Fagocitosis

1. FAGOCITOSIS
La fagocitosis es un tipo de endocitosis por el cual algunas células
(neutrófilos y macrófagos) rodean con su membrana citoplasmática a un
antígeno, célula apotótica, restos celulares, microorganismos y
sustancias de un tamaño generalmente mayor a 0.5nm y lo introducen al
interior celular. Esto se produce gracias a la emisión de pseudópodos
alrededor de la partícula o microorganismo hasta englobarla
completamente y formar alrededor de él una vesícula, llamada
fagosoma, la cual fusionan posteriormente con lisosomas para degradar
el antígeno fagocitado.

2. Células que intervienen en
el proceso de fagocitosis
▪ La fagocitosis se lleva acabo en células especializadas llamadas fagocitos, varias
células en el cuerpo humano ejercen funciones fagocitarias principalmente las
células blancas como:
Macrófagos
Monocitos
Eosinófilos
Basófilos
Neutrófilos

3. Etapas de la fagocitosis
▪ Quimiotaxis
▪ Adherencia
▪ Ingestión
▪ Digestión
▪ Excreción

4. Quimiotaxis
▪ Es la etapa de movilización y reclutamiento de leucocitos, por medio de la interacción
celular, a la zona o tejido lesionado. La mediacion de la activacion de leucocitos Estos
mediadores son pequeñas moléculas que consisten en lípidos (prostaglandinas,
leucotrienos y tromboxano), aminoácidos modificados (histamina, serotonina) y pequeñas
proteínas (citoquinas, factores de crecimiento, interleuquinas...) que representan
información específica destinada a las células capaces de utilizar esta información gracias a
la presencia de receptores específicos en su membrana plasmática. Los mediadores son de
origen plasmático (sintetizados por el hígado) o celular.

5. Opsonizaciòn
La opsonización por anticuerpos es el proceso por el que se marca a un patógeno para su
ingestión y destrucción por un fagocito. La opsonización implica la unión de una opsonina, en
especial, un anticuerpo a un receptor en la membrana celular del patógeno.Tras la unión de la
opsonina a la membrana, los fagocitos son atraídos hacia el patógeno. La porción Fab del
anticuerpo se une al antígeno, en tanto que la porción Fc del anticuerpo se une al receptor Fc
del fagocito, facilitando la fagocitosis. El complejo receptor-opsina también puede crear otros
productos como las proteínas del sistema del complemento C3b y C4b. Estos componentes se
depositan en la superficie celular del patógeno y contribuyen a su destrucción.

6. Diapédesis
▪ Los neutrófilos interaccionan con agentes quimiotácticos para migrar a sitios invadidos por
microorganismos, en un proceso denominado diapédesis o extravasación. Este proceso consta
de tres etapas:
▪ 1. En la luz del vaso sanguíneo: marginación, rotación y adhesión al endotelio
▪ 2. Migración a través de la pared del vaso sanguíneo.
▪ 3. Migración en el tejido hacia un estímulo quimiotáctico.

7. Adherencia▪ Otros receptores sobre la membrana de los leucocitos y otros fagocitos
actúan como mecanismos de adherencia sobre los microorganismos, sea a
productos microbianos específicos o sobre opsoninas del sistema inmune
del hospedador.
▪ Receptor de manosaS
▪ Cavenger
▪ CDC14Transmembrana de 7 helices alfa
▪ Receptores para los fragmentos Fc de los anticuerpos opsonizantes IgG2 e
IgG3.

8. Ingestión
▪ La unión a receptores de adherencia promueve señales de
comunicación intracelular que resultan en la evaginación de la
membrana del fagocito rodeando al receptor y su ligando
patogénico

9. Digestión
▪ Una vez que el fagosoma esta en el citoplasma comienza la desintegración del
mismo, proceso que se realiza por mecanismos independientes o dependientes de
Oxígeno. El segundo se da tras activarse rutas metabólicas que consumen oxigeno, lo
cual produce la liberación de radicales libres del oxígeno, que son tóxicos para los
microorganismos

10. Estallido respiratorio
▪ El mecanismo por el cual las células producen especies reactivas de oxígeno implica la
acción de una enzima llamada oxidasa de NADPH, esta enzima es capaz de emplear
NADPH como agente reductor para reducir el oxígeno líbre (O2) a superóxido, el cuál
se combina espontáneamenteo con otras moléculas para producir radicales libres
muy reactivos, entre los cuales se encuentran los aniones hidróxido, peróxido,
hipoclorito, hipoyodito y el óxido de nitrógeno (II)entre otros.

11. Excreción
▪ En el proceso de digestión queda una vesícula que contiene desechos, o el
mismo antígeno (Dado que no siempre puede ser desintegrado), por lo que
esto debe estar fuera de la célula para traer futuros inconvenientes.
Entonces, la forma de deshacerse de estos residuos es mediante la
exocitosis.

12. Enfermedad granulomatosa
crónica
▪ La enfermedad granulomatosa crónica es una enfermedad que se caracteriza por
una mayor susceptibilidad a infecciones bacterianas severas, junto con la formación
de abscesos y granulomas. Se produce como consecuencia de un defecto en la
capacidad microbicida de las células fagocíticas, en especial de los Neutrófilos; un
tipo de glóbulos blancos con una importante función en la defensa del organismo
frente a los agentes extraños.

13. Objetivo
• Observar en la práctica algunas etapas de la fagocitosis:
adherencia, opsonización, endocitosis y estallido
respiratorio.
• Observar microscópicamente un mecanismo de
destrucción oxidativo a partir de la reducción del
nitroazul de tetrazolio (NAT).

14. Metodología

15. Obtención de 5 mL de sangre
venosa sin anticoagulante
Depositar la muestra en un
tubo con tapón de rosca con
perlas de vidrio.
Agitar el tubo suavemente
evitando la formación de
espuma.
Depositar aprox. 0.8 mL de
sangre desfibrinada sobre los
cubre objetos
Incubar las
preparaciones
30 min a 37°CEliminar el exceso de sangre
depositando 2 mL de SS

16. 2 mL de MEM y 0.5 mL de NAT
107 levaduras
opsonizadas
107 levaduras sin
opsonizadas Incubar a 37°C, 30 minutos
Indicador NAT
Levaduras
Levaduras
opsonizadas
Levaduras sin
opsonizar
Retirar el liquido sobrenadante de cada caja con una pipeta
Pasteur cuidando de no tocar la preparación

17. Solución salina
Pasar los crubreobjetos a safranina
0.5% 10 min
safranina
Enjuagar con agua las
preparaciones ya teñidas,
dejar secar montar las
preparaciones con resina
sobre portaobjetos y
observar al microscopio…

18. • Adherencia: las células se adhieren al cubreobjetos
• Opsonizaciòn: la levadura queda opsonizada con C3b, el
suero humano sirve como la fuente de complemento.
el sistema del complemento se activa por la vía clásica.
• Endocitosis
• Estallido respiratorio :
NADP
H
NATH2
Reducido-azul-morado.
Ppdo.
NADP
Oxidasa
NAT
Oxidado-
amarillo

19. RESULTADOS