Este documento describe un procedimiento para identificar grupos funcionales presentes en aceites esenciales mediante reacciones de coloración. Se proporcionan métodos para detectar alcoholes, aldehídos, cetonas, ácidos, ésteres, fenoles e instauraciones utilizando reactivos como el reactivo de Lucas, reactivo de Brady, reactivo de Tollens e hidróxido de potasio. Los resultados indicarán la presencia o ausencia de diferentes grupos funcionales a través de observaciones de color u otros cambios.

1. TITULO DE LA PRÁCTICA:
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS FUNCIONALES EN ACEITES ESENCIALES MEDIANTE REACCIONES
DE COLORACIÓN.
NÚMERO: 1-1-2
OBJETIVOS: Identificar los grupos funcionales presentes en las moléculas que forman el aceite esencial,
mediante reacciones de coloración.
MUESTRAS: Aceite de: Canela, Anís, Clavo o Pimienta dulce, romero, izo, cáscara de limón, cáscara de
naranja.
EQUIPOS:
MATERIALES DE PROTECCIÓN PERSONAL:
• Mandil
• gafas de seguridad,
• Guantes.
• Vestimenta apropiada.
REACTIVOS:
• Sulfato de sodio anhidro
• Sulfuro de carbono
• Hidróxido de potasio
• Etanol
• 2,4-dinitrofenilhidracina
• Nitrato de plata
• Hidróxido de sodio
• Hidróxido de potasio
• Hidróxido de amonio
• Hidroxilamina o clorhidrato de hidroxilamina
• Ácido clorhídrico
• Permanganato de potasio
• Formaldehído
• Ácido sulfúrico
• Yoduro de potasio
• Almidón
• Yodato de potasio
• Agua destilada
MATERIALES E INSUMOS:
• 20 tubos de ensayo
• Pinza para tubos de ensayo,
• Gradilla,
• Reverbero
• 1 erlenmeyer de 25 ml.
• Pipetas Pasteur
• Pipetas de 5 mL
• Vasos de precipìtación de 75 mL.
ORGANISMOS:
PROCEDIMIENTO:
1. ALCOHOLES:
Reactivo de LUCAS. Se añaden 68 g de ZnCl2, en porciones, a 45 ml de HCl conc., procurando enfriar

2. la disolución a lo largo del proceso.
Técnica. Colocar 1 ml del alcohol en un tubo de ensayos y agregar 6 ml de reactivo de Lucas. Tapar y
dejar reposar durante 5 minutos. El reactivo de Lucas reacciona con los alcoholes primarios,
secundarios y terciarios con velocidades bastante predecibles, y dichas velocidades se pueden emplear
para distinguir entre los tres tipos de alcoholes. Cuando se agrega el reactivo al alcohol, la mezcla
forma una fase homogénea. La solución concentrada de ácido clorhídrico es muy polar y el complejo
polar alcohol-zinc se disuelve. Una vez que ha reaccionado el alcohol para formar el halogenuro de
alquilo, el halogenuro no polar se separa en una segunda fase.
2. ALDEHÍDOS Y CETONAS CON REACTIVO DE BRADY:
Reactivo de Brady: disolver 1.0 g de DNPH (2,4- dinitrofenilhidrazina) en 5 ml de H 2SO4 conc. Se
añaden lentamente y con agitación esta mezcla a una disolución de agua (7 ml) y etanol (25 ml) y
finalmente se filtra para eliminar sólidos en suspensión.
Ensayo: A 5 gotas de aceite esencial se adiciona 2 gotas del reactivo de Brady. Forman precipitados
amarillos o rojo oscuro. Precipitados rojos indican carbonilos aromáticos, los anaranjados indican
carbonilos α-β insaturados, y los amarillos carbonilos saturados.
3. ALDEHIDOS CON REACTIVO DE TOLLENS:
Preparación del reactivo de Tollens: añadir 2 gotas de una disolución de NaOH al 5% a 1 ml de
disolución acuosa de AgNO3 al 5%. Agitar el tubo y añadir gota a gota y con agitación NH4OH 2N,
hasta que se consiga disolver el precipitado de AgOH, que previamente se había formado.
Precaución: el isocianato de plata, compuesto muy explosivo en seco, puede estar presente en los
residuos de las soluciones del reactivo de Tollens; por esta razón, es conveniente tirar el resto de la
disolución de Tollens no utilizada y lavar los tubos con HNO3 diluido.
El ensayo se realiza tomando 1ml de reactivo con una gotas de aceite esencial y calentado en baño
María hasta observar la formación de un precipitado negro, o de un espejo de plata en las paredes del
tubo de ensayo, constituye una prueba positiva de la presencia de un aldehído.
4. DETECCIÓN DE ÁCIDOS
Para detectar la presencia de un ácido es el ensayo de iodato-ioduro, válido incluso para ácidos débiles.
Ensayo del iodato-ioduro para ácidos carboxílicos. Se toman unas 2 gotas del aceite esencial y se
colocan en un tubo de ensayo. Se añaden 2 gotas de una solución de KI al 2% y 2 gotas de una
solución de KIO3 al 4% (ambas en H2O). Se tapa el tubo y se calienta en un baño de agua hirviendo
durante 1 minuto. Se enfría el tubo y se añaden 2 gotas de solución de almidón, recientemente
preparada, al 0,1%. Si la sustancia es un ácido, aparecerá un color azul.
5. ESTERES:
Ensayo para la detección de ésteres. Se colocan 0,5 ml de solución de clorhidrato de hidroxilamina 1N
en alcohol, en un tubo de ensayo. Se adicionan 2-3 gotas de aceite esencial y gota a gota, una
solución de KOH 2N en metanol, hasta que la mezcla tenga pH 9-10, luego se adicionan 4 gotas más
de KOH 2N. Se calienta la mezcla hasta ebullición, se enfría y se añade gota a gota y con agitación
HCl 2N hasta pH 3 aprox. Seguidamente se añade 1 gota de solución de FeCl3 al 10% y se observa el
color. Una coloración rojo sangre es indicativa de la presencia de ésteres.
6. FENOLES: Dan coloración violeta con una solución de FeCl3 (2,5 g de cloruro férrico diluido a 50 ml
de agua y ajustado a 100 ml con etanol).
• 7. INSTAURACIONES: Si hay moléculas con instauraciones, una o dos gotas de aceite esencial se
disuelven en 0,5 a 1 ml de CCl4 y se le agrega gota a gota una solución al 2% de bromo en tetracloruro
de carbono si se necesita mas de 2 gotas para que el color del bromo persista mas de 1 minuto, es
probable la presencia de una instauración.
• Otro ensayo para identificar las instauraciones se realiza con una sln de KMnO 4 al 5 o 10%. El ensayo
se realiza con unas gotas de aceite esencial y unas gotas de reactivo hasta la aparición de un
precipitado café que indica la reducción del Mn y la oxidación del compuesto orgánico a un glicol.
• HIDROCARBUROS AROMÁTICOS: Esteres aromáticos y algunos fenoles dan coloración cuando a
una gota de esencia se añade un ml de una mezcla de 1 gota de formaldehído mas 1 ml de ácido
sulfúrico concentrado. Los derivados del benceno dan rápidamente en la superficie un color rosa,
anaranjado o rojo. Los del naftaleno colores azul-verdoso o verde.

3. RESULTADOS PRIMARIOS.
Reacciones positivas o Reacciones negativas / presencia o ausencia de diferentes grupos funcionales en el
aceite esencial.
CÁLCULOS ESTADÍSTICOS.
REPORTE DE RESULTADOS:
Escribir las reacciones realizadas utilizando moléculas que se encuentren en el aceite esencial e indicar colores
y precipitados si los hubiera.
CUESTIONARIO:
1. Qué es una reacción de oxidación.
2. Cuál de los procesos realizados indican oxidación?
3. Porqué el hidrodestilado presenta reacciones positivas.
4. Qué compuestos pueden estar presentes en su aceite esencial y cuáles en el hidrodestilado.
5. Qué proceso químico se produce para que las moléculas se mantengan en el hidrodestilado
6.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
Morelli, I., I Principi Attivi delle pliante Medicinali, 1981, 75-78.
Torssell K. B. G., Natural Product Chemestry, 1997, 261-275
Harbone. J. B. , Phytochemical Methods. 1997, 110-123
Luck, O., Investigación Fitoquímica, 1988. 23-36.
Dominguez, X., Métodos de Investigación fitoquímica, 1973
Martínez, A., Aceites esenciale, 2003, 1-34.