendo que el aminoglucocido entre y actúe.

• Prevencion:
• penicilina y gentamicina deberan
administrarse a personas con lesiones en
válvulas cardiacas antes de procedimientos
en vias intestinales o urinarias.
• No se dispone de vacunas

ESTREPTOCOCO GRUPO VIRIDIANS
Enfermedades:
• la más importante es la endocarditis.
• cocos Gram positivos en cadenas. Alfa
hemoliticos. Catalasa negativa.
• el habitad es la orofaringe humana
• los microorganismos entran al torrente
sanguineo durante procedimientos dentales.

• Patogenia:
• las bacterias después de procedimientos
dentales dispersan los microorganismos a
válvulas lesionadas. Los microorganismos se
protegen de las defensas del huésped dentro de
las vegetaciones. No se conocen toxinas. Los
dextranos facilitan su adherencia.
• frotis teñidos con Gram y cultivos.
• Colonias alfa hemoliticas en agar sangre.

• Al contrario de los neumococos la proliferación
no se inhibe con bilis ni con optoquinas,
Existen numerosas especies entre las que
citaremos el S. Sanguis y el S. Mutans. Las
pruebas serologicas no son utiles.
• Tratamiento:
• penicilina G con o sin aminoglucocidos.
• Prevencion:
• penicilina para pacientes con válvulas cardiacas
lesionadas o protesicas que se sometan a
procedimientos dentales.

(NEUMOCOCO)
• También llamado Estreptococo Pneumoniae.
• Enfermedades:
• La más frecuente son neumonia y meningitis en
adultos y otitis y sinusitis en niños.
• Cocos Gram positivos en *forma de Huso* en pares
(Diplococos). O en cadenas cortas
• son Alfa- hemoliticos Catalasa Negativos.

• Habitat y Transmision:
• El habitat son las vias aereas superiores humanas. La
transmision es por las gotitas respiratorias.
• Patogenia:
• Induce una respuesta inflamatoria. No se conocen
exotoxinas, la capsula polisacarida retarda la fagocitosis.
• El anticuerpo contra el polisacarido opsoniza al
microorganismo proporcionando inmunidad especifica.
• La infeccion respiratoria viral predispone a neumonia
neumococcica

• Frotis teñido por Gram y cultivo. Colonias alfa-
hemoliticas en agar sangre. La proliferacion se
inhibe con bilis y optoquinas produciendo una
reaccion denominada ¨quellung¨´ (inchazon de la
capsula con el antisuero especifico). Las pruebas
serologicas no son utiles.
• La prueba de aglutinacion del latex para antigeno
capsular en liquido cefaloraquideo puede ser util
en el diagnostico.

• Tratamiento:
• Penicilina. La resistencia es de grado bajo y se
debe a alteraciones de las proteinas para la
fijacion de la penicilina
• Prevencion:
• Se dispone de vacunas que contienen
polisacarido capsular de los 23 serotipos que
causan bacteremia.
• No existe un tratamiento profilactico.

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